TECHNIQUE —— CHOIX D’UNE METHODE DE DOSAGE

Les méthodes de dosage du glutathion réduit utilisent son pouvoir réducteur ou son pouvoir de provoquer une absorption de C2. Elles sont volumétriques ou colorimétriques.

La méthode colorimétrique de G. Hunrer et B. A. EaGLes [36], proposée antérieurement par For et Looney pour le dosage de la cystéine, utilise la coloration fournie par le réactif phospho-tungstique en milieu alcalin.

La méthode volumétrique de TunnicLiFFE consiste essentiellement à mesurer l’absorption de 0? dans des conditions convenables de réaction et de température dans un appareil du type manomètre différentiel de BARCRoOrT.

Bwer et Werrer [12] ont récemment proposé d'isoler d'abord le glutathion dans les filtrats trichloracétiques par précipitation avec du lactate de cadmium à un pH de 6,8 à 7 et de doser ensuite dans le précipité le glutathion réduit. Il faut éviter avec soin, lors de la précipitation, un pH trop alcalin qui favorise l'oxydation du groupement sulfhydrile. On se sert comme indicateur d’une solution de bleu de bromothymol et l’on ajoute une solution d'hydroxyde de Na à 2 p. 100 jusqu'à virage au pH de 6,8 à 7. Nous avons essayé cette méthode, mais le virage est très difficile à saisir pour les extraits trichloracétiques des tissus, surtout lorsqu'ils sont très colorés, ce qui est le cas le plus fréquent chez les

Invertébrés.

La méthode à l’iode de TunnicrirrE a été la plus employée, et c’est elle que nous avons utilisée. Elle consiste à oxyder par l’iode les groupements R — SH, en prenant comme indi-

EhLirbres

cateur de la fin de la réaction le nitroprussiate de sodium en solution ammoniacale.: