XI. — AcCR01SSEME>iT DE i/eMBRYOIN

Le mode d'accroissement de l'embryon est un des problèmes les moins avancés de l'embryogénie générale. Les recherches entreprises pour élucider cette importante question sont peu nombreuses et peu précises ; aussi la plupart des auteurs se bornent à émettre des hypothèses à ce sujet. Je ne m'occuperai ici que de celles qui ont rapport au développement des Poissons.

Chez les Vertébrés amniotes, l'embryon est placé au centre du blastoderme, et celui-ci s'étend sur le vitellus (dans les œufs méroblastiques) d'une manière uniforme, par toute sa périphérie, de telle sorte que l'embryon demeure en place à l'un des pôles de l'œuf, tandis que la fermeture du blastoderme a lieu au pôle opposé.

Chez les autres Vertébrés, l'embryon occupe au contraire une position excentrique et se développe sur le bord du blastoderme, celui-ci entoure le vitellus et sa fermeture se fait immédiatement en arrière de l'embryon.

Kupffer (104), qui s'est posé l'un des premiers la question de savoir comment se produit cette extension, admet qu'elle se fait comme chez les Vertébrés supérieurs, d'une manière égale et excentrique ; le centre du blastoderme reste fixe au pôle germinatif, le bourrelet blastodermique descend progressivement sur le vitellus, parallèlement à lui-môme, suivant des cercles parallèles à l'équateur de l'œuf. L'embryon qui est en connexion avec le bourrelet, l'accompagne dans son mouvement de descente, tout en s'accroissant en longueur. La fermeture du blastoderme a lieu en un point du vitellus diamétralement opposé à celui oi^i se trouvait le germe (fig. 27).

L'embryon s'accroît par intiissiisception dans toute sa longueur.

En tout cas Kupffer n'oxclut pas la possibilité d'une déviation de ce processus un peu avant la fermeture du blastoderme, et Ziegler (200) a noté, en effet, que chez le Rhodeus amar^us le trou vitellin est situé un peu asymétriquement sur le côté du diamètre vertical. Goronowitsch (57) admet aussi ce mode rie formation pour les Salmonidés.

Pour OEllacher (123), la partie épaissie du bourrelet blastodermique, qui donne naissance à l'embryon, reste en place sur un point fixe du vitellus, tandis que le reste du blastoderme s'étend sur la sphère vitelline. Le bourgeon caudal de l'embryon ne change pas de place ; la partie céphaUque s'accroît et suit le blastoderme dans "son mouvement d'extension (fig. 25).

Schémas de l'exlension liu blastoderme à la surf.ire du vilellus de l'œuf des Salinonidcs. — Fi;;. 23. Sclicma d'Œflacher: 1, 2, 3, i, positions occupées successivement par l'extrémité céphalique do l'embyron ; 1', 2', 3', 4', positions correspondantes du bourrelet blastodermique. — Fig. 26. Schéma de His : 1, 2,3, 4, positions occupées successivement par l'e.ttTémité caudaJe de l'embryon; 1', 2', 3', 4', positions correspondantes du bourrelet blastodermique. — Fig. 27. Schéma de Kupller : 1, 2, 3, 4, positions occupées successivement par l'embryon.

His (85) admet, au contraire, que l'extrémité céphalique reste fixée sur le vitellus pendant Textension du blastoderme. L'embryon s'allonge aux dépens de deux formations symétriques du bord épaissi du blastoderme. His (84) a primitivement émis cette hypothèse pour les Plagiostomes et Ta étendue ensuite aux Poissons osseux. Chez ces derniers, le bourrelet blastodermique forme une anse, dont les deux bords se rapprochent pour constituer la gouttière médullaire ; le sommet de l'anse est l'extrémité céphalique; l'extrémité diamétralement opposée du bourrelet est l'extrémité caudale. Le bourrelet blastodermique tout entier se trouve ainsi amené le long de la ligne axiale de l'embryon pour constituer le corps de ce dernier (fig. 2G). Chez les Plagiostomes, l'embryon se formerait de la

nM'ine manière, mais il n') a qu'uno partie du Ijourrelel ijlastodermique qui prend part à la constitution de l'embryon, car celui-ci est complètement formé avant la fermeture du blastoderme.

La théorie de His, ou théorie de la «oncrescence, a été adoptée par Rauber (137) qui a apporté en sa faveur des arouments tirés de la tératologie.

Rauber rappelle que LerebouUet (113) a observé certains œufs de Brochet dans lesquels l'embryon avait une seule tête et une queue, mais dont le corps était séparé longitudinalement en deux moitiés par un espace bl as to dermique, au miHeu duquel se trouvait le trou vitellin, Rauber a également observé des germes monstrueux de Truite dans lesquels, il y avait déhiscence de Tanse embryonnaire; le corps de l'embryon était séparé en deux parties qui se continuaient avec le bourrelet blastodermique et laissaient entre elles un espace vitellin, non fecouvert par le blastoderme. Cunningham (35) s'est rangé aussi à la théorie de His.

Au premier abord, la théorie de la concrescence de His et Rauber est très séduisante ; elle rend bien compte de la position excentrique de l'embryon, toujours en rapport avec le bourrelet blastodermique, et de la fermeture du blastoderme en arrière de l'embryon. L'adjonction à l'embryon du reste du bourrelet blastodermique, lors de cette fermeture, devient très compréhensible puisqu'elle n'est que la continuation du processus de la formation de l'embryon. Cette théorie est cependant contraire à certains faits d'observation et a soulevé des critiques sérieuses de la part de plusieurs auteurs, entre autres de la part de Balfour.

Balfour (9) tire les principaux de ses arguments du développement des Plagiostomes; je n'en citerai que quelques-uns. Il fait remarquer que la gouttière médullaire se ferme en avant plus tôt qu'en arrière, et que cette fermeture commence lorsque Tembryon est encore très court et avant que l'extrémité postérieure ait commencé à faire saillie au-dessus duvitellus. «Après que le canal médullaire est fermé et en continuité en arrière avec le tube digestif par le canal neurentérique, il est évidemment impossible qu'aucun accroissement de longueur ait lieu par concrescence. Si par conséquent l'opinion de His et de

148 RECHERGHES SUR tE DÉVELOPPEMENT

Rauber est acceptée, il faudra soutenir qu'une faible partie du corps seulement se forme par concrescence, tandis que la plus grande partie de la région s'accroît par intussusception. » « Chez VAmphioxus, dit plus loin Balfour, le blastopore est dabord situé exactement à l'extrémité postérieure du corps, quoique plus tard il passe au côté dorsal, il se ferme presque avant l'apparition de la gouttière médullaire ou des somites mésoblastiques, et les replis médullaires n'ont rien à voii avec ses lèvres, si ce n'est qu'ils sont en continuité avec elles, en arrière exactement comme chez les Elasmobranches.

<( Le vitellus nutritif, chez les Vertébrés, est situé à la face ventrale du corps et est enveloppé par le blastoderme, de sorte que, chez tous les Vertébrés à gros vitellus, les parois ventrales du corps sont évidemment complétées par la fermeture des lèvres du blastopore sur le côté ventral. Si His et Rauber ont raison, les parois dorsales sont aussi complétées par la fermeture du blastopore, de sorte que toute la paroi dorsale, aussi bien que la paroi ventrale de l'embryon, doit être formée parla concrescence des lèvres du blastopore, ce qui est évidemment une réfutation par l'absurde de toute la théorie. » (p. 287 et 288.)

On peut aussi opposer à la théorie de la concrescence des faits qui me paraissent lui être absolument contraires.

His, avec une patience admirable, s'est livré à de nombreuses mesures micrométriques et à des calculs pour déterminer la surface du blastoderme et le volume de l'embryon aux différents stades du développement. 11 a mesuré l'épaisseur de l'ectoderme et de la couche inférieure du blastoderme, le volume des cellules de ces deux couches, et enfin le volume de l'embryon et du blastoderme extraembryonnaire sur des blastodermes mesurant 1™"\7, 2""", 2, 2"""7 et 3""", 2 de diamètre. Ces embryons correspondaient à peu près aux stades A, B, C et D de la Truite, et il les désigne du reste par ces mêmes lettres.

Je ne puis rapporter ici toutes les mesures de His; je me contenterai de donner les conclusions auxquelles il a été amené, conclusions qu'il a résumées dans une note publiée dans Internationale Fischerei. Ausstellung zu Berlm, i880 (Schweiz.)

Le volume d'un embryon de Poisson, immédiatement après l'extension complète du blastoderme sur le vitellus, mesure environ 0,4 millimètre cube, celui de la paroi du sac vi-

tellin environ 0.1 niillinièlit' cnbe ; les deux volumes réunis représentent donc environ 0,55 millimètre cube. C'est un volume égal que possède déjà le germe avant le commencement de la formation de l'embryon, immédifttement après la fin de la segmentation, La transformation totale du germe en embryon et en paroi du sac vitellin a lieu sans que le volume total éprouve une augmentation perceptible. Dans le germe segmenté il y a les matériaux destinés à la constitution du corps, et il suffit de la transformation de ces matériaux pour donner naissance à l'embryon et à ses membranes. His compare ce processus à ce qui se passe lorsqu'un artiste modèle une sculpture avec une masse informe de terre glaise, saus prendre une nouvelle quantité de substance. Le volume des matériaux de formation ne reste constant que pendant la période de formation de l'embryon; pendant la segmentation, le volume du germe a à peu près doublé, et à partir de la période d'accroissement, la masse de l'embryon augmente naturellement d'une façon continuelle.

Je n'ai pas cherché à contrôler les mesures micrométriques de His, parce qu'elles demandent beaucoup de temps et beaucoup trop de peine pour le résultat forcément approximatif qu'elles peuvent donner. Je les admets cependant comme exactes, et je vais chercher à démontrer qu'elles ne prouvent rien au sujet de la formation de l'embryon par concrescence.

His a donné la mesure des cellules embryonnaires jusqu'au stade D; il a trouvé que le volume moyen de ces éléments était :

Ectoderme.

Couche inférieure.

. . 18047 [j. cubes. . .

12120 y- cubes.

En rapportant à 100 le volume des cellules au stade A, on trouve :

Ectoderme. Couche inférieure.

Stade A 100 100

11 résulte de ce tableau que les cellules diminuent de volume du stade A au stade D et qu'à ce dernier stade elles sont environ

quatre fois plus petites qu"à la fin de la segmentation. Le fait n'a rien qui doive surprendre, étant donnée la multiplication des cellules embryonnaires, multiplication qui se traduit sur les coupes par la présence d'un grand nombre de figures cytodiérétiques. Il est évident que, puisque le volume total de la masse embryonnaire ne change pas et que le volume des éléments diminue, ceux-ci doivent augmenter de nombre.

Au stade D, le blastoderme ne recouvre encore que la moitié environ du vitellus, la partie céphalique de l'embryon est à peine ébauchée. His dit qu'au moment de la fermeture du blastoderme le volume total des éléments cellulaires n'a pas sensiblement augmenté, mais il ne donne pas les dimensions de ces éléments. Jusqu'à ce que l'extension du blastoderme ait atteint Téquateur de Tœuf, la surface du bourrelet marginal doit augmenter ; elle diminue au contraire lorsque le bourrelet a dépassé l'équateur.

His a constaté que le bourrelet est formé au stade B par 10 ou 12 rangées de cellules, tandis qu'au stade D il n'en renferme plus que 4 à 6. L'épaisseur va encore en diminuant aux stades suivants ; au stade F, je n'ai plus trouvé que 3 ou 4 rangées de cellules dans le bourrelet.

Je n'ai pas calculé le volume des cellules embryonnaires aux différents stades, je me suis contenté de prendre leur diamètre moyen. J'ai constaté, comme His, que les cellules diminuaient de volume, après la fin de la segmentation, pendant les premiers stades embryonnaires, mais qu'à partir des stades D et E leur diamètre ne varie plus. Du reste, à cette époque, les mesures deviennent très difficiles. Dès que se différencient les principaux organes de l'embryon, les résultats que peuvent donner les mesures micrométriques des cellules sont tout à fait illusoires. Les dispositions que prennent les cellules dans les organes altèrent complètement leur forme primitive plus ou moins arrondie ou polyédrique ; les cellules allongées de l'axe nerveux de l'ectoderme, de la corde dorsale, ne sont plus comparables aux cellules non encore différenciées des premiers stades de l'embryon. Cependant en prenant le diamètre des cellules ectodermiques au stade D et des cellules hépatiques d'un jeune alevin récemment éclos, cellules qui représentent le volume moyen des éléments divers que constituent le corps,

DES l'OlSSONS ossEu:; 151

j'ai trouvé comme mesure moyenne et constante 15 i^. Les cellules cessent donc de diminuer de volume avant la formation complète de l'embryon et la fermeture du blastoderme.

Tant qu'il n'y a pas d'organes différenciés dans l'ébauche embryonnaire il est difficile de trouver des points de repère et de voir si ces points changent de position par rapport au bourrelet blastodermique. Cette observation est au contraire très facile dès que la corde dorsale et la vésicule de Kupffer

Fijî. 28. — Coupe longitudinale d'un embryon de Truite : A, extrémité postérieuie du bourgeon caudal ; B, extrémité postérieure de la vésicule de Kupffer; C, extrémité antérieure de la corde dorsale; D, extrémité antérieure de l'embryon ; P, dernière protovertèbre; P', première protovertèbre.

deviennent nettement visibles soit sur des coupes transversales, soit sur des coupes longitudinales. A partir du stade E, j'ai pu mesurer sur des coupes longitudinales de différents embryons la distance AG qui sépare l'extrémité antérieure de la corde dorsale de rextrémité postérieure de l'embryon et celle AB, qui sépare la paroi postérieure interne de la vésicule de Kupffer de cette même extrémité postérieure. J'ai mesuré également la distance CD qui sépare l'extrémité antérieure de la tête de l'embryon, et la distance qui sépare cette dernière extrémité de la vésicule auditive (fîg. 28).

Ces mesures montrent que, tandis que la longueur totale de l'embryon s'accroît de l'""\90, du stade E au stade H, la distance qui sépare la vésicule de Kupffer de la partie postérieure du bourgeon caudal n'augmente que de Û""",055. Cette partie postérieure de l'embryon n'a donc qu'une croissance insignifiante par rapport à celle du reste du corps. Ryder (154), chez le Belone longirostris ïx^Mva aussi la vésicule de Kupffer à une distance à peu près constante du bord du blastoderme.

La comparaison des valeurs de la distance CD, qui mesure la longueur de la tête, montre également que la [partie de l'embryon comprise entre la terminaison antérieure de la corde

dorsale et l'extréinité céphalique n'augmente pas sensiblement pendant l'extension du blastoderme sur le vitellus. Chez un embryon assez avancé, quelques jours après la fermeture du blastoderme, j'ai trouvé que la distance CD était encore de 0"'",76 tandis qu'elle était de 0'»'",60 au stade E.

C'est donc dans la région BC, comprise entre la partie postérieure de la vésicule de Kupffer et Textrémité antérieure de la corde dorsale que se fait le principal allongement de Tembryon.

Le nombre des protovertèbres augmente assez rapidement ainsi que je l'ai déjà dit, pendant Textension du blastoderme : au stade E, il y en a 3 à 4 de chaque côté de l'axe nerveux ; à la fermeture du blastoderme, l'embryon en possède environ 24 paires. Il est très difficile de déterminer la région dans laquelle se forment de nouvelles proto vertèbres.

Fol (51) a cherché expérimentalement à trouver le mode d'apparition des protovertèbres dans Tembryon de Poulet; en marquant au thermocautère, sur les côtés de Taire embryonnaire, le point où se trouvent les première protovertèbres, il a constaté que ces protovertèbres sont celles du cou ou même de la région céphalique. Fol admet que Tembryon des Vertébrés commence par n'être pour ainsi dire qu'une tête derrière laquelle apparaît de proche en proche le reste du corps. L'observation de Fol confirme ce qui est généralement admis par la plupart des auteurs à savoir que les protovertèbres se développent d'avant en arrière.

En est-il de même chez les Poissons osseux? Chez un embryon de Truite du stade E ayant trois paires de protovertèbres, CP', qui mesure la distance de l'extrémité céphalique de l'embryon à la première protovertèbre antérieure, est d'environ 1™™. Au stade F, chez un embryon à six paires de protovertèbres, CP' est encore de 1™™. Au stade H, chez un embryon à vingt-deux paires de protovertèbres CP, est de l,!""". Ces mesures prouvent que la première protovertèbre antérieure reste à une distance à peu près constante de l'extrémité antérieure de l'embryon ; il me semble donc logique d'admettre qu'il ne se forme pas de nouvelle protovertèbre en avant de la première des trois qui existent au stade E. Cette première protovertèbre antérieure se trouve, en effet, aux stades suivants, à quelque distance en

arrière de la vésicule auditive et immédiatement en arrière de l'extrémité postérieure de Tintestin antérieur. La segmentation transversale des plaques mésodermiques en protovertèbres se t'ait donc chez les Téléostéens, de même que chez le Poulet, d'avant en arrière.

Si d'un autre côté on mesure la distance AP qui sépare la dernière protovertèbre de l'extrémité postérieure de l'embryon, on trouve qu'elle est en moyenne de 0'""i,65 depuis l'apparition des protovertèbres, c'est-à-dire depuis le stade E jusqu'à la fermeture du blastoderme et même quelque temps après. La dernière protovertèbre reste donc pendant les premiers stades du développement de l'embryon à une distance constante de l'extrémité postérieure du corps, comme la première protovertèbre antérieure reste à une distance constante de l'extrémité antérieure de l'embryon. Puisque ni l'extrémité antérieure ni l'extrémité postérieure de l'embryon ne s'accroissent, on devrait en conclure que la partie moyenne subit seule de l'allongement. S'il en est ainsi, les nouvelles protovertèbres ne peuvent provenir que d'une division des protovertèbres préexistantes, car celles-ci sont exactement contiguës. Or, on ne voit jamais une protovertèbre se diviser pour donner naissance à deux autres. Le diamètre des protovertèbres diminue du stade E au stade H, mais leur hauteur augmente; il y a simplement déplacement des éléments qui les constituent. 11 est donc impossible d'admettre que de nouvelles protovertèbres prennent naissance entre la première et la dernière. On se trouve donc amené par le raisonnement à déclarer que l'embryon ne s'accroît ni par sa partie céphalique, ni par sa partie moyenne, ni par sa partie postérieure, ce qui est évidemment absurde. Le raisonnement pêche donc par sa base.

La valeur constante de la distance AP, qui sépare la dernière protovertèbre de l'extrémité caudale de l'embryon, ne prouve pas, en effet, que cette partie de l'embryon ne s'accroisse pas. Tandis que du côté de la tête il y a des organes nettement différenciés qui servent de point de repère et permettent de constater que la première protovertèbre conserve les mêmes rapports avec ces organes ; à la partie postérieure de l'embryon il existe, entre la dernière protovertèbre et la vésicule de Kupffer, un espace d'environ 0™™,45 dans lequel, à part l'axe

nerveux et la corde dorsale qui ont la même structure que dans le reste de l'embryon, on ne trouve que les lames mésodermiques non différenciées. Il peut donc se produire, entre la vésicule B et la dernière protovertèbre P, un allongement qui passera inaperçu s'il se forme en même temps une protovertèbre, et si l'épaisseur de cette nouvelle protovertèbre correspond précisément à l'acccroissement de l'espace BC.

Cette hypothèse, la seule qui me paraisse acceptable, n'est pas une simple vue de l'esprit, elle repose sur un fait d'observation. Lorsqu'on examine des coupes longitudinales d'un embryon pourvu de protoverlèbres, on constate que la partie antérieure de la lame mésodermique qui fait suite aux protovertèbres présente un léger renflement d'une épaisseur égale à celle des protovertèbres, et dans lequel les cellules commencent à se disposer radiairement autour d'un centre; le renflement est souvent séparé virtuellement du reste de la lame niésodermique par une ligne à peine visible : il ne peut y avoir de doute qu'on ait sous les yeux une protovertèbre en voie de formation.

L'embryon des ïéléostéens s'accroît donc jusqu'à la fermeture du blastoderme par la partie qui est comprise entre la vésicule de Kupffer elles protovertèbres, de nouveaux somites se formant constamment à la partie antérieure de cotte région au fur et à mesure qu'elle s'accroît; ce fait me semble nettement établi par les mesures que j'ai rapportées plus haut. Voyons maintenant si cette donnée est compatible avec la théorie de His.

Si la théorie de la concrescence de l'embryon est vraie, cette concrescence ne peut se produire qu'en avant de la vésicule de Kupffer. Si, en effet, la réunion des deux moitiés du bourrelet blastodcrmique avait lieu en arrière de cette vésicule, celle-ci devrait s'éloigner de plus en plus de l'extrémité caudale, dans la suite du développement embryonnaire, ce qui est contraire à l'observation ; admettons donc que la réunion des deux moitiés du bourrelet se fait en avant de la vésicule et que l'extrémité postérieure de l'embryon reste enchâssée dans l'anse formée par le bord externe du bourrelet blastodcrmique, il faut examiner comment peut se faire cette réunion.

Le bourrelet est formé comme on sait de deux couches, l'une

supérieure ectoilermiquo, Tautre inférieure provenant de la réflexion de la première et qui représente rendoderme primaire de Tembryon. La réunion des dcu\ moitiés du bourrelet peut se faire de deux manières différentes. 1° Les deux moitiés s'accolent par leur bord externe sur la ligne médiane de manière à former une masse cellulaire axiale, se continuant latéralement en deux lames, l'une ectodermique, l'autre endodermique. 2° Les deux couches qui contiennent le bourrelet se fusionnent avant la réunion des deux moitiés du bourrelet sur la ligne médiane, pour constituer après cette réunion une masse de cellules indifférentes qui pourront alors se différencier en cellules ectodermiques, mésodermiques et endodermiques.

La première hypothèse- est inadmissible, car les coupes pratiquées en avant de la vésicule de Kupffer montrent l'axe nerveux, la corde dorsale avec ses cellules caractéristiques, les lames mésordermiques et l'endoderme nettement différenciés. La seconde ne me paraît pas plus acceptable que la première, car il faudrait alors supposer que les cellules embryonnaires du bourrelet se différencient, au moment même de la fusion des bords du bourrelet, en éléments histogéniques aussi différents que ceux qui constituent l'axe nerveux et la corde dorsale.

On peut encore admettre que les deux moitiés du bourrelet ne forment que les parties latérales de l'embryon, Taxe nerveux et la corde dorsale s'accroissant sur la ligne médiane par intussusception. En faveur de cette hypothèse on peut invoquer l'observation de Ryder (156) relative au développement de VElecate canadensU. Cet auteur a vu sur des œufs dont le blastoderme était sur le point de se fermer, les deux moitiés du bourrelet se continuer distinctement avec Fembryon comme les deux branches d'un Y renversé. Ces deux moitiés du bourrelet présentaient une segmentation en somites jusqu'à une certaine distance en arrière de Tembryon. Dans l'angle aigu formé par les deux branches de l'Y, il y avait un espace losangique, formé de cellules reposant sur le vitellus et dans lequel Ryder pense avoir vu la vésicule de Kupffer et un cordon axial qu'il croit être la corde dorsale. L'auteur américain trouve que son observation confirme bien la théorie de His et Rauber; il reconnaît cependant que la masse cellulaire entre les deux moitiés du blastoderme est un peu embarassante. Pour lui, la segmenta-

tion en somites des bords du blastoderme est une simple accélération ou précipitation dans le mode habituel du développement. Il pense que le fait observé chez VElccate est une sérieuse objection à la théorie de Balfour qui fait accroître l'embryon à partir du bord de blastoderme, sans l'adjonction d'éléments provenant du bourrelet. Cependant Ryder ne repousse pas entièrement cette théorie et il tend à la concilier avec celle de la concrescence ; il est probable, dit-il, que l'embryon s'accroît à la fois par intussusception d'arrière et en avant à partir du bord du blastoderme et par coalescence des deux moitiés de ce dernier, non sur la ligne médiane, mais par une fusion graduelle comme se ferme le blastopore sur le vitellus.

La formation de la partie postérieure de l'embryon par l'adjonction du bourrelet blastodermique est indiscutable. Tous les auteurs ont constaté qu'au moment de la fermeture du blastoderme, le bourrelet constitue en arrière du bourgeon caudal un petit anneau plus ou moins elliptique, dont le grand axe est dirigé suivant l'axe de l'embryon. Les bords de cet anneau se rapprochent de la ligne médiane en même temps que le grand diamètre diminue ; ils se fusionnent et forment une masse cellulaire qui se soude intimement au bourgeon caudal, de manière à ne faire qu'un tout homogène. Il est très facile de suivre cette fusion sur des coupes longiiudinales ou transversales de la fm du stade H, telles que celles que nous avons déjà décrites (Planches, fig. 97 et 98).

Je rapellerai que lorque les deux moitiés du bourrelet blastodermique se réunissent sur la ligne médiane, au dessous de la tente formée par la membrane enveloppante, les deux masses ectodermiques se soudent pour constituer une masse unique de cellules indifférentes qui émet de chaque côté une lame endodermique primaire s'étendant à une certaine distance au dessous de l'ectoderme. On peut suivre pas à pas, sur des coupes, la fusion des deux bords du bourrelet. Si une fusion semblable avait lieu, dans l'hypothèse de la concrescence, en avant de la vésicule de KupfTer, on devrait retrouver dans cette région la même disposition des cellules et des feuillets qu'on trouve là où se fait réellement la fusion. Nous avons déjà dit que cette disposition n'existait pas en avant de la vésicule de Kupffer, il faut donc admettre que seule l'extrémité postérieure de l'em-

bryonse forme par coalescence des bords du bourrelet, en arrière du bourgeon caudal, au niveau du trou vitellin.

La théorie de His étant contraire aux faits d'observation, les hypothèses de Kupffer et d'CEUacher restent seules en présence. Toutes deux sont compatibles avec le résultat de mes recherches sur le mode d'accroissement de l'embryon.

Il est difficile, sinon impossible, d'établir le véritable mode d'extension du blastoderme sur le vitellus d'après les observations faites sur les œufs des Salmonidés ou tout autre œuf de Poisson de forme sphérique. Mais Miecz. von Kowalewski (103) me paraît avoir heureusement tourné la difficulté en prenant comme objet d'étude les œufs de forme ellipsoïdale du Carassius auratus et d'une espèce pélagique, indéterminée, provenant de Trieste. Sur ces œufs, dans lesquels les extrémités des axes inégaux de l'ellipsoïde servent de points de repère, von Kowalewski a constaté que, pendant la segmentation jusqu'au moment de la différenciation des feuillets embryonnaires, le blastoderme s'accroît également par toute sa périphérie, suivant le schéma de KupîTer; mais que, lorsque les feuillets sont constitués, l'extrémité caudale de l'embryon reste fixée sur un point du vitellus, et que, par conséquent, à partir de ce moment l'extension du blastoderme se fait d'après le schéma d'(Ellacher. Il me paraît très probable qu'il en est de même pour les œufs des autres Poissons et en particulier des Salmonidés.