‹ Recherches Sur La Purification De La LaccaseChapitre 59 sur 82 · ARE · texte numérisé non relu

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Les essais d’adsorption ont été effectués à divers pH, avec une suspension d’alumine B dont les caractéristiques étaient les suivantes.

10 cem* de cette suspension d’alumine B fournissent

1 AUNEEXITALASEC AS IDDEELO PERTE TEE EPP EEE 0 g.,456 2° Un résidu AlO, après calcination.......... 0 g.,360 a) Préparation du suc purifié. — 60 em° de Nuoc’Son

sont traités par un volume égal d’une solution de carbonate de sodium, d’après la technique indiquée précédemment. É

Le liquide actif obtenu par centrifugation est précipité par un égal volume d’acétone ; après une nouvelle centrifugation, le précipité est ramené avec de l’eau à son volume primitif, puis de nouveau précipité par un égal volume d’acétone, ce précipité recueilli par centrifugation redissous dans un peu d’eau, est desséché dans le vide sulfurique, pour chasser l’acétone, il est ensuite ramené à son volume primitif avec de l’eau distillée. Le pH de ce suc ainsi purifié est de 9.

b) Obtention des divers pH. — Des essais préliminaires nous ont permis d'établir les pH ci-dessous en utilisant l’acide acétique dilué au 1/10.

10 cm$ de suc ainsi purifié + 0 cm3 d’ac. acétique au 1/10

+ eau q.s.p. 15 cm$ donnent un pH = 9 10 cm° de suce ainsi purifié + 0 cm$,5 d'ac. acétique au 1/10

+ eau q.s.p. 15 cm3 donnent un pH = 8 10 cm$ de suc ainsi purifié + 1 cm? d’ac. acétique au 1/10

+ eau q.s.p. 15 em$ donnent un pH = 6,5 10 cmë de suc ainsi purilié + 1 cm$,5 d’ac. acétique au 1/10

+ eau q.s.p. 15 cmŸ donnent un pH = 5,9 10 cm3 de suc ainsi puriffé + 2 cm° d'ac. acétique au 1/10

+ eau q.s.p. 15 cm? donnent un pH = 5,2

10 cm3 de suc ainst purifié + 2 cmÿ,5 d’ac. acétique au 1/10 + eau q.s.p. 15 Cm$ donnent un pH = 4,6

= Mg

c) Adsorption. — L’adsorption de ces diverses préparations diastasiques à des pH différents, est réalisée de la façon suivante : 10 cm de la suspension d’alumine placés dans un tube à centrifugation, sont longuement centrifugés.

Le culot d’alumine ainsi obtenu est remis en suspension dans la préparation de laccase elle même, aux pH obtenus comme ci-dessus.

Après une agitation mécanique d’une demi-heure, chaque essai est centrifugé, et on mesure l’activité du liquide surnageant.

La quantité de la laccase disparue, mesure son adsorption.

RÉSULTATS ET COURBE REPRÉSENTATIVE. — Les résultats sont indiqués dans le tableau suivant :

Unité Unités 5 ue diasta- U’ RER siques X 100 siques Res U Ur SAC POTINÉ AN re. e 1.600 == == Suc adsorbé au pH = 9 1.250 350- 21,8 — aa pH = 8 900 700 43,7 — au pH = 6,8 1.050 550 87,8 —— audpH = 15795 950 650 40,6 — AU pHE—=2502 1125 475 29,5 — au pH — 4,6 1.125 475 29,6

et voici la courbe représentative de cette adsorption en fonction du pH.

adsorption

40 ee... eee e +f-

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