HANDES

Cobaye neuf. Injection de 1 culture âgée de 30 heures. Sacrifié au bout de 25 heures.

LEUCOCYTOSE DU SANG

HEURES TEMPÉRATURES PAR MILLIM. CUBE Avant l'injection. ...... SOLS 6.000 2 HN CUTÉSTADLES EE FES AUS 13.000 8 — TA à MER ISERE 17.000 DONNE RE C IT ES 15.000 25 — MA RUN € DO De SEP TOME 7 ARR TRAME AUTOPSIE. — Intestin grêle légèrement rosé. Le reste normal. Dans le

rectum, matières dures. Très peu de liquide dans l'intestin. Réaction de l’iléon : légèrement acide; du cæcum : acide. Pas d’épanchement péritonéal.

Cultures sur plaques. — Le jéjunum, l’iléon ont donné quelques colonies peu nombreuses. Le cæcum en a fourni un grand nombre. Péritoine, sang, stériles. Le rectum a fourni des colonies peu nombreuses.

Coupes. — Jéjunum : Épithélium intact sauf au sommet où il manque plusieurs cellules. Intiltration leucocytaire faible. Très nombreux éléments géants dans les lymphatiques centraux ; ils contiennent des leucocytes en grand nombre. L’endothéKum péritonéal est normal. Pas de vibrions dans la cavité ou la paroi. Vaisseaux sanguins remplis de sang.

Iléon : Mêmes remarques.

Cobaye neuf. Injection de 1 culture de 24 heures. Sacrifié au bout de

32 heures.

Aucune portion de l'intestin n’a fourni par la culture de vibrions cholériques.

3 cobayes neufs reçoivent chacun 1 culture de 20 heures après alcalinisation stomacale. Sacrifiés au bout de 40 heures.

Les cultures sur plaques, ensemencées avec le contenu des diverses portions de l'intestin, n’ont fourni aucune colonie cholérique.

? cobayes neufs. Injection de 1 culture âgée de 24 heures. Sacrifiés au bout de 35 heures.

Le contenu de l'iléon est neutre. Celui du cæcum, acide. Aucune portion de l'intestin n'a fourni, sur plaques de gélatine, de colonies cholériques.

Voici maintenant, si nous résumons nos observations. la série des phénomènes histologiques auxquels l'injection intra-stomacale du vibrion cholérique donne lieu chez le cobaye :

Le processus local s'accompagne toujours d’une augmentation du nombre des leucocytes dans le sang de la circulation générale, augmentation moins forte cependant que celle qui se produit dans le cas d'une injection sous-cutanée ou intra-péritonéale, lorsque le cobaye doit guérir. Le chiffre des leucocytes s'élève vers la vingtième heure à 20,000 ou 30,000 par millim. cube. Dans un cas où l’animal a succombé (exp. LXT), ce chiffre n'avait pas dépassé 12,000. Cette augmentation porte à peu près exclusivement sur les polynucléaires.

Cette leucocytose du sang est due à la toxine cholérique qui de l'intestin diffuse dans l'organisme. C'est de l’action de cette toxine que dépendent les principaux phénomènes histo-pathologiques que nous observons chez le cobaye cholérique. Un travail de C. Sluyts nous montre en effet que cette substance injectée dans la cavité pleurale des animaux détermine l'hyperhémie de la muqueuse intestinale et la desquamation de son épithélium. 11 faut donc admettre que les altérations épithéliales qui, à des degrés divers, sont constamment liées à la présence des vibrions dans l'intestin, sont dues à l’action directe du poison cholérique sur les cellules, et non à l'action mécanique des vibrions : cette dernière joue un rôle tout à fait secondaire. D'ailleurs, jamais, dans le cas qui nous occupe, on ne trouve de vibrions dans le péritoine ou dans le sang. Il se produit une véritable intoxication de la cellule épithéliale, intoxication qui se traduit par la formation de vacuoles intra-cellulaires. Ces vacuoles, dont nous avons étudié le mode de formation et qui se produisent en pleine substance protoplasmique, alors que le plateau strié et le noyau restent intacts, sont duesévidemment non à l’action directe d’un microbe ou d’unleuco-

cyte migrateur, mais sont l'indice d'un trouble grave dans la nutrition intime de la cellule. On peut rapprocher cette lésion de celle produite dans le rein par la toxine diphtéritique ou la toxine cholérique : comme dans ces deux derniers cas elle aboutit à la nécrose totale ou partielle de l'élément cellulaire.

Le phénomène macroscopique le plus remarquable est l'hyperhémie de l'intestin. Cette hyperhémie débute par l'estomac, gagne le duodénum puis s'étend progressivement à tout l'intestin grêle; son intensilé au niveau du gros intestin est faible. Ses deux maxima se trouvent à la région moyenne du jéjunum et à l'extrémité cæcale de l’iléon ; c'est également en ces deux points que la réaction cellulaire est la plus énergique. La congestion de la paroi stomacale décroît rapidement 3 ou 4 heures après l'injection ; celle de l'intestin s'accompagne vers la vingtième ou vingt-cinquième heure de la tuméfaction des follicules clos situés dans l'épaisseur de l’iléon et de la portion inférieure du jéjunum.

Cette hyperhémie locale est le phénomène primordial ; très rapidement aussi. après l'injection, survient un accroissement d'énergie dans les mouvements péristaltiques de l'intestin grêle ; si l'on sacrifie l'animal 1 ou 2 heures après l'injection, on trouve son jéjunum dans un état d'extrême contraction ; le résultat est l'expulsion rapide de la majorité des vibrions hors de l'intestin grêle et leur arrivée en masse dans le cæcum à une période très précoce du processus.

On trouve presque toujours pendant les premières heures de l’expérience de nombreux débris épithéliaux dans le liquide du duéodénum ; à ce moment l'épithélium de cette portion est intact ; il est probable que ces déchets proviennent en grande partie de l'estomac d'où ils auront été arrachés violemment lors de l'énorme distension stomacale produite par l’arrivée brusque dans cet organe d'une grande quantité de liquide.

Les altérations de l’épithélium dans l'intestin grêle ne se produisent pas au même moment à tous les niveaux ; elles apparaissent dans le duodénum à une période moins avancée que dans le jéjunum et l'iléon. C’est au niveau des deux maxima signalés plus haut etentre la seizième et la vingt-cinquième heure que ces lésions acquièrent leur plus haut degré d'intensité. C'est une vacuolisation de la cellule aboutissant à la nécrose (v. exp. LVID et portant à peu près exclusivement

sur les cellules du sommet de la villosité et cela pour deux raisons : d’abord parce que ce sommet baigne plus directement que le reste dans les liquides toxiques ; puis, parce que l'effort des leucocytes en diapédèse s'exerce principalement en ce point et achève l'œuvre de la toxine en écartant et pénétrant les cellules. |

À une période précoce de la maladie le nombre des polynucléaires augmente considérablement dans les capillaires des villosités, d’où ils envahissent le tissu conjonctif sous-épithélial. Ils s'accumulent ainsi sous l’épithélium, pénètrent entre les cellules, s’introduisent parfois dans les vacuoles intra-cellulaires. Vers la dix-huitième heure cette émigration est à son maximum : les leucocytes comblent alors le vide laissé au sommet de la villosité par les cellules épithéliales nécrosées et y forment un véritable bouchon. Les vibrions qui pénètrent par cette porte ouverte sont englobés et ne parviennent jamais dans l'épaisseur de la paroi. Ainsi donc les phagocytes ne jouent ici aucun rôle dans la destruction des vibrions qui emplissent la cavité intestinale ; ils arrêtent simplement ceux qui, au travers de l’épithélium dégénéré pourraient pénétrer dans la paroi. Quelques leucocytes parviennent jusque dans la cavité même de l'intestin ; mais c’est là un fait exceptionnel. La barrière la plus efficace à l’envahissement de l'organisme par les vibrions est ce plateau strié si épais, si résistant, qui ne présente aucun signe de dégénérescence alors que la cellule est déjà presque entièrement vacuolaire.

Notons ici que cette infiltration leucocytaire des villosités se compose presque exclusivement de polynucléaires ; que ces éléments sortent toujours des vaisseaux sanguins et jamais des Iymphatiques. Ces derniers sont au contraire le point de départ d'un processus secondaire qui débute vers la vingtième ou vingt-quatrième heure, A ce moment l'état de réplétion des vaisseaux sanguins diminue ; la diapédèse des polynucléaires se modère ; la portion profonde et rétrécie du lymphatique central se remplit d'éléments mononucléaires à gros noyau vésiculeux à protoplasma peu abondant et que nous avons décrits dans notre chapitre d’histologie comme représentant les stades jeunes des macrophages. Bientôt l'extrémité du lymphatique central se trouve remplie de macrophages géants, et vers la vingt-cinquième heure on voit ceux-ci gorgés de débris leucocytaires alors que le nombre des polynucléaires émigrés a considérablement diminué.

Fait curieux, rarement ces macrophages s’échappent hors du lymphatique, Il faut donc supposer que leurs pseudopodes seuls, traversant la paroi du vaisseau, vont saisir et ramener les polynucléaires affaiblis.

Ce stade ot au moment où la tuméfaction des follicules clos est à son maximum. Il est l’homologue du stade à mononucléaires que nous avons observé en étudiant la formation des abcès sous-cutanés chez les cobayes vaccinés ; seulement dans ce dernier cas la voie d'arrivée était les vaisseaux sanguins; ici les maerophages remontent les vaisseaux lymphatiques, et proviennent sans doute directement des follicules lymphatiques.

Il résulte clairement de nos observations que les phagocytes ne sont pas les agents de la destruction des vibrions dans la cavité intestinale ; ils n'interviennent que si des virgules, en petit nombre, tentent d'envahir la paroi.

Et cependant le vibrion cholérique, au We, d'un certain temps, est détruit dans l'intestin du cobaye. A chacune de nos expériences un témoin recevait dans l'estomac une culture entière. Sur 32 individus ainsi traités 1 seul a succombé ; nous avons pris son observation (exp. LXT).

Nous n’avons plus, à partir de la trente-cinquième heure, trouvé de vibrions vivants dans aucune portion du tube digestif. À ce momentlà, les virgules sont donc, sinon complètement détruits, du. moins réduits à un nombre excessivement faible.

Cette destruction des: vibrions cholériques a lieu principalement dans le cæcum vers lequel les chasse, dès le début du processus, l'in- +estin grêle violemment contracté ; les cultures sur gélatine, aussi

bien que l'examen des coupes, prouvent que très rapidement le cæcum se remplit de vibrions, alors que leur nombre décroît dans l'intestin grêle. D'autre part, une seule fois (exp. LXIV), il nous a été donné d'obtenir des colonies en semant des matières fécales. C’est donc dans Ja première partie du gros intestin que s'opère la destruction des microbes cholérigènes.

Un fait remarquable est que, après avoir séjourné en EL nombre et bien vivants dans le cæcum pendant plusieurs heures, ils semblent s'y éteindre tout à coup. En effet, toujours très nombreux jusque vers la vingt-cinquième heure, brusquement leur nombre devient très

faible, ainsi que l’on peut facilement s’en assurer par la méthode des plaques.

Leur destruction serait-elle due à l'acidité du cæcum ? Il est certain que la réaction de cette portion du tube digestif est franchement acide ; que, d’autre part, la réaction de l'intestin grêle devient souvent légèrement acide vers la fin de la maladie. Or, l’on sait combien le micro-organisme du choléra cultive mal en milieu acide. Il est donc raisonnable de penser quefcette acidité n’est pas étrangère à la disparition des vibrions dans l'intestin. Mais alors comment se fait-il que ces microbes puissent séjourner plus de 30 heures dans le cæcum sans périr ? Sur ce point, on le voit, le problème est encore loin d’être résolu.

Ainsi done, les deux. groupes d'éléments qui s’opposent à la pénétration du vibrion dans l'organisme sont l’épithélium d’une part, grâce à la résistance de son plateau strié; les phagocytes de l’autre, lorsque cet épithélium se trouve lésé en quelque point. Pourquoi l'animal suecombe-t-il lorsqu'on le soumet à l'influence de l’opium . pendant les premières heures qui suivent l'injection de bacilles cholériques dans l'estomac ?

Voici des expériences :

c). — Injection intra-stomacale de vibrions accompagnée d'injection de teinture d'opium dans le péritoine.

EXPÉRIENCE 68 Cobaye neuf. Poids 590 gr. Injection intra-stomacale, après alcalini-

sation, de 1 culture âgée de ?4 heures. Injection a D ts

de * ? c.c. de teinture d’opium. Mort au bout de 28 heures.

LEUCOCYTOSE DU SANG

HEURES à TEMPÉRATURES PAR MILLIM. CUBE Avant l'injection... .... EN BP 5.800 Theure aprés. -.:.. 30, des 17.000 PIREULES Reco : ON MR EUR 28.000 DORE Pr en nr | DR ne :33.000

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Analyse qualitative des leucocytes pour 100.

HEURES POLYNUCLÉAIRES MONONUCLÉAIRES LYMPHOCYTES Avant l’injection........ GE tLAPEE 21 {theurelaprés ee 7 : (IAE Loue 16 TO NEUTES ER ASE SUAEE Ds hé 11 DANS NET AR TE DOME, 10 35

Le narcotisé se réveille au bout de 2 heures et demie. À aucun moment il ne présente de diarrhée. |

AUTOPSIE (pratiquée au moment de l’agonie). — Œdème abondant de la paroi abdominale. Dans le péritoine, épanchement moyen, légèrement louche. Pas de dépôts fibrineux. Intestin grêle très hyperhémié d’un bout à l’autre, rempli d’un liquide clair, filant. Hypertrophie des follicules clos de Piléon. Estomac, cæcum distendus par les gaz. Foie, rate, reins très congestionnés.

Réaction de l’estomac, très acide; de l'intestin grêle, alcaline; du cæcum, légèrement acide,

Examen microscopique des liquides. — Épanchement péritonéal : Beaucoup d’hématies; vibrions cholériques en petit nombre. Quelques bacilles droits de l'intestin. Leucocytose abondante : 5 polynucléaires pour 2 mononucléaires et 1 lymphocyte. Les leucocytes sont sains. IIS ne contiennent pas de microbes.

Jéjunum : Vibrions cholériques abondants, en cullure pure. Pas de noyaux épithéliaux. Quelques rares polynucléaires qui ne contiennent pas de microbes. Iléon : Nombreux vibrions. Quelques grands bacilles et des streptocoques. Pas d'éléments cellulaires.

Cultures sur plaques. — Sauf Pestomac, toutes les portions de l'intestin ont fourni d’abondantes cultures de vibrions. Le liquide péritonéal également. Le sang en a fourni aussi, mais en pelite quantité.

Coupes. — Jéjunum : Dans la cavité intestinale, on voit de nombreux

“vibrions libres. Pas d’autres microbes. Au milieu d'eux se trouvent beaucoup

de leucocytes ; 9/10 sont des polynueléaires. Un certain nombre sont bourrés de vibrions ; mais, fait remarquable, ces vibrions englobés ne sont jamais réduits en granulations. Beaucoup de ces phagocytes sont dégénérés : leur noyau est alors transformé en un amas de sphérules chromatiques. En outre, on trouve encore dans la cavilé intestinale des macrophages, provenant des lymphatiques centraux et contenant des débris de leucocytes et de nombreux vibrions. Ces macrophages ne sont pas dégénérés. Eufin on rencontre dans la cavité quelques noyaux épithéliaux, mais ils sont rares.

L'épithélium est soulevé par longues bandes arrachées à leur substratum, mais encore en place ; entre la base de cet épithélium et le lymphatique central est accumulé un abondant œdème. Presque toutes les cellules sont atteintes de tuméfaction trouble et renferment des vacuoles, mais mal délimitées et difluses.

=efiTe

Les noyaux refoulés à la partie profonde se colorent bien. Quelques-uns sont en karyokinèse.

Entre les cellules épithéliales, comme aussi dans l’œdème sous-épithélial, on aperçoit de nombreux polynucléaires dont plusieurs contiennent des vibrions. On trouve également entre les cellules épithéliales des amas vibrioniens qui se sont évidemment multipliés sur place. Au sommet d’un grand nombre de villosités, l’épithélium est complètement détruit; les lymphatiques centraux communiquent ainsi librement avec la cavité intestinale; c’est à ce niveau que l’on trouve des mononucléaires géants tombés dans la cavité.

Le lymphatique central contient, comme toujours, des macrophages ; ils sont bourrés de débris leucocytaires et de vibrions. Beaucoup sont dégénérés ; leur noyau est fragmenté ct prend la couleur d’une manière uniforme et grossière ; souvent, on voit deux ou trois de ces éléments fusionnés entre eux. Le lymphatique renferme des vibrions libres ; on n'y voit point de polynucléaires; ces derniers remplissent, au contraire, les capillaires de la villosité et traversent leurs parois. |

La lumière des glandes de Lieberkühn contient des vibrions en abondance ; on trouve ceux-ci également entre les cellules glandulaires et dans les Iymphatiques profonds de la muqueuse. La muqueuse, la sous-muqueuse sont infiltrées de polynucléaires, parmi lesquels on aperçoit quelques lymphocytes. Les polynucléaires se trouvent en grand nombre dans les vaisseaux sanguins de la sous-muqueuse et sorlent à travers les parois des veines. Les lymphatiques de la sous-muqueuse contiennent en abondance et exclusivement des lymphocytes.

La couche musculaire est intacte et non infiltrée.

Dans le tissu sous-séreux, on lrouve des polynucléaires qui ne contiennent pas de microbes et quelques vibrions. L’endothélium péritonéal est desquamé.

Nulle part on ne trouve de Mastzellen.

Iléon : Les phénomenes sont les mêmes, mais ont un caractère de moindre intensité, Le nombre des vibrions intra-pariétaux, de même que celui des polynucléaires, est moins grand que dans le jéjunum.

EXPÉRIENCE 69 Cobaye neuf. Poids 455 gr. Injection de 1 cullure âgée de 30 heures.

Injection dans le périloine de 1,5 c.c. de teinture d'opium. Meurt aw bout de 21 heures.

LEUCOCYIOSE DU SANG

HEURLS TEMPÉRATURES PAR MILLIM. CUBE Avant l'injection. ...... Biel 26 IE 4.600 l'heure aprés 74m à 2D0,0h 0e 11.000 8 heures = ,...40.. AO ma ba 22,000.

ARE LT me Due in 220 dun. 8.000

La narcose dure 2 heures.

AUTOPSIE (au moment de la mort). — Du pylore à la valvule iléo-cæcale, l'intestin est vivement injecté et rempli d'un liquide brun clair, très fluide, à réaction facilement acide. Le cæcum est rempli de matières. jaunes, fetides. Le contenu du rectum est dur, marronné. Réaction du cæcum : acide.

Faible épanchement péritonéal. Viscères fortement congestionnés.

Examen des liquides. — Estomac : Nombreux vibrions ; rares noyaux épithéliaux. Pas de leucocytes. Duodénum : Mêmes observations. Zléon : Très nombreux vibrions ; quelques noyaux épithéliaux. Leucocytes abondants ; polynucléaires et lymphocytes en quantités sensiblement égales. Ils ne contiennent pas de microbes. Cæcum : Nombreux vibrions. Pas de leucocytes.

Cultures sur. plaques. — Toutes les portions de l'intestin, y compris l'estomac, ont donné de nombreuses colonies vibrioniennes. L’épanchement péritonéal, le sang pris dans le cœur ont également fourni d’abondantes

cultures.

Coupes. — Duodénum : Vibrions dans la cavité. On y trouve également quelques hématies, de rares noyaux épithéliaux et des leucocytes en quantité moyeune ; 5 polynucléaires pour 2 Iymphocyles et 1 mononucléaire. Quelques polynuelésires contiennent des vibrions ; la plupart sont dégénéres.

Le plateau strié de l’épithéliam est partout détruit, haché, les cellules épithéliales tiennent encore à leur subStratum en de nembreux points; mais toutes sont gonflées el troubles. Le noyau se colore bien.

Elles sont détruites au sommet des villosités.

Infiliration abondante de leucocytes dans la muqueuse et les villosités. Ce sont essentiellement des polynucléaires. On trouve également de nombreux lymphocytes. Au sommet de La villosité, quelques polynucléaires contiennent des vibrions, mais exceptionnellement.

Les vibrions se trouvent en abondance entre les cellules épithéliales, dans les lymphatiques ceatraux, dans le tissu conjonetif de la muqueuse à tous:les niveaux. Tous sont libres. On trouve également dans la muqueuse quelques gros bacilles droits.

Quelques vibrions dans la sous-muqueuse et la séreuse ; tous libres.

Dans le tissu sous-séreux, on trouve de nombreuses hématies extravasées. L'endothélium péritonéal est détruit.

La couche musculare seule n’est pas envahie par les vibrions.

Iléon : Dans la cavité intestinale, nombreux vibrions: Tres nombreux leucocytes, parmi lesquels beaucoun de polynucléaires, quelques mononuecléaires contiennent des vibrions; mais presque tous ces leucocytes sont dégénérés et leur noyau réduit à une tache chromatique se colorant irrégulièrement. Le long de Fépithélium, en de nombreux points, il y a de véritables plasmodies au milieu desquelles apparaissent des noyaux dégénérés de polynucléaires et des vibrions cholériques: Tous ces vibrions englobés sont intacts.

La Striation du plateau a disparu; les cellules épithéliales, généralement en place, sont gonflées et troubles. Leur noyau refoulé vers la profondeur est intact. En beaucoup de points, le noyau seul persiste entouré d'un pen de protoplasma. Ce protoplasma est alors envahi par les vibrions. |

La muqueuse, le tissu conjonctif sous-épithélial contient de nombreux polynucléaires émigrés. Très rarement, on en trouve un renfermant des vibrions. Ceux-ci forment de petits foyers dans toute l'étendue de la muqueuse. On les trouve dans Je lymphatique central, Très pe se trouvent à l’intérieur des macrophages. de ce }ympbatique.

La sous-muqueuse contient peu de vibrions. La musculaire n’en contient pas. On les trouve au contraire en abondance dans la séreuse, en petits foyers, au milieu d’hématies épanchées. L’endothélium a disparu.

Les leucocytes émigrés dans le tissu conjonctif de Ja villosité ne sout pas dégenérés comœe les phagocytes de la cavité intestinale.

Cobaye neuf. Poids 105 gr. Injection intra-stomacale de 1 culture de 20 heures. Dans le péritoine 1 c.c. 1/3 de teinture d'opium. Mort au

bout de 17 heures. È p x LEUCOCYTOSE DU SANG HEURES TEMPERATURES PAR MILLIM, CUBE Avant l'injection. . ..... DOUAI 5.600 1ShROUrTE ADTÉS re de DDOIO CNE 12.000 4 beures —,.:..,,.. 360,2. 11.000 DS Biens me re DD eût 7.000

La narcose dure 3 heures. Pas de diarrhée, = AUTOPSIE (au moment de la mort). — Intestin très hyperhémié, depuis : l’estomac, inclusivement, jusqu'au cæcum. Estomac rempli de liquide légèrement acide. Intestin grêle plein de liquide, flasque. Follicules clos légèrement hypertrophiés. Cæcum plein de gaz. Le rectum contient des matières dures. Réaction de l'intestin grêle, neutre; du cæcum, acide. Epauchement péritonéal moyen, rougeâtre: Pas de dépôts fibrincux. Viscères congestionnés.

Cultures sur plaques. — Le contenu stomacal, intestinal, cæcal, le liquide péritonéal, lé sang du cœur ont fourni de nombreuses colonies cholériques.

Coupes. : — Jéjunum : Dans la cavité, vibrions cholériques en quantité, en culture pure. Ils sont inassés en foyer contre les restes de l'épithélinm. Pas de leucocyles dans cette cavité ; quelques noyaux épithéliaux.

. L'épithélium, très dégénéré, est réduit aux noyaux cellulaires entourés d’un peu de protoplasma. Le plateau strié et le protoplasma adjacent ont disparu. Au sommet des villosités, les noyaux épithéliaux eux-mêmes sont absents. Glandes de Lieberkühn intactes. Les vaisseaux de la villosité sont gorgés de sang, mais contiennent peu de leucocytes. Dans les parties profondes de la muqueuse, de même que dans le lymphatique central il y a infiltration assez considérable de petits lymphocytes. Mais on ne trouve presque pas de polynucléaires. \

Pas d'infiltration de la sous-muqueuse ni de la séreuse. Très nombreuses hématies épanchées dans les mailles de cette dernière. Endothélium péritonéal absent.

On trouve de nombreux vibrions en foyer ou isolés dans Pintérieur de l’épi« thélium dégénéré, dans le lymphatique central, dans la muqueuse et dans la séreuse. Ils sont moins abondants dans la sous-muqueuse ; absents dans la musculaire. LECR

Aucune trace de phagocytose.

Iléon : Mêmes lésions. Mais l’épithélium est beaucoup moins dégénéré ; en beaucoup de points, les cellules sont entières, présentant seulement de la tuméfaction trouble. Le plateau, souvent présent, a partout perdu sa striation. Pas de leucocytose, de polynucléaires. Les vibrions sont librement répandus dans toute la muqueuse et dans la séreuse.

Cobaye neuf. Poids 550 gr. Injection de 1 culture âgée de ?4 heures. Dans le périloine 1 c.c. 3/4 de teinture d’opium. Sacrifié au bout de 3 heures el demie.

EXAMEN DES LIQUIDES. — Jéjunum : Innombrables vibrions en culture pure. Pas de noyaux épithéliaux ; pas de leucocytes. Iléon : Vibrions infiniment moins nombreux que dans le jéjunum. Aucun élément cellulaire.

Cultures sur plaques. — Le contenu de lestomac, de l'intestin grêle, du cæcum fournit de nombreuses colonies cholériques. Péritoine et sang, stériles.

Coupes. — Jéjunum : Dans la cavité, vibrions cholériques massés tout le long de l’épithélium. Pas de leucocytes. Pas de noyaux épithéliaux.

Les cellules épithéliales sont troubles, gonflées, remplies de liquides. L'épithélium du sommet des villositès est soulevé en masse par un œdème accumulé à sa partie profonde. En ce point, quelques cellules sont entièrement arrachées. Les noyaux refoulés vers la profondeur se colorent bien.

Le plateau épithélial est présent, mais il a perdu sa striation.

Dans l'œdème sous-épithélial, on trouve quelques vibrions isolés. On n’en voit point en d'autres points de la paroi. Aucune trace de leucocytose dans les villosités où la muqueuse. Dans les vaisseaux sanguins de la sous-muqueuse, il y a augmentation du nombre des leucocytes, mais pas de diapédèse. Les lymphatiques de la sous-muqueuse sont vides. La séreuse n’est pas infltrée et ne contient pas de vibrions. L'endothélium péritonéal est soulevé en longues bandes.

Les glandes de Lieberkühbn paraissent saines.

Pas de Mastzellen.

Dans le mésentère, aucune infiltration leucocytaire; aucune diapédèse.

Iléon : Mêmes lésions, moins avancées. Il existe déjà de la tuméfaction, trouble des cellules et de l’ædème sous-épithélial. Mais celui-ci ne renferme pas de vibrions. Aucune infiltration leucocytaire de la paroi.

Cobaye neuf. Poids 195 gr. Injection intra-stomacale de 1 culture de 30 heures ; injection intrapéritonéale de 1 c.c.1/2 de teinture d’opium. Sacrifié au bout de 6 heures.

LEUCOCYTOSE DU SANG

HEURES TEMPÉRATURES PAR MILLIM. CUBE Avant l'injection. ...... 380,8... 6.200 l'heuretaprés/. 100. 350,4. 1. 14.000 Shen ME... x 350,6... Fed 4 SRÉSSICIRES BREST re 6 — SRE QUE DO 23.000

La narcose dure 2 heures. Pas de diarrhée.

AUTOPSIE. — Estomac, intestin grêle très hyperhémiés et pleins de liquide. Réaction alcaline. Réaction du cæcum alcaline. Contenu du rectum dur. Léger épanchement rougeâtre dans le péritoine.

Examen des liquides.— Estomac : Vibrions assez nomhreux. Très nombreux streplocoques en longues chaînettes. Pas de leucocytes. Quelques rares noyaux épithéliaux.

Duodénum : Très nombreux vibrions. Beaucoup de noyaux épithéliaux ou de cellules épithéliales dégénérées. Pas de leucocytes. ;

Jéjunum : Mêmes phénomènes, mais plus intenses. Pas de leucocytes.

Épanchement péritonéal : Quelques vibrions. Beaucoup d’hématies. ‘ Quelques leucocytes polynucléaires assez rares et ne contenant pas de vibrions.

Cultures sur plaques : Toutes les portions de l'intestin grêle, de l’estomac, du cæcum ont fourni des colonies cholériques nombreuses, Le péritoine également. Le sang du cœur n’a rien donné.

Coupes. — Jéjunum : Dans la cavité de l'intestin, nombreux vibrions en culture pure ; rares noyaux épithéliaux. De temps à autre un leucocyte polynucléaire.

Épithélium trouble, gonflé, mais en place. La striation du plateau a disparu. Seules les cellules apicales des villosités sont absentes. Œdème sous-épithélial. Cet œdème contient de nombreux vibrions; on trouve également quelques vibrions qui ont pénétré daos la portion profonde des cellules épithéliales.

Il n’y a aucune infiltration leucocytaire de l’ædème, de la muqueuse ou de la sous-muqueuse. Mais on trouve de nombreux polynucléaires contenus à l’intérieur des vaisseaux sanguins. Les vibrions ont envahi toute la muqueuse ; ils sont moins nombreux dans la sous-muqueuse. Mais ils se trouvent dans la séreuse en nombre énorme, aussi bien sous l’endothélium soulevé que contre cet endothélium, dans la cavité péritonéale. On peut en voir également dans l’intérieur des cellules endothéliales, sans qu'il soit possible de dire s’ils y ont pénétré activement, ou s'ils ont été englobés.

Iléon : Mêmes lésions, moins avancées. Il y a peu de vibrions dans les villosités où la muqueuse. Mais ils se trouvent en nombre très grand dans la séreuse où ils forment de petits amas. Infiltration leucocytaire des tissus, nulle.

Les quelques observations précédentes suflisent pour nous permettre de saisir la succession des phénomènes histologiques qui caractérisent ce que l’on nomme le choléra expérimental des cobayes. %

L'action de la teinture d'opium détermine la résolution non seulement de l’appareil musculaire volontaire, mais encore des muscles lisses, comme par exemple ceux de la paroï intestinale.

Le liquide chargé de vibrions cholériques, au lieu d’être énergiquement poussé vers le cæcum, stagne au contraire dans l’estomac, le jéjunum et l’iléon. Les vibrions s’y multiplient ; au contact des toxines, les cellules épithéliales, dont la vitalité est déjà probablement affaiblie par la teinture d’opium, dégénèrent et périssent rapidement : elles s’ædématient, perdent leur plateau strié; d'autre part un æœdème abondant se développe dans le tissu conjonctif sous-épithélial. Les vibrions traversent facilement l’épithélium privé de son plateau strié ou désagrégé par endroits : ils se multiplient dans l'œdème sous-épithélial, pénètrent dans les lymphatiques, la séreuse et le péritoine dès les premières heures qui suivent l'injection. Les leucocytes, encore sous l’influence de la narcose, ne sortent pas des vaisseaux, et quand la diapédèse commence, l'envahissement de la paroi intestinale, de l'appareil lymphatique, de la cavité péritonéale par les vibrions, est déjà chose faite. À partir de ce moment, les phénomènes de destruction épithéliale vont en s’accentuant Les polynucléaires sortent en grand nombre des capillaires et des veines; mais ils se bornent en général à infiltrer la muqueuse et les villosités; un certain nombre de vibrions sont englobés; mais les cellules blanches, encore affaiblies par l'opium, n'ont pas le pouvoir de les digérer et dégénèrent rapidement (v. exp. LX VI. Nous retrouvons d'ailleurs ici la série des phénomènes étudiés en détail à propos des injections intrapéritonéales de vibrions chez des sujets vaccinés et soumis à l’action de l'opium.

Le cobaye meurt intoxiqué et infecté tout à la fois, car toujours nous avons, au moment de la mort, retrouvé les vibrions dans le sang du cœur.

Done : destruction précoce du plateau strié; intervention tardive des phagocytes, tels sont les deux facteurs qui permettent au vibrion d'envahir l'organisme.

Les bacilles virgules parviennent dans le sang par voie lymphatique ; à travers l'épithélium dégénéré, ils pénètrent en effet directement dans les chylifères centraux.

Notons ce fait intéressant que la leucocytose du sang se produit régulièrement très peu de temps après l'injection. Nous espérons expliquer ce phénomène dans le chapitre que nous consacrons plus loin à l’action de la teinture d'opium. La chose surprend d'autant plus, au premier abord, que la leucocytose des tissus est très lente à se faire.

, Notons également l'absence de Mastzellen dans la paroi envahie.

Remarquons enfin que dans les cellules épithéliales dégénérées, le noyau reste le plus souvent parfaitement intact et que ses caractères de colorabilité ne sont nullement altérés. Si la théorie de Klemperer était vraie, la présence d’un noyau intact et sécrétant par conséquent son acide nucléinique, devrait suffire à empêcher la pénétration des vibrions à l'intérieur de la cellule malade, ce qui n’est pas le cas, puisque les vibrions non seulement y pénètrent, mais encore s’y multi-

plient parfois en foyer.

d. — Injeclions répétées de vibrions dans l'estomac.

Abordons maintenant l'étude des lésions produites par les injections de vibrions cholériques dans l'estomac, après alcalinisation à doses répétées. Nous avons eu l'occasion de les observer à l'occasion d’'expériences que nous entreprimes pour vacciner les animaux par voie digestive.

Ce genre dé vaccination est-il possible? Nous avons déjà énoncé, au début de ce travail, l'hypothèse de Metchnikoff, relative aux vaccinations lentes par les vibrions des eaux.

Voici le protocole de nos expériences :

11 Cobayes neufs reçoivent chacun dans l'estomac, après alcalinisation, une culture de vibrions de Massaouah âgée de 30 heures, en émulsion dans à c.c. de bouillon stérilisé.

Cette injection est renouvelée 3 fois, dans les mêmes conditions, à 5 jours d'intervalle, Ainsi dans l’espace de 13 jours chaque cobaye ingéra 4 cultures entières.

Après la deuxième injection, les cobayes commencerent à maigrir, cet amaigrissement s’accompaguant dé tristesse, d’inappétence.

Quatre individus moururent 4 jours après l’ingeslion de la troisième dose.

AUTOPSIE. — On trouve l'intestin pèle dans toute sa longueur. L’estomac était affaissé, entièrement vide, sa réaction neutre. L’intestin entièrement vide également ; la réaction du cæcum, rempli de matières fecales, elait très acide. La rate et le foie étaient diminués de volume. Le cœur petit, flasque ; les veines gorgées de sang. Les capsules surrénales congestionnées et augmentées de volume. Pas d'épanchement péritonéal.

Cultures sur plaques. — Péritoine et sang stériles. Aucune portion de l'intestin ne fournit de vibrions cholériques. Aucune plaque n’est liquéfiée. Le cæcum a donné une culture abondante d'un bacille gros et court. Par conséquent pas de vibrions cholériques dans l'organisme. $

Trois jours après la troisième injection, un cobaye succombe en présentant pendant 5 heures de véritables phénomènes létaniques : trismus, contractures des muscles, des membres et de la nuque. Il est dans un état de maigreur extrême. |

AUTOPSIE. — Intestin anémié. Estomac et intestin grèle flasques et completement vides. Muqueuse pale. Réaction de lestomac : neutre ; de l’intestin également. Cæcum rempli d’une bouillie jaunâtre à réaction très acide.

Daus le périloine léger épanchemenut séreux, clair, filant. Pas d’épanchement pleural. Les viscères, sauf les testicules, sont anémiés, diminués de volume. Coloration de la bile extrèmement sombre.

Épanchement péritonéal. — Pas de microbes. Quelques lymphocytes.

Sang (pris dans Le cœur) donne 8,600 leucocytes par millim. cube de sang. Sur 100 leucocyles, onu trouve 81 polynucléaires, tous chargés de granulalions pseudo-éosinophiles, 1 lymphocytes et 4 mononueléaires. En outre il existe un nombre considérable de globules rouges à noyau prenant fortement le bleu.

Cultures sur plaques. — Les liquides intestinaux, le sang, l’épanchement périlonéal ne contiennent pas de vibrions.

Coupes. — Jéjunum. (V. pl. IT) La cavité intestinale renferme quelques coccus el une bactérie courte. Pas de microbes dans la paroi.

Le plateau épithélial est déchiqueté sur ses bords, haché, trouble; la striation a presque partout disparu. Par places il manque, entrainant avec lui des lambeaux de la cellule.

Les cellules épithéliales sont profondément altérées. Leur protoplasma est trouble, se colore très inégalement. Toute la partie profonde manque et n’est plus représentée que par des brides protoplasmiques qui s’entre-croisent en formant un réticulum dont les mailles circonserivent un œdème dans lequel nagent des poussières chromatiques, restes du protoplasma cellulaire.

La cellule épithéliale ainsi'altérée est réduite au 1/4 de sa hauteur normale. Partois dans les mailles du réticulum sous-épithélial on trouve des leucouytes poly ou mononucléaires. Certaines cellules épithéliales sont détruites complètement et représentées par un amas” de granulations prenant mal la couleur et formant comme un bouchou à la place de la cellule ancienne. Ceci se passe surtout au sommet des villosités.

Les noyaux épithéliaux sont absolument intacts.

Les vaisseaux sanguins, surtout ceux de la muqueuse et des villosités, sont absolument gorgés de sauy. Leur endothélium est intact.

Les chylifères centraux de la villosité ont également leur endothélium intact. La portion élargie en ampoule est littéralement bourrée d’un nombre énorme de mononucléaires geants, pressés les uns contre les autres et formant un véritable granulome. Ces éléments contiennent beaucoup de leucocytes et surtout une quantité tres grande d’hématies, plus ou moins dégénérées et entourées d’une vacnole claire. Ces mononucléaires, bien que lassés, gardent cependant leur individualité, et ne présentent pas, comme dans le tubercule, de pseudo podes de communication.

Parfois, bien que rarement, ces éléments sortent du lymphatique central pour pénétrer dans l’ædème sous-épithélial. On ne les rencontre jamais dans les lymphatiques de Ja sous-muqueuse.

Daus la muqueuse on voit un nombre assez grand de cellules fixes en karyokinèse; on observe également des karyokinèses assez nombreuses dans les cellules épithéliales de la base de la villosité.

L'épithélium glandulaire de Lieberkühn est intact. Intact également Pendothélium péritonéal. La leucocytose est faible dans les vaisseaux de la muqueuse ou de la sous-muqueuse.

Reins : Pas de microbes.

Endothélium des glomérules, endothéliums vasculaires intacts, congestion intense des vaisseaux. Pas de leucocytose intra-vasculaire ou des tissus.

L’épithélium des tubes contournés et des branches larges de Henle présente des lésions identiques. La striation disparaît. Puis les cellules se gonflent en prenant un aspect trouble et gravuleux ; elles finissent en se gonflant par combler entièrement la lumière du canalicule. Peu à peu apparaît une vacuole, pleine d’un liquide tenant en suspension quelques granulations protéiques, el qui refoule autour d'elle le protoplasma cellulaire. Cette masse liquide fait saillie, naturellement, au niveau du point de moindre resistance, c’est-à-dire vers la lumière du canal: en sorte que Le pr'otoplasma cellulaire avec lé noyau est repoussé vers la profondeur, Landis que du côté de la lumière cette varuole ne se trouve plus limitée que par une une mince membrane proloplasmique.