HISTORIQUE

Si on verse goutte à goutte de l’éther dans du sang défibriné, en agitant sans cesse jusqu’à ce qu’il ait pris un aspect gelée de groseille, on remarque que l’on n’a bientôt plus qu’une pulpe de cristaux microscopiques. Ces cristaux ne sont autre chose que la matière colorante normale du sang ou hémoglobine, qui suivant l’animal se présente sous forme de prismes, de tables rhomboïdales ou de tétraèdres.

Sans insister sur les propriétés de l’hémoglobine, nous rappellerons qu’elle peut être envisagée comme le produit de l’association d’une matière colorante particulière appelée hématine, et d’une matière albuminoïde peu

connue. On sait également que, sous l’influence de la plupart des alcalis même faibles, des acides même étendus, que sous l’influence de l’eau chaude cette hémoglobine est modifiée, qu’elle paraît se transformer précisément en cette hémaline restée liée mécaniquement au principe protéique.

Quelle est la nature de cette hématine ? Quelles sont ses propriétés? Peu de problèmes ont soulevé des opinions plus contradictoires depuis Lecanu, qui, le premier, jeta quelque jour sur la question ; jusqu’à Hoppe- Sevler qui, définitivement à mon sens, a obtenu le véritable principe immédiat cherché et a reconnu sa composition vraie.

Chevreul, Sanson, Mulder et autres prétendent que l’hématine est exempte de fer, qu’elle est insoluble dans l’eau, mais soluble dans l’alcool et l’éther. Berzelius, Lecanu, font entrer le fer dans les véhicules précités. Hoppe-Seyler, partageant ces idées, assigne à l’hématine la formule C96H,02Az12Fe3018.

Sans aucun doute les procédés d’obtention de cette hématine peuvent seuls nous expliquer ces propriétés et cette constitution différentes que lui prêtent divers chimistes. Si dans la préparation de cet élément on fait intervenir un agent énergique, on arrive certainement à des résultats que l’emploi d’une substance moins active sera loin de justifier. On détruit l’équilibre moléculaire du principe immédiat, on obtient un produit de métamorphose, d’altération, que l’on qualifie à tort de produit cherché.

Sanson (t) a recours à l'acide sulfurique concentré

(1) Sanson, Journ. depharm. et de chim. 1835, t. XXI, p. 420.

pour la préparation do l'hématine, et prétend tirer des conclusions sur le produit échappé d’un traitement aussi brutal. On sait d’ailleurs aujourd’hui que le corps obtenu dans cette opération se rapprocherait de la bilirubine de la bile. Mulder a obtenu un corps identique.

Dernièrement encore MM. Paquelin et Joly ne se sont pas mis, à notre avis, à l’abri de cette cause d’erreur en faisant intervenir dans la préparation de l’hématine des agents trop énergiques (i). Ils font macérer pendant huit jours des globules secs et pulvérisés dans l’alcool à 90 degrés additionné de 10 pour 100 d'ammoniaque. Ils filtrent et épuisent ces globules par de nouvelles macérations dans le même liquide. Les liqueurs sont réunies, puis distillées, pour retirer l’alcool. Il reste au fond de la cornue de l’hématine pulvérulente et un peu d’eau. On recueille cette hématine sur un filtre, on la lave, la sèche et on l’introduit dans un ballon avec cinq fois son poids d’acide acétique cristallisable. Le tout est soumis à une digestion de plusieurs heures, à une température qui ne dépasse pas 50 degrés ; enfin, au moyen de la benzine et du sulfure de carbone on sépare le pigment qui contient encore du fer. « Pour distraire le fer du pigment hématique, disent ces expérimentateurs, il faut procéder de la façon suivante : le dissoudre dans environ dix fois son poids d’acide acétique, additionner la liqueur d’une quantité d’acide citrique en poudre égale au quart de l’acide acétique employé, chauffer à une douce température pour favoriser la dissolution de cet acide, verser dans le mélange une cer~

(1) Comples-rendus de l’Académie de» science?, t. LXX1X (190 lit., 1874, n° 16).

Laine quantité d’eau, porter à l’ébullition pendant un quart d’heure pour hâter la dissolution du fer. »

Je n’achève pas de décrire le procédé. Répétant les expériences de MM, Paquelin et Joly, soit avec l’acide citrique, soit avec l’acide tartrique, nous avons vu en effet que ces acides en solution concentrée enlevaient à l’hématine son fer au bout de quelque temps d’ébullition. Mais nous n’hésitons pas à qualifier de produit d’altération le résidu de ce traitement énergique. Nous verrons plus loin qu’opérant à froid avec des acides étendus, nous obtenons des sels d’hématine nettement cristallisés et par suite définis, qui toujours contiennent du fer dans leur molécule. L’expérience nous a démontré que toute ébullition de l’hématine avec les acides en présence de l’eau, altère plus ou moins ce principe immédiat. Les acides minéraux ont une action plus prompte que les acides organiques, dont l’influence n’est pas moins réelle. L’acide acétique semblerait toutefois plus innocent.

Il ne répugné pas plus d’ailleurs d’admettre le fer dans la molécule de l’hématine que le zinc, le mercure et autres métaux en combinaison avec des radicaux organiques, comme la chimie nous en offre de nombreux exemples. Citerai-je encore le corps intéressant que M. Bong (1) a obtenu en faisant réagir dans certaines conditions le cyanure de potassium sur le sulfate de cuivre et un sel de fer. Ce corps, belle matière colorante rouge contient du fer dans sa molécule. Et tous les prussiates ne nous offrent-ils pas ce caractère?

L’organisme animal nous présente d’autres fois ce

(1) Voir Bongj Bulletin de la Société chimique, 1875.

genre de combinaison. Il suffit de traiter l’urine normale par un excès d’ammoniaque pour voir que le fer n’est précipité qu’en partie. Une autre portion paraît rester en combinaison avec les matières extractives qui ne l’abandonnent qu’en recourant à la calcination. Nous pourrious aller loin dans l’exposé des cas analogues.

Nous ne comprenons plus alors l’idée préconçue de MM. Paquelin et Joly sur la composition de l’hématine, et la série d’expériences qu’ils ont instituées pour précisément dépouiller ce pigment de son fer et décomposer somme toute, la molécule.

MM. Robin et Yerdeil, dans leur Traité de chimie anatomique (1), donnent également leur procédé de préparation qui aboutit à un produit soluble dans l’alcool et l’éther. Le sang est coagulé, pressé, traité par l’alcool alcalinisé avec quelques gouttes de carbonate de soude. L'alcool coloré en rouge intense est filtré, puis agité avec un lait de chaux. La chaux entraine la matière colerante sous forme de laque que l’on décompose par l’acide chlorhydrique ; on lave le coagulum albumineux là l’éther, puis on traite par l’alcool bouillant qui entraîne la matière colorante. Ajoutant un peu d’éther pour précipiter quelques matières entraînées par l’alcool, on distille sur une certaine quantité d’eau. La poudre noirâtre ainsi formée est soluble dans l’alcool et dans l’éther.

INous avons reproduit ponctuellement la méthode de MM. Robin et Yerdeil, et sommes tombés finalement sur un corps soluble, en effet, dans l’alcool et dans d’éther. Mais l’analyse nous a démontré qu’il représente

(1) Robin et Yerdeil. Chimie anatomique, t. UI, p. 383.

— te-

rnie combinaison d'acide chlorhydrique, probablement avec un dérivé de l’hématine, ce que tendent à prouver certaines considérations que nous exposerons plus loin.

L’hématine de Wittich (1), elle, doit sa solubilité dans l’alcool à un excès d’alcali. Notre manière de voir se trouve d’aiileurs confirmée par d’autres expérimentateurs, et en particulier par Gorup-Besanez (2).

Les reproches que nous pourrions adresser dans cet aperçu historique à l’hématine de Brand, de Vauquelin, de Berzelius, de Lecanu, sont d’un autre ordre. Les substances isolées, par ces divers chimistes, ne sont pas des produits d’altération, mais des mélanges d’hématine et d’albumine que leurs procédés ne pouvaient séparer. Lecanu cependant avait déjà perfectionné sa méthode. A l’aide du sous-acétate de plomb et de l’alcool, il étail parvenu à préparer, considérablement dégagée des matières albuminoïdes, une matière colorante qu’il désigna sous le nom de globuline (3).

Mais ce n’est pas là le principe immédiat qui réalise les conditions de pureté suffisante pour être soumis à l’analyse élémentaire.

Il nous faut arriver à Hoppe-Sevler pour avoir le véritable procédé de préparation de l’hématine pure et inaltérée. Le seul reproche à lui faire est sa longueur, les cristaux d’hémine sur lesquels opère le chimiste allemand exigeant des semaines pour sedéposer. Ce sont les raisons qui nous ont déterminé à chercher un moyen plus expéditif.

Hoppe-Sevler, en effet, prend du sang défibriné qu’il

(1) Journ. de pliarm. ctdechim., I. LXI, p. 11.

(-) (jorup- Besanez, Lehrbucli physiologischen Chemiê, ]). IGi.

:f) Lecanu. Journ. de pliarm. et de rhim ., ÎS-H), l. XVI, p. 7,14.

étend de un à deux volumes d’eau. 11 traite par le sousacétate de plomb et précipite l’excès de plomb par une solution de carbonate de soude. Aprf s un repos suffisant, on décante et l’on évapore dans le vide sur l’acide sulfurique. Le résidu pulvérisé est broyé avec quinze ou vingt parties d’acide acétique crisU. llisable ; on ajoute du chlorure de sodium en petite quantité, on agite pendant quelques heures, puis l’on chauffe deux heures au bain-marie. Cette solution additionnée de cinq fois son volume d’eau est abandonnée à elle-même quinze jours et plus. Il se dépose des cristaux d’hémine, ou chlorhydrate d’hématine, que l’on reprend par l'acide acétique pour les faire cristalliser de nouveau. On dissout ensuite les cristaux dans l’ammoniaque, on évapore au bainmarie, puis l’on chauffe longtemps à 130 degrés. Il suffit de reprendre par l’eau distillée pour enlever le. chlorhydrate d’ammoniaque formé et obtenir l’hématine pure.

Ce procédé long, mais exact, ne pouvait être remplacé que par une méthode joignant à une exactitude aussi rigoureuse la rapidité de l’exécution. Les recherches, que nous avons entreprises dans cette voie, semblent avoir abouti à ce moyen de préparation très-sûr et très-rapide. Nous allons l’exposer.