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En faisant agir l'extrait glycériné sur des solutions d'inuline à 1 pour 100, Green put observer la saccharification graduelle de ce corps. Ce même extrait glycériné soumis à l'ébullition devenait incapable de dédoubler l'inuline ; c'était done un ferment soluble.

Une fois admise la nature diastasique de l’agentnaturel de la saccharification de l'inuline, Green en étudia quelques propriétés essentielles. Il montra d'abord que ce ferment est différent de la diastase ordinaire (amylase).

En effet, en faisant agir l'extrait glycériné sur une solution d’empois d’amidon, il n’observa pas l’hydratation de ce corps. Il vit de plus que la salive, qui se montre si active à l'égard de l’amidon, a peu ou pas d'action sur l’inuline. Il était donc établi que l'inulase est différente de l’amylase. Green étudia aussi Pinfluence de la réaction du milieu sur l’activité du ferment. Comme la salive, dit-il, il « travaille » mieux dans un milieu neutre. Pourtant, la présence d’une très légère trace d'acide ne lui nuit pas, et cette très légère acidité favoriserait plutôt son action. Les acides plus forts que l'acide chlorhydrique lui sont préjudiciables et le contact pendant une heure dans un milieu dont l'acidité égale 0,2 pour 100 HCI le détruit tout à fait.

Les alcalis ont aussi une action pernicieuse et la puissance du ferment ne résiste pas au contact pendant une heure avec une solution à 1,5 pour 100 de carbonate de soude. En ce qui concerne l'influence de la température sur l'activité du ferment, Green constate simplement qu'à 4o° son énergie est beaucoup plus grande qu’à la

température ordinaire.

ENS ee

Enfin, Green chercha à déterminer l’époque où le

ferment fait son apparition dans le tubercule. Ilne le

rencontra pas dans destubereules complètement dévelop-

pés, mais qui n'avaient encore subi aucun procès de erminaltion.

Imbu de Ia théorie des proenzymes, il se demanda si

dans ces mêmes tubercules il n'existait pas une prodiastase, un zymogène qui, au moment de la germination, donnerait naissance au ferment vrai. Étudiant à ce point de vue laction de la chaleur et celle des acides, il observa que des tubercules complètement développés, coupés en gros fragments et soumis pendant 24 heures à l’action de la chaleur (35°), donnaient ensuite, quand ils étaient traités par la glycérine, un extrait contenant de l’inulase. L'action des acides sur la transformation du zymogène en inulase vraie fut au contraire négative.

Tels sont, brièvement mais assez complètement résumés, les points principaux des recherches de Green sur le ferment qui nous occupe.

Quelques mots maintenant du travail de M. Bourquelot que j'ai également signalé. Dans ce travail, M. Bourquelot montre que le liquide de culture de laspergillus niger sur le liquide de Raulin contient un ferment analogue sinon identique à celui de Green. On peut lobtenir mélangé à d’autres ferments solubles en suivant le procédé qu’il a décrit dans la note consacrée à la sécrétion de la tréha-

lase par le même champignon (1).

(x) E. Bourquecor. Sur un ferment soluble nouveau dédoublant le tréha-

lose en glucose. J. Ph. et Ch.[5], XXVIL, p. 497, 1893.

ns FA

« En raison, dit M. Bourquelot, de l'impossibilité où l'on est actuellement de séparer ces ferments les uns des autres, on comprend que la question de savoir si l’on avait affaire à un ferment spécifique ne pouvait être abordée qu'indirectement, comme lorsqu'il s'agissait de la tréhalase. C’est ainsi que linvertine et la diastase n’exercant aucune action sur l’inuline, il était permis .a priori d'affirmer que le dédoublement de ce composé n’était pas déterminé par l’un de ces deux ferments.

D'autre part, en étudiant l’action de la chaleur sur une solution aqueuse des ferments mélangés que produit l’aspergillus, j'ai constaté que cette solution pouvait être portée à 64° sans rien perdre de son activité à l'égard de l’inuline. Or nous savons que la tréhalase est détruite à cette température ; donc le ferment de l’inuline diffère de cette dernière.

«Mais il ne pas m'a été possible de trouver jusqu'ici de caractère permettant de la distinguer de la maltase. Quoi qu'il en soit, il n'y a pas d’inconvénient à la considérer, pour l’étude de ses propriétés, comme un ferment particulier et à lui conserver le nom d’inulase. »

En somme, comme on peut le voir, même après la publication de ces deux mémoires intéressants, l’histoire de l’inulase était loin d’être complète. Il restait à faire la démonstration rigoureuse de la spécificité de ce ferment, à faire ou à préciser l’étude de l'influence des divers agents physiques ou chimiques, soit sur le ferment luimême, soitsur la marche du phénomène qu'il détermine ; enfin, à faire toute entière l'histoire de l’inulase consi-

dérée quant à son rôle dans les phénomènes de la diges-

vtr

tion de l’inuline chez les animaux. Ce sont les résultats auxquels n'a conduit l'étude de ces différents points que

je vais maintenant exposer.