B. — LES TRAVAUX D’ALTMANN ET DE SES ÉLÈVES

‘Altmann (1890-1894), dans son ouvrage Die Elementarorganismen, étudie longuement le foie de Rana esculenta et donne de ses préparations des dessins admirables qui montrent la valeur des observations faites par ce savant, dont le seul tort fut de transformer en « bioblastes » imaginaires les granula réellement existants qu'il avait découverts.

Altmann montre d’abord la variabilité de la structure du foie de Grenouille en fonction des saisons. Il existe entre le Hungerleber et le Fültlerungsleber des différences considérables qui dépendent de l'absorption de nourriture. Dans le premier les cellules sont petites et remplies presque complètement, abstraction faite du noyau, par des granulations rondes et légèrement allongées. Le Fütterungsleber (dont on rencontre un maximum en été et un maximum en hiver) est constitué par des éléments très grossis et possédant un appareil filamenteux analogue à celui décrit par Flemming. Entre ces deux types extrêmes, d’observation rare, on rencontre toute la série des intermédiaires. Les filaments cellulaires proviennent de granula. Altmann attache à cette notion, obtenue par l’observation d'images variables, une importance considérable; elle montre en effet, contrairement à ce que prétendent Kuppier et Flemming que les Zellfaden ne sont pas des éléments fondamentaux du protoplasma, mais seulement des dérivés des granula qui eux sont réellement les éléments fondamentaux.

Il n’y a donc pas de protoplasma ou de substance interfilaire de nature indifférente. L'espace compris entre les filaments est rempli d'éléments vivants : « diese Raüme augenscheinlich mit lebenden Elementen gefüllt sind ».

La preuve de la nature vivante de ces éléments ressort irréfutablement du fait qu’ils constituent dans le cytoplasma le point de la transformation des graisses. Altmann reproduit dans ses planches les préparations obtenues par sa méthode. On y voit des grains rouge sombre, entourés d’une bordure noire de graisse osmioréductrice. Krehl retrouve dans l'intestin des Mammifères les Ringformen décrites par son maître et montre leurs rapports

avec la résorption de la graisse. Metzner étudie des formations identiques dans le foie de divers animaux à sang chaud et à sang froid. Se basant sur ses résultats personnels et sur ceux obtenus par ses deux élèves, Altmann conclut à la généralité du processus : « Das Auftreten jener Ringformen in Zusammenhang mit den Fettumsetzungen der Zelle als ein weit verbreitetes Vorkommnis erwies ». On peut du reste suivre tous les stades de la transformation des Ringkôrner en Vollkôrner ou grains entièrement constitués de graisse osmio-réductrice. « Von den kleinen zarten Ringkôrnern finden sich alle Uebergänge zu den grüsseren deren Osmiumring breiter geformt und dunkel geschwärzt ist; die helle Mitte wird dann immer kleiner, bis sie punktfôrmig ist und schliesslich ganz verschwindet. So entsteht aus dem Ringkorn das Vollkorn ».

Signalons ici que pour Altmann les anneaux graisseux sont intragranulaires « Zur Substanz der Granula selbst gehôüren ».

En somme, les granula constituent l’élément fondamental de la cellule hépatique; ce sont des éléments vivants qui peuvent prendre diverses formes en rapport avec les conditions physiologiques.

C. — DES TRAVAUX D'ALTMANN À L'APPLICATION DES MÉTHODES MITOCHONDRIALES

On ne peut que regretter le scepticisme qui accueillit les publications d’Altmann; ses travaux sont restés lettre morte. Quelques rares auteurs, ayant confirmé par leurs recherches personnelles les résultats obtenus par le savant allemand, ont essayé en vain de les faire prendre en considération.

La conception classique continue d’être celle de Kuppîer, Heïidenhaïin et Flemming. Renaut, dans son Traité d'Histologie pratique, décrit le protoplasma de la cellule hépatique comme formé par un réseau de travées dont les points nodaux sont occupés par des granulations protéiques et qui ravonnent du noyau vers la marge de la cellule. Dans les mailles du réseau est une substance qui, sous l'influence du sérum « fortement iodé » prend, dans nombre de cellules, la coloration brun acajou caractéristique de la substance glycogène.

Ferrari (1898) admet que les granules sont le facteur principal de l’activité cellulaire; ils changent de forme, de grosseur, de situation suivant leurs fonctions.

Schmaus (1897) observe des gouttes graisseuses dont le centre rouge est cerclé par une bordure bleue; il considère ces images comme formées par de la myéline.

Sjôbring (1900) utilisant le formol comme fixateur, obtient des images qui constituent une «splendide confirmation » des constatations effectives d’Altmann. Appliquant sa méthode à l’étude

F1G. 1. — Cellules hépatiques du Lapin aux différentes phases de leur fonctionnement (d’ap. Sjôbring).

1a, Cellule hépatique du fœtus; b, la même après la mort; 2a, cellule hépatique d’un Lapin après Il A A : A a A + : s un jeûne; b. c, la même modifiée après la mort; 3, cellule hépatique de Lapin après quarante-huit heures de jeûne.

Fixât. : formol, 10 p. 100; color. : hématoxyline ferrique.

des changements fonctionnels de la cellule hépatique, il constate des variations de structure dont il donne des dessins qui méritent d’être rapportés.

Michaelis (1900) publie le premier essai de coloration vitale de la cellule hépatique par injection de bleu de méthylène dans la veine mésentérique; il obtient la coloration de grains intracytoplasmiques. Le rouge neutre lui donne une couronne périphérique de granulations rouges sans rapport avec celles colorées par le bleu de méthylène.

Arnold (1901) étudie le comportement morphologique et fonctionnel des Kürner des Protoplasmas ou Plasmosomen de la cellule hépatique de différents animaux et en particulier de l’Hommeet du Chien.

L'étude vitale et supravitale avec ou sans coloration montre un état granuleux. Les mélanges formol, acide chromique et sublimé, chlorure de sodium, donnent aussi à la cellule hépatique une structure plutôt granuleuse, tandis que le liquide de Flemming décèle de nombreux filaments. On obtient, en somme, des images variables en rapport avec le fixateur, la durée de la fixation, l'épaisseur des objets, et aussi avec les variations fonctionnelles de la cellule.

La cellule hépatique est constituée par des plasmosomes réunis les uns aux autres par des filaments d'union (Bundeglieder); ces plasmosomes sont suceptibles de se transformer en granulations graisseuses; d’être le siège de la surcharge pigmentaire et de jouer un rôle dans la transformation des éléments de la bile.

L'examen des figures qui terminent le mémoire d’Arnold ne laisse pas à beaucoup près une impression analogue à celle qu'on retire des figures d’Altmann. Il semble que sous la dénomination générale de plasmosomes cet auteur englobe non seulement les granula d'Altmann, mais encore les vacuoles intracellulaires et peut-être même quelques artifices de préparation. Nous n'avons jamais observé pour notre part d’aspects comparables à celui représenté en particulier par la figure 4 du mémoire sus-indiqué. Dans cette figure, du reste, les formations colorées vitalement par le rouge neutre ne sont pas des granula, mais bien des vacuoles intracellulaires, comme nous l’avons précédemment indiqué.

Koiransky (1904), étudiant la cellule hépatique des Amphibiens, décrit des bâtonnets ou Sfäbchen qui occupent la zone apicale, seraient d’origine nucléaire et représenteraient le premier degré de la sécrétion.

Les dunkle Stäbchen, Schollen, und flockenformige Gebilde de Koiransky nous paraissent bien être, à ne considérer que les figures qu’elle en donne dans son mémoire, des artifices dus à une mauvaise fixation du chondriome.

Gilbert et Jomier (1906-1907) trouvent dans le foie du Chien et du Lapin soumis à l’inanition absolue « deux sortes de cellules, comme dans le foie normal, les unes grandes avec aspect clair; les autres plus petites et moins nombreuses sont sombres ». Les cellules claires, identiques à la normale, possèdent un protoplasma

constitué par un réseau alvéolaire dont les mailles s'étendent régulièrement sur toute la surface du cytoplasma et dont la densité est partout uniforme. Aux points nodaux du réticulum se rencontrent des granulations ayant une coloration analogue à celle de l’ensemble du réseau. Cette disposition est constante et se retrouve identique dans toutes les conditions physiologiques (jeûne et alimentation).

Le protoplasma des cellules sombres constitue, sur coupes non colorées, une aire homogène jaune pâle, non granuleuse, parsemée de taches incolores. Ces cellules sont disséminées irrégulièrement ou bien massées en bordure des vaisseaux.

En somme les auteurs donnent comme normale la structure décrite par Kuppîer, Heidenhaïin, Flemming. En ce qui concerne les cellules sombres, il semble bien, comme on l’a déjà remarqué, qu'il s’agisse le plus souvent d'éléments en voie de dégénérescence. Les images figurées et la description donnée par Gilbert et Jomier font immédiatement songer à cette interprétation : « Leur forme est variable, triangulaire, quadrangulaire, biconcave, longitudinale. Leurs dimensions sont beaucoup plus restreintes que celles des éléments clairs. Leur noyau est plus ou moins flétri, à contours irréguliers; il est d’autant plus atrophié que le protoplasma cellulaire paraît plus homogène. Il présente souvent une affinité spéciale pour la safranine qui le colore uniformément en rouge. » Contrairement à ce que pensent ces auteurs, il ne s’agit point là d'éléments vidés de leur substance de réserve, mais bien, à notre avis, d'éléments en voie de disparition avec pyenose nucléaire et autolyse cytoplasmique, tels que nous en avons souvent observé au cours de l’examen de nos préparations.

La conception de la cellule claire, élément normal du foie, a servi de point de départ à un certain nombre de travaux. Fiessinger (1908), qui utilise la fixation au Lindsay modifié ou non, considère que la cellule hépatique est normalement claire, et si l’on rencontre des formations granuleuses il faut les considérer comme pathologiques. Léon Bernard et Laederich après usage du Flemming fort arrivent à des conclusions analogues : la cellule hépatique présente un aspect clair et une structure réticulée. Is admettent l’existence de cellules sombres. La plus ou moins grande

fréquence de ces éléments, leurs rapports avec la charge glycogénique sont les seuls faits qui séparent ces auteurs de Gilbert et Jomier.

Launoy (1908), étudiant l’autolyse aseptique du foie dans des solutions chlorurées sodiques et calciques, a constaté que les altérations les plus précoces portent sur le cytoplasma : « Les cellules prennent ordinairement l'aspect de cellules claires qu’elles doivent à la raréfaction des granulations dont la chromaticité est très notablement atténuée. Les altérations nucléaires ne sont bien évidentes qu’à partir de la vingt-quatrième heure d’autolyse; leur début est explosif, elles consistent en hyperchromatose, caryolyse et achromatose. »

D'ALESMTRAVAUX BASES MSUR LES CMÉTAODES MITOCHONDRIALES

Mayer, Rathery et Schaeïffer (1908), étudiant les lésions du rein et du foie produites par injections d’acides gras et de savons d’éther, constatent que, si la cellule hépatique traitée par différents réactifs présente l'aspect clair, cette même cellule traitée par d’autres réactifs (fixation par le liquide J. de Laguesse, coloration par la méthode de Galeotti) revêt une structure toute différente. Rathery (1909) montre que dans ces conditions la «cellule hépatique apparaît, sur les coupes, bourrée de granulations. Ce sont des éléments arrondis très distincts et très isolés les uns des autres qui prennent parfois l'apparence de bâtonnets volumineux. Rathery rattache la structure granuleuse de la cellule hépatique à celle déjà notée par Altmann qui « l’a décrite d’une façon très précise et représentée dans des planches d’une netteté parfaite ». Au sujet de la valeur réciproque de l'aspect clair et de l’état granuleux, Rathery ‘croit que seul le fixateur peut être mis en cause et il conclut : « Partie bien fixée de la cellule : état granuleux; partie incomplètement fixée : état clair ».

Policard, dans une série de notes parues en 1909, publie les

1. Les résultats incomplets de Rathery tiennent peut-être, à notre avis, au tait que cet auteur a fixé ses pièces par un liquide osmiqué, dont la pénétration très lente, n’a, fixé les chondriosomes qu'après un début d’autolyse, ayant déjà entraîné la transformation granuleuse des filaments.

résultats obtenus par l’application de la méthode de Regaud au foie de différents animaux. Chez la Grenouille, il rencontre des filaments onduleux de calibre uniforme offrant une disposition irrégulière dans l'intérieur du cytoplasma. Ces filaments existent dans le foie de l’animal à jeun; au contraire, dans le foie des animaux en digestion, les cellules renferment des grains sidérophiles qui ne sont certainement pas des filaments autolysés, mais en représentent peutêtre la forme jeune. Il a retrouvé des formations analogues chez les Mammifères; chez le Chien il décrit trois types cellulaires : «le type cellulaire à filaments bacilliformes » situés dans les travées protoplasmiques intervacuolaires et se présentant avec une netteté particulière dans la zone périnucléaire; ailleurs les filaments sont « granuleux »; dans d’autres cellules, il rencontre « des grains plus gros, moins nombreux et moins sidérophiles ». Ces types cellulaires dérivent les uns des autres, la preuve en est fournie par la constatation de types intermédiaires. Les cellules du même type sont groupées par plages et les trois types se rencontrent dans le même lobule. Policard étudie ensuite les modifications apportées à l’appareil filamenteux par les intoxications massives à l’acide arsénieux. Ces modifications sont de deux ordres; on observe soit la transformation granuleuse suivie d’un gonflement et de modifications chimiques de la substance des grains, se traduisant par une avidité moins grande pour l’hématoxyline ferrique; soit la diffusion dans tout le cytoplasma de la substance qui donne aux filaments leur affinité pour les colorants spécifiques. Fiessinger, la même année, étudiant l'influence des intoxications brutales sur la cellule hépatique des Batraciens, conclut que la nature des toxiques importe peu; les altérations n’ont rien de spécifique; elles consistent essentiellement en une transformation granuleuse du chondriome filamenteux; ultérieurement les granulations arrondies de la première étape subissent une transformation graisseuse qui progresse de la périphérie au centre jusqu’à la formation définitive de la vésicule graisseuse. Chez les Mammifères l’évolution est entièrement superposable à celle observée chez les Batraciens, comme l’ont montré Policard, Fiessinger et Lyon- Caen.

Mayer, Rathery et Schaeïfer considèrent que les granula-

tions sont l’essentiel dans la structure de la cellule hépatique normale. A Policard revient le mérite d’avoir établi qu'il existe aussi et surtout des filaments et d’avoir, par l'emploi de la méthode de Regaud, assimilé ces formations au chondriome.

A partir de cette époque, l'étude cytologique et histophysiologique de la cellule hépatique est entrée dans une période vraiment féconde. Dès ce moment les résultats apparaissent tangibles qui donnent la solution de nombreux problèmes et fournissent une base solide sur laquelle s’étaieront les recherches ultérieures.

Fiessinger et Lyon-Caen (1910) se basant sur la physiologie et la pathologie essaient d’établir une parenté entre les aspects, très variables de cellule à cellule, que présente le chondriome hépatique. Ils concluent que « l’aspect normal du chondriome au repos et en dehors de toute altération semble résider dans l’aspect bacilliforme du chondriosome ».

Mayer, Rathery et Schaeîfer (1910), étudiant les propriétés physiques et chimiques des mitochondries de la cellule hépatique, arrivent à ce résultat que tout se passe comme si le chondriome contenait, en forte proportion, des acides gras non saturés. Ces auteurs montrent encore que l’intoxication par les acides organiques, en particulier les acides gras non saturés, ou par les bases organiques provoquent une cytolyse avec dissolution et disparition des granulations. Au contraire les hydrazines, le pyrrol, les toxines donnent d’emblée des lésions d’homogénéisation; les granulations se fusionnent et envahissent la cellule entière.

Fiessinger (1910) assimile ces altérations aux trois stades de dégénérescence signalés par lui en 1908 sous le nom de condensation granuleuse acidophile, dégénérescence atrophique avec lésion du noyau, dégénérescence atrophique amorphe avec vacuolisation. Comme Fiessinger avait utilisé des méthodes qui ne permettaient pas la conservation du chondriome, le parallélisme des dégénérescences observées par lui avec les lésions du chondriome décrites par Mayer, Rathery et Schaeñffer l’amènent à cette conclusion que la dégénérescence du chondriome retentit sur toute la structure de la cellule.

Policard signale encore que « certains stades fonctionnels de la sécrétion peuvent être caractérisés par un même dispositif struc-

tural que dans les cellules au début de leur autolyse. » Dans les cellules qui ont subi un début d’autolyse, on rencontre toujours l’aspect granuleux, jamais l’aspect clair.

De toutes ces recherches une conclusion nette se dégage : la cellule hépatique est très fragile et les mitochondries qui entrent dans sa constitution en sont les éléments les plus rapidement altérables. |

En 1912, Policard montre que les cristaux intracytoplasmiques d'hémoglobine peuvent être élaborés par les plastes mitochondriaux de la cellule hépatique; il établit un parallélisme entre ce processus et la formation de cristalloïdes de pigments aux dépens de chromoplastes chez certains Végétaux. Les travaux de Guilliermond avaient du reste montré dès cette époque que les plastes végétaux sont, à l’origine, assimilables à des mitochondries.

En 1914, Mayer, Rathery et Schaeffer publient un travail remarquable dans lequel ils synthétisent, en les complétant, leurs recherches antérieures. Ils concluent que les mitochondries, éléments permanents de la cellule, représentent pour une part des lipoïdes phosphorés à acides gras non saturés, que l’analyse décèle et dont elles sont l’expression morphologique. Les mitochondries sont un lieu de processus d’oxydation. Les chondriosomes seraient encore «une constante cellulaire répartie régulièrement dans tout le cytoplasme ou précipitée sous la forme de grains visibles morphologiquement, selon les variations de l’équilibre physicochimique intracellulaire ».

W. Berg, dans une série d'articles échelonnés de 1911 à 1920, publie les résultats obtenus par lui sur le foie de la Salamandre. Cet auteur rencontre des différences dans le chondriome selon que son étude porte sur des animaux capturés récemment ou tenus en captivité et soumis à des régimes différents. Il décrit en particulier des Hohlkugeln et des Homogenentropfen sur lesquels nous reviendrons ultérieurement.

Roberto Chaves (1920) à propos de la cellule hépatique du Hérisson conclut que pendant la vie intra-utérine, il se produit des « transformations notables qui se traduisent par des variations de l’aspect et du contenu cellulaire ainsi que par des différences dans les chondriosomes ».

En résumé, l'étude du chondriome de la cellule hépatique a été faite par Altmann dont les résultats, d’abord confirmés par Ferrari, Arnold et Sjôbring, furent complétés par Policard, Mayer Rathery et Schaeîfer.

$ II. — Technique.

Toutes nos recherches ont porté sur le foie des Souris blanches. Les animaux étaient tués par section du bulbe; les fragments prélevés de très petites dimensions (3 à 5 mm.) étaient immédiatement fixés.