CHAPITRE III

PROPRIÉTÉS GÉNÉRALES DE l’hÉMATINE.

Examinons maintenant les propriétés de l’hématine obtenue par ces modes de préparation, hématine qui représente le produit véritable et inaltéré du dédoublement de l’hémoglobine. Nous disons produit véritable et inaltéré, car nous allons le voir ; il va nous donner des cristallisations parfaitement définies sous le microscope, sans que l’on puisse constater la présence d’aucune matière étrangère.

Sous forme de poudre amorphe bleu noirâtre, lorsqu’elle est sèche, l’hématine est inodore, insipide. Elle est insoluble dans l’eau, dans l’éther, dans l’alcool, dans le chloroforme, dans le sulfure de carbone. Quelques auteurs ont émis l’opinion erronée qu’elle était soluble dans l’éther et dans l’alcool. Ils ont obtenu évidemment un dérivé de l’hématine, sous i’infiuence des agents chimiques employés à son extraction, dérivé qu’ils ont pris pour un produit pur.

Action des acides. — L’eau acidifiée ne la dissout pas, contrairement également à ce qu’ont dit certains auteurs expérimentant sur un produit d’altération.

Récemment précipitée, elle se dissout très-rapidement dans l’alcool et l’éther acidifiés, avec une teinte rouge brune spéciale. Si l’hématine est rescée sèche quelque temps à l’air libre et plus forte raison, si elle a été chauffée quelques instants de 100 à 120°, elle résiste davantage à 1 action de ces véhicules, elle peut même

résister complètement. Plusieurs fois j’ai tenté de dissoudre de l’hématine ainsi séchée dans l’alcool fortement acide, m’aidant de l’ébullition, sans parvenir à une solution complète.

L’hématine subit, à n’en pas douter, sous l’influence de la chaleur, une modification dans son état moléculaire.

Nous rapprocherons ce fait d’un phénomène analogue qui se passe pour l’oxyde de fer. Récemment précipité, à l’état gélatineux, le peroxyde de fer se combine avec l’acide arsénieux, les acides acétique, citrique, tartrique. La combinaison est même rapide. Qu’on fasse sécher ce peroxyde, ou qu’on le lave à l’eau chaude ou même qu’on le laisse quelque temps sous l’eau à une température supérieure à 10°, on aura bientôt un corps qui semble dénué de tout caractère de basicité vis-à-vis des acides précités.

C’est cet état de condensation moléculaire que nous retrouvons encore dans le chlorure de calcium fondu. Ce sel exige, malgré sa grande solubilité et sa grande affinité pour l’eau, une ébullition de quelque temps dans le liquide pour se dissoudre. Nous en dirons autant du sulfate de peroxyde de fer desséché.

L’eau fortement acidifiée l’altère plus ou moins, suivant la nature des acides, suivant le degré de température. L’ébullition de l’hématine, avec de l’eau acidifiée par l’acide sulfurique ou par l’acide chlorhydrique, amène une décomposition plus ou moins complète du produit. Cette décomposition se traduit par une soustraction du fer, qu’il est facile de reconnaître dans le liquide à l’aide des réactifs ordinaires.

À froid, l’acide nitrique concentré dissout l’hématine.

Une addition d’eau dans ce liquide très-acide n amène pas de précipité. L’hématine a subi un commencement d’altération. Si maintenant l’on soumet à 1 ébullition la solution d’hématine dans l’acide nitrique concentré, on voit la teinte rouge brun des solutions ordinaires, acides d’hématine, passer à une teinte jaune claire, avec dégagement de vapeurs rutilantes. Par refroidissement de la liqueur le liquide conserve une teinte verdâtre. L’éther agité avec ce liquide s’empare de la matière colorante. Examinée au spectroscope, cette solution éthérée ne donne pas de bandes d’absorption. Il n’y a pas lieu de soupçonner la biliverdine avec laquelle on pourrait la confondre, à un examen superficiel.

Ajoutons que l’ammoniaque fait passer la solution nitrique du jaune verdâtre au rouge orangé.

Par l’évaporation des liqueurs, nous n’avons pas réussi à obtenir une matière colorante cristallisée et définie.

Ces jeux de couleur que nous signalons peuvent, à l’heure actuelle, offrir une minime importance au point de vue des conclusions. L’hématine subit là une oxydation à n’en pas douter, que nous n’avons pas eu le loisir d’approfondir. Comme dans bien d’autres réactions que nous signalerons à propos de l’hématine, nous sommes en présence de toute une voie de recherches encore inconnue. L’influence spéciale des principaux agents chimiques n’a pas encore été abordée d’une façon rigoureuse.

Ce sont là autant de chapitres encore à élaborer de l'histoire chimique de l’hématine, qui ne seront écrits

que petit à petit, après maintes expériences délicates.

Nous en dirons autant de l’action de l’acide sulfurique concentré, étudiée par Mulder, par Hoppe-Seyler. Ella mérite d’être abordée de nouveau, afin de s’assurer si l’hématine modifiée par cet acide énergique, correspond à quelque homologue d’un pigment normal de l’économie.

Ici, comme ailleurs, il faut disposer absolument d’une proportion plus forte d’hématine qui se prête à une investigation suivie. Mulder a remarqué que si l’on traite l’hématine par l’acide sulfurique concentré, elle s’y dissout. L’eau précipite de cette solution un corps noir exempt de fer. Le liquide séparé par filtration donne les réactions de sulfate de protoxyde de fer.

Ce dérivé de l’hématine est amorphe, bleu noirâtre, avec des reflets métalliques ; il est insoluble dans l’eau acidifiée ; il est soluble dans les alcalis étendus .

Les acides organiques ont une action décomposante sur l’hématine moins active que les acides minéraux. L’acide acétique particulièrement nous paraît innocent. Les acides citrique, tartrique, à l’aide de quelques minutes d’ébullition en solution moyennement concentrée enlèvent le fer de l’hématine. C’est ainsi que MM. Paquelin et Joly ont obtenu leurhématine exempte de fer, qu’ils ont la complaisance d’envisager comme le pigment dérivé immédiatement de l’hémoglobine.

L’alcool et l’éther fortement acidifiés par les acides minéraux, altèrent beaucoup moins l’hématine que l’eau acidifiée dans les mêmes conditions. Les acides organiques en dissolution dans l’alcool ou l’éther ne modifient pas du tout l’hématine.

Cazeneuve. 3

On pourrait dire que la température relativement basse à laquelle bout tout l’alcool est la cause de cette non-altération. Toutefois nous avons chauffé en tube scellé pendant trois heures à 110° une solution d’hématine dans l’alcool saturé d’acide oxalique. Elle n'a subi aucune modification. Le spectroscope donne toujours la raie caractéristique de la solution acide d’hématine. Nous verrons qu’il en est autrement avec l’alcool chargé d’acide chlorhydrique.

Cette expérience seule pourrait nous amener à conclure que l’éther froid, faiblement acide, n’a aucune action décomposante sur l’hématine, et que notre mode de traitement est le plus innocent que nous puissions employer pour sa préparation. Nous allons voir notre opinion s’étayer de nouveaux faits importants, lorsque nous traiterons de la fonction basique et que nous préparerons, pour ainsi dire extemporanément, des combinaisons définies de cette substance avec certains acides.

Nous reprendrons plus loin cette question des acides vis-à-vis de l’hématine, lorsque nous apprécierons la nature basique de cette substance. En traitant du sang au point de vue médico-légal, nous rappellerons les caractères spectroscopiques des solutions acides d’hématine.

Action clés alcalis. — Comment l’hématine se comporte-t-elle avec les alcalis ? L’hématine pure, traitée par de l’eau alcalinisée à l’aide de la potasse, de la soude, de l’ammoniaque, se dissout avec une teinte dicroïque spéciale, verte par réflexion, rouge par réfraction. Certains oxydes métalliques, récemment précipités, l’oxyde de plomb, l’oxyde de zinc, l’oxyde

d’aluminium, se combinent avec l’hématine en formant des laques d’un beau vert. L’hématine ne subit aucune altération. Il suffit de traiter ces laques par de l’éther acide, pour régénérer aussitôt la solution acide rouge brun primitive. La potasse et la soude en solution concentrée altèrent profondément l’hématine. L’ammoniaque contracte avec elle une combinaison destructible à la température de 130 degrés. Nous avons remarqué cette combinaison ammoniacale est assez stable pour que les acides étendus n’aient aucune action décomposante sur elle. Que l’on dissolve en effet de l’hématine dans l’eau, à la faveur de l’ammoniaque, que l’on ajoute goutte à goutte de l’acide acétique, ou de l’acide oxalique, de manière que l’eau soit faiblement acide, on obtient un précipité floconneux, et la liqueur est décolorée. Ces flocons sont une combinaison d’hématine et d’ammoniaque. Recueillis et repris par l’éther, ils donnent une solution ambrée et même rougeâtre, si elle est concentrée. Il faudra chauffer cette liématine à 130 degrés pour chasser l’ammoniaque et la retrouver pure avec ses caractères d’insolubilité dans l’éther et l’alcool.

Nous avons cherché à obtenir un produit bien défini de cette combinaison alcaline de l’hématine, en soumettant à l’évaporation spontanée une solution alcoolique faiblement ammoniacale. Nous n’avons jamais pu obtenir de cristaux. Il s’est toujours déposé, avant l’évaporation complète de la liqueur, des granulations amorphes, solubles dans l’alcool et dans l’éther.

N’omettons pas de dire que les alcalis concentrés ou leur action prolongée, lorsqu’ils sont étendus, s’opposent à la formation des cristaux d’hémine. L’hématine

subit donc une altération manifeste. Nous verrons plus loin que du sang soumis à une putréfaction prolongée perd toute propriété de donner des cristaux de chlorhydrate. JBlondlot a déjà d’ailleurs signalé ce fait. Les solutions alcalines d’hématine ont aussi des caractères spectroscopiques importants, sur lesquels nous nous arrêterons en traitant de l’hématine en chimie légale.

Action de V albumine . — Je ne sais si l’on peut admettre que l’hématine forme une combinaison spéciale avec l’albumine autre que l'hémoglobine. Toujours est-il qu’une solution d’albumine dans l’eau tient l’hématine en dissolution, même en présence des acides . Du sang coagulé par l’éther à 56 degrés est traité à chaud par l’alcool, fortement acidifié par l’acide tartrique. Nous filtrons et additionnons l’alcool de deux fois son volume d’eau. Le liquide présente une teinte opaline et rien ne se précipite. L’alcool, fortement acide, a entraîné de la matière albumineuse que l’eau ne précipite pas, et qui retient ie pigment en solution. Traite-t-on, au contraire, le coagulum sanguin par l’alcool faiblement acide, on a une teinture, au sein de laquelle l’addition d’eau précipitera invariablement l’hématine. L’alcool, faiblement acide, n’a pas entraîné de la matière albuminoïde ; l’addition d’eau précipite l’hématine qui est insoluble, nous l’avons vu, dans l’eau acide. Nous nous demandons si les auteurs qui ont avancé la solubilité de l’hématine dans l’eau acide n’ont pas opéré en présence d’une trace d’albumine.

Action de l’cdu oxygénée. — L’eau oxygénée a une action bien réelle sur le pigment des cheveux. On sait

que certaines femmes brunes, jalouses de la couleur des blés, ont recours à cet agent décolorant pour jouer la nature. Nous avons pensé que cette action oxydante s’exercerait peut-être également vis-à-vis du pigment hématique. Quelques milligrammes d’hématine ont été mis eu présence de quelques centimètres cubes d’eau oxygénée. Ils ont amené la décomposition rapide de cette dernière. Nous retrouvons là le phénomène constaté, à propos de beaucoup de substances qui décomposent l’eau oxygénée par simple action de présence.

Action de la putréfaction. — Nous avons pensé que l’hématine, sous l’influence des corps réducteurs provenant de la décomposition des matières albuminoïdes qui l’accompagnent, subirait peut-être une modification, se dépouillant, par exemple, de son fer pour donner naissance à l’hématoïdine de Robin ou à un corps analogue. 500 grammes de sang défibriné ont été laissés, pendant quatre mois de chaleur, exposés à l’air dans un flacon, couvert d’une lame de verre pour éviter les poussières et la pluie. Au bout de quatre mois de fermentation putride, à une température très-favorable à l’évolution du phénomène, nous avons examiné le sang au microscope. Le fond du flacon était boueux et ne présentait à un grossissement de 300 diamètres que des granulations amorphes, de matière colorante brune, au sein d’un magma albumineux sans caractère morphologique.

Dès les premiers instants de la putréfaction, l’hémo globine a été décomposée en hématine.sous l’influence du dégagement ammoniacal et du sulfhydrate d’ammo-

niaque, sans qu’il s’opère, sous l’influence de ces agents réducteurs, une modification plus avaucée.

En traitant ce sang putréfié par l’alcool, nous avons entraîné une notable partie de la matière colorante, se dissolvant à la faveur de l’ammoniaque et des ammoniaques composées qui ont pu se former pendant la fermentation putride. Cette solution, d’une belle coloration rouge de sang, donne au spectroscope la bande d’absorption des solutions alcalines d’hématine. Il s’est ormé, en même temps, un faible coagulum albumineux, entraînant de l’hématine. A l’aide de' la solution étliérée d’acide oxalique, nous avons pu extraire cette hématine par notre procédé et constater qu’elle était presque inaltérée. Elle contenait du fer dans sa molécule, mais ne donnait pas des cristaux de chlorhydrate avec les modes d’opérer que nous avons indiqués. L’action des alcalis, vis-à-vis de l’hématine, s'est exercée trop longtemps.

Action de la chaleur. — L’hématine supporte une température de 180 degrés, sans se décomposer. Au delà de cette température, elle émet des fumées, se carbonise sans se boursoufler. Après combustion de toute la partie organique, il reste, comme résidu, de l’oxyde de fer d’un beau rouge, dans la proportion de 12,55 0/0. Gorup-Besanez donne le chiffre de 12,00. D’autres auteurs donnent 12,80. Nos essais ont abouti à une moyenne de 12,55 environ.

Nous avons déjà signalé plus haut l’action de la température vis-à-vis de la cohésion de l’hématine, tendant à modifier sa solubilité dans les agents acides qui

sont ses dissolvants ordinaires. L’hématine chauffée à 130 degrés se différencie considérablement, à ce point de vue, de l'hématine récemment précipitée. Nous reviendrons encore, à propos du chlorhydrate et du hromhydrate d’hématine, sur ce caractère.

Notre ami, le docteur Danlos, a expérimenté l'action lente de la chaleur vis-à-vis de l’iiématine, afin d’arriver à transformer cette dernière en hématoïdine. Pour cela, il lui a ménagé le milieu albumineux au sein duquel s’opère, dans l’organisme, cette curieuse métamorphose. Prenant du sang défibriné, il l’a enfermé dans une large éprouvette et recouvert d’une couche d’huile d’olive, afin d’éloigner le contact de l’air. Au bout de trois semaines d’exposition à une température voisine de celle de l’économie animale, le liquide sanguin a été soumis à l’examen microscopique. Aucune cristallisation n’avait apparu. Le sang n’était pas putréfié, grâce à une trace d’acide cyanhydrique ajoutée au commencement de l’expérience.

Les conditions dans lesquelles l’hématine passe à l’état d’hématoïdine dans les anciens foyers hémorrhagiques nous échappent encore.

Action de V électricité . — L’électricité décompose l’hématine, sans que nous ayons pu obtenir jusqu’à présent aucun produit de dédoublement défini. Nous avons opéré sur des solutions acides d’hématine dans l’alcool, que nous avons soumises à l’influence d’un courant de faible tension, obtenu à l’aide d’une pile thermo-électrique (Clamond). Au bout de quelques minutes d’action, le liquide, de rouge brun, passait au jaune clair. Evaporant le liquide au bain-marie, nous consta-

tions un résidu jaunâtre, constitué par un persel de fer et une matière colorante jaunâtre. Nous avons pu enlever par le sulfure de carbone cette matière que nous n’avons pu obtenir cristallisée.

Composition cle l'hématine. — L’hématine est un composé quinternaire contenant du carbone, de l’hydrogène, de l’azote, de l’oxygène et du fer. Lecanu a constaté le caractère ferrugineux de ce pigment, que M. Ghevreul avait cru exempt de fer, en cherchant à l’isoler par une mauvaise méthode. L’hématine non ferrugineuse est un produit de dédoublement, qui méritera une étude spéciale.

Nous n’avons pas voulu approfondir la formule de l’hématine, qui ne pourra être établie qu’avec l’étude des produits de transformation. Notre buta été de nous rendre compte si l’hématine, préparée par notre procédé, correspond à celle d’Hoppe-Seyler.

Nous avons pratiqué un dosage d’azote et deux dosages de fer.

Opérant sur 0 gr., 3112 de matière séchée a 100 degrés, nous avons trouvé 9 gr., 04 d’azote 0/0.

La formule G48 H51 Fe3 Az6 O9 (Fe = 28) exige 8 gr., 94 0/0.

Un dosage de fer a été effectué sur 0 gr., 175 de matière séchée à 100 degrés. Nous avons obtenu 12 gr., 51 0/0 de peroxyde de fer. Un second dosage effectué avec 0 gr., 216 de matière, prise dans les mômes conditions, nous a donné 12 gr., 564 0/0. Gorup-Besanez avait trouvé 12 gr., 60 0/0.

Nous n’hésitons pas à conclure que notre produit est identique avec l’hématine des chimistes allemands.