PRÉSENCE DE SUBSTANCES INHIBITRICES

Dans les essais qui suivent, notre but a été un peu différent de celui que nous nous sommes proposés au début de notre travail. Au lieu de chercher une bonne purification de la laccase nous avons cherché s’il y avait une certaine proportionnalité entre l’activité de la laccase et sa teneur en fer et en manganèse. -— Dans ce but nous avons fait subir à nos préparations diastasiques, des précipitations avec des quantités d'alcool ou d’acétone généralement inférieures au volume de la préparation diastasique utilisée, de façon à obtenir à la fois un précipité actif et un liquide actif, dans lesquels nous avons évalué l’activité, le taux en extrait sec et en cendres sulfatées, et dosé le fer et le manganèse.

Les proportions d’alcool ou d’acétone utilisées pour ces précipitations ont été :

À. — Pour l'alcool à 96°.

1° 1 volume de suc et 1 volume d’alcool.

2° 1 volume de suc et 3/4 de volume d’alcool. 3° 1 volume de suc et 2/3 de volume d’alcool.

B. — Pour l’acétone.

1° 1 volume de suc et 1 volume d’acétone.

2° 1 volume de suc et 3/4 de volume d’acétone. 3° 1 volume de suc et 1/2 volume d’acétone.

2, pr

Voici le schéma de ces précipitations :

activité précipité (alcool ou acétone \ extrait sec

” ayant été éliminé) ramené $ cendres sulfatées

2 au volume primitif. fer et manganèse

Préparation ra alcool ou acétone diastasique vol. fixé ci dessus , DE | activité

X liquide (alcool ou acétone | extrait see ayant été éliminé) ramené | cendres sulfatées au volume primitif. Fee Mn

Toutes ces précipitations sont faites à basse température, et l’alcool ou l’acétone sont éliminés comme précédemment.

Les déterminations d’activité ont été faites selon la technique indiquée, mais de plus nous avons cherché à mettre en évidence l'influence inhibitrice de certaines impuretés, en déterminant par exemple l’activité d’un précipité après addition du liquide actif résultant de la précipitation, ce liquide ayant été inactivé au préalable par la chaleur, et inversement, l’activité du liquide additionné du précipité préalablement inactivé par la chaleur.

Nous ne donnerons que les résultats obtenus par une précipitation alcoolique et une précipitation acétonique.

SUCRE sr e 4 volume.

Précipitation alcoolique ....... LebOl à 988 3/4 de volume.

Extrait sec Cendres sulfatées en g.

p. 100 cm3 Fer en mg.

p. 100 cm3 Manganèse en mg. p. 100 cm Activité /C. D.

extrait sec Titre en Mn Mn en y activité O. D.

100 cm3 de suc 6,500138,02| 4,4 | 39,0

a Te) [=]

Précipité alcoolique 2-0902-2700 Liquide surnageant 9,5 | 1,40 | 15,0 126,0| 18,3 Précipité + liquide inactivé.|4,900 - Liquide + précipité inactivé.| 950

Liquide + précipité,

ESS ot (=)

En: ASE

Droite Ft SUCRE ee 1 volume.

D OR ERDERRERS SAS RS AGÉLON ER ere 3/4 de volume.

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