I. — Formation da second globale polaire

Aussitôt après l'élimination du premier globule polahe il apparaît dans le vitellus, au voisinage immédiat de sa suiface, mie nouvelle figure très compliquée qui, dans son ensemble, représente bien certainement le second fuseau de direction ou le second amphiaster de rebut.

Des éléments de trois catégories distinctes intemennent dans la genèse de la figure :

V la masse claire du deuthyalosome ;

2^ les éléments chromatiques qui dérivent du corpuscule germinatif;

â^ le protoplasme ambiant.

La première question qui se présente est celle-ci : où se forme le second fuseau de direction? Est-ce au pôle organique de l'œuf, où siégeait, aux stades précédents, la figure ypsiliforme? Est-ce en un autre point de la surface du vitel-

EUOrARD VAN BENEDEN.

lus? Ce. lieu de fonnation est-il toujonra le même ou biei est-il indifférent?

Au moment de la formation du premier globule polaîra l'axe organique de l'œuf était facile à reconnaître; il n'en e pas ainsi plus tard. Cependant ai l'on admet, ce qui me parait ' fort plausible, que le globule polaire accolé à, la fac« interne de la première couche périvitelline ne change pas de plaça ce globule devient un point de repaire, qui permet de distini-, gner le point des enveloppes ovitlaires par où passait l'axe d l'œuf au moment de l'expulsion du globule.

Or, il se fait que dans beaucoup de cas le globule est sitoftiJ à, une assez grande distance du second fuseau de direction;'] parfois même ils se trouvent écartés l'un de l'autre d'un quj de grand cercle (pi. XVn, flg. 19). Est-ce à dire que le aecoiidj fuseau ne se forme pas dans l'axe organique de i'œufPl évidemment non; le globe vitellîn, grâce ft des mouvements ' amœboïdes qui paraissent très actifs au moment de l'expulsion du premier globule, peut se déplacer à l'intérieur de ses enveloppes et y exécuter une rotation. Ce qui tend à. prouver qu'il,! en est bien ainsi, c'est que dans la plupart les œufe qui montrent J le fusean à son début, celui-ci se trouve îmmèdiatem^it sot jacent au premier globule polaire et son axe se confond avec l'axe organique de l'œuf (pi. XVII, flg. 1). De plus chaqao f que le vitellus laisse apercevoir encore les traces, soit ( différentiatious axiales, soit des cercles circonpolairea pr( demment décrits, l'on peut constater que le centre de l'a périphénque du fuseau répond au centre de figure cercles (pi. XVII, fig. 9). H est donc probable qu'aussit^ après la formation du premier globule polaire, le vit«lliu exécute une rotation et que l'axe organique de l'œuf f avec l'axe passant pai- le premier globule polaire un s dont la valeur varie; aigu d'ordinaiiB, il peut devenir presqiu droit (fig. 19),

n semble cependant qu'après s'être écarté de sa p primitive l'axe du vitellus revient à sa direction premîâl on & peu près ; car dans la plupart des œufs le second globolod

rences, pas plus que je ne m'explique comment il se fait que le nombre des fragments varie beaucoup d'un œuf à l'autre (voir fig. 1 à 14 de la pi. XVII). Mais ce (lui ressort clairement de l'examen d'un grand nombre d'œufs durcis par Tacide nitrique, c'est que les fragments des deux éléments chromatiques primitifs, quelque soit d'ailleurs leur nombre, se groupent en deux disques adjacents, dans des plans perpendiculaires à Taxe du fuseau, au voisinage de son équateur (pi. XVn, fig. 10, 12 et G).

Dès que le deuthyalosome a atteint un certain volume, souvent même avant la fragmentation des éléments chromatiques, il apparaît, en deux points opposés de sa surface, des étoiles. Dans chacune d'elles on distingue un amas central formé par une agglomération de granules et un gi-and nombre de radiations qui paraissent formées par des fibrilles moniliformes. Les amas centraux aussi bien que les i-ayons qui en partent résultent de l'arrangement régulier des éléments constitutifs du protoplasme ambiant. Au début tous les rayons ont même longueur dans une même étoile. Des deux étoiles l'une est périphérique, l'autre centrale; leurs centres se trouvent situés Tun et Tautre suivant un même rayon de l'œuf, comme le montre clairement la figure 1 de la planche XVII. Ici le doute n'est pas possible, les éléments chromaticiues du globule polaire et ceux du deuthyalosome se trouvent encore reliés entre eux et l'amas central de l'étoile périphérique s'est formé tout autour des filaments convergents vers le centre de l'étoile. Aussitôt après la libération complète du globule polaire la rotation du vitellus commence et aloi'S les rapports changent. «Tai dit plus haut que les deux asters se forment aux dépens du protoplasme. Il ne faut pas oublier cependant que les éléments constitutifs de l'ancienne figure jT)siliforme, qui dérivaient, tout au moins en partie, de la substance achromatique de la vésicule germinative, ont été amenés au pôle de l'œuf où s'est formé le globule polaire. Il est donc possible qu'ils interviennent dans la foimation du second fuseau de direction; mais il n'est pas permis de rien affirmer à cet égard. Je ne

sais pas davantage si les éléments différentiés du vitellus, tels que je les ai reitréseutéa notamment flgare 19 (p). XVI) ont un rôle quelconque à jouer dans la genèse du second fuseaa de direction. J'ai cru observer que les deux asters ne naissent pas simultanément, mais successivement. Les deux astres d« J sont pas non plus parfaitement semblables : cela résulta de c«l que l'amas central de l'étoile périphénque se forme à lai surface même du vit«llua, tandis que l'amas central de Tautral étoile, siégeant au milieu dn vitellus. peut s'entourer de rajonaf de tons côtés. L'étoile centrale a la fonue d'une sphère, tandj que rétoile périphérique est tout au pliK hémisphérique.

En installant le foyer de façon à voir la surface du vitellui on distingue bien la forme de l'étoile périphérique {pi. XVti fig. 9). Son contour n'est pas circulaire, mais bien plutôt qoa-] drilatére : elle se constitue de quatre lobes bien sépan

Les rayons des asters, d'abord tous semblables entre eux, " présentent bientôt des difl'éreuees importantes. Les rayons immédiatement adjacents au deuthyalosome et même ceoi qai avoisinent de moins près le corps clair deviennent homogèoe» J et plus apparents; ils s'allongent considérablement et i même temps ils s'incurvent de façon à décrii-e des courbes i concavité dirigée en dehors. En même temps tons les aatr rayons des asters deviennent moins visibles et notablemenfj plus coni-ta. H en résuit* qu'à la coupe optique on distingi quatre faisseaux de fibrilles formant ensemble, vtt âg quadrilatère (pi. XVII, fig. 2) en forme de hsm^TLa d thyalosome occupe le milieu de la figure; les amas centraux des asters répondent aux angles obtus du losange; aux angle aigus se produirait un enti-ecroisement de fibrilles, n'éta que les rayons des asters en s'approchant du plan équatori de la figure tendent à fuir parallèlement à l'équateor. Cepeil'j dant, aux stades suivants, l'entrecroisement se produit manifeS' J tement (pi. XVn, fig. 5, 6, 7, U et 12). Le^ fibrilles d'aborf | moniliformes sont devenues homogènes. Les figures 3 et 4 I représentent en relief le même stade que j'ai représenté t coupe figure 2. La figure 3 montre l'image de profil, la figure 4

obliqaement. Les figures 5, 6, 7, 8, 10, 11 et 12 représentent

des stades ultérieurs du développement du second fuseau de

direction, d'après des œufs traités par Tacide nitrique. On

remarque que les amas centraux des asters deviennent tout à

fidt clairs, homogènes et transparents, et qu'en même temps il

se constitue, à la périphérie des amas, des plaques incurvées ^ I^^ ^vfp

d'où partent les faisseaux de filaments.

Ces plaques sont formés d'une substance très réfringente, se colorant légèrement en rouge par le carmin boracique et la ftachsine; elles sont constituées de corpuscules adjacents qui paraissent en continuité de substance avec les fibrilles. Ces plaques sont concaves suivant leur face dirigée vers le centre de l'étoile (pi. XVn, fig. 8, 10, 11 et 12). Je ne sais si ces plaques se constituent aux dépens des granules qui remplissent d'abord les espaces centraux^ où si elles résultent d'une confluence des fibrilles.

Les quatre faisseaux de fibrilles périphériques principales (nous donnons ce nom aux rayons des asters adjacents au deuthyalosome) sont parfois très nettement délimités (pi. XVEE, flg. 11). Us sont surtout bien distincts au voisinage des plaques stellaires, beaucoup moins apparentes au contraire près de Péquateur de la figure ; dans certains cas il est même impossible de les poursuivre au delà d'une certaine distance des pôles où elles paraissent s'arrêter toutes suivant une ligne concave vers le pôle correspondant de la figure (pi. XVII, flg. 8). Cependant les angles aigus du losange sont toujours bien dessinés et ils se prolongent dans le plan équatorial par une traînée granuleuse qui s'étend parfois jusqu'à la surface du vitellus (pi. XVII, fig. 8). Mais il s'est formé maintenant aux angles aigus du losange, probablement aux depuis des entrecroisements de fibrilles, des amas de gi*anulations de forme triangulaire et dans lesquels apparaît parfois un corpuscule central d'où partent des filaments radiés.

Les rayons périphériques accessoires sont encore visibles ; mais souvent peu distincts. Dans quelques œufs, j'ai vu les rayons accessoires de l'aster interne nettement divisés eu trois

fâîsseaux, an médian et deax latéraux. Le faisseau médian enveloppait partiellement mi corps clair, adjacent au spermatozoïde et qui n'est peut être que le corps intermédiaire de la figure ypsiliforme (pi. XVII, fig. 10). Les deux faisseaux latéraux étaient en rapport avec deux amas sphéroïdaux de substance claire, au milieu de chacun desquels se voyait une figure stellaire bien manifeste (pi. XVII, fig. 10).

L'ensemble de la figure compliquée que je viens de décrire et qui répond à ce que Ton a appelé le second fuseau de direction est d'abord bien symétrique. Mais bientôt les caractères primitifs de l'image se modifient profondément : la figure s'applatit d'un côté, comme si les éléments constitutifs de l'une des moitiés du losange étaient résorbés (pi. XVn, fig. 13). La forme générale devient aloi-s triangulaire : deux des angles du triangle répondent aux angles obtus du losange primitif, ou, si l'on veut, aux pôles du fuseau; le troisième, qui dérive de l'un des angles aigus du losange, aboutit à une formation sphéroïdale particulière : son centre occupé par un corpuscule assez volumineux est entouré de radiations. Noos avons vu apparaître cette formation au stade précédent (pi. XVII, fig. 10). On ne distingue plus du second angle aigu du losange que des vestiges peu apparents (pi. XVII, fig. 13). L'image que présente à ce moment le fuseau de direction n'est pas sans analogie avec certains stades de la figure ypsiliforme (voir pi. XVI, fig. 7). L'un des pôles est toujours diiigé vers la surface, l'autre vers la profondeur de l'œuf. Néanmoins on constate une tendance manifeste à un changement dans la direction de l'axe du fiiseau.

Au stade suivant (pi. XVII, fig. 14) l'axe du faseau s*est brisé et les deux moitiés, au lieu de se retrouver sur la prolongation Tune de l'autre, fonnent ensemble un V ouvert vers la surface du vitelliis. Des deux pôles du fuseau l'im est immédiatement adjacent à la surface, l'autre voisin de cette surface. Sur ime préparation montrant des centaines d'œufs an stade que nous avons représenté figure 14 (pi. XVII), on en trouve d'autres dans lesquels les plaignes stellaires, qui répondent

aox deux pôles de la figure^ sont Tune et l'autre adjacentes à la surface du vîtellus. Ils donnent lieu à des images que Ton pourrait confondre avec celles que nous avons l'eprésentées (pi. XV, flg. 15).

H en résulte que les deux pôles du second fuseau de direction se tournent l'un et l'autre vers l'extérieur, qu'ils deviennent tous deux superficiels, préalablement à la formation da second globule polaire, tout comme nous l'avons vu se produire, lorsqu'il s'agissait de la genèse du premier de ces éléments. Le second globule, pas plus que le premier, ne se forme aux dépens de l'un des pôles du fuseau, mais bien aux dépens de l'hyalosome pom-vu de ses éléments chromatiques et, comme nous allons le voir, l'expulsion se fait dans le plan équatorial du fuseau et non pas par une de ses extrémités.

Toute la description qui précède est fondée sur la considération des images que présentent les œufs durcis par l'acide nitrique. Les œufs durcis pai* l'alcool et colorés par le cannin boracique fournissent de fort belles prépai-ations ; mais les images sont assez différentes dans les deux cas, comme on peut s'en assurer en compai*ant la série des figures 15 à 19 de la planche XVII, 1 à 8 de la planche XVIII, 1 à 6 de la planche XYUIbis, 1 à 3 de la planche XIX, aux figures 1 à 14 de la planche XVII. Ce qui frappe tout d'aboid ce sont les dififérences considérables dans le volume, la forme et la disposition des éléments chromatiques dans les deux séries de prépai'ations. Je ne puis me rendre compte de ces différences et, comme il n'est pas possible de distinguer sur le vivant les détails de stmcture dont il s'agit, je ne pourrais dire si les préparations à Talcool ou bien les préparations à l'acide nitrique expriment plus exactement la constitution réelle du fuseau.

Mais, avant d'aborder l'examen des faits que révèle l'étude des préparations alcooliques, je ferai remarquer combien les images que présente le second fuseau de direction diffèrent de celles que nous avons décrites en les rattachant à ce que nous avons appelé la figure ypsiliforme. Les figiu*es 7, 8, D, 15 à 23

de la planche XV, 1 à 6 de la planche XVI et les figures 15* & 18 de la planche XVII, 1 à 8 de la planche XVIII ont été

toutes dessinées au même grossissement (Obj. D de Zeiss. Chambre claire), d'après dtis préparations traitées exactement de la même manière. Il en résulte clairement que les phéno- J mènes préalables à la formation du premier globule polaire nef peuvent être complètement identifiés à ceux qui précèdent ' l'élimination du second de ces éléments et l'on pourrait supposer d'après cela que les deux globules polaires n'ont pas exactement la même valeur.

Le second fuseau de direction présente, dans les préparations à l'alcool, im tel degi-é de complication qu'il est extrêmement diiScile, malgié la netteté des images, d'interpréter j tous les détails de structm-e que r(m distingue. Il est Umim aussi difficile de se rendre un compte exact de la snccessîoB j des phénomènes. J'ai représenté aussi exactement que possible les principales figui'es que j'ai observées, et je me bornerai à donner sur chacime d'elles quelques mots d'explicatioo.

Figure 15. Les deux amas centraux des asters sont fort étendus et il en est de même des plaques stellaires qui les délimitent. Celles-ci sont très apparentes et assez fortement teintées en ruse dans toutes ces préparations. L'on distingo^fl assez bien les limites de l'hyalosome, qui renferme dem paires de plaques chi'omatiques situées tout près du plai équatorial de la figure et, en apparence, soudées deux à deu^ en une plaque unique. Le volume des deux plaques n'est pas V même. L'hyalosome parait divisé, suivant l'axe de la figure, ( deux moitiés ; chacun d'elles renferme nn groupe chromatique! Dans le plan équatorial, à la place répondant à l'un des tuiglei aigus du losange, se voit une formation claire arrondie, i laquelle se distingue une petite étoile achromatique, peu é\(A gnêe de la surface du vitellus, et que je désigne sous le nom do] micrasler. L'axe de l'ensemble de la figure est nettemeBtl indiqué iiar une ligne brisée, divisant l'ensemble de l'ii eu deux moitiés à peu près semblables. Cette figure est s logue à celles que j'ai représentées planche XIX, figure 1 et StM

(Obj. 1/18 à Imm. hom. de Zeiss, chambre claire). Les difiârences proviennent probablement en grande partie de ce que l'orientation n'est pas la même : dans ces figures l'image n'est pas vue exactement en conpe : l'aster externe, qui n'est en définitive qu*nn hémiaster, ne se trouve pas exactement dans la conpe optique de l'œuf.

Les amas centraux des asters, les plaques stellaires et les deux qrstëmes de radiations sont très apparents. Il y a, dans chacune de ces figui*es, deux groupes d'éléments chromatiques, répondant aux deux plaques de la figure 15 (pi. XVII). Dans chacun d'eux on distingue quatre éléments (fig. 2); mais ils sont autrement gi*oupés que dans les plaques décrites plus haut n y en avait quatre aussi dans les objets représentés figures 1 et 3 ; mais ils ne se trouvaient pas dans un même plan. Les deux groupes d'éléments chromatiques sont assez éloignés de Taxe de la figm*e. L'hyalosome est subdivisé en deux moitiés, renfermant chacune un groupe d'éléments chromatiques. Les figures 1 et 3 montrent chacune deux micrasters équatoriaux. L'un des deux, dans la figure 1, est beaucoup plus rapproché de la surface du vitellus que l'autre. Us siègent dans des masses sphéroïdales claires, auquelles aboutissent des groupes de filaments périphériques. Les trois figures montrent une tendance manifeste à la subdivision de l'ensemble de l'image en deux moitiés. Cette division est déjà accomplie, en tout ou en partie, dans les systèmes de radiations, dans les plaques stellaires et dans le deuthyalosome.

La figure 16 (planche XYU) est surtout remarquable par l'obliquité de l'axe de fuseau, qui tend à se placer parallèlement à la surface du vitellus, après avoir été, au début, normal à cette sm*face (fig. 15). La plaque stellaire interne est complètement subdivisée. Chaque groupe chromatique se constitue de deux petites plaques adjacentes, renfermant chacune 4 globules chromatiques. Dans le plan équatorial se Toit distinctement un micrasier; il occupe le centre d'une zone claire délimité pai* un cercle de granulations.

L'œuf représenté figure 17, montre que la plaque stellaire

25fi

iiiteiue peut s'étendre considérablement en surface et devenir I presque plane. Dans ce cas, l'amas polaire moulé sur la plaque, f est lui même fort applati,

La figure 19 montre le dédoublement complet du faseattj primitif en deux fuseaux secondaires. T>i\as chacun de ceuz-eij l'on distingue deux groupes d'éléments chromatictnes, l'un &| droite, l'autre à gauche de l'axe du fuseau. Chaque groupe sel constitue de deux plaques chi'omatiques et chacune de celles-àj comprend au moins deux globules.

La figure 1 de la planche XVin représente encore lesl deux fuseaux jumeaux, mais dans une position ditférente. Les plaques st«lIaii'BS sont divisées en deux sous-plaques, dont l'une donne insertion aux filaments périphériques accessoires. , Les axes des deux fuseanx dérivés sont encore à peu prèsd parallèles l'un à. l'autre et normaux à la surface du vitelIas.J

Les figures 2, 3, 4, 5, 6 et 7 montrent la réduction prol gressive des éléments fibrillaires des fuseaux. Pendant cetteJ réduction la position relative des deux iiiseaux change; aprèsl avoir été complètement séparés l'un de l'autre, les deux fuseaux' i tendent à se coufonih'e de nouveau; cependant les. deux moitiés du deuthyalosome restent constamment Lien distinctes; il arrive un moment où la droite qui réunit les deux corps clairs, pourvus de leurs éléments chromatiques ou, ce qui revient au même, le plan équatorial du fuseau primitif, se trouve dirigé normalement à la surface du vitellus (fig. 6 et T). L'axe ds J l'eusemble de la figure a subi une rotation de 90° et lesl figures 6 et 7 de la planche XViH, comparées aux figures \ précédentes, ne peuvent laisser aucune doute sur la réalité dô cette rotation. Des deux corps clairs, l'un est maintenant dirigé vers l'extérieur, l'autre vers le centre de l' oeuf et l'on ■ voit, entre eux, une plaque formée par les résidus des élémenta f fibrillaii-es et des plaques stellaires des fuseaux.

Le corps clair externe, avec les éléments chromatiques! qu'il reulerme, va être éliminé poui- donner naissance aaJ second globule polaire; le corps clair interne reste dans IbJ vitellus (pi. XVUI, fig. s),

De tont le fuseau de direction il ne reste, au moment de l'expulsion du second globule, que les éléments que nous ayona représentés planche XVIU, figure S.

Trois faits importants se dégagent de l'exposé qui précède :

1' Le deuthyalosome pourvu, au moment de sa naissance, de deux éléments chromatiques se divise en deux parties, dont l'une est expulsée pour constituer le second globule polaire, tandis que l'autre reste dans le vitellus.

2" A peine le deuthyalosome a-t-il pris naissance, qu'il se forme autour de lui, aux dépens du protoplasme ambiant, une figure très compliquée qui rappelle, à certains égards, les figures karyokinétiques. Elle parait avoir poiu' point de départ l'apparition, en deux points opposés du deuthyalosome, situés l'un et l'autre dans un rayon de l'œuf, de deux centres d'attraction. Des asters se forment autour de ces points comme centres. L'externe est adjacent à la surface du vitellus. Mais les éléments qui entrent dans la constitution de cette figure complexe ne sont pas employés à fonner le globule polaire : ils ont en grande partie disparu au moment de l'expulsion du globule.

3" La figure exécute, dans le vitellus, une rotation de 90° et le plan de séparation entre les deux moitiés du deuthyalosome ne répond pas à l'équateur du fuseau de direction, mais à l'axe du fuseau. A la suite de sa rotation, l'axe du filseau, qui se confondait au début avec l'axe de l'œuf, est venu se placer peipendiculairement à cette direction radiaire. La raison d'être et la signification des détails de structure que j'ai figurés et partiellement décrits nous échappe totalement pour le moment.

Les phénomènes préalables à l'élimination du second globule polaire difierent, en beaucoup de points, de ceux qui préparent la genèse du premier globule. Mais les trois conclusions que je viens de formuler s'appliquent aussi bien à la formation dn premier globule qu'à celle du second. S'agit-U dans l'un ou dans l'autre cas d'un division cellulaire? les globules polaires sont-ils des cellules nées par voie

EDOCABD VAN BENEDEN.

de division aux dépens de la cellule œuf? Je ne le pense pas : les phénomènes préalables à l'expulsion des globales ce laissent pas que de présenter une certaine analogie avec les figures karyokinétiques; mais, dans toute division cellulsàre indirecte, les extrémités du fuseau achromatique sont les lieux de formation des noyaux dérivés; les éléments chromatiques.! du noyau en voie de division se portent vers ces centres. Les globules polaires, au contraire, ne se forment non aux pâtes de la figure dicentrique; ils ne répondent pas aux centres des asters : l'expulsion se fait dans le plan équatorial qui, primitivement tangentiel, devient plus tard radiaire, tandis que la. ligne des pôles, qui était d'abord nonnale à la sorfiice, devient secondairement tangentielle.

Depuis l'époque où les lignes précédentes ont été écrites et où la planche XVIII a été exécutée j'ai réussi i, obtenir d'excellentes prépai'ations colorées qui m'ont permis de pousser. beauconp plus loin l'étude de la constitution et de la conjugaison des pronucleus. Les résultats auxquels je suis arrivé. m'ont engagé à reprendi-e l'étude de la formation du pronucleus femelle, à laquelle se lie intimement celle du second globule polaire. J'ai donné dans la planche XYIIIiis qaelques figures complémentaires relatives à ces phénomènes.. Elles confirment pleinement les conclusions formulées cidessus; mais elles me permettent de préciser davantage quelques détails. Ces préparations ont été obtenues traitant par le carmin boracique les utérus de femelles Jetées vivantes dans de l'alcool à 40" et préparées après six mois de séjour dans ce liquide. Les œufs de la partie inférieure des utems ont continué à vivre et se sont normalement développés dans l'alcool. L'alcool ne travei'se qn'avec une extrême lenteur les enveloppes ovnlaires et il n'arrive eu contact avec le viteUus qu'après des semaines. Pendant ce t«mp.« le vitellus se segmente, l'embiyon se forme peu i. peu et l'on trouve, en remontant l'aterus à partir île son embouchure, tous les stades du développement de l'embryon depuis la foiTuation du second globule polaire.

La figure 1 (pi. XvUJL&w) représente à peu près le stade que j'ai dessiné planche XVni, fig. 4. L'ensemble de Timage, qui répond au second fiiseau de direction, au second amphiaster de rebut des auteurs, ne peut pas être assimilé au fuseau qui prend naissance quand un noyau se divise. On peut en dire autant de la figure ypsiliforme, qui précède la formation du premier globule polaire. Cependant, et c'est là certes l'un des caractères les plus apparents de l'une et l'autre image, lors de la formation des globules polaires aux dépens des résidus de la vésicule germinative, comme lors de la division/ d'une cellule par voie indirecte, il apparaît, dans le protoplasme cellulaire, au contact de l'élément nucléaire, et cela en deux points opposés pris comme centres, des images stellaires que l'on ne peut interpréter qu'en admettant qu'ils révèlent l'existence de deux centres d'attraction. De là une certaine analogie d'aspect entre les images qui caractérisent une division cellulaire indirecte ou karyokinétique et celles qui apparaissent dans l'œuf lors de la formation des globules polaires. Les noms employés tant par Biitschli que par Fol, pour désigner ces dernières images, reposent sur le rapprochement que ces auteurs ont cru pouvoir faire entre les phénomènes préalables à la formation des globules polaires et ceux qui caractérisent une vraie division cellulaire. D'après mes observations ce rapprochement ne repose que sur des apparences trompeuses. C'est pourquoi je propose de substituer aux dénominations de fuseaux de direction et d'amphiaster de rebut le nom de " figui-es pseudokaryokinétiques. „ Chez rascaride du cheval la première figure pseudokaryokinétique est ypsiliforme; la seconde, celle qui donne naissance au second globule polaire a une tout autre forme.

La figure l(pl.XVill6w) est à peu près symétrique; elle est divisée par une véritable plaque médiane, réunissant entre eux les deux pôles, c'est-à-dire les amas centraux des deux asters. Cette plaque, qui répond à l'axe de la figure, est radiairement dirigée. L'amas central de l'aster externe confine à la surfa^ du vitellus, où il donne lieu à une légère saillie. Il repose sur

EDOUAHD VAN BEHEDEN.

la plaque stellaire externe, contournée en demi cercle. De celle-ci partent les rayons divergents de l'étoile. La plaque stellaire interne est brisée, de fe^on à forme un V ouvert en dedans. Le sommet du V se continue dans la plaque médiane, , comme c'était aussi le cas dans les œufs que nous avons représentés planche XVUi, fig. 4, 5 et 7. Dans chaiine moitié de la i figure, k une ceitaine distance de la plaque médiane, se trouve un corps clair, arrondi, dans lequel s'observent deux plaques chromatiques formées chacune de quatre globules allongés, très avides de carmin, réunis entre eux pai- une substance ] moins chromopldle. Ces globules sont groupés deux par deux. Cette composition des éléments chromatiques de la figure, à ce stade et à tous les stades subséquents, est très constante; seidement les globules sont plus ou moins nettement séparés ■] les uns des autres : dans certains cas les quatre globules d'une même plaque chromatique paraissent soudés en un seul; d'autres fois la plaque semble constituée de deux parties; et alors on reconnaît nettement, dans certains cas, que chacune . de ces dernières est manifestement composée de deux globules.

La figure 2 ne diffère de la précédente que par l'indinaison J de la plaque médiane de la figure pseudokaryokinétiqne. Au lieu d'être dirigée radiairement, c'est-à-dire normale & , la surface de l'œuf, la plaque médiane est oblique. L'amas central de l'aster externe est moins distinct; il ne fait plus ^ guère saillie à la suiface. Les plaques stellaires tendent à se j confondi'e avec la plaque médiane. Un faissean de fibrilles j rattache à la surface l'un des deux corps clairs. Le point vers j lequel converge le faisseau se trouve au centre <rune saillie < vitellîne tiès claire et nettement circonscrite pai' un sillon, i Je donnerai à cett« saillie du vitellus, limitée par un sillon , circulaire, le nom de saillie périglobulaii-e.

La figure 3 montre la plaque médiane de la figure pseudo- ( kai-yokinétique beaucoup plus obliquement diiigée qu'au stade . précédent. Elle est devenue presque tangentielle. La plaque médiane se confond avec les plaques stellaires en un disque unique qui, à la coupe, piésente l'apparence d'une bande

foncée. Celle-ci est fixée à la surface en un point qui répond an centre de l'ancien aster externe, dont on ne (b'stingue plus les rayons. A son extrémité profonde la plaque se divise en deux branches divergentes, comme aux stades précédents. La biffurcation répond à l'aster interne de la figure pseudokaryokinétique primitive. La plaque règne suivant la ligne des pôles de cette figure; mais de radiaire qu'elle était, elle est devenue à peu près tangentielle. La saillie périglobulaire est moins considérable ; la plaque médiane se trouve dans un plan mené par le sillon périglobulaire.

En même temps la position des corps clairs pourvus d« leurs éléments chromatiques a complètement changé. L'un des deux est devenu externe; il confine à la surface du vitellus; il se trouve toujours à quelque distance de la plaque médiane; mais cette distance est beaucoup moins grande que dans la figure 1. Complètement plongé dans le vitellus aux stades précédente, il n'est plus maintenant entouré par le corps vitellin que sur les côtés et suivant sa ùuce profonde. Le corps clair interne se trouve à la face interne de la plaque médiane. Il a notablement augmenté de volume et se montre constitué de deux portions, pourvues l'une et l'autre d'une masse chromatique, dans laquelle on distingue tantôt deux, tantôt quatre parties. Je crois qu'il y en a toujours quatre; mais j'ai déjà dit plus haut que les quatre éléments sont intimement unis deux à deux, au moyen d'une substance unissante moins chromophile que la matière qui constitue les globules proprement dite. Le corps clair interne n'est autre chose que le pronucleus femelle. Toujours il se constitue, au moment de sa formation, de deux moitiés ai^acentes, parfois même complètement séparées et écartées l'une de l'autre. Chaque moitié a sa plaque chromatique propre. L'on remarque que la zone claire qui entoure les élémente chromatiques et qui dérive du deuthyalosome est maintenant délimitée par une ligne de granules punctiformes. De semblables granules se voient aussi dans l'épaisseur de la zone claire; ils sont souvent rangés en lignes régulières,

EDOCARD VAN BENBlOEIt.

parmi lesquelles quelques-unes, radiairement dirigée*, relient i les éléments chromatiques au contour du pronucleas. Ces 1 gTanuIes pimctîformes paraissent reliés entre eux par des j fibrilles d'une extrême ténuité. Granules et fibrilles sontj parfaitement achromatiques.

Le corps clair externe est le second globule polaire; Mj aussi renferme deux plaques chromatiques formées chacnnsl de quatre globules groupés deux par deux. Les êlémentaT chromatiques sont adjacents au contour du globule, du cdtAl externe. Chacon d'eux se prolonge en un filament achromatique très distinct, (|ui se diiige vei-s la plaqne médiane. De semblables filaments, également achromatiques, relient à la plaqne médiane les éléments chromatiques du pronucleus, qui eux j aussi sont souveAt marginalement placés {pi. XVTU&is, fig. 5)i |

La figure 4 montre un stade un pen plus avancé : le glohula polaire et le pronucleus se trouvent l'im et l'autre dans un même rayon de l'œuf, tandis que la plaque médiane, fort réduite, est dirigée perpendiculairement à ce rayon. Cette plaque, qui se confond avec le plan limite de la saillie périglobulaire, se reconnaît encore, à mi distance, entre les deux corps clairs. Le globule polaire est à nu suivant une grande partie de sa surface. Il fait plus fortement saillie. L'éœi- i nence périglobulaire est pins réduite. Les fibrilles acliro- 1 matiques. qui rénnisseut le globnle polaire et le pronucleus ^4 la plaqne médiane, sont bien visibles.

La figure 5 représente un stade pins avancé. Le glo polaire est complètement à nu par suite de la disparition de ' la saillie périglobulaire. Je pense que la substance de l'éminence rentre dans le vitellus. Le globule polaire se trouve appliqué par une assez large surface contre le vitellus, au fond d'une légère dépression, suivant laquelle l'on distingns ] encore très nettement la plaque médiane déilonhlée. Mais tandis ] qu'aux stades précédents le corps clair était écarté de la plaque, (fig. 1, 2. 3) il est maintenant adjacent & cet élément. Les 1 fibrilles achromatiques qui relient à la plaque médiane les éléments chromatiques marginaux du globule polaire et dn

pnmadeiis présentent, à ce stade. leur plus grande netteté. Je pense qne ces fibrilles ne sont autre chose que les fibrilles axiales qui, lors de la formation de la seconde fi^re pseudokaiyokinëtique rattachaient les éléments chromatiques aux pôles de la figure. Ces pôles confondus dans la plaque médiane se trouvent par suite de la réduction progressive de cette plaque, interposés entre les deux corps claii*s et occupent par conséquent le milieu de la figure pseudokarj'okinétique trans* formée.

L'identité de composition et Téquivalence du globule polaire et du pronucleus femelle sautent aux yeux dans la figure 5. Les seules difiiërences que Ton puisse signaler sont les suivantes : le pronucleus est un peu plus volumineiLx que le globule polaire. Tandis que le contour du globule polaire est marqué par une ligne très nette, continue et brillante, le contour du pronucleus est punctué. Le pronucleus n'est pas immédiatement adjacent à la plaque médiane; la poition interne des filaments achromatiques est donc en partie intranucléaii'e, en partie extranucléaîre. Il n'en est pas ainsi pour le globule polaire.

La figure 6 montre une réduction plus complète de la plaque médiane. Les fibrilles achromatiques, qui se dirigent vers cette plaque et s'y insèrent, parallèles entre elles au stade précédent^ convergent maintenant vers le point de la surface du vitellus oti siège le dernier vestige de la plaque médiane. Le globale polaire est toujours intimement uni au vitellus par toute sa jBbu» profonde applatie. Il présente d'ailleurs la même composition qu'au stade précédent. Le pronucleus femelle est d^ plus éloigné de la plaque médiane; le faisseau de fibrilles achrtnnatiques qui le relie à cette plaque s'est allongé. Le pramideus se constitue manifestement de deux lobes; il montre un contour ponctué et une zone corticale claire et achromatique; les éléments chromatiques ont augmenté de volume; ils sont moins homogènes qu'au stade précédent.

La figure 1 de la planche XlXbis montre le pronucleus libelle encore relié au globule polaire par un cordon homo-

EnorAfiU VAN BENEDEN.

gène, qui n'est autre chose que le faisseau des fibrilles achrtK^ matiquea agglutinées euti-e elles. D aboutit à un point de !& 1 surface du vit«llus qui répond à l'ancienne plaque niédiane..r L'on voit le cordon homogène se prolonger au delà de cfl-l l)oînt et se continuer, à travers le globule polaire, jusques e les éléments chromatiques de ce globule. Du côté du pronu-i cleus, composé de deux moitiés semblables, il s'insère ( . |;n^.((W*v l'échancrure qui délimite ces deux moitiés ; mais on ne peut \aM poursuivre h. l'intérieiu- de l'élément nucléaire. C'ast ce mêmel cordon que j'avais déjà aperçu antérieurement à mes demiéree'V observations et que j'ai représenté planche XVIII, figure ft C et planche XIX, figure 4, 5 et C. Bientôt toute trace de ixà cordon disparaît et le pronucleus femelle cesse d'être relié at J globule polaire.

Les conclusions formulés plus haut, en ce qui concerne i«^ genèse du second globule polaire, se trouvent donc pleinement confirmées par mes observations plus récentes, qui m'ont permis de préciser plus exactement la mai'che du phénomène.

Que le globule polaire est l'équivalent du pronucleus femelle et qu'on ne peut lui attribuer la valeui' d'une cellule, cela ressort clairement, non seulement de l'étude du mode de fonnatioa^ des deux éléments, mais aussi de la similitude de leur com tution, au moment rte l'exiiulsion du globule. Le second globt polaire se constitue, comme le pronucleus femelle à son d d'une masse daire, qui n'est autie chose que l'une des m du deuthyalosome ; il est délimitée par un contour achrom tique, auquel on ne peut attribuer la valeur d'une couche c laire. H ressort clairement de l'examen des figures 3, 4 (pi. XVmJîi) qu'il se produit dans le protoplasme de l'ém nence périglobulaire une véritable solution de continuité. 1 globule polaù'e présente déjà sou contour net, avant d'êtr expulsé par ce ti-ou. Les fig. 3 et 4 (pi. XVLLT&is) sont t fait démonstratives à cet égard, et l'identité de constitntioi du globule polaire et du pronu<^leus femelle ressort avec é dence d'images comme celle que j'ai représentée (même planche). Le globule polaire renferme 2 amas clirom

RECUERCUËS Slli LA FÉC0NDAT10^. 207

tiques marginaux et externes, comme le pronucleus femelle. Chacnn de ces amas. se constitue de deux petits masses cliromatiques, se colorant vivement en rouge par le carmin, reliées entre elles par un cordon de substance moins chi^omophile. Les deux masses sont manifestement formées, dans certains cas, de deux globules distincts plus ou moins intimement unis l'un à l'autre. H n'est pas douteux qu'ils n'existent dans tous les cas; mais parfois ils ne sont pas reconnaissables.

La constitution du premier globule polaire, que Ton trouve dans tous les œufs, applati à la ÛLce interne de la première couche périvitelline, est la même. L'on peut s'en assurer facilement quand les globules sont vus, non pas de profil, à la coupe optique de l'œuf, mais de face; ils se projettent alors sur le vitellus et comme tous les éléments chromatiques se trouvent à peu près dans un même plan, il est beaucoup plus aisé de les compter et d'analyser leur groupement Tandis que le pi*emier globule polaire se détache du vitellus et se fixe à la face interne de la première couche périvitelline, aussitôt après sa formation, le second reste adhèrent au vitellus où on le i*etrouve à tous les stades subséquents.

II. Des changements que subit le vitellus pendant cette période; formation de la seconde couche périvitelline.

Au moment de la formation du premier globule polaire le vitellus remplit complètement la cavité délimitée par la couche périvitelline. Les espaces plus ou moins étendus que l'on observe entre cette couche et la surface du vitellus, que j'ai représentés sur un grand nombre d'œufe, sont un produit artificiel résultant de ce que les réactifs employés déterminent une rétraction du corps ovulaire. Ce retrait ne s'observe jamais sur les œufs vivants. Cette remarque s'applique également aux stades ultérieurs du développement. Un retrait physiologique du vitellus ne commence qu'api-ès l'achèvement de la seconde couche périvitelline et après l'expulsion du second globule polaire (Voir pi. XIX, fig. 10).

268 EDOUARD VAN BEINEDEN.

J'ai dit pins haut qu'au moment de rélimination du premier globule polaire tout le vitellus devient obscur et granuleux; les gouttelettes hyalines et les réticulations du protoplasme ont disparu (pi. XVII, flg. 3, 5 et 6). Cependant, indépendamment des cercles concentriques que l'on observe autour du pôle et des particularités de structure, qui permettent d'affirmer qu'il existe à ce moment un axe de structure et des indices évidents d'une symétrie bilatérale de l'œuf, on constate que la couche corticale du vitellus a un autre aspect que celle qui entoui-e le spermatozoïde (pi. XVI, flg. 6 et 6). Dès que la seconde figure pseudokaryokinétique s'est constituée, toute la partie corticale du vitellus redevient claire (pi. XVJLL flg. 15). L'emploi de forts grossissements permet de reconnaître que cette couche corticale plus transparente reprend une stinicture réticulée bien manifeste (pi. XVII, fig. 5 et 7). On remarque bientôt l'apparition, dans la couche corticale claire, d'un contour circulaire vaguement indiqué, divisaat cette couche périvitelline en une zone interne qui passe insensiblement à la masse granuleuse du vitellus (pL XVJJL, fig. 16, 17, 18, pi. XVIU, fig. 1, 3, 6 et 7). Ce contour devient de plus en plus net, et, au moment de l'expulsion du second globule polaii'e, la zone externe s'est complètement séparée de la zone interne. Celle-là a donné lieu à la formation d'une membrane épaisse, la seconde couche ou zone périvitelline; celle-ci est devenue la couche périphérique du globe vitellin. Le globule polaire se forme à la limite entre les d^iz zones.

Dans le^ préparations à l'alcool, la seconde couche périvitelline en voie de formation, alors qu'elle commence seulement à se séparer du vitellus, montre déjà des stries irrégulièrenient concentriques (pi. XVII, fig. 16, pi. XVHI, fig, 1); elle est rarement homogène; au contraire, dans les préparations à l'acide nitrique ou à l'acide acétique glacial, elle ne montre pas ces lignes concentriques, elle parait parfaitement homogène et hyaline, au moment où elle devient isolable (pi. XVm, fig. 8). Sur le vivant elle est partout accolée à la &ce interne de la première couche vitelline; mais sous l'action des acides

les deux couches se décolent par places et s'écartent plus ou moins Tune de Tantre (pi. XVni, fig. 8). Quand cette couche a atteint son complet développement elle présente, sur le frais, on aspect bien particullei* : il semble qu'elle soit composée de fibrilles s'entrecroisant entre elles et fortement enchevêtrées ; - ■ l'on peut même y distinguer deux assises, l'une externe plus granuleuse, l'autre interne d'apparence fibrillaire. J'ai essayé de représenter planche XIX, figure 10, l'apparence que présente cette couche sur le frais. Ije premier globule polaii^e se trouve toujours interposé entre les deux couches périvitellines. Le second globule n'est éliminé qu'après la formation de la seconde couche.

Aussitôt après l'achèvement de la seconde couche périvitelline et la formation du second globule polaire, le vitellus commence à se rétracter : il prend invariablement une forme sphéroïdale; une espace périvitellin apparaît entre les couches périvitellines et le vitellus et le second globule polaire suit le corps ovulaire dans son retrait : il reste appliqué contre le globe vitellin rétracté. En cela le second globule paraît, à première vue, se comporter tout autrement que le premier : celui-ci reste adliérent à la face intenie de la première couche périvitelline : on le trouve invariablement placé, au stade (lue nous considérons, entre les deux couches (pi. XIX, fig. 7, 8 et 10).

Les caractères de la seconde couche périvitelline ne s'observât bien que sur les œufs frais. Si l'on soumet à l'action de Palcool des œufs comme celui que j'ai représenté, d'après le vivant, planche XIX, figure 10, les membmnes ovulaires opposent pendant des semaines entières un obstacle infranchissable à l'alcool. Mais il anive un moment où l'œuf meurt, et où l'alcool pénètre. Il se produit aussitôt des altérations profondes dans les caractères de la seconde couche périvitelline; le feutrage fibiillaii-e si particulier et si caractéristique de cette couche dispai*ait; il devient impossible de distinguer la seconde couche périvitellme; elle se confond avec le liquide qui occupe l'espace périvitellin proprement dit.

H semble que la seconde couche périviteUiiie se liquéfie coi plètement; car dans beaucoup d'œufs le globe vit«llin rétracté et durci ae montre immédiatement adjacent au contour interne de la première couche périvitelllne; celle-ci ne subit aucmie ' altération. Dans beaucoup d'œufa traités par l'alcool et moni dans la glycéiine, tout l'espace qui s'étend entre la premî^ couche périvitelline et le vitellus se montre strié radiairem* Les stries, très nettes sont tantôt dj'oites, tantôt inconrées toutes dans le même sens (pi. XlXbis, fig. 1); mais en tons cas une même strie peut se poursuivre aisément dans toute son étendue : elle semble s'insérer d'une part à la face interne de la première couche périvitelline, d'autre part au vitdlns. Plus la moindre trace de la seconde couche si distincte, pendant la vie, dn liquide périvit«lUu. U semble donc qne la substance constitutive de la seconde couche périvitelline ait des propriétés fort semblables à celles du liquide périvitel et, à mon avis, il foat considérer la seconde couche périvitelli et le liquide vitellin comme une seule et même formation li rement différentiée dans sa portion externe.

Mais quoiqu'il eu soit de cette manière de voir, il ressort ce qui précède, que le vitellus se déban-asse, pendant seconde période de sa maturation, d'une partie notable de substance; cette élimination se fait en deux poussées; 1' précède l'expulsion du premier globule polaire, qui se ratti à la première couche périvitelline; l'antre prélude an rejet second globule polaire et se continue après la formation cet élément. Les couches périvitellines sont-elles nn prodl de tranformation de la couche snpei'ficielle dn corps ou bien sont-elles un produit de seciétion rejeté par le vite] Si l'on va an fond des choses l'on reconnaîtra que ces qm tions n'ont aucune portée, en ce sens, qu'une sécrétion 6'aocomplissant imiformément suivant toute l'étendue de la Sor&Câ d'un élément cellulaire ne peut être distinguée d'une trai formation supei-ficielle. Tout ce que l'on peut constater l'observation c'est que les matériaux qui doivent servir l'élaboration des couches périvitellines s'amassent à la péi

cune ntAj^H

phérie du yitellas où ils forment une conche continue. Au débat il n'est pas possible de décider la question de savoir s'il fisLut voir dans le contour externe ou dans le contour interne de la couche la limite du globe vitellin; couche périvitelline et vitellus ne font quun; mais plus tard il devient évident que le contour interne de la couche répond à la surface du vitellus; les deux choses sont bien séparées. La question de savoir s'il faut donner à ce phénomène de genèse le nom de transformation ou de sécrétion est oiseuse. H en est de ces couches périvitellines de l'œuf comme des substances intercellulaires en général. Elles sont engendrées par le protoplasme cellulaire à la périphérie de la cellule.

Pendant la seconde période de la maturation ovulaire, il se dépose, à l'extérieur de chaque œuf, à la face externe de la membrane vitelline, une couche gi-anuleuse qui se colore vivement en rouge par le carmin, en bleu foncé par l'hématoxyline, alors même que l'œuf est encore parfaitement vivant et que les enveloppes ovulaires proprement dites s'opposent au passage de la moindre trace de matières colorantes. Si on examine cette couche granuleuse avec des grossissements sufiSsants, on remarque qu'elle se constitue de petits corpuscules ou de bâtonnets, allongés dans le sens du rayon de l'œuf, rangés les uns à côté des antres. Us donnent à la couche une apparence striée, les stries étant toutes radiairement dirigées. Au début les corpuscules sont plutôt arrondis, comme je l'ai représenté pi. XIX, flg. 3.

Les œufs utérins sont agglutinés les uns aux autres au moym d'une substance visqueuse, homogène ou granulée, qui gonfle beaucoup sous Faction de l'acide acétique; elle se coagule par l'alcool et se teinte en rose par les matières carminées. Cette substance est probablement un produit de sécrétion de l'épithélium de l'utérus. Je pense que la couche èk bâtonnets, qui revêt les œufs utérins, est un produit de différentiation de cette substance : par l'acide acétique les bâtonnets gonflent, s'allongent considérablement et tendent à fie confondre avec la substance agglutinative interovulaire.

Les œa& renfermés dans la partie inférieure de l'utems présentent donc de dehors en dedans les enveloppes suivantes :

1<^ Une couche, formée de bâtonnets, dont Torigine est extiu-ovulaii-e : c'est une enveloppe formée par apposition.

2^ Une membrane ovo-spermatique très mince. C'est la membrane \itelline complétée, au niveau du micropyle, par la membrane d'un zoospeime.

3<* Une première couche périvîtelline.

4<* Une seconde couche périvitelline, à laquelle il faxit rattacher le liquide périvitellin qui baigne immédiatement le globa vitellin rétracté.

Au moment de la libération du second globule polaire 1^ vitellus se constitue manifestement de deux couches : un^ couche périphérique claire et réticulée et une masse médullaire gianuleuse et plus sombre. Celle-ci se trouve déprimée, du côté où elle fait face au pronudeus femelle en voie de formation, pai* un espace clair assez volumineux, adjacent an noyau femelle (pi. XIX, fig. 4, 5 et 6). Celui-ci a une forme arrondie; il est délimité par un cercle de granules particuliers.

Les figures 13 et 14 de la planche XVn permettent de supposer qu'il s'agit là d'une foimation qui, par son origine, se rattache au plan équatorial du fuseau; le corps clair est venu s'interposer entre le pronudeus femelle et le centre de figure de l'œuf, après que le fuseau a subi sa rotation. A la surface du vitellus l'on distingue parfois très nettement un ou même deux cercles concentriques au pôle (pi. XTX, fig. 5 et 6). L'interne, plus petit, plus voisin du pôle supérieur de Tovule, est marqué par un sillon circulaire. Le globule polaire occupe le centre du cercle ou, tout au moins, un point voisin de ce centime. Le second, bien reconnaissable dans Tœuf représenté figure 4, semble indiquer une division de la masse vitelline en deux portions, dont l'une renferme les restes du zoospeime, tandis que l'autre se rattache au pronudeus femelle dérivé de la vésicule germinative (pi. XTX, fig. 4). H semble reproduii-e une limite que nous avons souvent observée à des stades moins avancés du développement de l'œuf et que nous avons signalée plus haut.

Ces particularités ne s'observent pas dans les œufs traités par Talcool et si Ton distingue chez eux une couche corticale et une niasse médullaire, ces couches présentent d'autres caractères que dans les œufs traités par l'acide nitrique. Le spermatozoïde et le pronucleus mâle qui en provient sont entourés d'une masse médullaire plus claire; puis vient une zone intermédiaire chargée de globules arrondis, enfin la péririphérie du vitellus est dépourvue de ces globules. (Voir pi. XVm et XYmhis).

Après la formation des pronucleus, quand les deux éléments nucléaires se sont rapprochés l'un de l'autre, le vitellus montre une striation radiaire manifeste. Elle s'observe bien sur le vivant (pi. XIX, flg. 10) et mieux encore dans les œufs traités par l'acide acétique glacial (pi. XIX, flg. 9).

m. — CShangements que subit le zoosperme pendant la seconde

période de la maturation de Tœuf.

Le spermatozoïde, modifié conmie je l'ai exposé plus haut, occupe pendant toute la période qui se termine par l'expulsion du second globule polaire et la libération de la seconde couche périvitelline le centre géométrique de l'œuf. Dans toutes les préparations bien colorées l'on distingue nettement son noyau chromatique au milieu d'un corps sphéroïdal faiblement teinté en rose et entouré lui-même, soit totalement soit partiellement, d^une auréole formée de gros globules chromophiles. L'amas coloré qui se constitue de ces divers éléments occupe le milieu d'une portion claire et peu granuleuse du vitellus. (Préparations alcooliques pi. XVil, fig. 15 à 18, pi. XVin, flg. 1 à 7.) La forme, le volume et la constitution du noyau varient d'un œuf à l'autre; mais les difiérences individuelles que l'on constate sont de même ordre que celles que nous avons constatées pendant la période qui précède l'expulsion du premier globule; ils ne sont nullement en rapport avec le degré de maturation de l'ovule. Le noyau chromatique se montre parfois constitué, comme au début, de granules plus avides

de matières colorantes, reliés entre eux par une substance moins cliromophile. Ces globules paraissent pouvoir s'écarter ou se rapprocher plus ou moins les uns des autres, peut-être même s'étendre en prolongements. H semble même qu'une vacuole claire peut se montrer dans la substance nucléaire (pi. XVn, flg. 1 5). Mais il s'agit là de changements éphémères qui n'indiquent nullement une évolution du noyau du zoosperme. Ce petit nucleus chromatique présente encore, vers le moment de l'expulsion du second globule polaire les mêmes caractères que dans les zoospermes non copules et les variations que l'on constate dans son aspect ne dépassent pas les limites de celles que l'on observe chez les spermatozoïdes libres.

Le corps ou, si l'on veut, la couche périnucléaire est formé d'une substance claire, présentant peu d'afBnité pour les matières colorantes. La forme de ce corps est toigours arrondie; ses dimensions varient légèrement d'un œuf à l'autre. Il est habituellement délimité par un contour bien net; parfois même on distingue manifestement un double contour dans les préparations à l'acide nitrique; la ligne externe est alors plus foncée et bien régulière; l'interne est plus pâle et sinueuse (pi. XYU, flg. 11). Mais il n'est pas toujours possible, tant s'en faut, de distinguer ce double contour (pi. 'KYUIbis, préparations à l'alcool).

L'auréole est constituée connue précédemment d'éléments globuleux très réfringents, parfois très volumineux et fort avides de matières colorantes (pi. XVII, fig. 11). Le contour externe de l'aui'éole est tout à fait irrégulier. Tantôt elle parait entourer de toutes pai*ts la couche périnucléaire, tantôt elle semble foimer une calotte unilatérale, dont l'extension est variable. Je crois qu'il existe sous ce rapport des différences réelles entre les œufs. Mais il est possible aussi que si, dans certains cas, l'enveloppement du corps sphéroïdal parait complet, il ne l'est pas en réalité, et que cette apparence dépende seulement de l'orientation de l'objet par rapport à l'observateur.

L'aspect de l'aui^éole vaiîe autant que son étendue; la masse

réfringente et chromophile qui la constitue est formée le plus souvent de globules dont le volume et le nombre varient considérablement d'un œuf à l'autre. Cette substance parait douée d'une propriété commune à tous les liquides : quand deux gouttelettes se touchent elles peuvent se confondre en une seule. La limite de l'auréole, assez nettement marquée dans certains œufs (pi. XVn, flg. 11), est tout à fait indécise dans l'immense majorité des cas; les globules constitutifs de l'auréole passent insensiblement alors au vitellus ambiant.

J'ai montré au chapitre précédent qu'une partie du corps du zoosperme, comprenant l'ensemble des éléments achromophiles du protoplasme, se sépare des éléments chromophiles du protoplasme et tandis que ceux-ci se concentrent autour du corps périnucléaire pour donner naissance à l'auréole, ceux-là tendent à se confondre avec le vitellus ambiant. Cependant cette fusion n'est probablement pas encore complète aux stades que nous avons décrits : car dans certains œufs, montrant la seconde figure pseudokaryokinétique déjà constituée, voire même au moment de l'expulsion du second globule polaire, j'ai cru observer encore le contour vaguement indiqué de la portion achromatique du zoosperme (pi. XVil, flg. 10, 11, 16, pi. XVm, fig. 4, 5, 7 et 8).

Pendant la période de formation du second globule polaire on distingue tout autour du zoosperme, au milieu de la masse granuleuse du vitellus, une zone plus pâle, dans laquelle on observe parfois une disposition radiaire (pi. XVII, fig. 16 et 19, pi. XViil, fig. 6). Ces radiations siègent aussi bien dans le protoplasme d'origine zoospermique (pi. XVII, fig. 11, pi. XViii, fig. 5) que dans le protoplasme ovulaire qui entoure le zoosperme transformé.

Daus certaines femelles presque tous les œufs montrent encore, à ce moment de leur évolution, un résidu du corps réfringent du zoosperme, soit à la périphérie du vitellus, (pi. XVJJLLftw, fig. 3 et 6) soit rejeté dans l'espace périvitellin (même planche, fig. 5).