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Argumenls en faocw de l'orijiim animale. — M.Aryumenls en faveur de F origine végétale. — C. Expérience décisive. — D. Conclusion.

Abordons maintenant la question de l'origine de ce pigment chlorophyllien. C'est le même problème qui s'est posé dans tous les cas nombreux où l'on a rencontré de la chlorophylle chez les animaux, — le problème de la chlorophylle animale. Peut-être présente-t-il, pour la solution, des conditions de simplicité et de facilité exceptionnelles, lorsqu'on l'examine dans le cas particulier du foie de l'escargot.

Il s'agit donc de savoir si la chlorophylle du foie est propre à cet organe ; si elle est fabriquée par l'organisme de l'escargot, avec ses propres ressources. Si c'est une xanlhophylle animale. Voilà l'une des alternatives A.

L'autre alternative B est la suivante : la chlorophylle hépatique est une substance extérieure à l'organisme, venue du dehors avec la nourriture, d'importation étrangère, alimentaire, d'origine végétale, qui s'est simplement fixée dans le foie par suite de conditions favorables particulières.

Telles sont les deux alternatives. Disons tout de suite qu'elles sont également vraisemblables d'avance, et même

correctement. Il l'a attribue' au rae'Iange de deux substances, une chloropliylle correspondant aux deux premières raies et l'hématine réduite correspondant aux deux dernières. Il ne pouvait pas éviter cette confusion, et cela pour deux raisons : la première c'est qu'il n'e'puisait pas préalablement le tissu hépatique des pigments aqueux qui, comme l'hémochromogène, peuvent partiellement se dissoudre dans l'alcool ; la seconde c'est qu'au lieu de recourir au chloroforme il n'employait précisément comme dissolvant que l'alcool, capable d'entraîner ces divers pigments.

qu'elles s'accordent également bien avec les premières

expériences rapportées jusqu'ici.

!. — A. Arguments en faveur de la chlorophylle animale. Expériences.

«. Valeur secondaire du ^ngtnent chlorophyllien. — La chlorophylle n'offre, a priori, rien de spécial aux végétaux. Les études anciennes et récentes sur l'étiolement, montrent bien que ce qui est caractéristique de la synthèse chlorophyllienne et par conséquent de la vie des végétaux verts, c'est le chloroleucite. C'est ce petit organe intra-cellulaire qui se teint de chlorophylle ; il travaille chimiquement à la synthèse des hydrates de carbone, lorsque sa teinture chlorophyllienne lui permet de disposer pour ce travail de l'énergie des radiations lumineuses absorbées par le pigment; mais, ces radiations peuvent être remplacées par une autre source d'énergie (sucre, etc.). C'est donc le chloroleucite qui est essentiel au point de vue végétal et non la chlorophylle.

|3. Analogie de la chlorophylle avec les pigments hïliaires. — En fait, il y a chez les animaux des pigments très analogues à la chlorophylle. Tels sont par exemple les pigments biliaires. Berzelius (1832) confondait la bihverdine des vertébrés avec la chlorophylle véritable. Stokes (1863) et plus tard A.Gautier (1879) ont insisté sur ces analogies de la chlorophylle avec la matière colorante de la bile. Elles sont, en effet, assez frappantes, si l'on compare la biliverdine à la xanthophylle. Les dissolvants sont les mêmes, par excellence le chloroforme; semblable, encore, le rôle d'acide faible ; semblables, les combinaisons avec les alcalis et la mutabilité de ces sels ; il y a également des analogies dans

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l'action des agents réducloiirs, et dans celle des agents oxydants, et des hydi'atanls. C'est nn point que nous examinerons plus lard.

7 . Conservation de ta chlorophylte liépatique pendant le jeûne hitiernal. — Nos premières expériences semblent favorables à la supposition d'une origine animale de la chloro|)bylle hépatique. Les escargots, examinés à la fin del'biver, après une période de plusieurs mois d'hibernation pendant laquelle ils n'ont point pris de nourriture, et par conséquent point de chlorophylle végétale, offrent encore dans leur foie l'hépato-xanthophylle. En particulier, nous avons constaté le fait sur des escargots fermés depuis le milieu d'octobre jusqu'au milieu d'avril, c'est-à-dire pendant six mois. L'animal a vidé son intestin sous l'épiphragme, au début de son inclusion et continue de produire une sécrétion hépatique rouge [hélicorubine de Ivrukenberg, hémoglobine deLankester, hématine réduite deSorby] capable d'éliminer, semblet-il, les éléments végétaux introduits antérieurement. La xanthophylle n'a cependant point été entraînée ; elle subsiste dans le foie. D'autre part, on n'en trouve pas sensiblement dans la sécrétion.

Ces expériences ont été d'abord interprétées comme la preuve que le foie fabrique lui-même sa chlorophylle au lieu de la recevoir toute faite du dehors (1). Mais cette conclusion excède le fait. L'expérience prouve simplement que la chlorophylle hépatique peut n'être pas d'importation alimentaire récente : le foie possède à son égard tout au

(l) C'est la conclusion de Mac Munu. — Mais, si l'on remonte à Tobservation qui a inspiré cette conclusion du savant anglais {loc. cit., p. 360), il semble qu'elle ne s'applique pas précisément à l'hépatochlorophylle, et que ce soit l'hémochromogôue qui aurait été retrouvé après six mois de jeune.

moins une faculté de fixation à la fois énergique et persistante. La conclusion ne va pas plus loin.

En résumé, il y a des probabilités pour l'origine animale del'hépato-xanthophylle : mais jusqu'ici rien de péremptoire.

IJ. — B. Arguments en faveur de l'origine végétale.

«. Pénétration dans le foie de la, chlorophylle alimentaire. — Il faut noter, avant tout, la possibilité que les aliments chlorophylliens pénètrent dans le foie. Nous avons, en effet, signalé précédemment la disposition particulière des canaux hépatiques chez l'escargot et d'autres mollusques. Ces canaux sont en facile communication avec l'intestin. Ce sont des diverticules du tube digestif très accessibles, par voie de reflux, au contenu de ce tube.

(3. Conservation j)Ossible de la chlorophylle alimentaire. — Une fois arrivée dans les canaux biliaires la chlorophylle végétale, alimentaire, est fixée certainement par le tissu hépatique : nous venons d'insister (A, 7) sur cette faculté de fixation.

La chlorophylle ainsi fixée dans le foie peut s'y conserver très longtemps. Cette conservation de la chlorophylle, ou, pour parler plus exactement, de ses caractères spectroscopiques est un fait très remarquable. Wohl (1865) a retrouvé le spectre chlorophyllien après plus de dix ans, dans des feuilles qui avaient été gelées, puis abandonnées dans un vase, humectées d'eau distillée. On a observé ce même spectre sur des feuilles sèches conservées depuis plus de trente ans. On a vu la raie spécifique de Brewster dans le terreau et la terre de bruyère. On la reconnaît dans les feuilles

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de thé qui oui. subi l'infiision el que l'on rejette de la théière. J. Chautard s'est assuré de la présence de la chlorophylle dans les résidus de la digestion, chez l'homme, les animaux de boucherie, le chien, le chat, le lièvre, le lapin, la canlharide, le hanneton, et, enfin, dans les egesta de l'hélix. Les résidus digestifs continuent à présenter les mêmes caractères spectroscopiques après plusieurs jours d'abstinence d'aliments chlorophylles.

y. Inconstance accidenlelle du pigment hépatique chlorophyllien. — Nous savons maintenant que la chlorophylle végétale, alimentaire, peut pénétrer dans le foie du mollusque, s'y fixer et s'y conserver ; et c'est ce dernier fait qui enlève toute valeur décisive à l'observation qui nous avait tant frappés au début, Mac Munn et nous à savoir, l'existence du pigment xanthophyllien dans le foie des escargots après six mois de jeûne hibernal. Une telle persistance expliquerait la présence très générale de l'hépalo-xanthophylle dans le foie des mollusques, alors même que cette substance serait d'origine végétale.

Mais cette existence très générale comporte des exceptions, et c'est l'une d'elles qui nous a mis en éveil. La voici : Au cours de nos études, nous avons eu l'occasion de rechercher l'hépato-xanthophylle chez des anodontes, d'ailleurs bien portantes, conservées dans un aquarium à eau très courante, et ne recevant pas d'aliments chlorophylles. La chlorophylle hépatique faisait défaut dans leur foie. D'autre part, dans les échantillons qu'a examinés Mac Munn, ce pigment était présent. Cette observation a attiré notre attention sur le caractère contingent du pigment en question. Nous nous sommes proposé de repro-

duire expérimentalement cette contingence, c'est-à-dire de faire apparaître ou de supprimer à volonté chez l'animal l'hépato-xanthophylle. Nous y sommes parvenus en réglant le régime. L'expérience suivante nous paraît, à cet égard, décisive.

III. — Suppression de la chlorophylle hépatique par privation d'aliments chlorophylles.

Nous avons opéré sur les escargots ; après la période hibernale, nous avons nourri pendant tout l'été et l'automne une centaine d'escargots avec des aliments privés de chlorophylle.

Nous les avons sacrifiés successivement, depuis le mois de juillet jusqu'au mois de novembre 1898.

L'expérience a donc duré un an eu moyenne.

Expérience. — Les animaux recueillis au mois d'octobre 1897, conservés dans une cave obscure, sont sortis d'hibernation vers le milieu de mars 1898. On en a fait trois lots. Le premier lot, de beaucoup le plus nombreux, a été nourri exclusivement de navets exactement nettoyés et débarrassés de toute matière verte.

Le second lot a été nourri de plantes étiolées. Nous avons fait germer à l'obscurité des graines de haricots ; nous les avons arrosés d'une dissolntion sucrée, de manière à permettre leur croissance au delà des premières feuilles et d'avoir ainsi des plantes assez développées pour pouvoir servir à l'alimentation de tout le lot d'animaux.

Le troisième lot, laissé à la lumière, a été nourri avec du papier à filtre imprégné de diverses substances alimentaires, amidon, gélatine, peptone, sels de fer, ferrine.

Ces animaux ont servi à des déterminations diverses, dont quelques-unes n'ont rien à faire avec le sujet qui nous occupe actuellement ; par exemple à celle du fer hépatique. Deux groupes de 10 escargots, empruntés aux lots 1 et 3, ont été examinés au point de vue des pigments hépatiques. Le tissu hépatique séché a été épuisé par le chloroforme. La liqueur est légèrement colorée. Elle contient donc un pigment. Il n'a pas les caractères spectroscopiques de la chlorophylle ; mais seulement ceux du choléchrome.