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« Il y a lieu de noter le saut brusque que fait la quantité d'indol mise en liberté entre la deuxième et la troisième heure ; il nous explique pourquoi les auteurs, ainsi que nous l'avons dit, n'ont, en général, signalé l'apparition de l’indol qu'aux environs de la troisième heure,

« Nous pensons qu’en prenant toutes les précautions indiquées dans nos diverses notes sur ce sujet (répéter les extractions éthérées, laver les extraits à la soude et les concentrer, si besoin est, par une distillation très doucement conduite de l’éther, afin de ne pas entrainer d'indol dans le distillat) (les extraits éthérés ne doivent pas êlre lavés à la soude, laquelle enlèverait de l’indol, p. 43), on arrivera à saisir tres rapidement au bout d'une heure et peut-être moins la mise en liberté d'indol chez les microbes qui sont des producteurs habituels de ce composé. »

=—)f5 — ne doit pas opérer directement avec l'eau peptonée en prétextant que les opérations signalées pour la recherche de l’indol sont beaucoup trop longues; d’ailleurs, il faut certes plus de temps pour décrire la méthode qu'il n’en faut pour la mettre en pratique; au bout de quelques minutes seulement le résultat peut être connu.

S1 cette recommandation n’est pas observée, on s’expose à des erreurs grossières. En effet, il résulte des travaux de C. Reichl, de O. Neubauer, de Cole, de Rohde (15) et de Steensma (53) que les aldéhydes donnent une réaction colorée avec les albuminoïdes et que cette réaction est sous la dépendance du groupement indolique de la molécule, c’est-à-dire du tryptophane. Avec la p.-diméthylaminobenzaldéhyde, la solution de peptone donne une coloration rouge puis violette passant finalement au bleu. Nous l’avons obtenue avec presque toutes les peptones que nous avons essayées. Elle est plus ou moins nette et se produit plus ou moins vite, mais elle fait rarement défaut. Nous ne l’avons pas obtenue avec la peptone P.

Buard (25), dans ses recherches, fait agir directement sur la peptone la solution alcoolique de vanilline ; or, celle-ci donne une réaction positive avec les peptones.

Escallon et Sicre (14) opèrent avec la solution de furfurol directement sur la culture. Le furfurol donne également une réaction positive avec une solution de

peptone.

53. SrgexsmA, Ueber Farbenreaktionen der Eiweisskôrper des Indols und des Scatols mit aromatischen Aldehyde und Nitriten

(Zeit. f. physiol. Ch., 47, 25).

non EE Evidemment, on ne peut mettre en doute les résultats annoncés par les auteurs précités et nous admettons bien volontiers qu’il est possible de reconnaître s'il y a production d'indol en opérant directement sur la culture, surtout quand on compare avec un tube stérile traité de la même façon, mais, néanmoins, dans certains cas, on pourrait être exposé à commettre une erreur. Du reste, le fait de recourir à un extrait éthéré présente un autre avantage qui devrait le faire adopter. L’acide nécessaire à la production de la réaction peut avoir une influence sur les substances contenues dans le bouillon et modifier le résultat. C’est ce qui arrive notamment avec les cultures de 6. pyocyanique. Sous l'influence de l'acide, la pyocyanine bleue devient rouge et il est alors difficile, pour ne pas dire impossible, de procéder à la recherche de l'indol. Si l’on fait un extrait éthéré, la pyocyanine n'étant pas entrainée par l’éther, la caractérisation de l’indol possible n'est entachée d'aucune fausse interprétation.

Inconvénients présentés par la distillation du milieu de culture. — Certains auteurs, se basant sur la propriété que possède l’indol de se laisser entraîner facilement par la vapeur d’eau, recommandent de distller les cultures pour obtenir une solution pure et plus concentrée de ce corps sur laquelle on effectuera la réaction. Ce procédé a été indiqué par Steensma (54), Feltz (38) et d’autres auteurs, notam-

54. STEENSMA, Ueber den Nachweis von Indol und die Bildung von Indol vortäuschenden Stoffen in Backterienkulturen (Cenlralblatt f, Bakt., Origin., 41, 295-298, mai 1906).

ment quand la présence de l’indol est douteuse. Il ne doit pas être employé. En effet, M. le professeur Porcher a démontré, comme nous l'avons déjà signalé, qu'avant d'arriver au terme indol, le noyau tryptophanique donnait naissance, lors de sa dislocation progressive, à des intermédiaires tels que l’acide indol-propionique, indol-acétique et surtout indol-carbonique. Or, ce dernier acide, en particulier, se dédouble en acide carbonique et en indol sous l’action de la chaleur. M. Porcher a démontré (55) que le s{aphylocoque doré, la bactéridie charbonneuse, le B. enteridis de Gærtner, certaines variétés de Fœcalis donnaient de l'indol quand on distillait leurs cultures alors que ces microbes n’en fabriquent pas, ainsi que le prouve la recherche négative de l'indol libre sur des cultures non chauffées. |

La bactérie du choléra des poules, toujours d'après le même auteur, donne des composés indologènes bien avant le quinzième jour, époque où apparaît l’indol. Les cultures de B. coli débarrassées de leur indol libre en donnent encore quand on les distille.

Le procédé que nous avons indiqué nous mettant à l'abri des erreurs dont la cause vient d’être donnée est donc de beaucoup supérieur à celui de Steensma.

Dosage de l'indgl contenu dans les bouillons de culture. — Si l’on a soin de suivre les indications que nous donnons dans la première partie,

55. Porcuer, De la présence des corps indologènes dans les bouillons de culture (C. R., 17 mai 1909).

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