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Je n’ai fait jusqu'ici porter ces essais que sur des représentants des Gentianées, des Pirolacées et des Éricinées — les Lycopodes, les Burmanniacées, les Épacridées, etc. seraient aussi à expérimenter. J’avouerai tout de suite que ces expériences ne m'ont pas donné de résultats parfaitement nets et qu’elles ont marché assez irrégulièrement parfois : leur réussite exige, comme je le disais un peu plus haut, une habileté pratique qui ne s’acquiert qu’au bout de très longs essais : Noël Bernard a mis dix ans à parvenir à coup sûr au résultat cherché, et même en suivant sa technique, il faut un apprentissage dont la durée n’a peutêtre pas encore été assez longue pour moi — pour qui ces expériences ne constituaient qu’une partie assez restreinte du présent travail. De plus, le spectacle des erreurs et des contradictions obtenues d’abord, puis peu à peu reconnues

par les précédents expérimentateurs, me mettait en . défiance, par anticipation, contre les résultats que j’obtien-

drais : un insuccès dans la germination peut, en effet, provenir de bien des causes, et il est difficile de l’attribuer exactement à une seule raison envisagée dans la théorie que l’on cherchait à vérifier. D'autre part, combien d’expérimentateurs, depuis dix ans, ont cru obtenir des germinations aseptiques, puis ont reconnu que les plantules obtenues étaient mycélisées, soit par accident, soit par défaut de technique, soit par infestation déjà opérée sur l'embryon! Quoiqu'il en soit, et pour exposer ici mes travaux sans faire grand état de ce qu'ils mont donné, voici ce que j'ai obtenu au cours de ces expériences :

I. — Essais DE GERMINATIONS DE- GRAINES EN MILIEUX PRIVÉS DE CHAMPIGNONS

:. A) OrcuinéEs. — Orchis militaris : sur un coton imbibé de mannite en solution à 1/2 0/0 : très lent progrès en un tubercule de moins de ! millimètre ; au bout de trente-

quatre jours, déformation et flétrissement sans avoir verdi. — Sur coton imbibé de coton de salep; à peu près semblable, mort au bout de quarante à quarante-deux jours.

Goodyera repens : évolution plus rapide, mais s’arrêlant beaucoup plus tôt: croissance cessant au bout d'une dizaine de jours (sur les deux milieux de culture).

Neottia Nidus-avis : rien au bout de plus de trois mois.

Listera ovata: sur coton avec solution de mannite, développement assez lent, mais régulier, donnant un petit protocorme tuberculeux dépassant 2 millimètres au bout d’un mois à six semaines, Commence à dépérir à partir de deux mois. Nul verdissement, ni aucun stade plus avancé. Résultats moins nets Sur coton au salep.

Orchis Pyramidalis : tubercule très petit et croissant très lentement, sensiblement comme O. militaris: n’a pu. atteindre six semaines sans périr.

B) OroBancuées. — Orobanche Teucrü: envahi par des moisissures.

O. Rapum : Rien au bout de soixante-douze jours.

C) Moxorropées. — Monotropa Hypopiutys: sur coton imbibé de mannite, production d’un tubercule mal différencié, ayant 2 millimètres en trois semaines ; vu au microscope, il se montrait envahi et nécrosé par des microphytes inférieurs. De nouveaux essais faits avec toutes les précautions possibles pour éviter l’envahissement, n’ont amené aucune modification des graines.

D) Genrranées. — Ærythrea Centaurium: les graines ont germé lentement sur mannite, plus rapidement sur salep ; l'embryon était massif mais sans verdissement; au bout de vingt-six jours il mourait sans être envahi par les bactéries ; il présentait les caractères d’une très jeune plantule de dicotylédone, mais se différenciant mal: divers

essais de culture ont toujours amené la mort entre quatorze et vingt-huit jours. Des essais de repiquage en tubes plus grands ou en terre ne l'ont pas aidé à survivre; toutefois j'en ai pu conserver un peu plus longtemps à l'air libre (vingt-neuf, trente-et-un, trente-six jours) : mais ces plantules ont toujours fini par mourir peu différenciées, envahies et nécrosées dans leurs tissus par des microphytes. Il est pourtant probable que l’on doit obtenir des germinations à l’air libre, et que ce n’est pas impossible en tubes.

Chlora perfoliata: développement très lent (rien sur mannile) en embryon dépérissant au boul d'un mois. D'autres essais n’ont amené qu’une évolution insignifiante.

Gentiana Pneumonanthe : envahi par des maissisures.

E) Pinouacées. — Pirola rotundifolia : Développement assez lent et régulier, s’est brusquement arrêté au bout d’une vingtaine de jours. L’embryon était massif, non vert, peu différencié. Les essais sur cette plante seraient à reprendre, en variant les milieux et avec essais de repiquage.

Pirola minor : Embryon plus petit (1 à 2 millimètres , arrôté avant le seizième jour son développement.

F) Ericnées. — Erica cinerea, E. vagans, Calluna vulgaris: Les graines de ces trois plantes n’ont montré aucun changement au bout de deux mois. 3

Les essais de germination aseptique des graines du type plus haut défini n'ont donc donné aucun résultat ; mais ce n’est pas là une preuve bien valable de leur impuissance à germer ; des essais très nombreux et spécialement poursuivis pendant très longtemps aboutiraient peut-être à des. réussiles dans certains cas. Il faudrait surtout tenter ensuite des semis — ou des repiquages de très jeunes plantulesaseptiques — en milieux préalablement infestés de champi- gnons de nature endophytique. Malheureusement l'isole-.

Le

ment de ceux-ci est encore si incertain, si mal connuet si discuté, même pour les rares spécialistes qui pensent avoir réussi dans ces derniers temps (N. Bernard, A. Cotton, H. Burgeff), que l'expérience est peut-être encore prématurée. Je l’ai tentée par acquit de conscience et sans grande conviction ; j'ai fait des semis soit sur des tranches (coupées’aseptiquement) de larges racines infestées, principalement de Limodorum ; soit sur des tubes ensemencés de divers mycelia, soit fournis par des fragments de racines d'espèces correspondant aux graines essayées, soit par des espèces variées de champignons saprophytes connus. Jé n’entrerai pas dans le détail de ces essais assez peu développés d’ailleurs : ils se résument tous en ceci, qu'ils ont échoué par étouffement dû au développement du mycelium, ou par incapacité germinative de la graine. Ces expériences demanderaient plusieurs années d'essais spécialement consacrés à ce but, comme l’a fait N. Bernard pour les Orchidées.

Les spores de lycopodes, sans chlorophylle et donnant une plantule rudimentaire (prothalle en toupie, souterrain, sans réserves ni chlorophylle, à croissance très lente), sont évidemment à ranger dans la même catégorie.

Si,au contraire, c’est une graine riche et à embryon bien différencié que nous observons, nous obtenons à coup sr, eten quelques jours,de magnifiques germinations ; on sait que celles de graminées et de légumineuses sont extrèmement faciles et régulières, le milieu fût-il stérilisé et même dépourvu de matières nutritives (sable mouillé); l'embryon a tout ce qu'il lui faut dans ses cotylédons, son albumen ou son périspermé, pour grandir jusqu’à ce qu’il ait {ce qui ne tarde pas) chlorophylle et racines qui lui permettront de vivre autotrophiquement. Au fond, une plantule en voie de germination est toujours saprophyte ou parasite ; en s’allongeant hors dé sa graine, elle se repait ou bien de ses proprés réserves organiques, qu’elle digère par son assise protéique, ou bien de celles d’une plante voisine, si elle-même n’en

a point; cette plante-nourrice sera un phanérogame (hôtesses des Orobanches) ou un simple champignon inférieur {(endophyte des Orchidées) ; il va de soi que la jeune plantule pourra y prendre simplement des matières nutritives encore brutes, sans dommage appréciable pour la nourrice, ou vivre des tissus de celle-ci ; aussi, doit-on définir « sapro-parasite » la vie de la plantule. De plus, je laisse supposer icique l'on a affaire à un simple phéiomène de digestion, c'est-à-dire à une absorption de matériaux externes pondérables : mais nous verrons au chapitre HE que la nature des relations mycophytiques peut êlre, et c'est même assez probable, d'une autre nature. Chez les grainesriches et à embryon perfectionné, celui-ci se nourrit « par les moyens du bord », el des hyphes microscopiques el de masse insignifiante par rapport à la sienne, ne peuvent lui être d'aucun secours, au contraire : tandis que leur masse et leur contenu sont fort appréciables pour le minuseule et rudimentaire amas de cellules qu'est un embryon d'Orchidée. Nous avons vu que certaines semences agerminalion facile, comme les graines de Joncées et les spores de Mousses, malgré leur faible dimension et leur pauvreté en réserves fligurées et pondérables, sont à ranger dans la même catégorie, parce qu'elles ont de la chlorophylle, ce qui leur permet de vivre autotrophiquement dès le début de leur germination. L'intrusion d’un mycelium chez une plantule supérieurement constituée et approvisionnée, n'aura donc aucune raison pour se produire de facon précoce, el ce n’est pas la plante qui parait la désirer; déjà nous voyons là un * véritable cas de parasitisme. Nous discuterons cette idée dans les deux chapitres suivants.

Quant aux points d'entrée du mycelium dans les racines déjà bien développées de plantes âgées de plusieurs mois, les auteurs, comme nous l'avons vu dans la première partie, ont beaucoup disculé sur la localisation de ces points d'entrée ; j'avoue ne trouver à cette question qu'un intérêt

très secondaire et purement descriptif ; les détails doivent varier suivant la plante-hôtesse, le type de champignon, Fâge, etc. J'ai cité dans la deuxième partie, chapitre premier, pages 56-57, les principales observations à ce sujeL. Burgeîf (op. cit., p. 123) a établi une assez curieuse statistique de la répartition des hyphes dans les poils suivant la région de la racine adulte, mais il s’agit des régions de sortie des hyphes pour aller communiquer avec l'extérieur, et non des points d’entrée ; celle-ci, en effet, se fait surtout par où elle peut, suivant les points suffisamment pénétrables que présente la racine et les régions du sol qui sont infestées : puisque, aussi bien, l'infestation externe d'une racine adulte est toujours chose accidentelle et irrégulière, pouvant se limiter mème à une gaine ectophytique, ce qui n'a jamais lieu dans l'invasion mycélienne précoce telle que nous la voyons chez les plantules d’Orchidées. Je ne m'occuperai donc pas de cette question peu intéressante à mon point de vue, et je vais examiner le mode de vie que subit l'endophyte une fois bien introduit dans la racine arrivée à un certain âge.