HYPERTROPHIE EXPÉRIMENTALE DU COEUR

Par E. GLEY

La très intéressante observation de M. Aubertin * m'engage à. signaler quelques exemples d'hypertrophie du cœur, constatés au cours d'expériences d'immunisation contre divers sérums toxiques, le sérum d'anguille et le sérum de torpille.

Chez des lapins ayant reçu, dans l'espace d'un mois, quatre ou cinq doses de l'un de ces sérums, suffisant à les immuniser contre une dose sûrement mortelle, ces animaux ayant été sacrifiés en vue de recherches diverses, j'ai, presque chaque fois que j'ai examiné leur cœur, trouvé cet organe hypertrophié. Je l'ai plusieurs fois pesé, frais et vidé de sang*, et j'ai noté des poids de 8 à 10 gr. Le cœur des lapins normaux, d'un poids moyen de 2 kilogrammes, pèse, en général, 5 à 6 gr. De plus, plusieurs de ces cœurs présentaient des altérations macroscopiques évidentes et souvent le péricarde contenait du liquide.

Cette hypertrophie, d'origine toxique, dépend-elle de troubles de la mécanique circulatoire? L'injection d'une dose toxique de sérum, plus ou moins voisine de la dose mortelle, détermine un abaissement de la pression artérielle, ce qui n'est guère favo-

• C. R. de la Soc. de BioL, 27 juillet 1907, t. LXIII, p. 208.

1. Il s'agissait d'une observation de lapin soumis pendant plusieurs mois à une intoxication absinlhique lente; le cœur de cet animal pesait 22 grammes. (Note ajoutée.)

2. Le cœur est pesé complet, oreillettes et ventricules, avec la partie originelle des gros vaisseaux. Dans ces conditions, Krause, dans son Anatomie des Kanincfiens, dit que le cœur pèse en moyenne 4 gr. 5.

rable à cette hypothèse. Il est vrai que l'étude des modifications cardio-vasculaires, tenant à des injections subtoxiques répétées, telles qu'on les pratique en vue de l'immunisation, n'a pas été faite. En l'absence des renseignements que pourrait fournir cette étude, on est tenté de penser que l'altération signalée peut être causée par des lésions rénales; les injections de sérum d'anguille déterminent, en effet, de graves lésions des reins, comme nous l'avons montré, L. Camus et moi, il y a une dizaine d'années'; l'étude histologique de ces lésions a d'ailleurs été très bien faite par notre collègue et ami A. Pettit ^

Quoi qu'il en soit, on remarquera qu'il peut se produire, au cours de l'immunisation contre des sérums toxiques, des réactions qui sont loin d'être favorables à l'organisme. C'est une notion d'ailleurs qui ressort aussi des recherches que Charrin et Gley ont poursuivies de 1891 à 1896 sur l'influence tératogène des produits microbiens [Soc. de Biologie, 1891-1896 etArch. de physioL, 1893-1896).

1. C. R. de l'Acad. des Se, 31 janvier 1898, t. CXXVI, p. 428, et Arch. intern. de pharmacodynamie, 1898, t. V, p. 247-305.

2. C. R. de la Soc. de Biol., 19 mars 1898, p. 320, et Arch. intern. de pharmacodynamie, 1901-1902, t. VIII, p. 409-428.

DE L'ACTION DES ICHTYOTOXINES SUR LE SYSTÈME NERVEUX DES ANIMAUX IMMUNISÉS CONTRE CES SUBSTANCES. CONTRIBUTION A L'ÉTUDE DE L'IMMUNITÉ *

Par E. GLEY

Dans plusieurs notes présentées à l'Académie', nous avons étudié, L. Camus et moi, l'immunité naturelle et acquise contre l'action toxique du sérum d'anguille; nous avons montré, entre autres faits, que le sérum sanguin des animaux immunisés a acquis une propriété antihémolytique, c'est-à-dire qu'il s'oppose in vitro et in vivo à l'action globulicide du sérum d'anguille; que ce mécanisme, en lequel consiste essentiellement l'immunité acquise, est très différent de celui de l'immunité naturelle, qui tient à une propriété cellulaire, à une résistance naturelle des hématies au poison, chez diverses espèces animales; qu'il est possible de superposer à cette immunité naturelle ou cytologique l'immunité humorale, etc.

Pour l'étude de l'immunité en général, c'est une question importante de savoir si et dans quelle mesure tous les organes qui subissent l'action d'une toxine quelconque, poison bactérien,

* C. R. de l'Acad. des Se, 9 décembre 1907, t. CXLV, 1210.

l. L. Camus el E. Gley : De l'action destructive d'un sérum sanguin sur les globules rouges d'une autre espèce animale. Immunisation contre cette action (C. R. de l'Acad. des Se, 31 janvier 1898, t. CXXVI, p. 428). — Sur le mécanisme de l'immunisation contre l'action globulicide du sérum d'ano-uille (Ibid 8 août 1898, t. CXXVII, p. 330). - Expériences concernant l'état réfractai re aii' sérum d'anguille. Immunité cytologique 24 juillet 1899, t. C.XXIX i) 231)

— Action hcmatolytiquc et toxicité générale du sérum d'anguille pour la marmotte {Ibid., 26 juin 1905, t. CXL, p. 1717)

venin ou sérum toxique, sont devenus résistants à cette action chez les animaux immunisés Gomment se comporte à cet égard le système nerveux pour lequel des sérums toxiques, tels que le sérum d'anguille, sont si particulièrement nocifs?' J'ai procédé à cette recherche de la façon suivante. La méthode employée peut évidemment être appliquée à l'étude d'autres toxines.

Connaissant la toxicité de ce sérum en injection intra-veineuse chez le lapin % j'ai déterminé cette toxicité sur le même animal en injectant le sérum directement dans le liquide céphalo-^ rachidien, à travers la membrane occipito-atloïdienne' ; j'ai ensuite cherché si, chez des animaux préalablement immunisés, cette toxicité n'est plus la même. Voici les résultats essentiels de ces expériences.

Le sérum d'anguille, introduit par cette voie, est au moins dix fois plus toxique que par la voie veineuse, car il suffit de 0,02 c. c. par kilogramme (au lieu de 0,2 c. c.) pour tuer un lapin en un laps de temps variant de 5-10 m. à 1 ou 2 h, ; si le sérum est frais et très actif, il suffit même de 0,01 c. c. par kilogramme.

Les principaux accidents sont les suivants : après une courte période d'excitation, l'animal, paralysé ou parésié, tombe sur le flanc et, dans cette position, présente des mouvements cloniques plus ou moins violents, de la polypnée, puis de la

1. Nous avons montré, en 1893, Charrin et moi (C. R. de la Soc. de Biol., 25 novembre 1893, p. 921), que la toxine pyocyanique paralyse les appareils nerveux vaso-dilatateurs, chez les animaux vaccinés comme chez les normaux. En 1898, Em. Roux et A. Borrel {Ann. de VInstitut Pasteur, 1898, t. XII, p. 225-239) ont constaté ce fait très intéressant que les lapins immunisés contre le tétanos sont rendus aussi facilement tétaniques que les animaux normaux, par injection d'une minime quantité de toxine tétanique dans le cerveau même; ainsi le cerveau d'un animal immunisé n'a pas l'immunité.

2. Voir sur ce point L. Camus et E. Gley : Recherches sur l'action physiologique du sérum d'anguille. Contribution à l'étude de l'immunité naturelle et acquise (Arck. intern. de pharmacodynamie , 1898, t. V, p. 247- 305).

3. C. Delezenne, dans un travail sur les sérums névroloxiques {Ann. de Vlmliiut Pasteur, 1900, t. XIV, 686-704), a déterminé la toxicité du sérum d'anguille en injection intra-cérébrale, d'après la technique employée par Roux et Borrel {Ibid., 1898) pour l'étude de la toxine tétanique, c'est-ù-dire en injectant le liquide en plein tissu, dans la région frontale, par un orifice fait à la paroi crânienne; il avait trouvé que par cette voie le sérum est cinquante fois plus toxique qu'en injection intra-veineuse. {Note ajoutée.)

dyspnée, da myosis, de la salivation. La mort arrive par arrêt respiratoire.

Or, chez les animaux immunisés à la suite d'injections intraveineuses de petites doses de sérum d'anguille, les accidents sont les mêmes et se terminent par la mort dans les mômes délais. Un fait à noter, c'est que chez un seul de ces animaux on a constaté du myosis; les autres n'en ont pas présenté. Cependant le myosis est un des signes les plus rapides et les plus sûrs de l'intoxication par le sérum d'anguille. Il y aurait donc immunité pour cet accident ou immunisation légère du système nerveux se traduisant par cette résistance à l'une des actions de la neurotoxine qui se trouve dans le sérum d'anguille.

Je dois signaler deux exceptions constatées au cours de ces expériences. Un lapin, ayant reçu 0,01 c. c. par kilogramme, a survécu après avoir présenté durant 1 h. les phénomènes convulsifs, les troubles respiratoires et le myosis qui sont de règle. Il ne devait être cependant que faiblement immunisé, n'ayant reçu que deux injections intra-veineuses du sérum toxique, ce qui, d'après nos expériences antérieures, est insuffisant pour amener l'animal à un degré élevé d'immunisation. Il s'est agi probablement ici d'un animal particulièrement résistant. L'autre exception concerne un lapin dont l'immunité a été éprouvée par une injection intra-veineuse, sûrement mortelle, à laquelle il résista; cet animal reçoit, sous la membrane occipitoatloïdienne, 0,01 c. c. de sérum par kilogramme; il présente pendant près de 1 h. les accidents habituels, puis il se remet; 2 jours après, on lui injecte 0,02 c. c. de sérum; il meurt en 9 m. 30 sec. (sans avoir eu de myosis).

Il ne semble pas que ces deux observations puissent restreindre la conclusion générale qui ressort de toutes ces expériences, à savoir que le système nerveux central des animaux immunisés contre le sérum d'anguille n'a pas acquis l'immunité ou, du moins, n'acquiert qu'une très faible immunité. Celle-ci parait donc ne se manifester que lorsque la toxine pénètre dans le sang, où elle est neutralisée par l'antitoxine formée dans l'organisme au cours de l'immunisation ou dont elle disparaît en vertu de quelque autre processus qu'il n'y a pas lieu d'examiner ici.

J'ai fait des recherches semblables avec le sérum de torpille, dont j'ai antérieurement montré les actions toxiques'.

La toxicité de ce sérum, injecté par la voie intra-rachidienne, est aussi dix fois plus grande environ que sa toxicité en injection intra-veineuse (0,2 c. c. par kilogramme au lieu de 2 c. c). Les accidents consistent surtout en attaques convulsives, toniques et cloniques, dyspnée, myosis, salivation; les phénomènes paralytiques sont plus rares, sauf quand les animaux ont reçu une faible dose permettant une survie de plusieurs jours. Il se développe alors une affection médullaire, caractérisée par de la parésie, un épuisement se produisant rapidement quand on force l'animal à se déplacer et tel que celui-ci tombe alors paralysé, une démarche spasmodique, etc. Je n'ai pu faire qu'un très petit nombre d'expériences sur des animaux immunisés"; les accidents ont été les mêmes et la mort est survenue dans des délais analogues.

D'autre part, les animaux qui ont reçu à plusieurs reprises dans le liquide céphalo-rachidien de petites doses de sérum de torpille ne résistent pas à la dose toxique. Il ne semble pas que l'immunisation puisse se faire par cette voie. — J'ai d'ailleurs entrepris quelques essais semblables d'immunisation du système nerveux contre le sérum d'anguille; l'insuccès, jusqu'à présent, a été le même. Ce qu'il n'est pas sans intérêt de constater au point de vue des mécanismes de l'immunisation.

1 E. Gley : Recherches sur le sang des Sélaciens. Action loxique du sérum de torpille (C R. de VAcad. des Se, 13 juin 1904, t. CXXXVIII, p. 1547 [voy. cidessus p. 102]).

2. Les expériences d'immunisation demandent, en elTet, un assez long temps. Or, malgré toutes les précautions d'asepsie et de conservation au froid, le sérum de torpille perd graduellement de sa toxicité. Ces expériences ne r)Ourraient être poursuivies dans les conditions nécessaires d'exactitude que dans un laboratoire maritime. — Je profite de l'occasion qui m'est offerte pour remercier M. le D'' Sellier, directeur adjoint de la Station biologique d'Arcachon, à l'obligeance duquel je dois le sérum de torpille dont j'ai eu besoin.

CONTRIBUTION A L'ÉTUDE DU MÉCANISME DE L'IMMUNITÉ. - DE L'ACTION DU SÉRUM DE TORPILLE SUR LE SYSTÈME NERVEUX DES ANIMAUX IMMUNISÉS CONTRE CE SÉRUM *

Par E. GLEY

Au point de vue du mécanisme de l'immunité, c'est une question importante de savoir si tous les organes qui subissent l'action d'une toxine quelconque, poison bactérien, venin, sérum toxique, sont devenus résistants à cette action chez les animaux immunisés. J'ai entrepris l'étude de cette question en me servant pour cela de deux sérums toxiques dont je me suis déjà beaucoup occupé, le sérum d'anguille et celui de torpille et au moyen d'une méthode déjà connue en pharmacodynamie, mais qui n'a pas encore été systématiquement employée et qui mériterait de l'être, la méthode des injections dans le liquide céphalo-rachidien.

* C. R. de l'Assoc. franç. pour U avancement des se, Congrès de Clermonl- Fcrrand, 31» session, p. 608-612, 8 août 1908.

1. L. Camus et E. Gley : De l'action destructive d'un sérum sanguin sur les globules rouges d'une autre espèce animale. Immunisation contre cette action. C. R., t. CXXVI, p. 428, 31 janvier 1898; — Sur le mécanisme de l'immunisation contre l'action globulicide du sérum d'Anguille. Ibid., t. CXX'VII, p. 330, 8 août 1898; — E.xpôriences concernant l'état rôfractaire au sérum d'anguille. Immunité cytologique. Ibid., t. CXXIX, p. 231, 24 juillet 1899; — Recherches sur l'action physiologique du sérum d'anguille, Contribution à l'étude de l'immunité naturelle et acquise. Arc/i. inlern. de pharmacodynamie, 1898, t. V, p. 247-305, etc.

E. Glky : Recherches sur le sang des Sélaciens. Action toxique du sérum de torpille. C. R., t. CXXXVIII, p. 1547, 13 juin 1904.

Quand on a à éprouver des substances dont une des caractéristiques ou le caractère essentiel est leur action sur le système nerveux central, cette méthode fournit, en effet, des résultats sûrs et précis, appliquée sur des animaux tels que le chien et le lapin, chez lesquels il est aisé de pratiquer une ou plusieurs injections par la membrane occipito-atloïdienne sans léser les centres nerveux, et après que l'on a laissé s'écouler une quantité de liquide céphalo-rachidien correspondant à peu près à la quantité de liquide injecté.

Je ne m'occuperai, dans ce travail, que du sérum de torpille. Je renvoie pour le sérum d'anguille à la note que j'ai publiée dans les Comptes rendus de l'Académie des Sciences ' l'année dernière.

J'indiquerai d'abord les effets du sérum de torpille en injection dans le liquide céphalo-rachidien, puis les effets de ce même sérum chez les animaux préalablement immunisés contre ledit sérum, et enfin les effets de ces injections chez des animaux qui ont reçu préalablement, par la même voie, des quantités déterminées de sérum antitoxique. — Toutes les expériences ont été faites sur le lapin.

I. — Abstraction faite des variations imprévues de toxicité dépendant des animaux qui ont fourni le sérum ou de la sensibilité particulière de quelques animaux d'expérience et de diverses causes de variation plus ou moins évitables, tenant, par exemple; à l'affaiblissement d'action dû au vieillissement ou à un manque de précautions dans la conservation, la toxicité du sérum de torpille injecté par la voie indiquée est en moyenne dix fois plus grande que la toxicité en injection intra-veineuse (0,2 c. c. par kilogramme au lieu de 2 c. c). Les accidents débutent 2 ou 3 min. après l'injection; ce sont des accidents respiratoires, polypnée et dyspnée, qui éclatent en même temps que des désordres du système nerveux central, consistant en

1. E. Gley : De Taction des ichlyoloxines sur le J*' maux immunisés contre ces substances. Contribution à 1 élude de limmumté. C.B., 9 décembre 1907 (voy. ci-dessus p. 125).

impulsions motrices; celles-ci sont caractérisées par des mouvements de propulsion (courses plus ou moins rapides), des sauts en hauteur, quelquefois des mouvements de manège, plus rarement de rotation sur l'axe, assez souvent des attaques cloniques, rarement toniques; on observe aussi du myosis qui va en s' exagérant, de l'exophtalmie (qui n'est pas constante), de la salivation. Cette phase d'excitation est suivie d'une phase de paralysie ou de parésie plus ou moins longue, suivant la dose injectée. Les animaux meurent en des laps de temps très différents, variant de 10 min. (très rarement moindres) à une ou plusieurs heures. Quand la dose n'est pas suffisante pour amener la mort immédiate, les accidents paralytiques dominent et durent plusieurs jours, quelquefois même de 15 à 20 jours; le plus souvent, l'animal est d'abord complètement paralysé, puis cette paralysie s'atténue, il n'y a plus de parésie; dans ce dernier état, quand on force l'animal à se déplacer, il se fatigue rapidement et, après quelques mouvements, il tombe épuisé. La température, le lendemain de l'injection, est très basse : j'ai relevé des températures de 30 à 33°; dans les jours qui suivent, elle se relève, mais sans revenir jamais à la normale. La perte de poids est considérable, dès le lendemain de l'injection, de 100 à 200 gr.

IL — Chez les animaux préalablement immunisés contre le sérum de torpille par des injections intra-veineuses répétées de petites doses de ce sérum (ces animaux résistaient à une dose toxique injectée dans une veine), l'injection dans le liquide céphalo-rachidien de la quantité ordinaire provoque les mômes accidents que ceux qui viennent d'être décrits et la mort dans les délais habituels.

Ainsi, quand le poison est porté directement sur les cellules nerveuses chez les animaux immunisés, rien n'empêche son action de se produire. Si ces animaux ne manifestent pas lf>s troubles nerveux caractéristiques, quand le poison est injecté dans le sang, ce n'est donc pas parce que leur système nerveux a acquis une résistance spécifique, c'est parce que la toxine en pénétrant par la voie sanguine dans l'organisme, y rencontre

une antitoxine qui la neutralise et en empêche les effets, avant qu'elle arrive aux cellules nerveuses. C'est là le fait essentiel sur lequel j'ai insisté dans une note du 9 décembre dernier, à l'Académie des Sciences. De même, nous avions antérieurement démontré, L. Camus et moi {loc. cit.), que les hématies des animaux immunisés contre le sérum d'anguille ne sont plus détruites par ce sérum, non pas parce qu'elles ont acquis une résistance propre, spécifique et en quelque sorte constitutionnelle, mais parce qu'il s'est formé dans le sang de ces animaux une substance antitoxique qui s'oppose à l'effet destructeur de l'ichtyotoxine.

III. — Les expériences que j'ai maintenant à relater viennent confirmer cette donnée, en même temps qu'elles en constituent une contre-épreuve.

J'ai trouvé, en effet, qu'on peut empêcher l'action si intense de l'injection intra-rachidienne du sérum de torpille en injectant par la même voie, et en même temps ou quelque temps auparavant, une quantité déterminée de sérum antitoxique (provenant d'un animal immunisé de la même espèce). Voici les expériences que j'ai pu réaliser jusqu'à présent.

Il me semble nécessaire de les répartir en deux séries, parce que les unes ont été faites avec un sérum antitoxique très actif, et les autres avec un sérum qui l'était très peu. Les animaux qui avaient fourni ces deux sérums avaient été cependant immunisés pendant le même laps de temps, soit 1 mois, à 5 jours près, et avaient reçu l'un et l'autre, pendant ce temps, huit injections de sérum de torpille, dont les deux ou trois dernières à dose toxique. L'un d'eux néanmoins, saigné 3 jours après la dernière injection, a donné un sérum très actif; l'autre, saigné le lendemain même de la dernière injection, a donné un sérum fort peu actif.

1° Avec le premier, dix expériences ont été faites.

A. — Deux animaux ont été injectés avec un mélange à parties égales de sérum antitoxique et de sérum toxique'; tous deux ont

1, Quand on opère ce mélange, il se produit un fin précipité.

survécu, après avoir présenté quelques accidents paralytiques qui ont duré plusieurs jours, s'atténuant d'ailleurs progressivement. — Un animal a reçu le même mélange, mais la quantité de sérum antitoxique était double de celle du toxique. Or, cet animal n'a présenté aucun accident, sauf une perte de poids considérable (250 grammes en vingtquatre heures).

Trois animaux témoins, ayant reçu des doses inférieures du même sérum de Torpille, sont morts en trois-quatre heures, en vingt-cinq heures et en quarante-six heures.

B. — Trois animaux ont reçu le sérum antitoxique cinq minutes avant le toxique. Deux d'entre eux n'ont eu aucun accident (sauf la perte de poids consécutive qui a été, pour l'un, de 75 grammes et, pour l'autre, de 280 grammes en vingt-quatre heures); le troisième est mort en cinq jours; mais les deux premiers avaient reçu une quantité de sérum antitoxique double de la quantité du toxique et le dernier une quantité seulement égale.

Deux animaux témoins pour les deux premiers sont morts, l'un, en trente-trois minutes, et l'autre en vingt-cinq heures et demie. Un témoin pour le troisième, ayant reçu une dose moitié moindre de sérum toxique, est mort en quarante-six heures.

C. — Deux animaux ont reçu le sérum antitoxique dix minutes après le toxique, à une dose double de la dose de ce dernier. L'un n'a présenté aucun accident (sauf une perte de poids de 90 grammes en vingt-quatre heures); l'autre est mort en quarante-trois minutes, mais ce résultat est suspect, en raison d'une infiltration des muscles de la nuque constatée à l'autopsie et telle que l'on pouvait se demander si l'injection de sérum antitoxique avait bien pénétré jusqu'au bulbe.

Un animal témoin est mort en trente-trois minutes, un autre en une dizaine d'heures.

D. — Enfin, sur deux lapins, l'injection de sérum antitoxique, toujours en proportion double, a été faite un quart d'heure avant celle du toxique. Le premier n'a présenté que quelques petits accidents (un peu de polypnéeetdemyosis) et une forte chute de poids (245 grammes en vingt-quatre heures); l'autre est mort en dix-douze heures, avec les impulsions motrices, les accidents convulsifs, puis les phénomènes paralytiques ordinaires.

Mêmes témoins que pour les animaux de la série B.

2" Avecle second sérum, huit expériences ont été faites. Dans presque toutes, la quantité de sérum antitoxique a été le double de la quantité de toxique.

A. — Un seul animal a reçu un mélange des deux sérums- il est mort en 1 h. 3 min. '

Deux lapins témoins, ayant reçu la même dose de toxine sont morts en 15 et 21 min. '

B. — Un seul animal a reçu le sérum antitoxique 10 min. avant le toxique. Après avoir présenté des accidents graves, il a survécu.

Mêmes témoins que pour le lapin A.

C. — Deux animaux ont reçu le sérum antitoxique un quart d'heure avant le toxique. L'un est mort en 40 h. environ, l'autre en 2 jours et une dizaine d'heures.

Mêmes témoins que pour A et B.

D. — Un seul animal a reçu le sérum antitoxique une demi-heure avant le toxique. Il est mort en 4 jours 35 min.

Mêmes témoins que ci-dessus.

E. — Trois animaux ont reçu le sérum antitoxique 1 h. avant le toxique. L'un est mort en 16 min., un autre en 55 min., et le troisième en 1 h. 26 min.; celui-ci avait reçu une dose d'antitoxine triple de la dose de toxine.

Mêmes témoins que ci-dessus. Un autre témoin a succombé en 4 min. à une injection intra-veineuse de 2 c. c. par kilogramme du même sérum de torpille ; le sérum ayant servi à ces expériences était donc très toxique.

Encore que cette seconde série d'expériences soit moins pro bante que la première, en raison l'activité beaucoup moindre du sérum antitoxique qui y a été employé, on voit que l'injection de l'antitoxine dans le liquide céphalo-rachidien, en même temps ou peu de temps avant l'injection du poison, protège le système nerveux contre les effets nocifs et mortels de ce dernier. Il ne m'a pas encore été possible de déterminer exactement la durée de l'action préventive exercée par le sérum antitoxique; dans la seconde série d'expériences, on remarque bien que cette durée n'a pas dépassé une demi-heure ou 1 li. ; mais, comme celles-ci ont été faites avec un sérum peu actif, on n'en saurait rien conclure de sûr. C'est un point à fixer par de nouvelles recherches.

Il reste, dès maintenant, que les cellules nerveuses, de même que les globules rouges du sang, ne résistent à une ichtyotoxine donnée que parce que l'antitoxine de celle-ci se trouve en leur

présence, soit qu'elle reste à leur contact, soit qu'elle y ait été préalablement fixé; de toute façon, il faut que la neutralisation (chimique) de la toxine par l'antitoxine puisse s'effectuer pour que les éléments anatomiques soient protégés contre l'action de cette toxine.

ACTION DES SÉRUMS TOXIQUES ET DE LEURS ANTITOXINES SUR LE SYSTÈME NERVEUX. CONTRIBUTION A L'ÉTUDE DU MÉCANISME DE LTMMUNITÉ*

Par E. GLEY

J'ai montré que divers sérum s toxiques (sérum d'anguille et sérum de torpille), injectés directement dans le liquide céphalorachidien, agissent de la même façon sur les animaux préalablement immunisés et sur les animaux témoins*. Il résulte de ces faits que les éléments anatomiques, au cours de l'immunisation, n'ont pas acquis l'immunité; ils ne résistent qu'autant que la toxine, avant de les atteindre, a été neutralisée par l'antitoxine présente dans le sang; si la toxine peut arriver jusqu'aux cellules nerveuses des animaux immunisés sans passer par le milieu sanguin, elle les intoxique aussi bien que celles des animaux neufs.

Voici, à l'appui de cette conception, une preuve nouvelle*. J'ai trouvé qu'on peut empêcher les accidents si violents' que détermine l'injection sous-arachnoïdienne du sérum d'anguille

• C. R. de VAcad. des Se, 8 nov. 1909, l. GXLIX, p. 812.

1. E. Glbt : C. R. de VAcad. des Se, 9 décembre 1907, t. CXLV, p. 1210.

2. Toutes les expériences résumées ci-après ont été faites sur le lapin. Voir, pour le détail des expériences, les comptes rendus du Congrès de l'Assoc. franç. pour l'avancement des se, session de Lille, 1909.

3. Voir E. Gley, loc. cit., et Congrès de l'Assoc. franç. pour l'avancement des se, Clermont-Ferrand, 1908, p. 608.

ou du sérum de torpille en injectant dans le liquide céphalorachidien, en même temps ou plus ou moins longtemps avant, une quantité déterminée de sérum antitoxique (sérum sanguin provenant d'animaux préalablement immunisés).

1. Les animaux qui ont reçu le mélange de toxine et d'antitoxine, à condition que celle-ci fût suffisamment active et en proportion double, n'ont point présenté d'accidents.

2. Il en est de même pour les animaux ayant reçu le sérum anti S, 10 et 15 m. avant le sérum toxique si la dose du premier est suffisante (triple ou quadruple de celle du second).

3. Les animaux qui reçoivent l'antitoxine 1 et 2 h. avant la toxine ont des accidents plus ou moins graves, mais survivent presque tous.

4. Enfin l'injection du sérum antitoxique a été faite sur trois animaux 5 h. avant l'injection de sérum d'anguille. Un seul de ces lapins a survécu après avoir présenté des accidents graves durant 1 h. 1 /2.

Bien entendu, pour chacune de ces séries d'expériences, il y eut des animaux témoins recevant les mêmes doses de sérum toxique seul ; tous moururent de la façon que j'ai décrite {loc. cit.).

Ainsi l'immunité des tissus, par rapport du moins aux toxines dont j'ai étudié l'action, dépend de la neutralisation, par les antitoxines correspondantes, des toxines amenées au contact de ces tissus. Dans ce fait se manifeste de nouveau la différence radicale qui existe entre l'immunité humorale et l'immunité cytologique, celle-ci tenant à la résistance propre, constitutionnelle en quelque sorte, des éléments anatomiques vis-à-vis d'une toxine donnée*.

t. V, 1898, p. 247-305, et C. R. de VAcad. des Se, t. CXXIX, 24 juillet 1899, p. 231.

DE L'ACTION DES SÉRUMS TOXIQUES SUR LE CŒUR ISOLÉ D'ANIMAUX IMMUNISÉS CONTRE CES SÉRUMS *

Par E. GLEY et V. PACHON

Les ichtyotoxines (sérum d'anguille, sérum de torpille), portées directement dans le sytème nerveux central d'animaux préalablement immunisés contre l'action de ces liquides, l'empoisonnent de la même manière que le système nerveux d'animaux témoins; c'est ce qu'ont montré les recherches de l'un de nous*.

Nous avons voulu voir si, dans quelque autre tissu, l'immunisation ne fait pas apparaître une résistance spécifique. Nos expériences ont été effectuées sur le cœur isolé du lapin, dont il est facile d'étudier le fonctionnement par la méthode de Langendorff, au moyen de l'appareil de V. Pachon*.

Les sérums employés étaient le sérum d'anguille ou celui de torpille.

Il nous a fallu d'abord déterminer l'action de ces sérums sur le cœur du lapin normal.

La détermination exacte de la toxicité est rendue assez délicate par le fait des variations d'activité des sérums suivant l'âge de ceux-ci et surtout par cet autre fait, à savoir que ces liquides

* C. R. de l'Acad. des Se, 8 novembre 1909, t. CXLVII, p. 813.

1. E. Gley : C. R. de VAcad. des Se, t. CXLV, 9 décembre 1907, p. 210, et Assoc. franç. pour l'avancement des se, Clermonl-Ferrand, 1908, p. 608.

2. Voir une description sommaire de cet appareil dans le Journ. de Phystol. et de Pathol. générale, 15 mars 1909, p. 253 (H. Busquet et V. Pachon).

n'agissent pas sur le cœur d'une façon élective; ils provoquent bien quelques troubles fonctionnels, mais ce ne sont point à coup SÛT des poisons cardiaques. Sous ces réserves, voici les principaux phénomènes que nous avons observés :

L'adjonction au liquide de Ringer-Loclte, qui circule dans les vaisseaux du cœur et entretient le fonctionnement de cet organe, d'une dose de sérum d'anguille variant de 1 à 4 p. 100, selon l'activité du sérum employé, amène plus ou moins rapidement des irrégularités du cœur : à un groupe de contractions devenues plus faibles, succède un groupe de contractions plus amples ; cette succession des mouvements cardiaques rappelle les groupes périodiques de Lucinni, que ce physiologiste a décrits d'après ses observations sur le cœur de grenouille, mais en diffère par leur périodicité, beaucoup plus irrégulière. Au début du passage de la solution toxique dans les coronaires, il se produit quelquefois une courte phase d'accélération des contractions cardiaques.

Le sérum de torpille, ajouté au liquide de Ringer-Locke à la dose de 10 ce. à 20 ce. p. 100, produit des troubles arythmiques plus ou moins graves; souvent le cœur se ralentit aussi, quelquefois ses contractions diminuent d'amplitude.

Le cœur des animaux immunisés réagit-il aux sérums toxiques de la même façon que le cœur des lapins normaux? Les difficultés que nous avons signalées plus haut relativement à l'étude de l'action de ces toxines sur le cœur isolé se retrouvent naturellement ici. Il s'en ajoute une autre qui vient de ce que le cœur des animaux immunisés présente presque toujours des altérations ; il est hypertrophiés très souvent chargé de graisse avec un péricarde qui contient du liquide. On peut penser que ce cœur doit réagir moins bien qu'un cœur normal aux influences toxiques.

En fait, nous avons vu que le sérum d'anguille n'a produit, dans deux cas, que des troubles des plus légers; dans un autre cas sont survenues, mais assez tardivement (10 m. après le début de l'intoxication), des irrégularités persistantes; enfin, dans un dernier cas,

ACTION PHYSIOLOGIQUE DES ICllTYOTOXINES

tout de suite après le passage de la solution toxique, il s'est produit des irrégularités, une accélération de plus en plus marquée et un affaiblissement progressif des contractions. D'autre part, le sérum de torpille, sur le cœur de deux animaux immunisés, n'a produit aucun trouble au contraire, sur le cœur d'un troisième lapin, il a déterminé une arythmie analogue à celle qu'on observe sur le cœur des lapins normaux.

Conclusions. — Le cœur de plusieurs de ces animaux immunisés a présenté à peu près les mômes troubles que celui des témoins. Il suit de là que cet organe isolé et fonctionnant en liquide Ringer-Locke, c'est-à-dire privé de l'antitoxine présente dans le sang circulant de l'animal intact, ne résiste guère mieux à l'action de la toxine que l'organe de l'animal non immunisé. La résistance aux toxines tiendrait donc à la présence élective, dans le sang, des antitoxines spécifiques correspondantes. Mais le cœur de plusieurs autres de nos lapins immunisés a paru posséder une certaine résistance à l'action de l'ichtyotoxine. Serait-ce là un fait d'accoutumance ou bien l'antitoxine, qu'on trouve dans le sang des immunisés et qui préserve les éléments anatomiques contre l'action de la toxine, se fixerait-elle en partie sur les éléments musculaires? Quoi qu'il en soit, cette résistance est un phénomène inconstant.

Ces expériences conduisent donc à des conclusions moins précises que celles faites par Gley dans les mêmes conditions sur le système nerveux des animaux immunisés. Ce qui peut tenir, en partie au moins, à ce que les sérums toxiques considérés, étant au premier chef des poisons du système nerveux central, tandis que, nous l'avons fait remarquer, ils agissent médiocrement sur le cœur, les réactions nerveuses sont plus nettes que les accidents cardiaques. Et ainsi l'étude du cœur isolé, qui paraissait a priori très favorable à la détermination de la nature du processus d'immunisation, ne s'est pas montrée dans ces recherches,

1. Il importe de remarquer, relativement à l'un de ces deux cas, que le sérum employé s'est également montré inactif ù la môme dose sur le cœur de deux animaux témoins. C'est donc une expérience dont il n'y a pas à tenir compte.

en ce qui concerne les sérums avec lesquels nous avons expérimenté la méthode de choix.

Appendice. — Dans trois expériences, nous avons fait fonctionner le cœur isolé, en ajoutant du sérum anti toxique (sérum de lapin immunisé) au sérum toxique introduit dans le liquide de circulation artificielle. Dans cette condition, nous avons vu le sérum d'anguille ou celui de torpille ne produire aucun effet sur le cœur.

RECHERCHES SUR L'ACTION ANTAGONISTE DES SÉRUMS TOXIQUES ET DE LEURS ANTITOXINES SUR LE SYSTÈME NERVEUX ET SUR LE CŒUR ISOLÉ. CONTRIBUTION A L'ÉTUDE DE L'IMMUNITÉ *

Par E. GLEY

Dans des recherches antérieures, j'ai montré que divers sérums toxiques (sérum d'anguille et sérum de torpille), si on les injecte directement dans le liquide céphalo-rachidien, par ponction de la membrane occipito-atloïdienne sur le lapin, agissent de la même façon sur les animaux préalablement immunisés et sur les animaux témoins'. J'avais conclu que la résistance aux toxines dont il s'agit est due à la neutralisation de celles-ci par les antitoxines correspondantes qui se trouvent dans le sang des animaux immunisés; les éléments anatomiques, au cours de l'immunisation, n'ont pas acquis une immunité propre; dès qu'ils ne sont plus protégés par l'antitoxine, s'ils sont atteints directement par la toxine, sans que cette dernière ait passé par le milieu sanguin où elle aurait été neutralisée par son antagoniste, — et c'est là un particulier intérêt de cette application de la méthode des injections sous-arachnoïdiennes que j'ai faite

* C. R. de r Association française pour l'avancement des sciences, Congrès de Lille, 38« session, p. 739-746, 4 août 1909.

1. E. Gley : C. R. de l'Acad. des Se, 9 décembre 1907, 1. CXLV, p. 1210; — Congrès de VAssoc. franc, pour l'avancement des sciences, Clerniont-Fcrrand, 1908, p. 608.

systématiquement à l'étude de la question du mécanisme de l'immunité, — ils ne manifestent aucune résistance spéciale. Preuve nouvelle en faveur de la différence radicale qui existe entre l'immunité humorale et l'immunité cytologique*.

1. — J'ai exposé l'année dernière au Congrès de l'Association, à Clermont-Ferrand, les résultats d'une série d'expériences qui confirment cette donnée générale. Ces expériences consistaient à injecter dans le liquide céphalo-rachidien, avant le sérum toxique, des quantités variables de sérum antitoxique ; ainsi traités, les animaux ont survécu à la condition que la dose d'antitoxine fût suffisante et qu'elle ne fût pas injectée trop longtemps avant l'injection de toxine. J'ai étendu mes recherches qui n'avaient été faites alors qu'avec le sérum de torpille; je les ai répétées avec le sérum d'anguille, en variant les doses et en prolongeant les intervalles de temps séparant les deux injections. Voici les résultats obtenus.

Les expériences suivantes ont été faites avec du sérum de lapin provenant de deux animaux immunisés pendant six mois et demi, ayant reçu pendant ce laps de temps 24 injections intraveineuses de sérum d'anguille et ayant résisté à plusieurs reprises à des doses rapidement mortelles pour des animaux témoins. D'autre part, il a été constaté que les hématies du sang de ces animaux avaient acquis une grande résistance à l'action hémolytique du sérum d'anguille.

A. — Un seul animal a été injecté avec un mélange de sérum antitoxique et de sérum toxique', le premier était en proportion double. Il n'a présenté aucun accident. — Contre-épreuve : trois jours après, il reçoit la même dose de sérum toxique seul et meurt en 53 m.

Deux lapins témoins, recevant la même dose de sérum d'anguille (0,03 ce. par kil.), succombent en 26 et 31 m.

B. — Un seul animal reçoit le sérum antitoxique 5 m. avant le

1. Voir à ce sujet L. Camus et E. Gley : Arch. inlern. de pharmacodvnamie 1898, t. V, p. 247-305; - C. R. deVAcad. des Se, 24 juillet 1899, t. CXXIX p 23l'

2. Dans mes expériences antérieures sur le sérum de torpille (Conorès de VAssoc. franc, 1908, p. 608), trois animaux avaient été injectés avec le mélange de ce sérum et du sérum anti et avaient résisté à l'injection

toxique, à une dose double de celle de ce dernier. Il n'a aucun accident. Mêmes témoins que pour l'animal A.

Contre-épreuve : quatre jours après, cet animal est injecté avec la même dose du même sérum toxique; il présente des accidents graves (impulsions motrices, myosis, salivation, dyspnée, etc.), durant au moins 2 h. Le lendemain, il succombe en 2. h. 3 m. à l'injection d'une dose moindre (0,02 ce. par kil.) d'un sérum fraîchement recueilli.

C. — Deux animaux ont reçu le sérum antitoxique, en proportion double', 15 m. avant le toxique. Ils ont succombé, l'un en 7 m., l'autre en 23 h.

Mêmes témoins que pour l'animal A; un autre témoin est mort en 12 m. (témoin pour l'animal ayant succombé en 7 m. à l'injection d'un sérum provenant d'une autre anguille que celle dont le sérum avait servi pour le lapin qui n'est mort qu'en 23 h.)

D. — Un animal a été injecté avec une dose double de sérum antitoxique, 30m. avant de recevoir le sérum toxique; il a survécu après

avoir présenté des accidents graves, qui ont duré au moins 2 h.

Contre-épreuve : 5 jours après l'injection de la même dose du même sérum toxique; mort en 40 m.

Mêmes témoins que pour l'animal A..

E. — Quatre lapins reçoivent le sérum antitoxique / h. avant le toxique, la dose injectée étant trois fois (pour deux de ces animaux, n"" 1 et 2), six fois {x\9 3) et dix fois (n° 4) plus forte que celle du toxique.

Le n" 1 est mort en quelques heures; le n^ 2 a survécu après avoir présenté des accidents graves pendant 1 h. 1/4; le n° 3 a survécu, n'ayant eu des accidents que pendant 20 à 30 m.; et enfin le n° 4 a survécu également, ayant présenté des accidents durant une demi-h.

La contre-épreuve, faite sur les trois survivants, a donné des résultats intéressants. Deux jours après l'expérience ci-dessus, le n° 2 reçoit la même dose du même sérum d'anguille : il a des accidents graves durant au moins 3 h. Cinq jours après, nouvelle injection, faite avec un nouveau sérum, mais avec une dose un peu moindre (0,02 c. c. par kil. au lieu de 0,03 ce.) : accidents graves durant plus de 24 h. Onze jours après, injection de 0,03 ce par kil. : l'animal meurt en 36 à 48 h. — Le n" 3, deux jours après la première expérience, reçoit la même dose du même sérum toxique : il survit encore après avoir présenté des accidents graves pendant 1 h. 1/2. Le lendemain, même injection du même sérum : mort en 5 m. — Le n» 4, enfin, six jours

1. Quantité évidemment insuffisante, d'après toutes les expériences qui suivent.

après la première expérience, reçoit la même dose du même sérum toxique : il meurt en 1 h. 56 m.

Quant aux animaux témoins, deux lapins, qui ont servi de sujets de comparaison avec le n° 1, sont morts en 24 et 31 m., ayant reçu naturellement la même dose de sérum toxique; un lapin, témoin pour les 2 et 3, est mort en 12 m., et deux témoins pour le n° 4 sont morts en 47 et 50 m.

F. Trois lapins ont reçu une dose de sérum antitoxique dix fois

plus forte que celle du sérum toxique 2 h. avant cette dernière. L'un, le n° 1, est mort en 36 h. environ; les deux autres ont survécu après avoir présenté des accidents graves, le n° 2 durant au moins 30 m., et le n° 3 durant 1 h.

Six jours après (contre-épreuve), le n» 2 reçoit la même dose du même sérum toxique; il meurt en 23 h. 46 m. — Le n" 3 reçoit, trois jours après la première expérience (ayant perdu dans ce laps de temps 344 gr.)', une nouvelle dose égale du même sérum d'anguille : il survit après des accidents graves. Cinq jours plus tard, soit huit jours après la première injection (ayant encore perdu 177 gr., ce qui fait pour ce lapin de 1.946 gr., une diminution totale de 521 gr. en une semaine), on lui injecte de nouveau la même dose : il meurt en quelques heures.

Un lapin témoin pour les n°^ 1 et 3 est mort en 50 m. ; deux témoins pour le n° 2 sont morts en 47 et 50 m.; un autre témoin pour le n° 3, pour la dernière expérience pratiquée sur cet animal (trois jours après la première), est mort en 41 m.

G. — Trois animaux ont reçu le sérum antitoxique 5 h. avant le toxique, une quantité dix fois plus grande. Deux ont succombé en 50 m. et en quelques heures; un seul a survécu, après avoir eu des accidents graves durant 1 h. 1/2.

Cinq jours plus tard (contre-épreuve), ce survivant reçoit la même dose du même sérum d'anguille : il meurt en deux jours et quelques heures (ayant perdu 234 gr. [poids primitif 2.025 gr.]), et avec une température au-dessous de 23°).

Trois témoins, pour les animaux de cette série, sont morts en 29 et 41 m. et en 36 h. environ.

Ainsi l'injection de sérum antitoxique dans le liquide céphalorachidien, même 1 h. et 2 h. avant rinjection de sérum toxique,

1. J'ai déjà signalé des pertes de poids aussi considérables sous l'influenro du eérum de torpille. A la suite des injections intra-veincuses non immédiale ment mortelles de ce sérum ou du sérum d'anguille, on peut observer au^«i des diminutions de poids, mais moins marquées qu'après les iniections ^on« arachnoïdiennes. ■' ouu-.-

a préservé presque tous les animaux; sur un total de 7, il n'y eut, en effet, que 2 morts, et du reste plus tardives que celles des témoins. Cette injection préventive, étant faite cinq heures avant celle du toxique, peut encore exercer quelquefois ses effets protecteurs. Ces expériences, rapprochées de celles réalisées avec le sérum antitoxique du sérum de torpille, dontj'ai fait connaître Tannée dernière les résultats, montrent bien que l'immunité des tissus, relativement au moins aux toxines employées, dépend de la neutralisation, par les antitoxines correspondantes, des toxines portées au contact de ces tissus.

II. — Pareille conclusion ressort aussi, quoique moins nettement, de deux autres séries d'expériences, que j'ai faites en collaboration avec V. Pachon sur l'action des mêmes sérums d'anguille et de torpille sur le cœur isolé des animaux immunisés contre ces sérums*.

Ces expériences ont été faites sur le lapin, dont le cœur isolé s'étudie aisément par la méthode de Langendorff*. Nous avons dû d'abord déterminer l'action des sérums dont il s'agit sur le cœur du lapin normal.

La détermination exacte de cette action est rendue assez délicate par le fait des variations d'activité des sérums suivant l'âge de ceux-ci et surtout par cet autre fait, à savoir que ces liquides n'agissent pas sur le cœur d'une façon élective; ils provoquent bien quelques troubles fonctionnels, mais on ne peut certes point les ranger parmi les « poisons cardiaques ». Ces réserves faites, voici en résumé ce que nous avons observé.

1. — L'addition au liquide deRinger-Locke, qui circule dans les vaisseaux du cœur et entretient le fonctionnement de cet organe, d'une doso de sérum d'anguille variant de 1 à 4 p. %<), selon l'activité du sérum employé, amène plus ou moins rapidement des irrégularités du cœur : à un groupe de contractions devenues plus faibles, succède un groupe de contractions plus amples; cette succession de mouvements cardia-

1. E. Glet et V. Pachon, C. R. de l'Acad. des Se, 1909, t. CXLVII, p. 813.

2. L'appareil utilisé dans ces expériences est un appareil spécial, imaginé par V Pachon (voir C. jR. de la Soc. de BioL, 27 novembre 1909, p. 599).

ques rappelle les groupes de Luciani, décrits sur le cœur de la grenouille par ce physiologiste, mais en diffère par leur périodicité beaucoup plus irrégulière. Au début du passage de la solution toxique dans les coronaires, il se produit quelquefois une courte phase d'accélération des contractions cardiaques. — Le sérum de torpille, ajouté au liquide de Ringer-Locke à la dose de 10 à 20 ce. p. °/oo, produit des troubles arythmiques plus ou moins graves; souvent le cœur se ralentit aussi, quelquefois ses contractions diminuent d'amplitude.

1 ôis. — Le cœur des animaux immunisés réagit-il aux sérums toxiques de la même façon que le cœur des lapins normaux? Les difficultés que nous avons signalées plus haut relativement à l'étude de l'action de ces toxines sur le cœur isolé se retrouvent naturellement ici. Il s'en ajoute une autre, qui vient de ce que le cœur des animaux immunisés présente presque toujours des altérations: il est hypertrophié', très souvent chargé de graisse, avec un péricarde qui contient du liquide. On peut penser que ce cœur doit réagir moins qu'un cœur normal aux influences toxiques.

En fait, nous avons vu que le sérum d'anguille n'a produit, dans deux expériences, que des troubles des plus légers; dans un autre cas sont survenues, mais assez tardivement (10 m. après le début de l'intoxication), des irrégularités persistantes; enfin, dans un dernier cas, tout de suite après le passage de la solution toxique, il s'est produit des irrégularités, une accélération de plus en plus marquée et un affaiblissement progressif des contractions, — D'autre part, le sérum de torpille, sur le cœur de deux animaux immunisés, n'a produit aucun trouble"; au contraire, sur le cœur d'un troisième lapin, il a déterminé une arythmie, analogue à celle que l'on observe sur le cœur des lapins normaux.

Ainsi le cœur de plusieurs de ces animaux immunisés a présenté à peu près les mêmes troubles que celui des témoins. Il s'ensuit que cet organe isolé et fonctionnant en liquide de

1. Voir E. Glby : Hypertrophie expérimentale du cœur. C. R. de la Soc de Cio^., 27 juillet 1907, p. 208.

2. Il importe de remarquer, relativement à l'un de ces deux cas, que le sérum employé s'est également montré inaclif à la môme dose sur le cœur de deux animaux témoins. C'est donc une expérience dont il n'y a pas à tenir compte.

Ringer-Locke, c'est-à-dire privé de l'antitoxine présente dans le sang circulant de l'animal intact, ne résiste guère mieux à l'action de la toxine que l'organe de l'animal immunisé. Ce nouvel ordre de faits montre donc que la résistance aux toxines paraît bien tenir à la présence élective dans le sang des antitoxines spécifiques correspondantes. Mais le cœur de plusieurs autres de ces lapins immunisés a manifesté une certaine résistance h l'action de l'antitoxine. Serait-ce là un fait d'accoutumance ou bien l'antitoxine, que l'on trouve dans le sang des immunisés et qui préserve les éléments anatomiques contre l'action de la toxine, se fixerait-elle en partie sur les éléments musculaires? Quoi qu'il en soit, cette résistance est un phénomène inconstant.

Ces expériences conduisent par suite à des conclusions moins précises peut-être que celles que j'ai faites dans les mêmes conditions sur le système nerveux des animaux immunisés. Ce qui peut tenir, en partie au moins, à ce que les sérums toxiques considérés, étant au premier chef des poisons du système nerveux central, tandis qu'ils agissent médiocrement sur le cœur, les réactions nerveuses sont plus nettes que les accidents cardiaques. Et ainsi, l'étude du cœur isolé, qui paraissait a priori très favorable à la détermination de la nature du processus d'immunisation, ne s'est pas montrée dans ces recherches, en ce qui concerne les sérums avec lesquels nous avons expérimenté, la méthode de choix.

2. — Dans une autre série d'expériences, nous avons fait fonctionner le cœur isolé en ajoutant du sérum antitoxique (sérum de lapin immunisé) au sérum toxique introduit dans le hquide de circulation artificielle. Dans cette condition, nous avons vu le sérum d'anguille et celui de torpille ne produire aucun effet sur le cœur. Malheureusement, nous n'avons pu faire que trois expériences de ce genre; pour les multiplier comme il conviendrait, les quantités de sérum nécessaires pour déterminer des réactions cardiaques suffisamment nettes étant assez grandes, il faudrait avoir à sa disposition des quantités de sérum antitoxique plus considérables que celles que nous avons eues.

— De beaucoup des expériences relatées plus haut (I, en

et de D à G) ressort une donnée sur laquelle il n'est pas sans intérêt, je crois, d'attirer l'attention. Il est facile de constater qu'à la suite de l'injection de sérum antitoxique dans le liquide céphalo-rachidien, les animaux résistent souvent à une deuxième injection de sérum toxique (expérience que j'ai qualifiée de contreépreuve), comme le montre le tableau suivant; et ceux d'ailleurs qui y succombent meurent beaucoup moins vite que les animaux témoins (sauf une seule exception, celle de la série D), comme on peut le voir aussi sur le tableau. Exceptionnellement, j'ai vu un animal résister à une troisième injection (v. le tableau).

LAPINS 1

des séries suivantes 1

INTERVALLE

de temps

entre l'injection de sérum antitoxique

et celle de sérum

toxique

2" INJEC- TION de sérum toxique faite après

SUITES

de la 2" injection

3» INJEC- TION de sérum toxique faite après

SUITES

de la 3' injection

4« INJEC- TION

de sérum toxique faite après

SUITES

de la 4« injection

5 minutes.

4 jours.

Survie.

5 jours*

Mort

en 2 h. 3'

Mort en 40'

1 heure.

Survie.

11 jours

mort en

Survie.

Mort en 5'

Mort

en 1 h. 56'

2 heures.

Mort

en 23 h. 46'

Survie.

Mort en

5 heures.

Mort en 2 j.

qq. heures.

et quelq. h.

1. Dans cette colonne, comme dans la troisième et la septième, les jours sont comptés à anîitoxiqne"'*'^ première injection de sérum toxique à la suite de Tinjection de sérum

Ces faits s'expliqueraient-ils par un commencement d'immunisation locale du système nerveux chez les animaux ayant pu résister à une première injection intra-rachidienne de sérum toxique, grâce à l'injection antécédente de sérum antitoxique? Je rappellerai d'abord à ce sujet que les essais d'immunisation que j'ai faits par cette voie de la ponction de la membrane occipito-atloïdienne ont été infructueux». D'ailleurs, comment