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partie moyenne, au contraire, il y a, entre deux cils consécutifs, une distance de 2 y à 2 u 5 et, dans la partie postérieure, ils ne sont plus qu’à 1 s 8 d'intervalle.

La taille est également variable : ils sont, sur tout le corps, épais, longs et flexueux, mesurant de 7 s à 7 u 5 vers le milieu du corps, et ont une longueur de 8 y à 8 y 5 dans la région postérieure. 6

Chez Orchitophrya stellarum Cépède, les cils ne sont pas à section circulaire. Les plus forts grossissements (oc. 12 obj. 1.5) m'ont permis de voir que ces éléments sont aplatis, de telle sorte que leur section transversale est elliptique. Leur structure n’est pas homogène. La région axile est moins transparente que la région superficielle. Après double coloration, elle apparaît plus avide des colorants chromatiques que la région superficielle, laquelle est assez affine des réactifs cytoplasmiques.

ENDOPLASME. — Le cytoplasme est très limpide dans la région antérieure du corps ; il devient spumeux dans la région postérieure.

L'examen microchimique montre que certaines granulations endoplasmiques sont constituées par du glycogène (fig. 87), tandis que d’autres sont franchement de nature graisseuse. (fig. 88). Certaines d’entre elles sont basophiles, d’autres acidophiles.

Etudiées in vivo, les granulations les plus claires, plus petites que les autres, ont un aspect réfringent (fig. 85); elles se colorent en noir par l’acide osmique et par les fixateurs osmiques (fig. 88).

J’ai répété l’expérience de DaDppr pour mettre en évidence l'existence de granules graisseux endoplasmiques (1). Cette méthode doit confirmer les résultats obtenus par la réaction osmique. Maïs elle a comme elle l’inconvénient de réagir sur des Infusoires fixés.

(1) La méthode introduite dans la technique par DADDI est la suivante : Pour rechercher les éléments graisseux, on traite les Infusoires fixés au sublimé à 2 %, avec une solution saturée dans

de l’alcool à 70° de rouge Soudan III. Les granules graisseux se colorent vivement en quelques minutes. Les autres éléments du Protozoaire restent incolores. es

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I1 devenait intéressant d’étudier l’action 2n vivo d’un réactif permettant de déceler les éléments gras du cytoplasme sans altérer l’Infusoire.

Pour cela, j’ai adopté dans mes études cytochimiques la méthode que ISsEL (1905) à recommandée dans son travail sur les Ancistrides du golfe de Naples. Cette technique est très simple. Elle consiste uniquement dans l’action colorante in vivo du rouge neutre en solution saturée dans l’eau de mer. Je l’ai employée sans modification pour le parasite des Etoiles de mer pour les raisons que j’ai déjà exposées dans un travail antérieur.

Pour mes recherches de biochimie cellulaire des autres Infusoires astomes altérés par l’eau de mer, j'ai modifié la technique de la manière suivante : J’ai remplacé l’eau de mer comme dissolvant du rouge neutre par la solution physiologique isotonique du liquide digestif des animaux hébergeant les parasites intestinaux considérés.

Les résultats obtenus ainsi ont montré l’opportunité de cette modification de la méthode de ISsEL.

Sous l’ectoplasme, et entre les stries d'insertion ciliaire, des - colorations très fines, m’ont permis de mettre en évidence des éléments myonémiques intéressants (fig. 88). Pour cela, j'ai employé avec les fixateurs ordinaires (sublimé acétique, sublimé alcoolique de Schaudinn et liquide de Bouin) la coloration à l’'Hémalun-éosine-orange. Aïnsi, il se différencie nettement en coupes, des plages mauves dont le contour est franchement circulaire. Ce sont les sections des myonèmes longitudinaux.

MACRONUCLÉUS. — Le macronucléus, unique, est le plus souvent, au repos, subsphérique ou ovoïde. Quelquefois il prend une forme irrégulière mais toujours plus ou moins globuleuse (fig. 85, 86, 87). Il occupe ordinairement la partie centrale de l’endoplasme. Parfois, il est déjeté sur le côté jusqu’à venir presque au contact de la région sous-cuticulaire ectoplasmique.

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Sa taille varie en fonction de celle de l’Infusoire. Elle oscille entre 8 u et 13 y de diamètre environ.

MicRoNUCLÉUS. — Le micronucléus est plus colorable que le macronucléus. Il occupe une position très variable dans l’endoplasme et relativement au macronucléus. Au repos, sa forme est subsphérique ou ellipsoïdale. Dans le premier cas, il mesure 2 y à 3 w de diamètre ; dans le deuxième, le grand axe de l’ellipsoïde a 4 et le rayon de son cercle médian de lpà2p.

Division. — L’Orchitophrya se divise transversalement. Le micronucléus s’allonge d’abord en même temps que sa chromatine s’ordonne dans le sens du grand axe fusorial (fig. 89). Puis chaque moitié du fuseau orienté dans le sens de la longueur de l’Infusoire se détache de l’autre et finalement le micronucléus a donné deux micronuclei-fils. Un sillon transversal apparaît vers le milieu de la longueur du corps et en s’approfondissant graduellement divise l’Infusoire en deux parties. Le macronucléus, très allongé, s’étrangle au niveau du sillon et chacun des Infusoires-fils est ainsi constitué.

Au cours des recherches que j’ai poursuivies sur l’accommodation d’Orchitophrya stellarum Cépède au milieu marin, j'ai pu constater que la division s’effectuait aussi bien dans le testicule de l’hôte que dans le milieu extérieur.

ADAPTATION AU MILIEU MARIN. — En étudiant Orchitophrya stellarum Cépède dans les débris de testicule d’Etoile de mer, l’Infusoire conserve, pendant un temps assez long (jusqu’à une demi-heure) une morphologie et une cytologie normales.

Si, au contraire, je broiïe un peu de la glande génitale parasitée dans une assez forte quantité de solution physiologique, . l’Infusoire subit des modifications pathologiques, analogues, quoique lentes, à celles qu'éprouvent les Protozoaires endoparasites et les Infusoires astomes spécialement (en particulier Anoplophrya (p. 425), Protophrya (p. 465), etc.), lorsqu’ils sont plongés dans l’eau douce ou dans tout liquide ana-

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logue de tonicité inférieure à celle de leur milieu parasitaire habituel.

L’extrême rareté du parasite qui nous occupe, l’abondance des Etoiles de mer dans un même creux de rocher, la grande quantité d’Orchitophrya qu’on observe dans un même hôte et l’action tout à fait inattendue du liquide physiologique sur la constitution d’Orchitophrya stellarum m’ont conduit à étudier l’action du milieu marin sur cet intéressant Infusoire.

À cet effet, j'ai fait une série d’expériences qui consistaient :

10 À prendre un fragment de testicule parasité et à étudier l’aspect de l’Infusoire dans le milieu semi-fluide obtenu

par sa dilacération ; 2° à additionner progressivement de l'eau de mer filtrée à cette préparation et à observer les changements subis par l’Orchitophrya au cours de ces additions successives ; 30 à mettre dans un verre de montre un fragment du testicule comme un quart de noisette et à remplir ce verre de montre d’eau de mer ; 4 à mettre un testicule dilacéré dans un cristallisoir plein d’eau de mer et à étudier le sort réservé à l’Infusoire parasité; 5° à tenter l’infection artificielle de nouvelles Etoiles par immersion dans les cristallisoirs ensemencés. |

La conclusion générale de ces recherches peut se résumer comme suit :

19 Pendant la vie à l’intérieur du testicule de l’ Etoile de mer, le parasite accumule dans son endoplasme une grande quantité de substances de réserve, les unes amylacées, les autres de nature grasse.

20 L’appareil locomoteur de nature ciliaire montre les stries disposées selon des rangées longitudinales ou à peine incurvées selon une hélice à très long pas.

30 L’extrémité antérieure du corps, quoique plus étroite que la postérieure n’en est pas moins souvent très obtuse et

bourrée de substances de réserve.

4° Le corps est toujours massif. Le rapport de la longueur à la largeur du corps, variable selon les Infusoires, reste toujours très petit (fig. 89). La moyenne de quelques-uns de ces rapports chez des individus pris au Laser de l’observation nous donne comme indice d’allongement :

5° La progression de el dans le testicule s AErGERe surtout par simple translation.

6° Dans l’eau de mer, Orchitophrya stellarum Cépède ne subit pas de déformations pathologiques. L’Infusoire s'adapte au milieu marin. Ses mouvements sont très rapides, son cytoplasme est tout à fait normal. L’appareil ciliaire conserve ses caractères cytologiques normaux et l’extrémité antérieure du corps augmente sa sensibilité tactile.

7 L'adaptation de l’Infusoire peut être considérée comme instantanée. À peine dans l’eau de mer, ie parasite imprime à son corps, à l’aide de ses myonèmes longitudinaux, une torsion autour de son axe longitudinal. Ce phénomène (fig. 85, 86, et 87)est suivi d’un allongement très net (indice +). Il entraîne un changement de l'orientation des stries d’insertion ciliaire qui se disposent sur des hélices subparallèles.

8° Les cils continuant à battre activement d’avant en arrière suivant la direction de leurs lignes d’insertion ciliaire, l’action de la force de propulsion antéro-postérieure pendant la vie dans le testicule de l’hôte, s’exerce maintenant selon une hélice. De ce fait, à la simple translation s’est substitué un mouvement de progression par mouvement giratoire autour de l’axe longitudinal du corps. Ce nouveau mode de locomotion donne à l’Infusoire une vitesse beaucoup plus grande.

9 L’endoplasme devient plus clair par disparition progressive et partielle des éléments graisseux et amylacés emmagasinés par le parasite au cours de la vie intratesticulaire.

10° Cette vie externe pendant laquelle le parasite épuise ses réserves semble devoir être d’assez longue durée et devoir s’achever avec la disparition totale de ces réserves.

119 J’ai pu suivre, en compagnie de mon regretté maître,

le professeur GIARD, qui à présenté mes résultats à l’Institut (1907), l’adaptation d’Orchitophrya stellarum Cépède au milieu marin pendant seize jours, soit en présence d’Etoiles de mer indemnes, soit dans l’eau de mer seule.

12° Tous mes essais (24) d'infection expérimentale directe m'ont donné des résultats négatifs.

13° L’adaptation au milieu marin d’Orchitophrya paraît être un phénomène normal de la vie de cet Infusoire.

14 Les transformations résultant de cette adaptation sont surtout d'ordre cinétique ; elles tendent au déplacement rapide de l’Infusoire au sein du milieu marin.

15° La rareté du parasite, son habitat si spécial, son adaptation prolongée unique jusqu'ici chez les Astomes au milieu dans lequel vit l’hôte, permettent de supposer que : 1° le milieu parasitaire et le milieu marin ont une tonicité égale ou très peu différente; 2° la contamination des Etoiles de mer (malgré les résultats négatifs de mes essais d’infection expérimentale) doit s’effectuer par un processus d’infection directe.

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