Ibid., XVII, 1904, pp
culture les fragments de racine coupée, on en voit partir des moisissures banales ; enfin,des contre-essais consistant à inoculer à de jeunes plantules un Fusarium authentique, ont amené l'envahissement général et la mort de ces plantules (p. 119). Il a toutefois fait lui-même des expériences analogues d'extraction, et, poussant plus loin que ses prédécesseurs la recherche des endophytes mis en culture, il a retiré de trente-cinq plantes différentes une dizaine de genres : Mortierella, Mucor, Trichoderma, Gliocladium, Cephalosporium, A lternaria, Arthrobotrys, tous signalés dans l'humus par Oudemans et Kôning, Moëller, Lendner, elc ; plus Fusarium, Acrostalagmus et Thielaviopsis qui n'onbpas élé trouvés libres dans le sol — le dernier genre avait été signalé par Petri chez le Podocarpus, et Galiaud discute et condamne cette attribution. Depuis, N. Bernard a lui-mème reconnu (190%) que le Æusarium n est ni un vrai endophyte ni un hôte propre aux racines ; il a rapproché du genre Oospora des champignons extraits de racines d'Odontoglossum,de Phalænopsis et de Cattleya, qu'il décrit soigneusement et dont il expérimente de la façon la plus intéressante l’action germinatrice sur les plantules des Orchidées (1). Peklo (1906) croit avoir reliré l'endophyte authentique de Neottia (2), mais Burgeff met en doute le bien-fondé de cette assertion.
Devant ces nombreuses divergences, les auteurs les plus récents ont considérablement perfectionné leur technique ; la méthode de prélèvement interne de Matruchot et Molliard, dont nous avons parlé, leur a servi de modèle, et dans les cas assez rares où l’on se contente de couper un fragment des lissus internes pour l’abandouner en tube à salep stérilisé, on emploieles plus minutieuses précautions, dont on aura la description dans le travail de 1909 de Ber-
1. C. R. Ac, Sc , 21 sept. 1908, pp. 483-485, — /hid., 8 mai 1905, pp. 1272-1273, 2. Flora, Bd. XCVI, 1906, pp. 260-275.
nard (pp. 185-186). Gallaud dès 1904(Thèse p. 117) avait aussi employé le procédé Matruchot-Molliard, mais s’il a parfaitement évité toute contamination extérieure, il n'a pu arriver à faire croître le mycelium endophytique dans ses tubes à culture. Arth. Cotton a aussi tenté la culture pure d’un endophyte (1904).
Mais les plus récents modes de prélèvement du mycelium se font à présent par des procédés un peu différents : celui de Burgeff, exposé pp. 10-41 de son mémoire, consiste essentiellement à enfoncer dans la racine un tube capillaire de verre formant emporte-pièce, et dans lequel glisse un fil de verre formant piston, qui permet d’expulser dans le tube à culture le fragment prélevé, La dernière méthode de Bernard, très audacieuse, consiste à pêcher directement les pelotons d’endophytes dans les cellules, en y plongeant (sous un microscope redresseur à grande distance frontale grossissant 80 fois) un fil de platine emmanché, très fin et se terminant en un anneau ou boucle de diamètre microscopique, le tout stérilisé ; « On approche le petit anneau... de manière qu’un peloton et un seul se voie juste en son centre, On baisse alors le fl, il se prend une gouttelette de liquide dans l’anneau et le peloton avec elle... pour semer le peloton, il suffit de toucher le milieu de culture avec le petit anneau (1)». Une opération si délicate exige certainement, quoiqu’en dise avec trop de modestie l’auteur, une prodigieuse habileté : elle ne présente pas autant de risques de contamination qu'on pourrait le croire, parce qu'il est facile de s'assurer au microscope, en l’exécutant, de la pureté du peloton extirpé. Trois fois sur quatre la germination en tube du mycelium ainsi prélevé ne se produit pas ; mais quand la culture réussit, on obtient un beau système mycélien, dont les caractères végétatifs aussi bien que les sclérotes formés de filaments moniliformes (l'auteur n’a jamais pu arriver