désaminase = d-désaminase + co-enzyme

Ce qui l’indique, c’est qu’on ne peut obtenir la d-enzyme qu’aux dépens de tissus contenants la 1-enzyme; par contre, il est possible d’extraire la 1-enzyme du système contenant la d-enzyme. Les deux systèmes d’enzymes ont en commun avec les oxyda-

tions biologiques qu’une activation de l’oxygène est nécessaire à leur action i ).

Seule l’action de la 1-désaminase ressemble entièrement aux oxydations biologiques, parce qu’elle aussi est invariablement liée à la conservation de la structure cellulaire; cette action ne dépend pas de la solubilité ou de l’insolubilité de la 1-désaminase; en effet, après broyage des tissus et séparation de l’extrait, le résidu et l’extrait sont l’un et l’autre inactifs. Cependant, cette ressemblance avec ce qu’on connaît des oxydations cellulaires ne permet pas de conclure à une identité. Les désaminases forment un système d’oxydation particulier qui, dans les tissus, peut être distingué des autres systèmes d’oxydation par l’anhydride arsénieux; car ce dernier n’entrave pas la désamination, mais empêche l’oxydation ultérieure du céto-acide formé. On pourrait en conclure que cette oxydation ultérieure est due à l’action de déshydrogénases. En effet, les expériences de Banga, Schneider et Szent-Gvorgyi (1931) indiquent que l’anhydride arsénieux arrêterait l’action des seules déshydrogénases.

Quelles sont ces déshydrogénases? Pour expliquer l’oxydation ultérieure du céto-acide formé, ne devrait-on pas faire plutôt appel à une enzyme bien définie, la carboxylase? Ce serait là une généralisation illicite. Bien qu’il soit reconnu que cette enzyme agit sur les céto-acides dans la levure, ces mêmes cétoacides se dissocient d’une manière toute différente dans les bactéries et les tissus animaux (voir article 2).

Etant donné que dans notre cas on ne peut faire appel à aucune enzyme identifiée, nous supposons simplement:

1° qu’il existe des enzymes agissant sur la chaîne carbonique des acides aminés,

2° en nous appuyant sur le critérium de Banga c.s. (1931), nous les désignons du terme général „déshydrogénases”.

En résumé, nous pouvons dire que l’asparaginase (Grassmann et Mayr) et la glutaminase (Krebs 1935b) sont identifiées comme hydrolyseurs spécifiques du radical amide, attaché respectivement à l’acide aspartique et à l’acide glutamique. On n’a pas examiné s’il existe encore d’autres désamidases, correspondant chacune à un seul acide amidé.

Quant aux désaminases, c’est dans les articles cités de H. A. Krebs, qu’on trouvera presque tout ce qui est connu à leur sujet.

Peut-être pourrait-il être question, pour les désaminases comme pour les désamidases, d’une action sur un seul acide aminé.

1 ) Cela s’applique également à la désaminase des d-amino-acides (qui agit donc dans les tissus autrement que dans un extrait).

Cependant cette action spécifique cadrerait moins avec ce que Ton connaît déjà des désaminases. Le point important qui fait paraître les désaminases comme étroitement apparentées entre elles, c’est leur action oxydante; au contraire, l’action des désamidases est une hydrolyse.

Les désaminases des tissus végétaux, présentent-elles les mêmes caractéristiques que celles des tissus animaux?

Seule l’évidence expérimentale décidera de cette question. En attendant, nous pourrions supposer qu’elles se ressemblent, mais une identité complète est peu probable. En effect, en physiologie végétale, on voit que la désamination peut ne pas se produire sous certaines conditions. Krebs s’était occupé des seuls tissus animaux, où le ferment semble toujours être présent, et également actif. Jusqu’ici des résultats concluants pour la désamination des tissus végétaux font défaut; c’est là le sujet de l’étude que nous allons entreprendre. ' .

Article 2

Produits du métabolisme des acides aminés

Krebs a démontré dans les articles déjà cités que, dans les tissus animaux, les céto-acides et l’ammoniac sont les premiers produits de dissociation. On n’a pas encore pu montrer d’une façon concluante que ces produits sont les mêmes dans le métabolisme des tissus végétaux.

H. A. Krebs et W. A. Johnson (1937a) ont examiné dans des tissus animaux ce que deviennent ensuite ces céto-acides. Ces auteurs résument leur résultat dans les deux schémas généraux suivants: * - ; :.

R.CO.COOH + R’.CO.COOH + H 2 0 R.COOH + C0 2 + R’CH(OH). COOH.

R.CO.COOH + R’.CO.CH 2 .COOH + H 2 0 R.COOH + C0 2 + R’.CH(OH).CH 2 .COOH.

a-céto-acide + £-céto-acide + H 2 0 acide carboxylique -(- C0 2 + £-hydroxacide. , :

Le fait que l’acide carboxylique apparaît comme produit de réaction dérivant du céto-acide, était déjà connu, car même in vitro les céto-acides passent facilement par oxydation à l’état d’acides gras comportant un atome de carbone en moins. La production de l’hydroxacide était connue aussi, car les défenseurs

de ITiypqthèse de, la désamination hydrolytique avaient déjà fortement attiré Vattention sur ce produit. Mais la réunion des deux produits de réaction dans une seule réaction générale est entièrement nouvelle et, par surcroît, les précisions relatives au mécanisme de cette réaction sont nouvelles aussi. Krebs et Johnson ont notamment démontré que la réaction n’est pas liée à la présence d’oxygène libre, mais qu’elle peut se produire anaérobiquement par oxyréduction.

Une action oxydante est due au céto-acide II qui, par le fait même est déshydrogéné pour passer à l’état d’hydroxacide. Pour l’acide pyrotartrique par exemple, on a constaté que 50% environ de cet acide est réduit et passe à l’état d’acide lactique et que 50% est oxydé et passe à l’état d’anhydrique carbonique et d’acide acétique. L’importance de la réaction découverte par Krebs et Johnson réside en premier lieu en ceci que son application est générale, car elle peut expliquer non seulement la dissociation des amino-acides, mais aussi le métabolisme des matières grasses et des hydrates de carbone. Cette réaction est aussi très importante du fait qu’elle permet d’expliquer la dissociation des céto-acides, sans faire appel à l’enzyme carboxylase. Dans la réaction de Krebs et Johnson, comme dans la dissociation par la carboxylase, il se forme à partir du céto-acide de l’anhydride carbonique, mais dans le premier cas, il se forme en mêmei temps des aldéhydes et dans le second cas des acides. Il est donc bien démontré que la dissociation des sucres par la levure, toujours très riche en carboxylase, ne permet pas d’établir un schéma général de cette dissociation.

Krebs et Johnson ont examiné également çè que deviennent ensuite les hydroxacides. On a constaté que ces substances sont engendrées anaérobiquement et qu’elles subissent ensuite une réaction aérobie avec absorption d’un atome d’oxygène par molécule d’hydroxacide. Il se reforme alors un céto-acide et ce corps subit’ de nouveau la réaction anaérobie: nous trouvons donc ici le système de transfert d’oxygène qui avait été établi par Szent Gyôrgyi (1935) pour l’acide oxalo-acétique.

Dans un deuxième article de la même année, Krebs (1937 b) démontre que la réaction citée plus haut et constatée dans les tissus animaux, a lieu également dans des bactéries. Là réaction ici aussi est anaérobie; de plus on a pu démontrer que cette réaction constitue, un stade intermédiaire du métabolisme des tissus non-broyés. En résumé, nous aboutissons à la représentation Rivante des produits de dissociation résultant du métabolisme .des ânixno-acides: - ..v.