PONS EE

Hnisons légèrement par quelques gouttes de solution de carbonate de soude à 1/10° jusqu’à ce qu'il bleuisse légèrement le papier de tournesol. Nous répartissons en tubes. Nous stéri- Hsons suivant le conseil de M. le Professeur Calmette (Manuel technique de microbiologie et sérologie, 1926), par 3 chauffages successifs de 30 minutes chacun à 100° et à 24 heures d'intervalle, car, « la stérilisation à 1145° altère le lait en peptonisant la caséine et caramélisant Je lactose » (Prof. Calmette).

Pour le lait tournesolé, que nous emploierons souvent, il suffit d'ajouter au lait légèrement alcalinisé de la teinture de tournesol en quantité suffisante pour donner une teinte nettement violette. Nous mettons 20 cc. de teinture de tournesol au litre.

6°) Fermentation du bouillon glucosé : Préparation du bouillon simple :

SE RENE NEA ANIME OR ER de PE De 200 gr.

DOLTTATIN NES RSR TENEEE 2 gr.

Peptone Ghapoteantir 0" remErTERe 6 gr.

Glucose ee Ta LME APT STAR 4 gr.

On fait dissoudre. On filtre sur papier Chardin. On répartit en gros tubes à essai qui contiennent à l’aise un tube à hémolyse renversé (qui fera cloche). On stérilise. On fait en sorte : 4° de faire monter la température lentement, 2° de ne pas dépasser 120°. Pendant la stérilisation, le petit tube se remplit.

Au cas où la culture est positive, le gaz résultant de la fermentation se condense dans le fond de la cloche et la soulève.

Indépendamment de ces différents moyens d'identification, à chaque fois qu'un doute pouvait surgir du fait de l’absence d’un des caractères que mous vérifions, un ensemencement nouveau était fait sur gélose simple et avec la nouvelle culture d’autres ensemencements et de nouveaux examens étaient faibs jusqu’à ce qu'une conviction basée uniquement sur les fails expérimentaux vienne s'imposer à notre espril.

Préparation de la gélose simple :

Peéptone Chapoteaut ere eR ent 20 gr.

SeLÉMATINS Se IRAN D PER RAR DASER GÉlOSe LEE AORE ER POET Re LA ST Te 20 gr.

Eau commune ...... ie PAST RE RE PONT ECTEE

Pen r'v.

era

On fait dissoudre et bouillir 410 minutes. On alcalinise et on filtre sur filtre Chardin mouillé avec eau très chaude (À encore

1} y a intérêt à placer entonnoir et récipient dans l'atmosphère

encore Chaude d’un autoclave).

Répartir encore chaud en tubes droits. Stériliser à 115° pendant 20 minutes et incliner les tubes au sortir de l’autoclave et encore chauds.