‹ Recherches Sur La Purification De La LaccaseChapitre 44 sur 82 · NV · texte numérisé non relu

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et sel, ajoutée d’un seul coup au suc diastasique, également refroidi pendant 10 minutes dans de la glace fondante ; après une agitation énergique, il se forme un abondant précipité brunâtre. Une centrifugation rapide permet d'obtenir un liquide qui se sépare parfaitement du précipité.

A. Liquide. — Le liquide ainsi obtenu, est limpide, d’une coloration jaune brunâtre.

Son pH est voisin de 9,2 — Il renferme un excès de

carbonate de sodium et de ce fait la teneur en extrait sec et en cendres sulfatées est notablement augmentée.

B. Précipité. — Le précipité obtenu, se rassemble bien par centrifugation ce qui permet une décantation facile. Sa coloration est brun noirâtre. Il est pratiquement inactif. Il contient une partie des impuretés qui accompagnent la laccase.

B. Etude de l’action du carbonate de sodium sur le suc de l’arbre à laque.

Nous avons étudié la répartition de l’activité, du manganèse, du fer et de l’azote dans le liquide, et le précipité, obtenu par l’action du carbonate sur des préparations de la laccase. Nos essais ont porté sur trois échantillons A.B.C. de suc de l’arbre à laque, d’origines différentes.

Liquid activité Suc À ou B ou GC. 50 cm 4 Iqui es 50 3 manganèse + Solution carbonate es ramene à cm fer et azote de Sodium N. : ie

le mélange est agité à ner basse température et Le .Précipité - \ . .

centrifugé. ramené à 50 cm l Rte Remarque. — La concentration diastasique est déter-

minée selon la technique indiquée précédemment. La solution diastasique obtenue après action du carbonate

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de sodium est ramenée par des solutions tampons au pH optimum de 6,7. — Les dosages du manganèse, du fer et de l'azote, ne présentent aucune difficulté. Cependant la préparation des cendres sulfatées est un peu plus difficile, du fait de la présence d’un excès de carbonate de sodium. Lors de la calcination de l'extrait sec, celui-ci gonfle, se boursoufle, forme un véritable champignon charbonneux, qui tend à sortir de la capsule. Il faut prendre la précaution d'utiliser des capsules d’une capacité suffisante. On peut aussi décomposer le carbonate de sodium en excès par l'acide chlorhydrique, évaporer à sec au bain marie et calciner ensuite, en opérant comme précédement.

Voici les résultats de ces trois essais :

Concentration diastasique C. D.

Manganèse en mg. p. 100 cmô Fer Azote en mg. p. 100 cmë

Suc A 50m O!SOiCMS ER Re 367116,8| 8,3 |89,6/44,9

RE ee ramené à 100 cm°| 305] 1,6| 1,4 [35,8 5,2 50 emÿ + Sol, CosNas N. 50 em N . | préc. ramené à 100 cm3 12]14,9) 7,3 [51,9/12,40

Suc B 50 cm3 + H,30 50 cmi......., cs... 1375 148,5/12,7 |98,1135,3 ) »°

MCD x liq. ramené à 100 em] 1413 | 5,7 3,4 [36,7

50 cm3 + Sol, CoyNas N. 50 cmÿ RARES Fe FT ramené à 100 cm} 0 |43,2] 9,05/60,5| 1

Sue C 50 cm3 + HO 50 cm8... ....... 4850 |61,2/16,3 |96,312,6

Sue C : liq. ramené à 100 cm°| 3880 8,91.5,7 132,8 50 cm3 + Sol. CoyNao N. 50 cmè NS

préc. ramené à 100 em] © |52,9141,3 [62,3

On voit d’après les chiffres obtenus que seul, le liquide surnageant est actif, et que la perte en activité ne dépasse pas 20 p. 100. Nous ne pouvons pas déterminer l’activité, c’est-à-dire le rapport

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