‹ Recherches expérimentales sur les altérations cellulaires des glandes gastriquesChapitre 20 sur 33 · TECHNIQUE · texte numérisé non relu

TECHNIQUE

La condition essentielle, pour obtenir de bons résultats dans l'étude de la structure fine des cellules glandulaires de l’estomac, est de s'adresser à un matériel provenant d'animaux qui viennent d’être sacrifiés. On évite, de la sorte, la formation de lésions cadavériques qui se superposeraient aux lésions expérimentales.

Voulant déterminer : 1° à partir de quel moment, sous l'influence de doses journalières de phosphore et de bicarbonate de soude, on peut dire qu’il y a état pathologique de la cellule ; 2° par quelles étapes successives passent les cellules ainsi altérées pour aboutir à la dégénérescence et à la mort, nous ne pouvions y arriver que par la méthode expérimentale.

Le chien nous a paru être l'animal de choix pour toutes les recherches portant sur la cytologie des glandes gastriques : d’abord parce que son estomac se vide assez vite et ensuite parce que le cycle évolutif de ses digestions est bien établi.

L'animal une fois sacrifié, toujours entre la cinquième et

la sixième heure de la digestion, on ouvre rapidement la cavité abdominale pour extraire l'estomac. Cet organe, incisé suivant la grande courbure, était vivement étalé, nous séparions ensuite la muqueuse de la couche sous-jacente, puis nous prélevions de petits morceaux qui, une fois étendus sur des plaquettes de liège et fixés avec du fil, étaient plongés dans le liquide fixateur.

Le choix de ce liquide a une importance capitale. Le liquide de Bouin fraïichement préparé, le formol à 10 p. 100, sont parmi les nombreux fixateurs, ceux quidonnentles meilleursrésultats. Nous y laissons les pièces de 15 à 18 heures.

Les solutions à base d’acide osmique donnent des fixa-

tions moins recommandables; elles font prendre aux diverses granulations que renferment ces éléments cellulaires des colorations peu électives. Il nous a cependant bien fallu avoir recours à elles pour mettre en évidence la graisse dans les cellules lésées. A la suite de nombreux essais, notre choix s’est arrêté sur le liquide de Lindsay -et d'Hermann. Le liquide de Flemming donne des résultats moins satisfaisants.

Les colorants varient selon les parties' que lon veut mettre en relief. Pour le réticulum cytoplasmique, le kernschwartz, l’hématéine, l’hématoxyline au fer (méthode de Martin Heidenhain) sont parmi les meilleurs. Pour les granulations, la fuchsine acide avec décoloration à l'acide picrique (méthode d'Allmann) est le réactif par excellence ; le bleu de méthylène, le triacide d'Ehrlich, l'éosine sont aussi indispensables pour l'étude histochimique de certains de ces granules. Sur les coupes fixées par les solutions d'acide osmique, la safranine est tout

Léo

indiquée après mordançage par le permanganate de potasse (méthode d'Henneguy).

Les inclusions à la paraffine, le montage des coupes sont autant de manipulations trop connues pour que nous en parlions ici.

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