OUTRE

des cultures, ils présentaient les variations, au sujet desquelles nous avons insisté dans la première partie de ce travail ; nous n’y reviendrons done pas. Mais il faut nous arrêter plus longtemps sur les streptocoques. Ces streptocoques, qu’ils aient été isolés dans des selles normales ou diarrhéiques, se sont toujours présentés à notre observation avec des caractères analogues, à part quelques différences de détail. Dans les examens directs des matières fécales, après coloration par la méthode de Gram, ou mieux par la méthode

d’Escherich, ils se présentent généralement sous forme de diplo-

coques, à grains arrondis, plus souvent un peu allongés, ovoïides ou avec une extrémité plus ou moins amincie ; mais à côté on rencontre des chaînettes de 4, 6, 8 cocci, et des amas irréguliers plus ou moins volumineux. Sur les tubes de gélose ensemencés avec les fèces, alors que les colonies de streptocoques sont à côté de colonies de colibacilles, ces colonies sont souvent plus grosses et plus opaques que ne le sont habituellement les colonies de Streptocoques. Mais repiquées sur gélose en culture pure, elles revêtent les caractères ordinaires : elles sont fines et transparentes. Il semble donc qu’il y ait pour le colibacille et le streptocoque un phénomène de satellitisme cultural analogue à celui observé par Metchnikoff pour le vibrion cholérique et les microbes favorisants, par H. Meunier (1) et Grassberger pour le bacille de Pfeiffer et le staphylocoque ; cependant le fait n’est pas constant, et une condition nécessaire, pour qu’il soit observé, est que les colonies soient peu serrées; dans le cas contraire, en effet, les colonies

de streptocoques sont fines et ne présentent rien de spécial. Ces

streptocoques troublent le bouillon, sans dépôt ou seulement avec un dépôt tardif et peu abondant. Ils poussent généralement sur la gélatine à la température du laboratoire, et ne la liquéfient pas. Le lait tournesolé reste bleu ou bien vire au rouge, en même temps que la coagulation se produit; il n'y a rien de fixe. Ces streptocoques poussent bien dans le milieu de Marmorek et parti-

(1) HENRI MEUNIER. Satellitisme des colonies du bacille de Pfeiffer dans les cultures mixtes, Compt, rend, de la Soc. de biol., 11 juin 1898.

culièrement dans un mélange de deux parties de sérum de lait et d’une partie de bouillon. Dans ces divers milieux, et principalement dans les milieux liquides à côté de diplocoques, on trouve en nombre variable des chaînettes plus ou moins longues et la forme des cocci est variable comme dans les matières fécales. Une culture en bouillon de 24 heures, inoculée sous la peau d’une souris blanche à la dose de 1 centim. cube est généralement inoffensive; dans quelques cas rares l’animal meurt en trois ou quatre jours. Aux doses de un demi-centim. cube et même de 1 centim. cube l’inoculation sous la peau de l'oreille du lapin ne détermine aucun phénomène, ou seulement un peu de rougeur et de gonflement passagers, mais pas d’érysipèle.

Comme on le voit, les streptocoques, que nous avons isolés de l'intestin des jeunes enfants, ne présentent aucun caractère particulier constant et fixe, qui permette d'en faire un groupe à part dans la grande espèce des streptocoques. Ils ne se différencient pas sensiblement d'autres échantillons de streptocoques que nous avons isolés du lait, de la peau, de la gorge, ou d’appendices enlevés par M. Jalaguier. Nous pensons qu'ils ne doivent pas être isolés des autres streptocoques. N'ayant pas étudié les échantillons du streptococcus enteritis d'Escherich (1), del’entérocoque de Thiercelin (2),nous ne saurions dire si ceux-ci diffèrent des nôtres.

Tels sont donc les caractères des colibacilles et des streptoco-

(1) Le streptovoceus enteritis d'Escherich se présente sous forme d’éléments arrondis ou en lancette, groupés généralement en diplocoques, beaucoup plus rarement en chaînettes, pouvant compter jusqu'à 20 ou 30 éléments, rarement en amas comme les staphylocoques. Il est difficile à cultiver et sa vitalité dans les milieux de culture est très limitée ; c’est sur la gélatine qu’il se conserve le mieux. Ses caractères varient avec chaque cas. Sa virulence est très faible pour ia souris blanche, — Par ses caractères, il se rapproche du pneumocoque et du méningocoque intra-cellulaire; mais l'absence de capsule, la possibilité de donner de longues chaînettes, le peu d'action sur la souris blanche permettent de le ranger parmi les streptocoques. (ESCHERICH. Loc. cit., 28 mars 1899.)

(2) THIERCELIN. Sur un diplocoque saprophyte de l'intestin susceptible de devenir pathogène. (Comptes rend. de la Soc. de biol.,\ 15 avril 1899.) Ce strepto-

coque présente, À peu de choses près, les mêmes caractères morphologiques que le streptocoque d’Escherich. Il est virulent pour la souris à la dose de 1c. c.

ques, dont nous avons étudié l'association. Pour établir le rôle de cette association dans la pathogénie des infections gastro-intestinales, il convenait tout d’abord, suivant le plan que nous nous étions proposé, d'établir expérimentalement la réalité d’une association active de ces germes isolés de l'intestin. Avant nos recherches, quelques auteurs se sont occupés de l’association strepto-colibacillaire. F. Widal et F. Besançon (1) ont montré que l'association des streptocoques et des colibacilles de la bouche normale, les uns et les autres dépourvus de virulence, permet d'obtenir des races de streptocoques capables de produire chez le lapin l’érysipèle, la suppuration, la septicémie, l’endocardite végétante. Motta Coco (2), dans ses études sur le pathogénie d'une forme spéciale de fièvre intestinale, différente de la fièvre typhoïde et de la malaria, observée chez des soldats revenus d'Afrique, a constaté que l’injection dans l’estomac simultanément de colibacilles et de streptocoques ou de staphylocoques provoque chez les animaux un catarrhe gastro-intestinal intense qui ne produit pas le colibacille seul. Mais ces observateurs ne se sont pas placés dans les mêmes conditions d'expérience que nous.

Les expériences, dont nous avons donné le résumé à la Société de biologie, le 28 janvier 1899, portaient sur 10 échantillons de colibacilles isolés dans des selles normales ou pathologiques et 15 échantillons de streptocoques ; 3 seulement de ces colibacilles tuaient, en moins de vingt-quatre heures, des cobayes d’un poids moyen de 300 grammes, à la dose de 1 centim. cube de culture en bouillon de dix-huit à vingt heures inoculée sous la peau ; les autres étaient sans action à cette dose. Parmi les 15 échantillons de streptocoques, 10 provenaient de l'intestin des mêmes enfants, 3 avaient été isolés du lait en usage à l'hospice des

0 F. WipaL et F, BESANÇON. Endocardite végétante expérimentale sans traumatisme valvulaire par streptocoque salivaire. (Soc. méd. hôp., 20 avril 1894. ) — F. WiDAL. Streptococcie. In 7». méd. ct thérap. de Brouardel, Gilbert el Girode I, avril 1895, p. 315.

(2) MorrA Coco. Il coli bacillo ed i cocchi piogeni nell’ etiologia delle febri intestinali ; ricerche sperimentali. G@azz. degli Ospidale, 23 janvier 1898.

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Enfanis-Assistés, 1 provenait d'une bulbe de pemphibus et 1 d’une angine; tous étaient sans action sur le cobaye en inoculation sous-cutanée à la dose de 2 centim. cubes de culture en bouillon. En mélangeant les cultures de ces deux microbes dans des proportions convables, nous avons vu que le mélange était plus actif que chacun des microbes pris à part, qu'il tuait les cobayes à des doses inférieures aux doses mortelles pour chacun d’eux. Sur 20 groupements différents obtenus en variant les combinaisons, nous avons obtenu 15 fois des résultats positifs. Les quantités de chacun des microbes mis en présence étaient d’ailleurs variables. Avec les colibacilles non virulents à 1-centim. cube, il a fallu, pour amener la mort rapide des cobayes, associer tantôt un demi-centim. cube (5 fois), tantôt 1 centim. cube (8 fois) à 1 centim. cube ou à 2 centim. cubes de streptocoques ; avec les colibacilles virulents à 1 centim. cube, la dosede colibaciiles nécessaire, pour tuer par association avec les mêmes quantités de streptocoques, a été de 1 demi-centim. cube. Dans 5 cas, l'association a été inactive, même aux doses maxima, que nous avons indiquées.

Poursuivant nos recherches, nous avons étudié l'association de 10 nouveaux échantillons de colibacilles et de streptocoques de l’intestin. Sur ces 10 expériences, nous avons obtenu 6 fois des résultats positifs, 4 fais des résultats négatifs. Dans un des cas positifs, le colibacille, qui était sans action à la dose de 1 centim. cube, tuait, associé à 1 centim. cube de streptocoques, à la dose de un quart de centim. cube un ccebaye de 290 grammes. Dans les5 autres cas positifs, où les colibacilles étaient également dépourvus de virulence, 3 fois les doses nécessaires ont été de 1 centim. cube de colibacille et de 1 centim. cube de streptocoques ; 2 fois, un demi-centim. cube de colibacilles et 4 ou 2 centim. cubes de streptocoques. |

Ce qui frappe tout d'abord dans l'étude de ces faits, c’est que l’association strepto-colibacillaire n'est pas toujours active. Ces différences dans les résultats paraissent tenir pour une part aux échantillons associés. Si, en effet, on associe un colibacille donné successivement à divers streptocoques, on a, d'une façon générale, suivant

my.) Eu les cas, toute une série de faits positifs, ou toute une série de faits négatifs, à part quelques exceptions inévitables; il en est de même, si, inverse ment, on associe à un même streptocoque divers: colibacilles. Il semble donc que certains de ces microbes soient plus aptes à donner des associations actives, et d’autres, des associations négatives.

Un autre fait intéressant se dégage de ces expériences quand on. recherche de quelle manière est mort le cobaye. Si on examine à plusieurs reprises l’œdème développé au point d’inoculation, on constate que les colibacilles, d'abord en moins grand nombre que, les streptocoques, augmentent et finissent prr prédominer, tandis que, inversement, les streptocoques finissent par disparaître. D'autre part, si on ensemence une goutte de sang du cœur, à l’autopsie, sur deux ou trois tubes de gélose, en dilutions successives, de façon à avoir des colonies isolées, on ne constate la plupart du temps que des colibacilles en culture pure; rarement il y a en outre quelques colonies de streptocoques, mais toujours en petit nombre. Le colibacille est donc le seul à se généraliser; le streptocoque n’a qu’une action locale, passagère, de présence. L'animal meurt de colibacillose et non pas de strepto-colibacillose, d'infection mixte. Il semble qu'il y ait là un fait de symbiose microbienne, analogue aux faits signalés par Vaillard, Rouget, Vincent, pour le tétanos, par Besson pour le vibrion septique. Le streptocoque, par sa présence, permet la pullulation locale du coli-. bacille, qui sans cela serait détruit ; il disparaît d’ailleurs, semblant attirer à lui seul toute {l’activité de la défense organique; le colibacille, une fois qu’ilest en quantité suffisante, infecte alors l’organisme, D'ailleurs ce qui estencore en faveur de ce mécanisme, c’est que, sauf de rares exceptions, nous n'avons pas constaté une augmentation notable de virulence du colibacille ainsi isolé du sang du cœur, ni même en inoculant en série un colibacille associé à des streptocoques. Une autre preuve en sa faveur est la nécessité d’inoculer les cultures mélangées ; les mêmes doses, pathogènes dans ce cas, cessent de l'être, si on les inocule en des points séparés, ce qui

montre bien de plus que les doses assez fortes, dont l'emploi est nécessaire, n'agissent pas par leur masse, mais par l’activité propre des microbes, ;

Cette modalité de l'infection chez le cobaye semble tenir à l’animal lui-même, qui est très résistant à l’infection streptococcique. Il ne paraît pas en être de même, si on expérimente sur le lapin, animal beaucoup plus sensible au streptocoque. Comme Widal et Bezançon l'ont vu, la même association strepto-colibacillaire détermine chez lui une exaltation de la virulence du streptocoque, avec lequel on peut obtenir l'érysipèle. Nous avons fait d’ailleurs la même constatation, dans quelques cas où nous avons expérimenté comparativement chez le lapin et le cobaye ; mais les résultats obtenus par nous ont été moins nets chez le premier animal que chez le second. Il ne semble pas d’ailleurs y avoir toujours coïncidence entre l’activité du mélange pour les deux espèces animales ; on peut voir des associations pathogènes pour l’une sans action sur l’autre. Il y aurait là sans doute matière à recherches intéressantes.

Nous avons donc établi que l'association des streptocoques-et des colibacilles isolés des selles des jeunes enfants était active pour le cobaye. Nous avons vu, d’autre part, que les résultats expérimentaux différaient dans une certaine mesure suivant les échantillons. Tantôt l’activité du mélange est très grande, tantôt elle est moyenne, tantôt enfin elle est nulle. Ii fallait se demander, si ces différences étaient en rapport avec l’origine de ces microbes, avec l’état de l'intestin, dont ils avaient été isolés. Si, en effet, un mélange actif pour le cobaye correspondait à un état d'infection gastro-intestinale et au contraire un mélange inactif à l’état normal, il y avait dans cette étude un criterium important pourétablir le rôle de l'association strepto-colibacillaire dans chaque cas donné. Nous avons donc réuni dans ce but des observations d’eufants normaux et d’enfants atteints d'infections gastro-intes-

tinales aiguës ou chroniques.