LE NOR

peut avoir, elle aussi, une action franchement inhibitrice qui s'apparente d’ailleurs, en l'espèce, à l’acton des antiseptiques.

Pour trouver une solution à notre problème nous nous sommes inspirés à la lois du milieu de Teague modifié comme nous l’ont indiqué MM. Diénert et Etrillard et tel que nous l'avons exposé, et du milieu de Schmitz (gélose-sérum rouge congo), modifié et simplifié d’une facon particulièrement heureuse par Chandelier.

Chandelier «emploie du bouillon gélosé ordinaire (à 3 p. 100 de gélose), lactosé à 1,5 p. 100 exactement, neutralisé au tournesol, réparti en ballons de 169 cc. et stérilisé à 115°.

A 100 cc. de ce milieu, préalablement fondu au bain-marie à 50 cc., on ajoute :

Sol. de soude 0 gr. 5 p. 100 stérilisée... 10°cc. Puis

Sol. aqueuse stérilisée de rouge Congo à

SO OT ASE SE ARR IAA: TAPER Re ES 10 cc.

Puis on coule en grandes boîtes de Pétri stériles dont le couvercle est garni d’une rondelle de papier filtre, sur lequel s'effectuera la condensation de la vapeur d’eau dégagée pendant la solidification de la gélose. On ensemence ensuite et on porte à d’étuve.

Les colonies typhiques sont apparentes au bout de 24 heures, sous d'aspect de petites masses aplaties sèches, écailleuses, cupuliformes et de couleur rouge foncé, les colonies de bacilles coli se détachant en bleu foncé sur le fond rouge. (Manuel technique de microbiologie, par MM. le Professeur Calmette, Nègre et Boquet). Et ces derniers ajoutent : « Ge milieu est, avec celui de Lôffler-Schuster, le plus recommandable pour l'isolement du bacille typhique. C’est incontestablement celui qui, en l’état actuel de nos connaissances, fournit les meilleurs résultats. »

Nous avons pensé à préparer un mélange de gélose et de gélatine en proportion telle que ce mélange soit liquide à la tenipérature de 42° et solide à la température de 30".

EDS D —

Ainsi concevions-nous la possibilité d’ensemencer directement l’eau à examiner sur un milieu momentanément liquide qui, dès l’ensemencement fait, se soliditiant très rapidement, c'est-à-dire en quelques instants, permettrait une culture en milieu solide.

Par tâtonnements €. après des essais répétés nous nous sommes arrêtés à 10 de gélose pour 100 de gélatine ?# la prière formule de notre milieu était la suivante

PepIODET,- Der er ROSE EE EE Ée 30 gr.

SELS MATIN SEM CREER PE REX MEME te NOT LACOSTE SN AAC RES HORS 15 gr.

(HÉlOSB. LES A ME 10 er.

Céline Ars er AA PR HN MODE FA ISTLÉC ES SR RER EE 1000 cc.

Dans une bassine mous mettions la peptone, le sel marin, le lactose et l’eau. Nous chauffions jusqu’à une température voisine de l’ébullition. Nous ajoutions alors d’abord la gélose coupée en petits morceaux, puis après agitation et dissolution, la gélatine coupée ausi en petits morceaux. La dissolution faite et après refroidissement, nous neutralisions au napier tournesol et nous ramenions au volume de 1.000 cc. avec de l’eau distillée. Nous répartissions alors en plaques de houx à raison de 45 cc. par plaque et nous stérilisions à 115° pendant 20 minutes. Après refroidissement nous obtenions dans les plaques de Roux un milieu solide de 2 centimètres environ de hauteur au moment du besoin nous ajoutions après liquéfaction au bainmarie à 42° environ et aseptiquement 1 ec. 5 de solution de lessive de soude stérile préparée en dissolvant 1/2 cc. de lessive de soude dite lessive des savonniers dans 100 cc. d’eau, 4 ce. 5 de solution stérile de rouge Congo à 2 p. 100, puis l’eau de mer à examiner, soit 1 cc. Nous mélangions sa;gneusement sans trop agiter pour éviter les bulles d'air. Puis nous laissions solidifier horizontalement.

Tel quel, ce milieu, à cause sans doute des 3 cc. de hiquide que nous ajoutions au moment de nous en servir, avait bendance à 30° à se liquéfier. Nous l’abandonnions alors à la température ambiante qui dans le laboratoire exposé en plein soleil oscillait dans les 24 heures entre 19° et 27° (car toutes les expériences sur le milieu que nous indiquions ici ont 6t6 faites en été).