II. — Formation da premier globale polaire aux dépens de la

figure YpsiUforme.

Je décrirai successivement les changements de position de la figure dans le vitellus et les modifications qui se produisent dans sa constitution.

A, — Changements de position.

Pendant la première période de la maturation de Tœuf la vésicule germinative est logée au milieu du vitellus qui Tentoure de toutes parts. Il en est de même, au début, de la figure ypsUiforme qui, nous l'avons vu, se développe en grande partie aux dépens de cette vésicule.

Mais elle n'occupe jamais le centre du vitellus; elle est toqjours excentriquement placée et s'approche progressivement de la périphérie. Les figures 5, 15, 16, 22 de la planche XV démontrent qu'il en est bien ainsi.

Pendant la première période de sa maturation l'œuf présente un axe et deux pôles et toute sa structure témoigne de cette polaiîté. Le micropyle et le bouchon d'imprégnation répondent à l'une des extrémités de l'axe ovulaire, que nous avons appelée, pour ce motif, le pôle d'imprégnation. De plus, à certains stades, l'œuf présente une symétrie bilatérale manifeste. Il suffit de considérer avec attention la figure 4 de la planche X pour voir qu'il n'existe qu'un seul plan capable de diviser l'œuf en deux moitiés sjrmétriques, c'est un plan passant d'une part par l'axe organique de l'œuf, d'auti-e part

par le grand axe de l'ovoïde irrégulier qui constitue la tête de la massue ovulaire. Malheureusement, quand Tœuf a atteint sa maturité, sa forme est devenue celle d'un ovoïde : la papille répondant à la poignée de la massue et qui portait à son extrémité le bouchon d'imprégnation, cette papille a disparu et il faut y regarder de près pour reconnaître encore le pôle d'imprégnation. Au moment où un zoosperme vient se fixer à l'éminence de fixation, le pôle d'imprégnation, et par conséquent l'axe de l'œuf, restent facilement reconnaissables ; il en est de même tant que le zoospeime reste uni à l'enveloppe ovulaire, fut-ce par l'extrémité de sa papille caudale. Mais il arrive un moment où le spermatozoïde devient libre dans le vitellus. Rien ne peut plus faire reconnaître dès lors l'emplacement du micropyle et il est impossible de se rendre compte du trajet que suit le zoosperme avant d'atteindre le centre du vitellus.

Je me suis beaucoup préoccupé de la question de savoir si la figure ypsiliforme se dirige vei*s un point déterminé de la suiface du vitellus et, dans le cas où il en serait ainsi, quelle est la position de ce point relativement à l'axe primitif de l'œuf. Il faudrait pouvoir, pour résoudre ces problèmes, rapporter la position de la vésicule germinative, en voie de transformation, à un point fixe dont la position serait connue relativement à la direction de l'axe ovulaire. Tant que le zoospeime reste fixé à la place qu'occupait le micropyle ce point fixe existe; mais il cesse d'être reconnaissable dès le moment où le zoosperme se détache de l'enveloppe de l'œuf. Or, le plus souvent il se libère bien avant que la figure ypsiliforme ait gagné la surface de l'œuf.

La position relative des deux éléments, à un même stade de développement, parait éminemment variable. Tantôt ils semblent situés tout près l'un de l'autre, tantôt on les trouve aux pôles opposés de l'œuf. J'ai représenté figure 13 (pi. XIV) un œuf où le speimatozoïde, encore fixé à la membrane, occupait l'un des pôles, et où la figure ypsiliforme, déjà superficielle, se trouvait au pôle opposé. Il en était de même dans l'œuf

représenté figure 9, en ce sens que là ligne reliant la figure ypsiliforme au point de la surface le plus voisin aboutissait à peu près au pôle opposé à celui qu'occupe le zoosperme encore fixé. Mais il n'en est pas toujours ainsi, tant s'en faut, et je ne puis rien affirmer, quant à la position du point d'afifleui*fement de la vésicule germinative, par rapport au pôle d'imprégnation et par conséquent à l'axe organique de l'œuf primitif.

Ce qui ressort clairement de l'examen d'un grand nombre d'œu& et particulièrement de celui que j'ai représenté figure 13, c'est que, dans certains œufs tout au moins, la vésicule ne tend pas à se rapprocher du pôle d'imprégnation, mais que, bien au contraire, elle gagne plutôt le pôle opposé. Est-ce toujours ainsi? H est permis d'en douter. Je ferai observer que dans les œufs qui ont conservé leur forme ovoïde dans les préparations, presque toujours la figure ypsiliforme et les globules polaires qui en dérivent se trouvent au voisinage de l'une des extrémités du grand axe de l'ovoïde. (PI. XV, fig. 8, 9, 16, 17, 18, 20, 21, 22. PL XVI, fig. 2 et 4. PI. XVm, fig. 4. PI. XIX, fig. 7, 8, 10.) Quand l'œuf est mur U affecte aussi d'ordinaire une forme ovoïde et le micropyle répond approximativement à l'une des extrémiités de l'axe de figure de l'œuf. En se fondant sur des images comme celle que j'ai représentée planche XTV, figure 13, et où le zoosperme était certainement fixé encore par l'extrémité de sa queue, on peut donc supposer que le point d'aflleurement de la figure ypsiliforme répond à ce que j'ai appelé le pôle neutre de l'œuf. Mais ce fait est-il constant? c'est là encore, à l'heure qu'il est, une hypothèse.

Si j'ai insisté sur ce point, c'est que la question me parait avoir une réelle importance. La présence de la figure ypsiliforme à la surface de l'œuf, au moment où le zoosperme a gagné le centre du vitellus, montre qu'après comme avant la copulation l'œuf présente une polarité manifeste et le caractère de symétrie de la figure ypsiliforme semble indiquer que l'œuf lui-même est à symétiie bilatérale. Le plan de symétrie serait le plan équatorial

KDOrARI) \m DC."<E1I£N.

de la figiU'e ypsiliforme. Il importe de savoir si ue plan répond au plan de symétrie de l'œiif non imprégné, si l'axe organique de l'œuf pourvu d'un zoosperme est le même que l'ase de la massue ovulaire en voie de maturation, si le point occupé par la figure ypsiliforme et plus tai'd paj- le globule polaire correspond au pôle d'imprégnation, au pôle neutre ou à tout autre point de l'œuf non imprégné, si en plans de symétiie de l'œuf répondent au plan médian du nématode auquel l'œuf donnera naissance. D semble résulter des belles recherches de Auerbach que l'extrémité rétrécie de l'œuf, celle où se forment les globules polaires, celle où l'on j observe une plus grande accumulation de protoplasme hyalin, devient l'extrémité antérieure de l'embryon, tant chez Asmris nîgrovenosa que chez Strongyliis auriadaris. Si, comme quelques indicé pourraient le faire croire, le pôle d'imprégnation répond à l'autre extrémité de l'œuf, l'extrémité antérieure aussi bien que l'extrémité postérieure de l'embryon seraient préformées dans l'œuf même avant l'imprégnation. 11 deviendrait probable dés lors qu'il en est de même poui' les faces ventrale et dorsale, droite et gauche de l'animal futur. Mais tout cela est encore hypothétique à l'heui-e qu'il est.

La figui-e ypsiliforme vient se metp'e en rapport avec la i sui'face du vitellus par les extrémités des deux branches | divergentes de TY. Comme ces extrémités répondent aux deux . ' amas centraux des asters primitifs, ou, si l'on veut, aux extrémités polaires du fuseau de dii-ection, il s'en suit que la figure ypsiliforme se compoi-te ici tout autrement qu'on ne l'a décrit chez la plupai't des animaux où la formation des globules , polaires a été étudiée. (Voir fig. 5, 7, 8, 15, 16, 22 et 23 de i la pi, XV.) Bientôt après que les extrémités des branches J divergentes de l'Y sont arrivées à la surface, l'angle que ces j branches forment entre elles devient de plus en plus obtus;' elles finissent par se placer dans une même direction, voire à mémejl s'incurver légèrement en sens inverse; l'Y devient uaj T dont la branche horizontale se place parallèlement à, la J i du vitellus, immédiatement en dessous de la conchq"

'ié.Li-:.*.*^

périvitelline. La portion principale de la figure ypsiliforme est pour ainsi dire éliminée (pi. XV, fig. 16 et 22). L'obser* vation de Bûtschli, qui a décrit et figuré chez le Oiundlanus degans des figures qui se rapportent fort bien à celles que nous faisons connaître, se trouve donc pleinement confirmée chez TAscaride du cheval. Le fuseau éliminé de Bûtschli (pi. m, fig. 11 et 12 de son mémoii^e) n'est autre chose que la portion principale, devenue superficielle de la figure ypsiliforme. Il est à noter cependant que Bûtschli représente dans cette position le second fuseau de direction ; car il figure & une des extrémités de celui-ci une petite vésicule qui ne peut être que le premier globule polaire.

D'habitude, les deux pôles de la figure n'atteignent pas en même temps la surface; l'un y arrive un peu plus tôt que l'autre : dans les figures 17, 19 et 20 de la pi. XV, tandis que l'un des amas polaires se continuait manifestement avec la surface du vitellus, l'autre était encore à quelque distance de cette surface. Il était facile de s'assurer, en changeant progressivement le foyer, que l'autre pôle de la figure se trouvait entouré de toutes parts par la substance vitelline. Au contraire, dans les figures 18, 21 et 23, non-seulement les amas polaires, mais le fuseau tout entier étaient superficiels. Les fuseaux^', v.a.(. ne se trouvant pas dans la coupe optique de l'œuf, la ligne réunissant les pôles ne se confondant pas avec cette coupe optique, Us paraissent plongés dans le vitellus. Mais cela dépend uniquement de l'orientation de Tœuf relativement à

l'observateur.

' Comment la figure ypsiliforme est-elle amenée & la surface de l'œuf? Tant que la figure est plongée dans le vitellus on voit dans la plupart des œufTdes filaments protoplasmiques se porter de divers points de la figure, plus particulièrement des amas polaires, vers 1a surface de l'œuf. Ces filaments n'ont ai^cun caractère spécial, si ce n'est leur direction ; leur constitution paraît être la même que celle des autres filaments réticulés du vitellus. Voir les figui*es 1, 3, 4, 6, et 7 de la planche XV. Que tous ces filaments sont doués de contractilité, cela

résulte clairement de ce fait que, dans tous les points où de semblables filaments ou faisseaux de filaments s'insèrent à un zoosperme, le corps protoplasmique de ce dernier se soulève en une éminence conique ou arrondie, tandis que, entre ces points d'insertion, l'on observe au contraire des dépressions, (fig. 3 de la pi. XV et fig. 17 de la pi. XIV). Comme ce sont les amas polaires qui sont attirés les premiers vers la surface, c'est d'habitude de ces amas que partent le plus gi*and nombre de filaments. Us forment souvmt des sortes de pncèaux ou d'éventails. Souvent la partie de la surface du vitellus dans les limites de laquelle s'insèrent ces ilaments est ci^*conscrite par un contour circulaire bien marqué, et au centre de ce contour se voit un petit corpuscule réfringent, à prolongements radiés, simulant une sorte de nra^ourvue d'un petit nombre de rayons, (fig. 8, 9 et 18, pi. XV). U semble que c'est à ces petites étoiles qu'aboutissent les amas polaires (fig. 18). La présence de ces petites étoiles est loin d'être constante. On en observe aussi quelquefois dans l'intérieur du vitellus, au point de convergence de plusieurs filaments réticulés, ou bien aussi en d'autres points de la surface et notamment au point où l'hyalosome de la figure ypsiliforme semble devoir àfeoirtu- (fig. 8 de la pi. XV).

B. — Changements dans la constitution de u figure

YPSILIFORME.

Le contour des amas polaires, d'abord très irrégulier et vaguement indiqué, se régularise et se marque de plus en plus nettement. Ces amas se transfoiinent en un corps hémisphérique bien circonscrit, qui s'applatit de plus en plus et finit par devenir discoïde (pi. XVI, fig. 8, 9, 10, 11, 12 puis fig. 13 et 7 de la même planche, et la série des fig. 15 à 23 de la planche XV).

La subsUnce constitutive des amas, formée d'abord de granules assez volumineux, devient de plus en plus homogène et doime lieu à la formation d'un disque brillant et fort réfringent.

Les fibrilles axiales et périphériques de la figure ypsiliforme peuvent s'unir transversalement les unes aux autres et, en se soudant entre elles, donner lieu à la foimation de cordons plus ou moins épais d'une substance très réfringente et d'apparence homogène. Ce sont surtout les fibrilles de la lame équatoriale qui manifestent une tendance marquée à la formation de semblables cordons, dans lesquels on ne distingue plus même aucune trace de striation. (Voir pi. XVI, fig. 9, 11 et 13 et aussi pi. XV, fig. 7, 15, 19 et 21.) Mais les faisseaux de fibrilles qui constituent les branches divergentes de l'Y tendent à devenir aussi de plus en plus homogènes et de plus en plus réfringents. Dans beaucoup de cas, surtout dans les préparations d'œufs traités par l'alcool, il devient fort difficile de distinguer aucune striation : (fig. 21 de la pi XV.) On observe sous ce rapport des différences d'un œuf à l'autre et, dans les préparations d'œufs traités par l'acide nitrique la composition fibrillaire persiste plus longtemps. Mais cependant on remarque d'une manière constante que la netteté des contours de la figure ypsiliforme, résultant de ce que toute la figure devient plus sombre et plus homogène, augmente avec l'âge. En même temps toute la figure se rapetisse. • \.vx,h>» va*v

La lame équatoriale présente au début son plus grand développement vers la profondeur, de façon à constituer la branche verticale de l'Y (fig. 3, 4, 5, 7 etc. de la pi. XV). Cette branche on peut souvent la poursuivre sur une gi'ande longueur. Quand le zoosperme est arrivé au centre ou dans le voisinage du centre de l'œuf^ l'on peut voii* souvent les filaments de la branche verticale de l'Y s'insérer sur le spermatozoïde. Les filaments périphériques de la figure, en partant des amas polaires droit et gauche^ convergent vers un point ou plutôt vers un corps granuleux, vaguement délimité, que j'ai appelé le corps pédieux. Au delà du corps pédieux les fibrilles divergent de nouveau, de façon à donner lieu à un figure conique dont les fibrilles représenteraient autant de génératrices (fig. 5, 6 et 7 de la pi. XV). La cavité du

zaU EDOUARD VAN BEREDEN.

côiie parait uccupée, dans beaucoup de cas, par une partie j ilitférentiée du viteilus, de forme sphéroïdale et de volome 1 variable, que j'appelle le corps intermédiaire (iig. 9 et 16^' lie la planche XV). Des filaments périphériijues partant des I amas polaii'es se rendent directement, les uns au corps- 1 pédieuï, les autres au corps intermédiaire, qui lui même parait I se rattacher au spermatozoïde par des filaments convergente' \ (fig. 9, 18 et 22). A un certain stade les fibrilles périphériquei les pins externes, celles qui marquent la limite externe dS'l la niasse sphéroïdale sont extrêmement nettes (fig. 6, 7 et fi Pins tard ces fibrilles ne sont plus guère visibles : distingue plus de la figure ypsiliforme que les trois brancha principales : les branches divergentes et la lame éqnatorialB.II Le corps intermédiah-e aussi bien que le corps pédieoXV avec les fibrilles qui y aboutissent et qui en partent se ratt*-n ehent à h branche verticale de la figure ypsiliforme, quoiqu'ils ne soient très probablement, par leur origme, que des portions différentiéea du corps protoplasmiqne de l'œuf. Tous ces éléments se ti-ouvent dans la prolongation de la poignée du bilboquet et se rattachent les uns aux autres. Dans la plupart des œufs, peut être dans tous, ils constituent ensemble une chaine continue, qui rattache le zoosperme devenu central^ aux restes tiansformés de la vésicule germinative deveni superficielle (fig. 16 et 18).

A une certaine période du développement le viteilus est U à Hait clair; on n'y distingue plus rien autre chose qu'a beau reticulum protoplasmique, totalement dépoui'vn de toatfl granulation autre que les fines ponctuations qui entrent à la composition du protoplasme lui même (pi, XV. flg. 1).

Mais bientôt des globules apparaissent tout autour zoosperme devenu central (fig. 5) et ce dépôt granuleiu s'étend progressivement et rapidement vers la périphérien concentriquement au spermatozoïde. Le réseau protoplasmîqiu qui s'étendait dans toute l'étendue du viteilus ne s'obsen bientôt plus qu'à la périphérie (fig. 7 et 23). La couche cortiJ

RECnERCHES SUR LA FÉCONDATION. 221

cale réticalée devient de moins en moins épaisse et, an moment de la formation du premier globale polaire, tout le corps de Tœuf est devenu granuleux (pi. XVI, fig. 3, 5 et 6.) Pour suivre ces changements progressifs dans la constitution du vitellus il faut avoir recours à ime série de préparations fûtes aux dépens d'un seul et même individu, par une seule et même méthode. C'est en se servant à cet effet d'un atems traité par l'acide nitrique à 3 <^/o et coloré, soit par la fodisine, soit par le carmin boracique, et en montant dans la glycérine des œufs pris en des poijits de plus en plus éloignés de la poche séminale, que l'on peut voir le mieux cette rédaction progressive du réticulum et la transformation du vitellus réticulé, du centre vers la périphérie, en une substance granuleuse dans laquelle il n'est plus guère possible de distinguer le réseau, (pi. XV, fig. 5, 6. 7, 23 et pi. XVI, fig. 3).

Mais ce n'est pas seulement autour du spermatozoïde que débute le changement qui s'opère dans l'aspect du vitellus. La partie profonde de la figure ypsiliforme s'entoure elle aussi de sabstance opaque et, dans beaucoup d'œu&, on distingue à on certain stade, deux amas granuleux qui restent pendant qoelqae temps indépendants et sépai*és l'im de l'autre : Tun est en rapport avec le spermatozoïde, l'autre avec la vésicule germinative modifiée (fig. 5, pi. XV, voyez aussi pi. XIV, fig. 16). Mais bientôt les deux amas granuleux, qui s'étendent rapidement l'un et l'autre, en arrivent à se toucher, puis à se confondre en une masse commune. Cependant l'on distingue longtemps encore une limite plus ou moins distincte entre les deux portions de cette massa granuleuse, unique en apparence, et entourée de toutes parts d'une zone transparente réticulée. (pi. XV, fig. 7, 15 et 20). Dans la plupart des œufs traités par l'alcool on obseiTe même un sillon superficiel répondant au plan de séparation entre les deux parties du corps vitellin. (pi. XV, fig. 16, 19, 21, 22, pi. XVI, fig. 1 et 2).

La portion principale de la figure ypsiliforme, et notamment ses deux branches divergentes restent constamment dans la zone corticale réticulée, cette partie de la figure devenant

bientôt superficielle, tandis que la partie profonde de la tige du bilboquet plonge dans la masse granuleuse. Parfois celle-ci s^élève alors en une sorte de cratère et la limite entre les denx portions de la figure se marque par une ligne transversale très nette. L'œuf représenté planche XV, figure 8 montrait admirablement cette particularité.

Quand la portion principale de la figure ypsiliforme est devenue superficielle, que Tangle ouvert en dehors que les branches divergentes formaient entre elles s'est effiuîé, quand la figure a pris l'apparence que j'ai repi*ésentée (fig. 22, pi. ]ÇV) on ne distingue plus de la tige du bilboquet que quelques traces dirigées suivant l'axe de l'œuf. Ce qui reste encore de Tancienne figure ypsiliforme affecte l'apparence d'un fuseau, dont l'axe est dirigé parallèlement à la surface de- l'œuf et, comme le fuseau est tout à fait superficiel, l'on pourrait croire qu'il a été expulsé en dehors du vitellus. Mais il n'en est rien; nous verrons plus loin ce qu'il advient du fuseau.

Examiné non plus en coupe optique, mais à la suûce da vitellus, le fuseau montre deux branches collatérales dirigées perpendiculairement à son axe. De là une figm-e cruciale. Nous avons représenté figures 17, 20, 21 et 23 de semblables images. Les branches collatérales de la croix sont de longueur variable ; tantôt semblables entre elles (fig. 20), d'autre fois elles sont très dissemblables (fig. 17 et 21). Elles ne sont que des faisseaux de fibrilles périphériques agglutinées dans le plan équatorial de la figiu-e et dirigées suivant deux directions opposées. Quand les deux branches se trouvent dans un même allignement leur direction commune est perpendiculaire à la dii-ection primitive de la tige du bilboquet : celle-ci répondait à un rayon de l'œuf, celle-là est parallèle à la surface de l'œuf ou à peu près.

Le fuseau, formant la branche verticale de la croix, et les deux branches collatérales se trouvent dans un même plan. C'est i)ourquoi on ne voit pas ces dernières dans un œuf orienté comme celui que nous avons représenté figure 22. Les quatre branches de la croix rayonnent autour d'un centre

commim occnpé par les éléments chromatiques de l'anciemie vésicule germinative. De ce même centre Ton voit myonner d'autres jQlaments d'épaisseur variable; leur direction est souvent incurvée. Les quatre branches de la croix, aussi bien que les rayons secondaires que Ton distingue entre ces branches, forment ensemble un disque circulaire (pi. XV, flg. 23) dont le contour répond à la surûice du vitellus.

La comparaison entre des figures comme celle que nous avons représentée figure 23 et l'image figure 20, où Ton distingue déjà vaguement une radiation formée par des stries de ponctuations, tend à montrer que les i*ayons secondaires se forment à nouveau dans le protoplasme. U en est de même, je pense, de Tune des branches collatérales de la croix, (pi. XVI, fig. 7 et 11), . tandis que l'autre résulte de ce que la substance constitutive de la tige du bilboquet se déplace progressivement dans 1q j)lan équatorial, de façon & ce que, après avoir formé un faiêuseàu radiaire, elle finit pai* constituer, dans le même plan, un faisseau tangentiel. Cependant la trace de la tige du bilboquet persiste dans le vitellus où l'on distingue toujours des traînées de granulations reliant le centre de la figure cruciale au spermatozoïde. Je pourrais encore exprimer l'opinion que j'émets, sur l'origine de la figure cruciale, en disant que la figure ypsiliforme décrit autour de Taxe reliant ses deux pôles une rotation équivalente à un angle de QO^'. En même temps la figure tend à devenir symétrique, et à se compléter par la formation, au côté du fuseau opposé au point d'insertion de la tige du bilboquet, une branche nouvelle diiîgée comme la première dans le plan équatorial de la figure. A un certain stade du développement la tige du bilboquet, formée par un fiusseau de fibrilles agglutinées en un cordon homogène, cesse d'être rectiligne; elle décrit des ondulations, comme si après avoir été d'abord tendue, grâce aux cordons qui s'inséraient & son extrémité, elle cessait tout à coup d'être sollicitée par la traction de ces éléments (pi. XVI, fig. 9).

Les branches collatérales de la croix sont formées l'une et

l'aatre non par an, mais par denx faisseaox de fibrilles périphériques agglutinées (pi. XV, fig. 23). Ces deux faisseanx d'abord confondus dans la tige du bilboquet se séparent progressement l'un de l'autre et se disposent parallèlement l'un à l'autre. Cette division s'étend dans toute l'étendue du plan équatorial; non seulement elle se montre dans les deux branches collatérales de la croix, mais aussi à la surfeur de , l'hyalosome, comme si toute la figure cruciale se fendait v,^-*^*^ en deux. La subdivision commence toigours d'abord dans la tige du bilboquet et s'étend delà, de proche en proche dans la branche opposée (pi. XV, fig. 15, 17, 19, 21, 28 et aussi pL XVI, fig. 13).

Cette division qui s'opère dans tout le système des fibrilles périphériques , dans un plan normal à la surface du vitellus, tout autour de la masse claire qui renferme les corpuscules chromatiques, a pour conséquence la subdivision de la figure achromatique et la mise à nu de la sphère du bilboquet. A ce moment il n'est plus possible de distinguer les fibres achromatiques axiales. La division en deux lames de la plaque équatoriale parait jouer im rôle important dans la libémtion du premier globule polaire. J'ai dit plus haut que la figure cruciale, dont j'ai indiqué la constitution et le mode de formation, forme dans son ensemble un disque circulaire. La division de la plaque équatoriale en deux lames intéresse naturellement le disque tout entier, qui se décompose en deux moitiés (fig. 23). Je considère le plan suivant lequel se fidt la division, c'est-à-dire le plan équatorial de la figure ypsîUforme, comme le plan médian de l'œuf. Tandis que les deux moitiés du fuseau sont sjTnétriques, ce qui parait résulter de la genèse de toute la figure ypsiliforme, il n'en est pas de même des deux branches collatérales de la croix. Celles-ci ne sont pas équivalentes, pour autant que Ton puisse en juger par leur mode de formation ; et de fait elles sont encore dissemblables au moment où la figure a atteint son complet développement (fig. 23). De sorte qu'un plan passant d'une part par le centre de l'œuf, de l'autre par les branches coUa-

HECOEHCHES SDR Lt FÉC0NDAT10>.

térales, c'est-à-dire le plan éiiuatorial de la figure ypsilifomie est le seul qui divise l'œuf en deux moitiés symétriques.

D'après cela l'œuf présenterait à ce moment non pas seulement on ase organique et deus pôles d'inégale valeur, mais aussi un plan de symétrie unique; il aurait une structure bilatérale.

Dans quelques œufe j'ai obsei-vé deux paires de branches divergentes dans la figure ypsiliforme. Je ne sais si cela est constant (pi. XV, fig. 9).

Je ferai remarquer aussi que daus la période qui précède immédiatement l'achèvement de la figure cruciale les deux moitiés du fuseau (branches divergentes de la figure ypsiliforme) sont souvent très dissemblables, l'une devenant extrêmement volumineuse et montrant très-nettement sa composition fibrillaire, l'autre beaucoup plus réduit* est aussi plus homogène, figure 13 (pi. XVI).

Peu de temps après que le disque, avec sa figure cruciale, se sont constitués il devient impossible de tUstingaer le fuseau. H Jy. ^ m'a paru qu'il se raccourcit de plus en plus et qu'il se confond progressivement avec les autres filaments radiaires du disque. Ceux-ci deviennent aussi de moins en moins distincts et tous les éléments constitutifs du disque se réduisent en une substance finement ponctaée. Au début les limites du disque restent parfaitement apparentes : son contoni' circulaire se voit avec une grande netteté à la surface du vitellus. Épais vers son milieu, où il renferme le corps claii' pourvu des corpuscules chromatiques, il s'amincit vers ses bords, qui se continuent avec le contour externe du vitellus (pi. XVI, flg. 4 et 15). Dans les œuis qui n'ont subi de la part des réactifs employés pour les durch- aucune rétraction, ou remarque que le disque se termine extérieurement par une surface à peine convexe qui se mbutè" exactement sur la face inteiTie de la couche périvitelline (pi. XVI, fig. 4). La région médiane du disque proémine fortement dans le vitellus. Mais quand le vitellus s'est un peu réti-acté, le milieu du disque se soulève en un tubercule qui fait saillie à la surface de l'œuf. Dans ces œufe

le contour du disque est pr&sque toujours iniliqné par un léger sillon circulaire. Peu à peu la substance du disque devient de j plus en plus semblable au reste du vitellus et il airive un moment où il devient très difficile de la disting:ner. De tonte ' la figure ypsiliforme il ne reste plus qu'un seul élément bien reconnaissable : c'est le prothyalosoine avec ses corpnscnles chromatiques (p], XVI, fig. 5). Néanmoins il persiste toiyoura quelques traces de la fig:ure ypsiliforme. L'axe organique de l'œuf, suivant lequel la figure devenue superficielle se trouvait reliée au zoosperme par uue série d'éléments tels que la tige du bilboquet, le corps pédieux, le corps intermédiaire et les | filaments qui s'y rattachent, cet axe reste indiqué par des | traces peu distinctes, mais dans lesquelles je crois reconn^ûtra 1 encore, dans certains cas, le corps pédieux et le corps inter- [ médiaire (pi. XVI, fig. 5). Autour du pôle occupé par l'hya- 1 losome pourvu de ses corpuscules chromatiques se voient i des cercles concentriques; d'habitude on en distingue trois. Le plus interne marque probablement l'ancienne limite da ' disque; le plus externe la limite que nous avons signalée plus haut entre la portion du vitellus qui se rattache aa zoosperme et celle qui se développe autour de la portion profonde de la figure ypsiliforme; l'intermédiaire provieait je pense de l'extension, vers la surface du vitellus, de la ligne qui sépare la portion superficielle de la figure ypsiliforme de la partie prcïfonde engagée dans le vitellus grannleus J (vou' fig. 7 et 8 de la pi. XV). Les figui-es 16 et 22 de la j planche XV sont instructives pour l'étude de l'origine de ces I cercles concentriques.

Tant que le disque reste distinct on retrouve des indicas ' manifestes de sa division en deux moitiés, suivant le plao équatorial de l'ancienne figure (gl. XVI, fig. 3); sur tont le pourtour du corps clair une feii^ assez large se montre et il semble que suivant cette fente le corps clair soit & nu. 4

Nous en sommes arrivés au moment oii le premier globolafl polaire va être expulsé; mais avant de décrii-e ce phénomèna nous devons revenir un instiint sur nus pas. Il n'a été ques- 1

RECnERCHES SUR LA FÉCONDATION. 227

tion jusqu'ici que des modifications que subit la portion achromatique périphérique de la figure ypsiliforme. Nous ayons vu qu*au moment où la figure vient de se constituer aux dépens des restes de la vésicule germinative, la coupe du bilboquet renferme une sphère claire et que dans cette sphère il existe deux disques chromatiques généralement formés chacun de quatre corpuscules agglutinés. Ce corps n'est que le prothyalosome de la vésicule germinative et les éléments chromatiques qu elle renferme ne sont autre chose que le corpuscule germinatif dédoublé. Avant la copulation de l'œuf et du zoosperme le nucléole se montrait déjà constitué de deux disques adjacents (pi. XTV, fig. 8) et si Ton compare la figure 13 de la planche XVI aux figures 10, 11, 12, 13 et 9 de la planche XTV ou même à la figure 8 de la même planche on verra que la figui-e chromatique ne subit guère de modifications dans le cours des métamorphoses de la vésicule germinative. C'est ce que montre encore bien une compai-aison entre les figures 3 et 4 de la planche XVI et les figures 16 et 17 de la planche XIV qui représentent la même figure chromatique difieremment orientée.

L'image de la figure chromatique dans la figure 1 (pi. XVI) qui montre les deux disques superposés vus obliquement est très semblable aux images que nous avons représentées planche XTV, figures 14 et 15. Les éléments chromatiques se maintiennent sans subir aucun changement depuis le moment où la vésicule germinative disparait, jusqu'au moment où le globule polaire va être expulsé. D'habitude l'on voit quatre corpuscules dans chaque disque chromatique; quelquefois cependant leur nombre est manifestement plus considérable.

A tous les stades du développement la fi^re chromatique se trouve entourée d'une substance claire, comme c'est déjà le cas dans la vésicule germinative avant sa transformation. Cependant le volume du prothyalosome de la vésicule germinative est plus considérable que celui du corps clair qui renferme la figure chromatique au moment où le globule

EDOUARD TAN BEITEDEN.

polaire est siu- le point de se fonner. Je ue suis pas en mesure de dire comment se fait cette réduction. Des images comme celle que j'ai représentée planche XVI, figure 9 semblent indiquer une expulsion d'une partie de la masse claire préalablement à la fonnation de l'une des branches transversales de la figure cruciale. A voir des images comme celle que j'ai représentée planche XIV, flgiire 16 l'on serait porté k croire que la partie centrale de la masse claire se difl'érencie à un moment donné; peut-être la zone corticale est elle ensuite éliminée, (pi. XVI, fig. 9, pi. XV, fig. 3, 6, 7 et s). Peutêtre aussi la réduction se fait-elle par exosraose. Mais ce qui n'est pas douteux, c'est qu'une partie de la masse claire se maintient, à tous les stades du développement autour de la figure chromatique.

Le premier globule polaire se forme aux dépens du protkyalosome réduit et aux dipms des éléments chromatiques qu'û renferme. Chacun des deux disçpies chromatiques fournit au globule polaire la moitié de sa substance et le prothyalosome se divise tangentidletn&it; ce n'est pas l'un des pôles du fuseau qvii est éliminé; mais dans le plan éqitatorial que se fait V Éliminaiion.

Le corps clair est encore indivis dans les figures 3, 4 et 21 de la planche XVI. On y distingue les deux disques chromatiques se regai'dant par leurs faces. Dans la figure 2 (pi. XVT) les deux disques chromatiques se sont allongés dans le sens du rayon de l'oBuf et le corps claii* montre un commencement d'étranglement. Cet étranglement est beaucoup pins marqué dans la figure 15 de la même planche; cette figure montre une ligne transversale très nette eutre les deux moitiés de la masse claire et les figures 16, 17, IS et 20 de la même planche montrent la moitié externe de la ma-sse claire complètement séparée par étranglement progressif de la moitié interne; la première semble sortir pai- la fente qui sépare le disque en deux moitié-s.

La figui'e du'omalique e^t bien recomiaîssable daas les

figures 15, 16, 17, 18 et 20. Il ressort clairement de l'examen comparatif de ces figures qne chaque disque chromatique, après s'être transformé en tm bâtonnet renflé à ses deux bouts, fortement étranglé à son milieu, se divise en deux parties dont l'une reste dans la moitié externe, l'autre dans la portion interne du corps clair en voie de se dédouliler. Que la constriction qui amène la séparation complète des deux moitiés du corps clair agit sur les bâtonnets de taçon à les rapprocher l'un de l'autre au niveau de leur portion étranglée en un filament, c'est ce qui me parait résulter d'images comme celle que nous avons représentée figure 20, où les deux filaments fortement étirés en longueur relient encore l'iui à l'autre les deux renflements terminaux. On distingue parfois un petit bouton vers le milieu du filament (flg. 20). E semble même que par suite de la constriction de plus en plus prononcée les filaments peuvent se rapprocher au point de se toucher et môme de se confondre. Je ne puis m'expliquer autrement des images comme celle de la figure 16 où les portions externes des deux disques chromatiques sont réunies entre elles par leur bout effilé. Ce qui est moins douteux encore c'est qu'à, un moment donné la continuité enti-e les renflements terminaux externes et internes des bâtonnets s'interrompt, par suite de la rupture des filaments qui les réunissaient entre eux (fig. 18).

La moitié externe du prothyalosome avec ses deux éléments chromatiques, constitue certainement la plus grande partie du globule polaire. Conatitue-t-elle à. elle seule ee corpuscule? Une ligne très nette dirigée perpendiculairement aux bâtonnets chi-omatiques apparaît dans Tépaissem- du disque achromatique et divise la substance de ce dernier en deux portions inégales dont l'ime se rattache au globule polaii'e soulevé au dessus de la sui-face du vitellus, et dont l'autre renferme le corps clair interne que je propose de désigner sous le nom de deuthyalosome. Cette ligne apparaît au niveau de l'étranglement qui amène la division du prothyalosome en deux moitiés. L'on pomrait croire que c'est suivant

cette ligne que se fait la séi)aratioii du globale polaire. Le globule se constituerait clans ce cas du corps clair externe pouTMi de ses deux éléments chromatiques et de la portion externe du disque achromatique. (Voir les fig. 16, 17, 18 et 20 de la planche XYI.) Mais je ne suis nullement convaincu de l'intervention d'une portion quelconque du disque dans la constitution du globule polaire et dés images comme celles que j'ai représentées planche XVII, figures 1 et 3 sont de nature à justifier mes doutes à cet égard. Les figures Id et 20 de la planche XYI montrent une véritable expulsion du globule polaire par une sorte d'orifice, par une déchirure circulaire du centre du disque. S'il enti*e dans la constitution du globule polaii-e autre chose que la masse claire dérivée du prothyalosome et les deux éléments chromatiques qui descendent directement du corpuscule germinatif de l'œuf, ce ne peut être qu'un ti-ès mince revêtement supei-ficiel, dont l'origine doit être cherchée dans les éléments constitutifs du disque achromatique.

Aussitôt libéré le premier globule polaire s'applatit à la face interne de la première couche périvitelline et, aux stades suivants, on le trouve toujours a4jacent à la face interne de cette zone. Dans les préparations à Tacide nitrique il se présente d'habitude sous la forme d'un petit disque très réfiingent souvent un peu irrégulier. L'alcool détermine un léger gonflement du disque; souvent il devient irrégulier, bosselé à sa face interne et montre constamment un certain nombre de corpuscules vivement colorés. Leur nombre et leur forme varient d'un œuf à l'autre. Parfois on observe des indices de fragmentation (pi. XVIII, fig. 2); mais c'est là un fait très accidentel et je n'ai jamais vu le corpuscule complètement dédoublé. Cependant la substance chromatique du globule forme fréquemment deux amas qui eux même sont composés chacun de deux éléments accolés.

Ce qui païuît ressortir de ce long exposé difficile à compi-eudi'e et relatant une série de détails dont je ne puis saisir la portée, c'est V que le premier globule polaire est principalement et peut étie même exclusivement formé d'éléments

dérivés de la vésicule germiiiative de l'œuf. Ces éléments sont en partie chromatiques, en partie achromatiques. Les globules chromatiques constituent dans le globule polaii*e deux amas distincts; ceux-ci dérivent de la subdivision en deux moitiés de chacun des deux disques chromatiques qui formaient le corpuscule germinatif (nucléole de Tœuf). La substance achromatique du globule polaire est une partie du corps clair ou prothyalosome de l'œuf.

2^ La seconde moitié du prothyalosome, avec les deux amas chromatiques qu'elle renferme, reste dans l'intérieur de l'œuf. Cette partie qui reste dans l'œuf est de tous points semblable au globule polaire éliminé. Je l'appelle deuthyalosome.

3<> La division du prothyalosome ne se fait pas perpendiculairement à l'axe du fiiseau de direction, mais suivant l'axe réunissant les pôles de la figure. Les deux disques chromatiques, que l'on serait tenté de comparer aux deux moitiés chromatiques d'un noyau en voie de division, ne peuvent être comparés aux deux moitiés d'une plaque équatoriale divisée ; l'un ne passe pas dans le globule polaire, l'autre dans le deuthyalosome, auquel cas la formation du globule polaire pourrait être comparée à une division cellulaire; chacun des disques chromatiques se segmente,^To)^ de la formation de ce globule, suivant un plan passant par l'axe du fuseau.

L'on ne peut donc pas comparer la genèse du premier globule polaire à une division cellulaire indirecte. H ne s'accomplit d'ailleurs ici rien qui rappelle les transformations bien connues des filaments chromatiques d'un noyau de cellule au moment de la division et le corps protoplasmique de l'œuf paraît n'intervenir en rien dans la constitution du globule polaire.

L'apparition, au voisinage du prothyalosome, lorsque la vésicule germinative commence la série de ses métamorphoses, de deux centres d'attraction, cei*taines analogies entre la figure ypsiliforme et un ftiseau achromatique pourraient faire songer à une division karyokinétique. Mais il n'en est rien. La raison d'être des détails de structure que révèle l'étude de la figure

EDOCAED TAN BEHEDEN.

ypsiliforme, les changements multiples et compliqués qui sa ' produisent dans sa constitution sont inexplicables à l'iieure qn'î] est. Mais en tous cas Us semblent bien plutôt avoir pour but de donner au vitellus une structure appropriée à la fonctioil que l'œuf doit accomplir, le dédoublement du prothyalosome et J l'expulsion d'une de ses moitiés, que de former le globule.

Le soit disant fuseau de direction s'est déjà confondu areoi le protoplasme de l'œuf au moment où le globule se constitua ■ et les fibrilles achromatiques n'interviennent nullement dans] la composition de cet élément.

III. — DeB modlficatlona dn vltallaa pendant la période de forsuLtlon da premier glabnle polaire.

Dans la description que j'ai faite de l'œuf tel qu'il < constitué avant l'imprégnation j'ai dit que le vitellus se constitue : 1» de sphères hyalines se colorant en rose dans le picrocarmin, après l'action de l'acide osmique; 2" de gouttelettes homogènes claires et transparentes difficiles & distingua J siu- le fiais des sphèi-es hyalines, mais que l'on ne peut con> fondre avec ces dernières dans les préparations au picro*'^] carmin ; 3° d'un réseau protoplaamique comprenant une mince couche superficielle ininterrompue, d'une couche enveloppant la vésicule germînative et d'un système de lames réticulées remplissant tous les espaces, d'ailleure forts réduits, laissent entre elles les sphères et les gouttelettes; puscules réfi'ingents disséminés dans la substance protopiaf mîque. Suivant la méthode que l'on emploie pour durcir < pour colorer les œufs, suivant que l'on monte dans la glycÉ ou dans le baume, tantôt certains éléments deviennent pliu apparents, tantôt ces mêmes éléments deviennent peu distinct et d'autres se montrent avec une parfaite netteté.

Dans les préparations d'œufs traités par l'alcool et coloré par le carmin boracique les corpuscules réfi-ingents dispai sent, les sphères hyalines se confondent avec les gouttelette homogènes et le réticulum pi-otoplasmique devient très appi

RECDERCnES SUR LA FÉCONDATIO^. 283

rent. Dans les préparations à l'acide nitrique an contraire les Mrpiiacules réfring'eats eonsereent tous les caractères qu'ils présentent sur le vivant; il en est de même des gouttelettes homogènes et des sphères hyalines, et le réseau protoplaamique est bien distinct.

L'acide oemique et le iiicrocarrain rendent de gi'ands services, quand il s'agit d'étudier les éléments formés du vitellus; mais le réseau protoplasmiqne est difficile à voii- dans des œufs traités paj- cette méthode. Si elle mérite d'être recommandée poui' l'examen de l'œuf avant l'imprégnation et même pour l'étude de la pénétration du zoosperme, elle doit être écartée pour l'analyse des changements consécutifs à. la copulation de l'œuf avec le spermatozoïde et cela pour cette raison qu'aussitôt que la zone périvitelline a commencé à se former, il n'est plus possible de faire pénétrer le carmin : tout l'œuf prend une couleur jaune uniforme. Or, comme cette méthode est la seule qui permette de distinguer les sphères hyalines, il est difficile de se rendre compte de ce que deviennent ces éléments. Cependant j'ai réussi à résoudre partiellement cette question en recourant à. des préparations d'œufs traités par l'acide osmiqne. Les sphères hyalines disparaissent ti'ès probablement sans laisser de traces, peu après l'entrée du zoosperme et les gouttelettes homogènes prennent au contraire une importance croissante; elles deviennent plus nombreuses et surtout plus volumineuses. C'est exclusivement k leur présence que le vitellus est redevable de son apparence réticulée, peu après la copulation. Je renvoie pour l'exposé des faits relatifs à. la disparition des sphères hyalines à l'exposé que j'en ai fait dans le premier chapitre de ce mémoire. Comme l'aspect que présente le vitellus varie, suivant la méthode que l'on emploie, il est nécessaire, si l'on vent étudier les modifications successives du corps ovulaire, pendant la seconde période de sa maturation, de recourir à des séries d'œufs préparés en suivant nne seule et même méthode. Je recommande tout particnlièrement, pour l'étude de ces changements, l'emploi de l'acide nitrique à 3 "jo. L'utenis traité en entier par la solution acide

est placé dans l'alcool au tiers, puis dans l'alcool à 70, coloré par le carmin boracique ou la fuchsine et les œufs sont montés dans la glycérine. L'étude de séries d'œufe traités par l'alcool colorés par le carmin boracique et montés dans la glycérine rend aussi de bons services. H est nécessaire de contrôler sur le vivant les résultats de l'examen des œufs traités par les méthodes que je viens d'indiquer.

Pendant la copulation des produits sexuels, tant que le zoosperme proémine à l'extérieur de l'œuf, et que la vésicule germinative conserve encore ses caractères de vésicule, de nombreux corpuscules réMngents, disséminés dans le protoplasme, se voient distinctement dans toute l'étendue du vitellus (pi. XTTT, fig, 77 et 78). Mais à peine la trace du micropyle a-t-elle disparu, le spermatozoïde se trouve-t-il engagé dans l'intérieur de l'œuf, la figure ypsiliforme est-elle en voie de formation, que les corpuscules réfringents se concentrent dans la couche superficielle du vitellus d'une part, autour de la vésicule en voie de transformation et particulièrement autour des amas polaires de la figure ypsiliforme de l'autre. Bientôt il ne s'en montre plus un seul dans le réticulum protoplasmique qui s'étend dans la plus grande partie du corps ovulaire (pi. XIV, fig. 9). Les cor^ puscules fort nombreux dans la couche superficielle et aussi au voisinage de la figure ypsiliforme en voie de formation présentent les mêmes caractères que précédemment : ils sont de volume et de forme très variables; ils sont très réfringents et si on les examine, en se servant de forts grossissements, ils se montrent constitués de granules agglomérés, comme s'ils n'étaient autre chose que des grumeaux de petits éléments réfringents agglutinés entre eux. Au fur et à mesure que la zone périvitelline s'épaissit le nombre des corpuscules réfringents diminue dans la couche superficielle du vitellus et aussi autour de la figure ypsiliforme. H arrive bientôt un moment où toute trace de ces corpuscules a disparu et où l'on ne distingue plus, dans le vitellus, que des gouttelettes

homogènes remplissant complètement les mailles fort inégales d'ailleurs d'un réseau formé pai- le protoplasme de l'œuf. Tout l'œuf est alora d'une transparence parfaite et le. protoplasme qui forme le reticulum est devenu notablement plus abondant. Ce fait joint à la cii'constance que le contour des corpuscules réfringents devient de moins en moins foncé me font croire que les corpuscules réfringents ne sont pas résorbés, mais que la substance ponctuée qui les constitue se confond peu à peu avec le protoplasme et contribue directement & augmenter la masse protoplasmique réticu]ée. Les figures 17 de la planche XIV, 1, 3 et 4 de la planche XV représentent l'aspect du vitellus au stade que nous considérons.

La structure radiaire du vitellus si apparente avant l'imprégnation n'est plus guère visible maintenant.

A ce moment le zoosperme et la figure ypsiliforme changent de place : la spermatozoïde qui était resté pendant un certain temps adhérent à la membrane de l'œuf par l'extrémité de sa queue et qui, dans beaucoup si non dans tous les oeufs, s'était, si je pois ainsi m'expiimer, couché sous la membrane, son axe étant dirigé non pas normalement, mais plutôt tangentiellement à la snrfjEUïe du vitellus (pi. XIV, fig. 9, 10, 14, 15), se rapproche progressivement du centre de l'œuf. La figure ypsiliforme au contraire qui occupait d'abord une position plutôt centrale gagne peu à peu la surface. H semble même que le déplacement centrifiige de cette dernière commence avant le mou- Tement centripède du zoosperme. A peine ces changements de position se sont-ils accomplis que Faspect du vitellus se modifie au contact du zoospeime d'une part, de la figure jrpsiliforme de l'autre. Tout autour du zoosperme le vitellus devient granuleux et partant il perd de sa transparence; les Soattelettes homogènes disparaissent et la place qu'elles occupaient est envahie par une masse granuleuse. Les granulations vitellines prennent naissance, non pas dans les gouttelettes, mais dans les trabécules protoplasmiques qui augmentent rapidement de volume et cela aux dépens des

EnOfARn VAP) BENEDEN.

gouttelettes qui fini^aoïi par être complètement résorbées. Cette même transformAtion du vîtellus s'opère aatonr de Is portion profonde de la figure ypailiforme (pi. XV, fig. ") et fi), De là la formation dans l'œuf de deux amas granuleux beaucoup plus considérable, renferme à son iutérieur I sperme, l'autre excentriqaement placé se rattache à la ypsiliforme. On distingue alors dans le vitellus deux partit l'une granuleuse et plus sombre, l'autre réticulée et tran»^ parente. Les deux amas gi-anuleux primitivement distincts s'étendent aux dépens de la partie réticulée et bientôt confondent en un senl. H semble, à première vue, comme le Zûosperme occupe le centre de cet amas, que celui-ci s'est fonné exclusivement autour du zoospenne; mais en y regaiv dant de près on distingue d'habitude l'existence d'une ligne dflT. séparation entre les deux portions d'origine distijicte qui, eu sa" juxtaposant, ont donné lieu à une masse en apparence unique, qui occupe tonte la partie médiane de l'œuf {pi. XV, fig. 7). On distingue parfois vaguement, dans la masse granuleuse, une striation radiaire autour du zoosperme comme centre. La marche du phénomène et l'aspect de l'œuf semblent indiquer que le zoospenne d'une part, la figure ypsiliforme de l'autre attîrenl à eux une partie du vitellus et se partagent en quelque soi le corps ovnlaire, dans lequel ils sont plongés l'un et l'autre^ Les préparations d'œufs traités par l'alcool sont au moii aussi instructives à. cet égard que ceux qui ont été durcîj par l'acide nitrique, et les radiations que l'on observe autoi du zoosperme y sont même plus apparentes (pi. XIV, flg. pi. XV, fig. 2 et 15).

La couche périphérique réticulée bien distincte sur tous 1( œufs quelque soit le traitement auquel ils ont été soumis, qu'on les observe frais, dans la glycérine ou dans le baume, diminue peu à peu d'épaisseur. Elle se transforme peu à peu en substance granuleuse sombre et, au moment de la formation du premier globule polaire, elle a disparu. Tout le vitellus est granuleux. Qd. XVI, fig. 3, ac. nitr. fig. 5 et 6 alcool).

On distingue néanmoins encore dans ces œufs une zone.

corticale et une masse médullaire; Taxe organique de Tœuf reste distinct et sur le pourtour du pôle, où se forme le globule polaire, on distingue divers cercles concentriques. J'ai donné dans le paragraphe précédent l'explication de ces particularités, en rendant compte de leur origine. J'ai représenté (pi. XVI, fig. 19) divers détails de structure que j'ai observés sur plusieurs œu&. Le globule polaire est entièrement constitué. Les éléments chromatiques qui restent dans le vitellus se sont déjà dédoublés ; ils reposent sur un corps drcolaire. Au milieu de cet espace se trouve un autre élément circulaire renfermant un corpuscule d'où partent des radiations. Plus profondément se voit un autre corps arrondi; de ce corps partent des lignes l'une axiale, les autres obliques. Ces dernières aboutissent à des sillons circulaires qui régnent à la surface du vitellus. La figure montre d'autres détails de structure dont j'ignore aussi la signification, mais que j'ai figurés tels que je les ai vus, parce qu'ils indiquent d'une manière évidente la symétrie de l'œuf.

HT. — Formation de la première couche périvitelline.

J'ai fiût plus haut l'histoire de la membrane vitelline ; elle se forme peu à peu aux dépens de la couche superficielle du protoplasme ovulaire pendant la première période de la maturation de l'œuf. Au moment où l'œuf est prêt à recevoir le zoosperme, cette membrane peut être isolée. Elle présente à ce moment une solution de continuité au pôle d'imprégnation et, an moment de la copulation, la membrane du zoosperme Tient se mettre en continuité par son bord libre avec le bord libre de la membrane vitelline. H en résulte la formation d'une membrane unique qui s'étend d'une part sur tout le pourtour du vitellus, abstraction faite du bouchon d'imprégnation, et d'autre part autour de la partie du zoosperme qui s'élève, sous la forme d'une papille conique, au dessus de la surfiEU» de l'œuf. Cette membrane unique je l'ai appelée la membrane ovo-spermatique. Dès le moment où cette

quand on se sert du 1/18 k immeiision homogène de Zaisa (pi. XV, fig- 16). En traitant par l'acide acétiqne faible od produit aussi le soulèvement de la membrane ovo-spermatique. H ne peut donc y avoii- de doute sur l'origine de la substance qui fuime la zone périvitelline ; cette substance vient da vitellus de l'œuf.

Des mensurations exactes du globe vîtellin viennent confirmer cette conclusion; le globe vitellin diminue de volume aa fur et à mesure que la zone s'épaissit.

Il se fait donc pendant cette période de la maturation de l'œuf qui se caractérise par la série des phénomènes préalables & l'expulsion du premier globule polaire, un dépôt progressif 1 de substance hyaline à ta tace interne de la membrane ovo- f spennatique. Le corps protoplasmiqne de l'œuf est l'agent ] formateur de cette substance qui est peu è. peu éliminée par la vitellus, pendant que la vésicule germinative, qui a donné lien à la formation de la figure yi»siliforme, se prépare elle même è. rejeter sans la forme de globule polaire, une partie de sa <

Je propose de désigner ce dépôt hyalin sons le nom do première coudie ou de première zona périviteUine, afin d'indiquer pai- là le rapprochement que je croîs pouvoir établir entre j cette substance et le liquide périvitelhn qui, chez une foula 1 d'animans, est expulsé par le corps ovulaire, lors du retrait [ du vitellus.

L'on trouvera plus loin la justification de cette manière de I voir.

V. — Changements que subit le zoosperme pendant la gânèso du premier globale polaire.

Au moment où il vient de pénétrer dans le vitellus le | zoosperme présente encore ta même forme et h peu près laj même constitution que le zoosperme libre (pi. XIV, fig. 9, 10» f 13, 14, 16, pi. XV, fig. 1). Les différences que l'on constats^l entre œufe d'un même stade dépendent de ce que, au moment a

de la copulation, les zoospennes n'ont pas tons la même forme ni la même constitution : tantôt ils renferment un corps réfringent, tantôt ils en sont dépourvus; la forme et les dimensions du corps réfringent sont éminemment variables; bref les zoospermes affectent indifféremment les formes que nous avons décrites plus haut sous les noms de type pyriforme, type campanuliforme et type conoïde.

Mais tout spermatozoïde dès qu'il a pénétré dans le vitellus diffère d'un spermatozoïde libre par les caractères suivants :

1^ Son corps protoplasmiqne se colore tout entier en rose sous Faction du picrocarmiu ou du carmin boracique, tandis que les zoospermes libres traités de la même manière et que l'on trouve entre les œu&, sur les mêmes préparations, sont absolument incolores.

2^ Tandis que dans les zoospermes libres le protoplasme de l'hémisphère céphalique se constitue de grosses granulations régulièrement espacées et reliées entre elles par des filaments grêles, que l'on y distingue des systèmes de lignes régulières les unes radiaires, les autres concentriques, dans le 2soospermé, après son entrée, l'hémisphère céplialique paraît formé d'une substance homogène ou finement ponctuée. L'on y distingue plus nettement que dans le zoosperme libre une zone périnucléaire très pâle et ime masse corticale plus foncée. Cette dernière est d'ordinaire fortement épaissie en un bourrelet entourant la zone périnucléaire, amincie, au contraire, au voisinage du pôle d'imprégnation du zoosperme. H en résulte qu'à la coupe optique on distingue d'habitude trois lobes dans l'hémisphère céphalique : un lobe médian principalement formé par la zone périnucléaire et deux lobes latéraux constitués par la substance corticale seule (pi. XIY, fig. 13 et 17).

3® Le contour de la queue n'est pas marqué par une ligne régulière, mais au contraire inégal et comme denticulé. Les stries transversales de la queue, résultant de la stnicture du protoplasme, sont souvent plus apparentes que dans le zoosperme libre; elles sont formées par des séries régulières de granulations assez volumineuses et qui font saillie à la siuface.

4<> Le corps réfringent de la queue commence à diminuer de volume^ aussitôt après la pénétration et, par contre, son revêtement protoplasmique s'épaissit d'autant (fig. 10, 13 et 14 de la pi. XIV, fig. 1 de la pi. XV).

Les changements ultérieurs que subit le zoosperme peuvent être énumérés en peu de mots.

Le corps réfringent diminue rapidement de volume : il perd sa forme conoïde, et devient globulaire. Sa réfringence reste la même. Le globule devient de plus en plus petit et, parfois^ il finit pai* se fondre complètement. Les derniers vestiges du corps réfringent ne disparaissent d'habitude que lorsque le zoosperme est déjà devenu central. Cette circonstance est très précieuse en ce qu'elle permet de reconnaître, avec une parfaite évidence, que l'élément coloré qui occupe le centre de l'œuf n'est pas la vésicule germinative, qui occupait cette place avant l'imprégnation, mais bien le zoosperme. D'habitude toute trace de corps réfringent a déjà disparu bien ayant la formation du disque achromatique qui se constitue aux dépens des éléments de la figure ypsDiforme. Mais il n'en est pas toiyours ainsi. L'on retrouve parfois le résidu du corps réfringent sous la foime d'un globule réfringent arrondi au moment de la formation du premier globule polaire et même encore après. Ces difierences dépendent probablement de ce que le volume du corps réfringent des zoospermes est éminemment variable au moment de l'imprégnation.

Le contour du corps réfringent, quelque soit sa rédaction, reste toiyoïu^s très net et bien régulier, de sorte que Ton poiurait croii*e à une dissolution progressive de sa substance. Mais je ne pense pas qu'il s'agisse là d'un phénomène de (Ussohition ou de résorption : au fur et à mesure que le corps. réfrhigent diminue de volume la queue du zoosperme se remplit d'une substance claiie et finement granuléOi qui présente rai)pareuoe du protoplasme. Je pense que cette substance est un produit de transfonuation du corps réfringent.

L'on constate dans les œuli? de certiiines femelles une persistance rouianiuable du corps réfringent. Chez l'une d'entre

elles, j'ai retrouvé le résidu de ce corps, dans presque tous les œufs, alors que le second globule polaire était déjà, éliminé. Ces œufs occupaient la portion tout à fait inférieure de Tuterus. Ce qui est bien remarquable, c'est que dans tous ces œufe, ce résidu, sous la forme d'un corpuscule aiTondi, de volume variable, mais toujours bien reconnaissable à sa réfringence particulière, se trouvait non plus dans le zoosperme, mais au contraire librement suspendu dans le corps vîtellin de l'œuf. Il avait été expulsé par le zoosperme. Dans les œufs, qui avaient déjà éliminé leur second globule polaire, le corpuscule réfringent se trouvait invariablement tout près de la surface du vitellus, souvent, mais non toujoui^, dans le voisinage du globule polaii-e. Dans les œufs poui-vus de deux pronucleus le corpuscule avait été rejeté par le vitellus et se trouvait dans le liquide périvitellin. En examinant des œn& de moins en moins avancés dans leur développement, j'ai vu le corpuscule réfiîngent de plus en plus rapproché du zoosperme et enfin logé dans le corps de cet élément. H n'y a pas le moindre doute ni sur l'origine ni sur le rejet définitif de ce corpuscule par le vitellus en voie de rétraction. Après qu'il est arrivé dans le liquide périvitellin il se dissout et disparait. Certains élémetiU qui entrent dans la iomponithn du spermatozoïde peuvent donc, pendant la maturation de tcsufj être éliminés d'abord par le zoosperme copule puis par te corps protoplasmique de Vœuf lui-même. Mais, dans la plupart des œufs. Ton n'observe rien de semblable : Télément expulsé dans certains cas, subit des changements dans ses propriétés qui font qu'il se soustrait à la vue.

H semble extraordinaire qu'un phénomène semblable puisse se présenter chez certaines femelles et faille défaut chez d'autres. Je pense que ces dittërences dépendant uniquement du yolnme que présente, au moment de la copulation, le corps réfringent du zoosperme. J'ai dit plus haut que chez certaines femelles presque tous les zoospermes, aussi bien ceux qui sont libres que ceux que Ton observe soit en copulation, soit après leur entrée dans le vitellus, sont dépourvus de corps réfringent.

tandis, que chez d'autres, presque tous aflfectent le type conoïde; d'autre part le volume moyen du corps réfringent varie beaucoup d'une femelle à l'autre. H est probable que ce n'est que dans les cas où ce corps est exceptionnellement développé que sa résolution ne se fait qu'incomplètement. Dans ces cas là seulement l'élimination peut-être observée. Peut-être l'expulsion se fait-elle dans tous les cas ; mais la substance expulsée, n'afiectant pas la forme d'un corps visible, échappe-t-elle à l'obseiTation.

De même que les corpuscules réfringents du vitellus disparaissent peu à peu et se transforment en protoplasme ovulaire, de même le corps réfringent du zoosperme contribue à augmenter la matière protoplasmique du spermatozoïde. Dans l'œuf comme daiis le zoosperme cette résolution des éléments réfringents commence aussitôt après la copulation des produits sexuels. A certains points de vue le corps réfringent du zoosperme peut être comparé aux corpuscules dentoplasmiques du vitellus. Les uns et les autres ont une raison d'être d'ordfe physiologique; mais ils n'ont aucune importance morphologique.

La forme générale du spermatozoïde change; elle est éminemment variable d'un œuf à l'autre ; mais on peut dire cependant qu'en règle générale cette forme tend à devenir irrégulièrement globuleuse. En même temps le contour du zoosperme devient de moins en moins distinct et, n'étaient les matières colorantes, il serait fort difficile de le retrouver au mOieu du vitellus. Souvent le reste du corps réfringent se retrouve dans la portion terminale de la queue qui tend à se séparer par un étranglement du reste du spermatozoïde, (pi. XV, fig. 14, 8 et 9). Mais il n'en est pas toujours ainsi : (pi. XV, fig. 12 et 13).

Le protoplasme de la queue perd peu à peu son affinité pour les matières colomntes et, de toutes les parties du zoosperme, celle qui perd le plus vite et le plus complètement cette affinité, c'est la portion du corps protoplasmique qui héberge le reste du c^jrps réfringent (pi. XV, fig. 8 et 9). La

plus grande partie de la queue se résout en une substance granuleuse qui devient très difficile à distinguer du protoplasme ovulaire avec lequel elle paraît se confondre.

La masse corticale du protoplasme céphalique conseiTe au contraire, en tout ou en partie, son affinité pour le carmin ; elle se concentre autour de la masse claire périnucléaire, à laquelle elle constitue une auréole formée de gros globules chromophiles, dont les dimensions sont parfois très considérables (pi. XVI, flg. 3). Cette auréole a un contour très irrégulier et son apparence est éminemment variable. Je ne pense pas que toute la substance corticale de l'hémisphère céphalique soit employée à la fonnation de cette auréole colorée; mais le protoplasme de la queue intervient lui aussi dans sa genèse. L'examen d'un grand nombre de préparations m'a donné la conviction que le protoplasme du zoosperme, abstraction faite de la masse périnucléaire qui conserve pendant toute cette période les mêmes caractères, se divise en deux parties : une portion chromophile qui se concentre autour de la masse périnucléaire pour lui foimer son auréole de globules réfringents et colorés, et une portion achromophile qui occupe, relativement à la première, une position périphérique. La limite de cette deniière, formant le contour du spermatozoïde, est souvent difficile à distinguer.

La substance de l'auréole est beaucoup plus avide de carmin que la substance protoplasmique du zoosperme primitif; elle se colore vivement en rouge dans les prépai'ations au carmin boracique et à la fuchsine et souvent même cette coloration est si intense, qu'il est difficile de distinguer le noyau chromatique, logé dans la masse périnucléaire, de l'un des gros granules constitutifs de l'auréole.

Le noyau ne subit guère de changements; il n'augmente probablement pas de volume; les différences que l'on constate à cet égard d'un œuf à l'autre peuvent être attribuées à ce que les zoospermes libres présentent, au point de vue des dimensions de leur noyau, des difiërences individuelles con-

sidémbles. Tantôt le noyau, pendant la période que nous considérons, aifecte une forme spliéroïdale et il est indivis; d'autres fois il pai-ait bosselé à sa surface, ou bien encore il ressemble à une petite rosace; souvent l'on voit de sa suiface partir des filaments d'épaisseur variable, dont la direction est d'ordinaire radiaire. J'ai trouvé des noyaux fragmentés. Dans un noyau exceptionnellement volumineux j'ai obseiTé des granules plus vivements colorés, reliés entre eux par une substance plus claire; il semblait que ces granules étaient situés aux extrémités de tractus ou de boudins formés par une substance plus pâle. Le noyau de ce zoosperme ressemblait beaucoup à la figiu-e chromatique de la figure ypsiliforme (pi. XVI, fig. 1). Peut-être ces diflei'ences d'aspect sont-elles dues à ce que la substance nucléaire est capable de mouvements amœboïdes; car je n'ai jamais pu trouver une relation entre la forme du noyau et le degré de développement de l'œuf.

La masse périnucléaire est d'ordinaire spliéroïdale. Son contour est marqué par une ligne bien régulière; son volume est très variable d'un œuf à l'autre.

Ce qui ressort clairement de ce qui précède, c'est que le zoosperme ne parait pas subir pendant la période que nous venons de considérer de changements bien importants : il ne se confond pas avec le vit^llus ; dans certains cas ses limites deviennent difftciles à voir; mais il n'est pas douteux qu'a^itour de son noyau cliromatique, logé dans sa zone périnucléaire claire, il reste une couche protoplasmique d'origine spermatique. Non seulement au moment de la copulation U ne se produit aucune fusion compai'able à celle qui s'opère lorsque deux ou plusieurs cellules se confondent pour donner naissance à un syncytium ; mais, au moment où le premier globale polaire est expulsé, le speimatozoïde parfaitement reconnaissable, dans toutes ses parties, est encore distinct du corps vitellin qui l'enveloppe de toutes parts.

Il semble cependant, d'après les indices signalés plus hanl, que le zoosperme expulse certains éléments qui dépendent

REClIERCilES SIR LA FÉCONDATION. 247

de son corps protoplasmiqne, qu'il les transmet au vitellits et que celui-ci les rejette à son tour dans le liquide périyitellin. L'on peut constater d'autre part que les éléments chromophiles du protoplasme spermatique se concentrent peu à peu autour de la zone périnucléaire, de façon à lui former une auréole colorée, tandis que la portion acliromopliile du protoplasme se porte vers la périphérie, où elle devient difficile à distinguer du vitellus ambiant.

§ n. De LA FORMATION DU SECOND GLOBULE POLAIRE ET DES CHANGEMENTS CONCOM^IITANTS DE L'ŒUF.

Comme je l'ai fait dans le cliapiti-e préxîédent je décrirai successivement :

V la formation du second globule polaire;

2* les changements que subit le vitellus pendant c^tte période et la formation de la seconde couche périvitelline ;

3^ les modifications que subit le zoosperme pendant cette période.