CHAPITRE I
Technique opératoire et histologique
La technique opératoire suivie est essentiellement la même pour l’autoplastie et pour l’'hétéroplastie. Il n’y a dans les deux ordres d'expériences qu’un factéur qui change, c’est la nature du greffon. Le Lapin, porte-greffe constant, est enfermé dans une boite spéciale construite de manière à permettre une immobilisation complète du sujet pendant l'opération et pendant la période post-opératoire. Après anesthésie à la cocaïne de l'œil à opérer, on fixe la clignotante par une pince à forcipressure ; un aide écarte les paupières, et l'opérateur, fixant le globe par une pince à mors placée sur le muscle droit supérieur, trace sur la cornée, à l’aide d’une serpette de Garezowsxr bien tranchante, un rectangle de 0"004% X 006 environ. On excise alors à la pince à iris et au couteau de pe Gragre le tissu cornéen circonscrit par le rectangle, sur la moitié ou les deux tiers de l’épaisseur totale de la membrane transparente. Il y a avantage à enlever un fragment de cornée aussi épais que possible, de façon à creuser une véritable cupule dans laquelle on pourra déposer le lambeau. En procédant ainsi on évite que le greffon fasse une
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saillie rop considérable sur le plan de la cornée et soit balayé par le jeu des paupières. Il faut avoir soin, toutefois, de ne pas ouvrir la chambre antérieure, sous peine de voir l'adhérence du greffon irrémédiablement compromise par la filtration de l'humeur aqueuse consécutive à cet accident. Sur l’œil également anesthésié du sujet qui doit fournir la greffe, on prélève par le même procédé un lambeau cornéen de dimensions à peu près égales à celles de la perte de substance. Mais, de même que le greffon ne doit pas, autant que possible, être plus épais que n’est profonde la perte de substance, de même il y aura avantage à tailler un lambeau un peu moins étendu que la surface à combler; ou comprend, en eflet, qu'un lambeau trop large, dépassant les bords de la surface sur laquelle il doit reposer, adhère médiocrement et se trouve exposé à une chute précoce du fait de l’action des paupières.
Le prélèvement du transplant est une opération délicate qui doit être aussi peu traumatisante que possible. Voici comment on procède à ce prélèvement. L'opérateur, après avoir circonscrit un lambeau cornéen, comme dans le temps de préparation de la surface à grefler, saisit avec la pince à iris un des angles du lambeau ct il en libère la face profonde avec le couteau de DE GRAEFE manœuvré très doucement, et agissant parallèlement à cette face. Il faut autant que possible insinuer le couteau dans le plan de clivage qui ne tarde pas à se produire dès que l’on tire un peu sur l'angle saisi par la pince et rester dans ce plan de clivage pendant toute la durée de la libération.
Le transplant prélevé est immédiatement déposé dans la perte de substance préalablement creusée sur la cornée porte-greffe et on achève de l’étaler et de l'orienter correctement au moyen d'une spatule maniée avec la plus grande douceur. Le Lapin, dans sa boîte, est placé dans un endroit obscur et silencieux ; on le soumet au jeûne pendant les douze heures qui suivent l'opération. À ce moment, on peut l’alimenter sans inconvénient sérieux pour l’adhérence de la greffe. Néanmoins, il est formellement indiqué de prolonger l’immobilisation pendant trente-six heures encore, sous peine de voir tomber le greffon, du fait de
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mouvements intempestifs de l'animal. Il va sans dire qu’une asepsie manuelle, et surtout instrumentale, aussi rigoureuse que possible est indispensable pour le succès de l'opération.
Dans les essais d’autoplastie, le greffon provenait de l'une des cornées du Lapin et était greffé sur l’autre. Au cours de nos recherches sur l’hétéroplastie, nous avons pratiqué deux séries d'expériences. Dans une première série, les transplants ont été prélevés sur le Cobaye; dans la seconde série, les greffons provenaient de la Poule. La Poule:est incontestablement l'oiseau de choix, en raison du volume relalivement élevé de la portion accessible de son globe oculaire et de l'épaisseur assez marquée de sa cornée. Le Pigeon, par exemple, donne des résultats bien moins satisfaisants ; la cornée est d’une minceur extrême, elle est très fragile, se perfore avec la plus grande facilité, de sorte qu'il devient très difficile sinon impossible de prélever correctement un transplant sur la cornée de cet animal.
Que l’on greffe sur une cornée de Lapin de la cornée de Poule ou de la cornée de Cobaye, on a dans les deux cas réalisé une greffe hétéroplastique. Néanmoins, il convient d'observer que si le Lapin et la Poule sont des animaux très différents, il n’en est plus de même pour le Lapin et le Cobaye. Sans doute, les deux types sont assez distincts l’un de l’autre pour qu'on les ait placés dans deux familles différentes : la famille des Léporidés et celle des Subongulés ; mais cependant ils présentent des caractères communs tels qu'on les classe dans un même ordre zoologique, celui des Rongeurs. Or il est démontré, et nous avons pu le constater nous-même au cours de ces recherches, que les résultats de la greffe cornéenne, sont d'autant moins satisfaisants que les tissus mis en présence proviennent d'espèces plus éloignées l’une de l’autre. Il n’était donc pas certain, a priori, qu’il dût y avoir identité complète dans le processus histologique de ces deux sortes de greffes hétéroplastiques que nous nous proposions de réaliser, même dans les cas où elles se seraient trouvé avoir suivi toutes deux une évolution heureuse. C’est pour ces raisons que nous avons cru indispensable de contrôler l’une par l’autre les deux séries d'expériences.
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Des animaux ainsi opérés ont été sacrifiés à des stades très rapprochés, à partir de la cinquième heure après l'opération, et dans chacun des stades les examens microscopiques ont porté sur deux ordres de pièces. Les premières ont été débitées en coupes méridiennes et colorées par la méthode de Vax G1EsoN- Curriss, qui permet de différencier nettement l’épithélium des formations conjonctives. Ces coupes permettent aussi d'apprécier la structure de l’épithélium, son épaisseur, les rapports qu'il contracte avec le parenchyme sous-jacent; elles permettent enfin de saisir assez nettement les désordres qui peuvent venir troubler la stratification régulière des lamelles du tissu propre de la cornée.
Mais il faut remarquer que ces coupes méridiennes, intéressant les cellules fixes de la cornée perpendiculairement au sens de leur étalement, ne peuvent nous donner que des renseignements très incomplets sur les modifications dont ces éléments sont le siège au cours de l’évolution de la grefle. C'est pourquoi, à chaque stade, il a été réservé des pièces qui ont été coupées frontalement et en série. Ces pièces ont été traitées par la méthode de coloration de pe Luxro-VorLaro, qui malgré quelques inconvénients donne des résultats assez nets et assez constants pour pouvoir être utilisée avec avantage.