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b) Réaction de Kolls et Youmans. — Dérivée de celle d’Abelin et permettant de déceler l’arsénobenzol à une dilution de 1/2.000.000°. Mode opératoire pour le sang: 1 n° de sang oxalaté est versé dans un tube gradué de 10 n°; on ajoute 3 7m d’eau distillée pour le laquer puis o n° 5 de HCI N/10 et de solution fraîche de nitrite de soude à 1 % et on mélange bien en maintenant le tube dans la glace pour éviter toute élévation de température. Puis on désalbumine le mélange en ajoutant 1 n° d’ac. trichloracétique à 20 % et 1 n° d’alcool méthylique, qui empêche l'entrainement de l’arsénobenzol par le précipité. On complète le volume à 10 n°. On filtre après quelques minutes ; 5 %n° du filtrat, qui ne doit pas renfermer de traces d’hémoglobine, sont additionnés de 2 %n° de soude N/4 et de © Yn° 5 d’une solution d’orcine à 0,05 % dans l’ordre indiqué. S’il y a de l’arsénobenzol dans le sang, il sc produit une coloration rouge clair qu'on compare avec des étalons préparés avec du sang normal.
— Mode opératoire pour les tissus: on en broie un poids déterminé avec un volume connu de sable de quartz et on traite le produit de la même façon que le sang.
— Pour le liquide céphalo-rachidien, la désalbumination est inutile, s’il ne contient pas de globules rouges ; il faut employer une grande quantité de liquide en raison des faibles quantités d’arsénobenzol qu'on y décèle.
— Pour l'urine, on en utilisera, au contraire, de faibles quantités, à cause de sa couleur jaune, qui trouble la compa-
raison colorimétrique.
c) Réaction d'Ehrlich et Bertheim (d’après Stühmer). — On dissout une petite quantité de paradiméthylamidobenzal-
déhyde dans quelques gouttes d'HCI pur ; on ajoute une solu-
tion aqueuse saturée de sublimé en grand excès et on redissout aussitôt le précipité floconneux qui se produit par agitation énergique avec quelques gouttes d'HCI pur.
Les combinaisons du salvarsan donnent, avec cette solution, une précipité jaune ou jaune-orangé qui est insoluble dans une solution saturée de sublimé en excès. La solution doit être fraîchement préparée ; en outre les réactions sont plus intenses lorsqu'on chauffe légèrement la solution de sublimé avant de l'ajouter à la solution chlorhydrique de la paradiméthylamido benzaldéhyde et qu’on utilise le réactif encore chaud.
Mode opératoire pour les tissus: les organes sont débités au microtome, et les coupes sont aussitôt plongées dans la solution; la coloration est appréciée avec une netteté suffisante à l’œil nu, au besoin à la Ioupe; l'estimation de l’intensité de la coloration demande quelque exercice.
Mode opératoire pour le sérum: le sérum est additionné de réactif dans la proportion de 1/2 Yn' de sérum pour 3 Yn de réactif et agité énergiquement ; il se produit un précipité qui ne gêne en aucune façon l'évaluation de la réaction colorée. Mais les sérums doivent être exempts d’hémoglobine pour éviter toute erreur dans l’appréciation de la coloration jaune.
La réaction est inutilisable pour les urines et les selles.
— Ces procédés présentent un grand intérêt pour l'étude du métabolisme de la fraction organique de la molécule des arsénobenzènes ; mais ils sont inutilisables pour les selles (tout au moins celui d’Abelin et celui d'Ehrlich et Bertheim), ce qui ne permet pas d'établir, comme nous avions l'intention de le faire, des bilans d'élimination. D’autre part, si l'organisme peut, dissocier partiellement l’As de la molécule cyclique auquel il est fixé, ces réactions ne peuvent traduire fidèlement
le métabolisme de l’As ainsi dissocié. Enfin, l'absence de réac-
tion analogue permettant de déceler la molécule cacodylique s'oppose à toute comparaison entre le métabolisme des arsénobenzènes et des cacodylates au moyen de ces procédés.