BACTÉRIOLOGIE

Bacille fusiforme.

Vincent décrivit, dans un article sur la pourriture d’hôpital, publié dans les Annales de PTnastitut Pasteur en 1896, un bacille fusiforme qu’il considérait comme l'agent de cette maladie ; et qu'il avait retrouvé dans quelques cas d’angine pseudo-membraneuse. Sa première observation sur ce point remonte à 1893, mais ‘ son travail complet ne date que de Mars 1898.

Bernheim, le ‘48 juin 1897 puis le 11 février 1898, donna une étude plus approfondie du même bacille dans la stomatite ulcéro-membraneuse. Plusieurs auteurs, Lemoine, Dopter, Raoult et Thiry, Abel, de Stoecklin, Rispal, Sacquépée, Ch. Nicolle, Freyche, Sehneïder, Lichwitz ' et Sabrazès, Fotiadés constatèrent la présence de bacilles fusiformes dans les ‘lésions ulcéro-membraneuses de la bouche et de‘la gorge et contrôlèrent les résultats de Vin: cent et de Bernheim.

Jusqu'ici il est impossible d’affirmer que ce bacille ait été décrit antérieurement. Bernheim et Abel admettent cependant qu’il a été mentionné par Miller dans les pulpes dentaires purulentes, et Abel veut voir en lui le micro-

organisme décrit par Plaut, en 1899, dans cinq cas d’an-

gine légère où il ne trouva que des bacilles et des spirochaëtes de Miller: |

C’est aussi l'avis de Plaut qui, dit Panoff, « trouve ces: « deux microorganismes semblabes à ceux décrits. par « Bernheim et admet comme lui qu'ils sont les facteurs « véritables de l’angine. ».

D’après Abel et Panoff, Heim aurait signalé avant Bernheim sur une amygdale qu’on croyait atteinte de diph, térie, de grands vibrions, « des bacilles spirilliformes. » et de petits spirochaëtes.

En somme, aucune identification n’est totalement. démontrée, même celle du bacille fusiformeet du bacille de la pourriture d'hôpital, car. malgré la même disposition du microbe dans la fausse membrane la même forme et et les mêmes réactions avec les diverses matières colorantes, on n’a pu jusqu'ici obtenir de cultures pures. Or, seule l’inoculation positive de celles-ci constituerait la preuve définitive et incontestable d’une. complète

identité.

Frottis d'angine à bacilles fusiformes et spirilles.’

HO

Formes et dimensions. — Quand on examine un frottis d’une angine ou d’une stomatiteulcéro-membraneuse, après coloration à la thionine phéniquée, on voit sur la préparation une quantité considérable de bacilles longs de 6 à 12 p. présentant deux extrémités amincies et un centre légèrement renflé de 0 x. 6 de diamètre en moyenne.

Ces dimensions sont d’ailleurs assez variables ; dans la salive etle tartre dentaire du singe nous avons observé un microbe ressemblant fortement à celui que nous décrivons, mais légèrement plus gros et plus long.

Tantôtle bacille est rectiligne, tantôt il est faiblement incurvé sur lui-même en virgule. Le plus souvent, les éléments sont isolés, mais parfois plusieurs sont réunis par leurs extrémités, formant une suite de 2, 3 ou 4 individus.

On observe cet assemblage fréquemment chez le singe. Unis deux à deux, ils se mettent généralement en S.

Dans la majorité des préparations les bacilles fusiformes sont isolés ou en amas irréguliers. Vincent les a vus en faisceaux composés d'éléments divergents presque radiés.

Ce microbe présente des formes d’involution, on constate dans sa continuité des espaces clairs, séparant des parties plus sombres. Cette disposition particulière est surtout apparenté quand on emploie la thionine phéniquée où la fuchsine de Ziehl diluée.

Panoff l’a constatée à l’état frais.

Les espaces clairs sont en nombre variable, 3 à 5 dans chaque élément en moyenne. De dimensions inégales, ils

remplissent les vides laissés entre les points sombres, qui

Me eux sont plus réguliers. L'ensemble du microbe ressemble à une gousse remplie de pois.

Ces parties transparentes ne sont pas des spores, car ainsi que nous venons de le dire elles sont irrégulières, non réfringentes et de plus elles ne se colorent point par les procédés qui teignent habituellement les spores; ce sont de simples vacuoles.

Vincent dit avoir observé cette forme vacuolaire dans les cas déjà traités par un antiseptique; quant à nous, elle nous a paru assez constante et ne pas devoir se rattacher à cette cause, puisque nous l’avons retrouvée dans tous nos examens chez le singe et dans la plupart des stomatites et des angines non encore soumises au traitement.

Vincent décrit d’autres formes d’involution dans lesquelles le bacille affecte de grandes dimensions, est granuleux et se colore mal. Ces bacilles ont des contours irréguliers, leur protoplasma est échancré. Parfois leur centre est considérablement renflé, incolore, et les contours de ce renflement sont simplement marqués par un fin linéament ; ils rappellent la configuration d’une navette.

D’après Bernheim, on trouve dans quelques cas rares, un rerflement ovale qui absorbe avec plus d'intensité les matières colorantes que le reste du microbe.

Coloration. — Pour obtenir une bonne coloration, Ch. Nicolle conseille de traiter préalablement la préparation pendant quelques secondes par l’éther sulfurique pour dissoudre les substances grasses.

Le bacille fusiforme se colore très facilement par Îles

colorations simples. La thionine phéniquée, employée par

Vincent et Nicolle, nous a donné de bonnes préparations de ce microbe. Il prend très bien également la fuchsine (Bernheim), le liquide de Ziehl dilué au 1/4 (Vincent), le violet de gentiane phéniqué (Raoult et Thiry), et les solu- ‘tions aqueuses simples de bleu de méthylène et de bleu de toluïdine.

Bernheim a constaté qu’il prend avidement le bleu de méthylène, mais cependant moins fortement que le bacille diphtérique.

Panoff a fait la même constatation pour les autres colorants.

Lichwitz et Sabrazès ont obtenu avec le chloro-iodure de zinc une réaction brun acajou très légère qui se détache sur le fond jaune des préparations.

Panoff admet que les réactions de Gram, de Weiïgert et de Claudius, considérées comme négatives par les différents auteurs, décolorent complètement le bacille dans ses formes ordinaires, mais que par contre les formes à structure vacuolaire et granuleuse prenant plus fortement le colorant, ne le cèdent qu’incomplètement à l'alcool à 95° ou au chloroforme, même si l’action de ces dissolvants est assezlonque.

Mobilité. — La question de la mobilité du bacille fusiforme a été agitée à différentes reprises. D’après Bernheiïm ils avancent lentement en vacillant. À Raoult et Thiry ils ont semblé présenter tantôt un mouvement oscillant, tantôt être complètement immobiles,. Nicolle, Lichwitz et Sabrazès, les considèrent comme privés de mobilité. De Stoecklin, quiles a observés en youtte pen-

dante, les a vus complètement immobiles, Dans un cas

st es : À

NOT où les bacilles lui semblaient mobiles, Panoff essaya vainement de mettre des cils en évidence. Sur six examens qu’il fit dans le but de rechercher la mobilité, dans 4 cas il n’eut apparence d'aucun mouvement et dans 2 apparence de mouvemements spontanés.

‘Nous même avons récherché dans un cas, si les bacil- les etles spirilles étaient doués de mobilité. Ce résultat fut négatif.

Cultures. — Jusqu'ici, tous les essais de culture du bacille fusiforme faits dans les milieux les plus variés en présence de l'air, n’ont donné aucun résultat.

En milieu anaérobie, la plupart des expérimentateurs ont également échoué dans leurs tentatives. Cependant il a été possible à Abel d'obtenir dans un cas sur trois, deux générations du bacille sur sérum sanguin. Dans ce cas les bacilles ne cultivèrent pas en colonies isolées, mais seulement à côté de colonies de grands diplocoques qui se montrèrent en petit nombre. Passé deux générations, il futimpossible d’obtenir de nouvelles cultures. Thiry a obtenu quelques cultures du bacille fusiforme au milieu d’autres microorganismes anaérobies.

Nous avons essayé, avec M. lé D' Nicolle, d’obtenir des cultures à l’air libre sur sérum coagulé. Nous n’avons pas été plus heureux dans les cultures anaérobies par piqure, d’abord sur agar coagulé, puis, sur un mélange solidifié, composé de 2/3 d’agar pour 1/3 de sérum humain.

Malgré ces essais malheureux nous pensons avec Abel qu’il ne faut pas désespérer d’arriver à cultiver ce mi-

crobe. Abel fait remarquer que sa culture pourrait bien

Us être sous la dépendance d’un phénomène de satellitisme semblable à celui de l’influenza.

Inoculations. — Divers essais ont été pratiqués en vue d’inoculer le bacille fusiforme aux animaux, mais aucun n’a donné de résultat.

Vincent a cherché vainement à reproduire les lésions en inoculant les fausses membranes à la surface des gencives du lapin, dans les fosses nasales et sur la conjonctive. De Stoecklin ne fut pas plus heureux que Vincent.

Raoult et Thiry à la suite d’une injection sous la peau d’un cobaye d’un exsudat d’amygdalite riche en bacilles et en spirilles, constatèrent la formation d’un abcès qui s'ouvrit en quinze jours. Dans le pus examiné à différentes reprises, ils trouvèrent des streptocoques, qui n'étaient pas apparents dans l’exsudat de l’amygdalite et de rares bacilles. Des ensemencements pratiqués avec ce pus ne donnèrent naissance qu’à des colonies de streptocoques. Panoff n’obtint rien après inoculation sur la conjonctive traumalisée, sur des brûlures cutanées, chez les cobayes ou les rats blancs. Des expériences tentées pour reproduire la stomatite ulcéro-membraneuse chez le singe après excoriation de la gencive ne nous donnèrent aucune lésion.

Habitat. — Le bacille fusiforme est un hôte assez fréquent de la cavité buccale, mais toujours, sauf sous l’influence de certaines inflammations où il peut se multiplier légèrement, il n’existe qu’en petite quantité.

Indépendamment de la stomatite et de l’angine ulcéro-

membraaeuse, où on le retrouve en nombre vraiment con-

too sidérable, le plus souvent associé à de très nombreux spirilles, on a pu l’observer dans quelques autres lésions de la bouche et de l’amygdale.

Sa présence a été signalée en petite abondance dans la salive et le tartre dentaire (Abel). Dans six préparations que nous avons faites avec le produit derâclage de dents, nous avons pu l’observer 5 fois en éléments épars et peu nombreux. Toutes les fois nous avons trouvé un mombre plus important de spirilles.

-Salomon dans 30 affections buccales diverses : stomatites mercurielles, plaques muqueuses, angines lacunaires, n'avait vu que des bacilles et des spirilles très rares.

Nous avons repris, en partie ces recherches, nous en donnerons les résultats avec ceux déjà observés.

Panoff a examiné l’exsudat de quatre chancres syphilitiques buccaux, et a trouvé; une fois quelques rares bacilles de Vincent, mais plus petits en général, que dans les formes habituelles, une autre fois, un assez grand nombre de spirilles. Dans les deux autres cas ainsi que sur trois chancres mous intrabuccaux (?) il n’a obsérvé aucun de ces microbes.

Dans un cas d’ulcérations typhiques de la bouche et du pharynx, pas de bacilles fusiformes, quelques rares spirilles ; dans une stomatite aphteuse, ni bacilles ni spirilles. C’est aussi ce que trouva Ch. Nicolle dans un cas semblable inédit.

Sur trois plaques muqueuses buccales, Panoff vit une seule fois ces deux microorganismes en très petit nombre. Sur cinq examens de préparations ayant la même origine trois fois nous trouvâmes de rares bacilles fusi-

Lesueur 5

Sem, | dec formes et des spirilles, deux fois l’examen fut négatif. Bernheim a noté la présence du bacille dans les dents cariées, dans deux gingivites d’origine dentaire, nous l'avons vu en assez grande quantité, sans cependant qu’il atteigne le nombre observé dans les stomatites et angines ulcéro-membraneuses. Il était accompagné de spirilles et de beaucoup de microbes variés.

Nicolle fit la même constatation dans une gingivite hémorrhagique.

Dans des préparations provenant d’une femme atteinte de scorbut nous avons vu des spirilles et d’autres microorganismes. |

Vincent a pu constater la présence de quelques bacilles fusiformes développés à la surface d’exulcérations produites par une angine herpétique simple. Dans un même cas nos examens restèrent négatifs. Vincent a vu en explorant les préparations microscopiques de fausses membranes, traitées par le Gram et colorées ensuite par le Ziehl dilué, membranes provenant d’angines à colibacille, à streptocoque et à bacille dipthérique, des bacilles fusiformes isolés, qui, dit-1l, se trouvaient présents au même titre que les autres bactéries saprophytes ou pathogènes existant normalement dans la bouche à côté du microbe spécifique.

Ce qui nous a frappé dans nos recherches sur la flore des diverses affections buccales, c’est la présence constante et en nombre considérable du bacille fusiforme et des spirilles dansles stomatites mercurielles. Sur six cas qu’il nous a été donné d’examiner, toujours ils étaient

présents dans les conditions de fréquence quenous venons

Tes

de signaler. Dans deux cas où il y avait ulcération avec production d’exsudat grisâtre on aurait pu penser, si l’on avait ignoré que les malades prenaient du mercure, que l'on se trouvait en présence de stomatites ulcéro-membraneuses vraies, tant les préparations malgré la présence d’autres variétés microbiennes ressemblaient à celles que l’on a dans cette affection. Si l’on admet, avec Galippe, que la stomatite mercurielle est d’origine microbienne, nous ne sommes pas loin de penser comme les auteurs allemands, qu’on doit la considérer comme une variété de stomatite ulcéro-membraneuse et que les bacilles fusiformes et les spirilles jouent un rôle important dans son évolution.

En dehors de la bouche, le bacille fusiforme a été trouvé dans le pus d’un empyème du sinus maxillaire et d’un abcès prélaryngien (Sabrazès).

Depuis les travaux de Vincent surla pourriture d’hôpitel, il est considéré avec Le spirille comme jouant le rôle principal dans l’étiologie de cette affection. L'identité de ce bacille fusiforme avec celui de la stomatite ulcéromembraneuse et de l’angine de Vincent n'a pu être complètement démontrée faute de cultures et d’inoculatons, mais elle est généralement admise à cause de la similitude de forme, de réactions et de disposition dans les lésions.

Ce microbe est répandu, probablement sur une grande partie du globe, car il a été trouvé dans plusieurs régions, en France, en Allemagne, en Turquie et dans la République Argentine.

Sa présence pouvait être intéressante à constater chez quelques animaux. Chez cinq singes dont nous

avons examiné la salive et le produit de râclage des

Le 99 =

dents, cinq fois nous avons trouvé une bactérie que nous avons considérée comme étant le bacille fusiforme. Trois fois, il était accompagné de spirilles, et chaque fois il y avait d’autres microbes, mais toujours il était en quantité relativement considérable, et souvent dans une préparation il était représenté par autant d’éléments que tous les autres microorganismes réunis.

Chez cette espèce animale le bacille nous a paru un peu plus grand que chez l'homme. Fréquemment incurvé, de forme vacuolaire, il n’est pas rare de voir 2, 3 ou 4 éléments se mettre bout à bout.

La même recherche faite sur 6 lapins, 6 cobayes, un chien, ne nous donna aucun résultat positif.

Associations. — Le bacille fusiforme se rencontre dans les fausses membranes très souvent associé au spirille, mais il y a d’autres microbes existant en petite quantité dans les lésions ulcéro-membraneuses. Ceux-cine semblent jouer qu’un rôle insignifiant ou nul dans l’affection, et n'être là qu’à titre de microbes normaux de la bouche.

Ils sont parfois si peu nombreux qu’on n’en rencontre point sur les frottis et qu’on est obligé pour les découvrir de faire des ensemencements. Comme on pouvait facilement le prévoir, on trouve présents ceux qui habitent normalement la bouche et les agents pathogènes de différentes variétés d’angine.

Le streptocoque et le pneumocoque qui existent dans la bouche des sujets sains (Widal, Bezançon, Griffon) ont été retrouvés dans l’exsudat des angines de Vincent par

Raoult et Thiry et par Panoff.

De Stoecklin, dans le cas étudié par lui, a isolé un

streptocoque et un bacille pseudo-diphtérique non pathogène.

Cette expérience montrant l’inocuité pour les animaux qui en sontles réactifs ordinaires, des microbes associés aux bacilles fusiformes et aux spirilles, engageà penser que ceux-ci seuls sont les agents pathogènes de la maladie.

Bien que le streptocoque puisse être, d’après Vincent, cause d’angines ulcéreuses chez les enfants,sa présence dans les cas qui nous occupent, n'étant le plus souvent révélée que par des cultures, il est tout naturel de penser qu’ilne doit jouer qu’un rôle bien effacé. Peut-être est-ce à lui que sont dues les complications septicémiques que lon a observé quelquefois dans le courant d’une stomatite ulcéro-membraneuse.

Les coli-bacilles, recueillis 19 fois sur 36 prélèvements fait chez des hommes sains au niveau des amygdales par Grimbert et Chouquet, ont été vus dans les angines ulcéro-membraneuses par Vincent. Lemoine Raoult et Thiry, mais toujours à titre exceptionnel. Leur présence, rarement constatée à l’examen direct, a été miseen évidence par les cultures. Le coli-bacille, qui a été trouvé également deux fois sur 4 cas de syphilides diphtéroïdes de la bouche des typhiques, peut causer des angines particulières bien distinctes des angines ulcéro-membraneuses. Nous n’estimons pas qu’il ait un rôle important dans les lésions qui nous occupent. Cependant nous devons signaler ce fait, qu'Escherich, en 1895, trouva dans les membranes et les organes d’un cas d’angine grave avec

ulcération, de courts bâtonnets semblables au coli et, que

= JA — Bernheim pense que le bacille isolé par Frühwald en 1889 dans son étude sur la stomatite ulcéro-membraneuse, bacille dont les cultures dégageaient une odeur de putréfaction semblable à celle de l’haleine des malades, serait peut-être un coli-bacille (Panoff).

Parmi les autres espèces microbiennes signalées par S toos, comme cohabitant avec les bacilles fusiformes et les spirilles, nous pouvons citer les leptothrix, le kommabacillen, le staphylocoque, le coccus conglomératus. Vincent et Nicolle ont vu des coccus.

Bernheim les a trouvés unis au bacille diphtérique, mais dans ces cas il y aurait eu, d’après lui, une véritable superposition des deux maladies. Ainsi associée, la diphtérie se manifesterait localement par une odeur fétide, des fausses membranes grisâtres et sanieuses recouvrant des ulcérations comme dans l’angine de Vincent. Nous avons vu déjà que dans certaines angines diphtériques, Vincent, Roussel, Thiry, Panoff, ont trouvé à côté du bacille de Loeffler, des bacilles fusiformes accompagnés

ou non de spirilles, et n’existant là qu’à titre de microbes vulgaires de la bouche.

SPIRILLES

Parmi toutes les associations au bacille fusiforme, il en est une seule qui mérite vraiment de porter ce nom, c’est l'association du spirille, les autres n’étant que des réunions fortuites et sans conséquence des deux espèces microbiennes.

La présence des spirilles est pour ainsi dire constante, tous les auteurs la considèrent comme telle, et il n’y a que quelques cas rares où leur absence fut remarquée.

Vincent, quia pu observer quelques-uns de ces cas croit qu'ils correspondent à une forme moins grave de la maladie dans laquelle l’ulcération serait presque insignifiante.

La première constatation de spirilles dans la stomatite ulcéro-membraneuse remonte à Pasteur auquel Bergeron avait donné à examiner des produits de cette affection. Ces spirilles auraient été cultivés par M. Netter alors interne de Bergeron, sur de la sérosité d’ascite ou de pleurésie préalablement défibrinée et maintenue à l’étuve à 38°.

Les cultures étaient fortement troubles et exhalaient une odeur infecte. Ces spirilles très flexueux et très mobiles devenaient, dans les cultures, plus larges et moins flexueux.

L’inoculation à un fapin ne fut suivie d’aucune lésion (1)-