‹ Recherches spectrographiques sur l'absorption des rayons ultra-violets par les albuminoïdes, les protéides et leurs dérivésChapitre 9 sur 51 · DA UN · texte numérisé non relu

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[ce sont !: le sucre de canne, le sucrate de chaux. le glycose, l'urée, le biuret, la taurine, le chlorhydrate de glvcocolle, l'alanine] ; |

«la seconde comprend les corps plus absorbants, mais < sans caractère élecuf déterminé »

[ce sont: le chlorhydrate de leucine, la leucine, l'acide hippurique, l’allantoïne, l’alloxane, le cholalate de soude, le glvcocholate de soude, le taurocholate de soude]:

« la troisième comprend les corps dont le spectre est < franchement caractérisé par des bandes d'absorption »

[ce sont: l'acide urique, l'acide oxalurique, le cyanate de potassium, la sarcine, le chlorhydrate de sarcine, le chlorhydrate de xanthine, la tyrosine et l'hydroquinone — ce dernier corps examiné par Soret à cause de son analogie de consütution avec la tyrosine].

Sorel, avant remarqué (avec Danilewski) que l'addition de soude aux substances albuminoïdes modifie profondément leurs spectres d'absorption, étudia l'influence exercée par la soude sur les propriétés absorbantes de la plupart des corps appartenant à la troisième série. [Il reconnut que les courbes d'absorption de la tyrosine et de Falbumine, soit à l'état naturel, soit après addition d'alcali, présentent une grande ressemblance. Nous aurons à revenir sur ce fait intéressant.

En 1887, Hartley ? confirma l'existence d'une bande d'absorption ultra-violelte pour Falbumine pure, pour la caséine et pour la sérine (sérumalbumine).

En 1899, Blyth® fit paraître un mémoire «sur le spectre d'absorption des protéides (protéiques) par rapport à la tyrosine ». Il observa que lFalbumine d'œuf, a sérum-

1 J'énumerce entre crochets les corps de chacune des (rois séries examinés par Sorel.

? W.-N. Harriey : Spectroscopie Notes on the Carbohydrates and Abuminoïds from Grain. — Journ. of the chemic. Society, LI (Transactions), 58, 1887.

3 AW. Blyth. — Loc. cit.

albumine, la caséine animale, la caséine végétale, la peptone de Witte — toutes substances d’où on peut retirer de Ta tyrosine par un traitement approprié —- présentent dans l'ultra-violet une bande d'absorption pratiquement identique à celle de la tyrosine, L'auteur dit être à peu près certain que la bande d'absorption des substances protéiques précitées est due à ce que la Eyrosine entre dans leur constitution. Il rapporte ensuite les résultats qu'il a oblenus en observant quelques autres protéiques. Une albumose préparée d’après les indications de Schrütter ! ne montrait aucune absorption sélective. Une toxalbumine diphtérique présentait la bande habituelle des albuminoïdes. Une autre toxalbumine, provenant d'un cas d'endocardite ulcéreuse, donnait au contraire un spectre d'absorption continu. Enfin des gélatines de dif férentes provenances n'offraient pas non plus d'absorption sélective. (Notons que la grande transparence relative de Ta gélatine avait été déjà signalée par Soret, Hartley et Schumann.)

En terminant, l'auteur dit que les corps protéiques pourraient être divisés convenablement en deux catégories au point de vue chimique : ceux qui donnent la bande d'absorp- Uon de la tyrosine et ceux chez lesquels cette bande est absente, division qui correspond à une profonde différence dans la constitution de la molécule.

10. Critique des travaux de Soret, Hartley et Blyth. = Comme on Fa vu par le passage cité plus haut, Soret ne Sillusionnait pas sur le degré de pureté des substances albuminoïdes qu'il avait examinées et se demandait si leur spectre ne devait pas être attribué à quelque substance étrangère qui les soullerait. Quand on songe au pouvoir absorbant extrémement intense de certains principes physiologiques (Facide urique, par exemple), on comprend toute la valeur de objection précédente, Elle atteint les travaux de

! H, Scurarrer. Monatshefte f. Chem., XIV, 612, 1893.

EL Es Hartley et de Blyth tout autant que ceux de Soret, car les auteurs anglais ne se sont pas suffisamment préoccupés de là purification des matières albuminoïdes avec lesquelles ils ont opéré.

Hartley avance bien qu'il a examiné de l'albumine pure; mais, comme il se contente de l’énoncer sans indiquer la provenance de son produit, ni les moyens de purification employés, on ne peut prendre son dire en sérieuse considération — d'autant plus qu'il mentionne, au début de son mémoire, que ses solutions étaient si troubles qu'il à éprouvé de ce fait beaucoup d'ennuis. Ajoutons qu'il ne donne les limites de La bande d'absorption que pour une épaisseur unique d'une seule dilution.

Blvth dit simplement qu'il purifia de Falbumine par des précipitalions réitérées (avec quelle substance précipitante ?), et qu'après plusieurs filtrations sur du papier durer 11 obünt une liqueur presque hmpide. Hartley et Bivth ne donnent aucun renseignement sur la préparation des autres substances protéiques qu'ils ont examinées.

Ces quelques remarques démontrent assez combien il était désirable qu'on sût à quoi s'en tenir sur le spectre des substances albuminoïdes vraiment pures. Or, actuellement, on possède des techniques perfectionnées permettant d'isoler des substances albuminoïdes parfaitement pures au pont de vue qui nous intéresse: c'est-à-dire absolument exemples de corps étrangers pouvant exercer une action absorbante, bien que constituées peut-être, dans certains cas, par des mélanges d'espèces très voisines, Je décrirai plus loin les résultats que j'ai obtenus en étudiant d'une façon aussi complète que possible l'absorption des rayons ultra-violelts par quelques substances albuminoïdes rigoureusement purifiées et exactement définies (ovalbumine, sérumalbumine, édestine cristallisées, elobine de Foxyhémoglobine cristallisée, etc.) Qu'il me suffise, pour le moment, d'annoncer que mes recherches établissent que la bande d'absorption ultra-violette que montrent les substances albuminoïdes appartient bien en propre à ces

substances.

Nous savons que Soret et Blyth ont cherché comment on pouvait interpréter le spectre à bande des matières albuminoïdes et qu'ils sont arrivés, tous deux, à la conclusion qu'on devait le rapprocher du spectre très analogue de la tyrosine, Blyth, dont le mémoire est postérieur de seize ans à celui de Soret, parait avoir ignoré complètement les travaux de son devancier sur ce point. Il est plus affirmatif que lui, bien que ses observations soient moins concluantes. Il conslate, en effet, qu'une toxalbumine et qu'une albumose ! {qui donne, d'après Jui, loules les réactions ordinaires d'une albumine) ne présentent pas de pouvoir absorbant sélectif. Comme rien ne prouve Fabsence du groupement de la tyrosine dans les corps précédents, ces résultats négatifs semblent s'opposer à l'acceptation de la conclusion formulée par Blyth. Ce que lon doit aussi reprocher à cet auteur, c'est d'avoir complètement négligé Fétude des propriétés absorbantes des autres groupements qui prennent part à la consbtution des substances albuminoïdes. A ce point de vue, le travail de Sorel est bien supérieur. Soret a examiné un grand nombre de dérivés des substances albuminoïdes et il a, de plus, étudié comparativement les modifications apportées aux caractères spectraux de ces dérivés et à ceux des albuminoïdes par le changement de réaction (alcalinisation ou acidificalion) : enfin, les conclusions qu'il tire de ses recherches si étendues sont pleines d'une judicieuse réserve. Après avoir, d'une part, noté les ressemblances et les différences qui

! On oblient celle albumose (de Senrærrer) en ajoutant à 100 er.

de peplone de Wille, dissous dans de l'eau acidifiée par SO'H?, 200 grammes de poudre de zine el 300 gr. d'acide sulfurique. On laisse reposer À jour, puis chauffe au bain-marie pendant # heures : on sépare par filtration le zine non dissous, ajoute à la liqueur de la barylte Jjusqu'à alcalinité et sature l'excès de baryte par CO? La liqueur filtrée est évaporée à siceilé. Le résidu jaunâtre est partiellement soluble dans l'alcool méthylique chaud, En ajoutant de léther à l'extrait alcoolique, on précipite lalbumose, La solution de cette albumose (?)} additionnée de réacÜif de Millon 5e colore en rouge el laisse bientot déposer un préci-

pilé roue,

PT

existent entre le spectre de Falbumine et celui de la tyrosine. et, d'autre part, constaté l'analogie des spectres de la tyrosine et de l'hydroquinone qui possèdent en commun le groupe paraoxyphényle, 11 ajoute : « d'après les belles recherches de Hartley et Huntinglon, quelques autres corps de la série aromatique présentent des spectres d'absorption qui ne sont pas sans analogie avec celui de lalbumine: il serait donc prématuré de s'arrêter à une conclusion positive, avant une étude plus complète de cette catégorie de composés ».

Vingt-cinq ans se sont écoulés depuis la publication du remarquable mémoire de Soret. Pendant cette période, notre connaissance de la constitution des matières albuminoïdes a fait des progrès considérables. On a découvert plusieurs dérivés qui semblent constituer des noyaux très importants de la molécule albuminoïde (arginine, Iysine, histidine, proline, trvptophane, ete). On à reconnu, par contre, que certains corps, qu'on présumat autrefois provenir de lalbumine, n'en dérivent pas. Tel est le cas pour l'acide urique : Soret, avant observé que le spectre de l'acide urique offre de l'analogie avec celui de lalbumine, avait discuté l'hypothèse de lexistence d'un noyau commun qui exphiquerat cette ressemblance. Cette supposition, parfaitement légitime alors, nous apparait maintenant comme inadnussible. Par conséquent, notre posibon n'est plus du tout la même en face du problème pose, ce qui nous impose évidemment de reprendre l'étude de la question. D'ailleurs, même à l'époque où à paru le travail de Soret, il eût été nécessaire de repreadre cette étude pour la compléter (Soret avait omis d'examiner certains dérivés essentiels déjà connus) et pour là rectifier (Soret s'était contenté quelquefois d'examiner des corps manifestement impurs).

Entre les principes albuminoïdes naturels el leurs dérivés éloignés (non albuminoïdes) dont nous venons de parler, il existe tout un ensemble de corps intermédiaires : les albuminoïdes de transformation hydrolyüque. Quelques-uns d'entre eux ont déjà été examinés par Sorel el par Blyth, mais dans des conditions qui laissent beaucoup à désirer. BIvth, par exemple,

a décrit le spectre d'une solution dans l'eau de ce mélange complexe de protéoses qu'est la peptone de Witte : or, dans l'eau pure, on n'obtient qu'une solution très incomplète à cause de la présence d'hétéroprotéose. Quant aux produits examinés par Soret, ils étaient très mal définis, et la concentration des solutions restait indéterminée. Le programme des recherches à effectuer dans ce sens était done tout tracé : 11 fallait opserver les spectres des principaux termes échelonnés de Fhydrolyse des substances albuminoïdes naturelles (proto- et deutéroprotéoses, amphopeptone, antipeptone) el déterminer les propriétés absorbantes de chacun de ces corps, en n'opérant, autant que possible, qu'avec des liqueurs ttrées et sous des épaisseurs mesurées.

Je passe maintenant à l'exposé des résultats que m'a fournis l'étude de Fabsorption des ravons ultra-violets :

4 par les substances albuminoïdes naturelles :

2° par les substances albumanoïdes de transformation hydrolyvtique :

3° par les dérivés non albuminoïdes des substances albumimoïdes.

S 4. — Absorption des rayons ultra-violets par les substances albuminoiïides naturelles,

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