CHAPITRE PREMIER

Remarques sur la structure de l'œuf avant la ponte.

Les recherches de Ray Lankester (1) et d’Ussow (2) ont fixé dans ses traits généraux l’histoire du développement de

(1) E. Ray Lankester, Observations on the develop. of the Cephalopoda (Quaterly Journal of micr. Science, t. XV, 1875).— The growth of the ovarian Egg of Loligo and Sepia (Phil. transactions, 1875).

@) M. Ussow a publié divers mémoires allemands ou russes sur le déve-

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l'œuf; 1l reste cependant des points importants sur lesquels ces auteurs ne sont pas d'accord, par exemple le sort de la vésicule germinative ; et d'autre part, leurs recherches ont été faites à un moment où lattention n'avait pas été encore appelée comme elle l’est aujourd’hui sur les phénomènes de maturation de l'œuf. Pour toutes ces raisons, Je reviendrai rapidement sur la structure de l'œuf ovarien, en corrigeant quelques-unes des données généralement admises, qui m'ont paru mexactes, el en insistant surtout sur les transformations de la vésicule germinative et sur la constitution de l’œuf au moment de la ponte.

Avant tout, j’exposerai les méthodes dont je me suis servi.

Pour les œufs ovariens, leur grosseur et la présence autour d'eux d’un follicule épais et plissé rendent impossible l'étude par transparence. Il faut donc recourir aux coupes en séries faites après l’action des réactifs fixateurs.

Les mêmes causes qui empêchent lobservation directe, c’est-à-dire le volume des œufs et la présence du follicule, nuisent aussi à la fixation, qu’il est difficile d'obtenir parfaite ; cependant je suis arrivé à de bons résultats avec l'acide osmique et avec la liqueur picro-sulfurique de Kleinenberg. La liqueur picro-sulfurique que lon emploie actuellement au laboratoire du professeur Kleinenberg, et dont je me suis servi, se prépare de la façon suivante : on verse dans une solution saturée d'acide picrique 2 pour 100 d'acide sulfurique concentré, on filtre et l’on ajoute pour une partie du mélange filtré trois parties d’eau, puis on dissout 2 pour 100 de sel marin dans cette dernière liqueur. Après un séjour de deux heures environ dans la liqueur picro-sulfurique, les objets sont portés dans l'alcool à 70 degrés, renouvelé jusqu’à déco-

oppement des Céphalopodes, de l'année 1874 à l’année 1879. En 1881, il a publié dans les Archives de biologie de Van Bencden (t. I), ses Untersuchungen über die Entwickelung der Cephalopoden, dans lesquelles il résume ses anciennes recherches, en y ajoutant quelques faits nouveaux. C’est à ce dernier mémoire que je reuvoie constamment, sauf indication précise du contraire.

loration parfaite, puis colorés au carmin et débités en coupes.

L'étude au moyen de coupes est seule possible pour les œufs revêtus de leur follicule, parce que les plis folliculaires qui pénètrent jusqu’à une certaine profondeur dans l’intérieur de l’œuf empêchent d'isoler convenablement le vitellus formatif et de l’étaler pour l’examiner à plat; mais, lorsque les œufs ont abandonné leur follicule et sont tombés dans la poche péritonéale qui renferme l’ovaire, le vitellus formatif, rassemblé au pôle aigu de l’œuf sous la forme d’une lame bien distincte, peut être facilement isolé et examiné à plat dans toute son étendue. Ges préparations de la lame protoplasmique sont les plus instructives, voici comment on les obtient. Les œufs retirés de la poche péritonéale et de Poviducte où ils sont empilés, sont portés dans un mélange à parties égales, fraîchement préparé, de liqueur de Kleinenberg et d’une solution de bichromate de potasse à 2,5 pour 100 (1). Le chorion qui enveloppe l'œuf devient immédiatement plus ferme; à l’aide de fins ciseaux on coupe l’œuf en travers suivant l'équateur, et on porte l'hémisphère aigu dans la liqueur de Kleinenberg seule. Le mélange ci-dessus n’est pas employé comme fixateur, mais seulement pour durcir le chorion et pour permettre de le séparer plus facilement du vitellus; en effet, si l’on coupe l'œuf directement sous la liqueur picro-sulfurique ou sous l’eau de mer, le chorion se gonfle et adhère à la lame protoplasmique dont il est bien difficile de le séparer ensuite sans déchirer cette dernière ; au contraire, après l’action du bichromate, le chorion s’enlève comme une calotte en laissant libre et intact le contenu de l’œuf. Les œufs doivent rester à peine une ou deux minutes dans le mélange picro-chromique, et ne doivent pas présenter de traces de coloration par le bichromate. On les place ensuite dans un cristallisoir bas contenant de la liqueur de Kleinenberg, en les faisant reposer sur leur section, de manière que la lame protoplasmique soit tournée

(1) Ce mélange m’a été indiqué par mon ami le D' R. Fusari, qui l’employait pour ses recherches sur le développement des Téléostéens faites au laboratoire du professeur Kleinenberg.

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en haut. Au bout d'une heure et demie on peut, à l’aide d’une spatule, détacher peu à peu la lame protoplasmique du vitellus nutritif sous-jacent, on la reçoit dans un verre plat contenant très peu d'acide picro-sulfurique où elle s'étale d’une manière parfaite. On remplace alors Pacide picro-sulfurique par de l'alcool à 70 puis à 90 degrés. Par cette méthode on obtient des préparations sans aucune déchirure. L'acide osmique et la liqueur de Flemming sont loin de présenter tous ces avantages; ils rendent la lame protoplasmique très friable, il est difficile de l'enlever en entier, en outre ils colorent trop fortement les globules vitellins qui restent attachés à sa face inférieure et obscurcissent la préparation, Cependant on peut les employer lorsqu'on veut faire des coupes totales de l'œuf, et ils rendent des services en permettant de contrôler les résultats fournis par la méthode précédente.

Pour isoler le blastoderme dans les œufs pondus, on emploie exactement la même méthode que ci-dessus, à cela près qu'une fois les premiers stades de la segmentation passés, il n’est plus besoin de couper les œufs sous le mélange de bichromate et de liqueur picro-sulfurique, parce que le chorion se détache très facilement du germe. Il suffit alors de recevoir directement les œufs dans l'acide picro-sulfurique après les avoir dépouillés de leurs enveloppes colorées.

J'ai toujours employé parallèlement (à partir du moment de la chute des œufs) ces deux moyens d'étude : 4° examen à plat du vitellus formatif isolé; 2 coupes en séries, soit de la lame isolée seule, soit de l'œuf entier avec le chorion pour les rapports. Quel que soit le mode de fixation adopté, j'ai employé concurremment les trois modes de coloration suivants: 1° le carmin boracique à l'alcool préparé suivant la formule de P. Mayer, surtout pour la coloration d’embryons avancés; 2° l’hémaloxyline de Kleinenberg, qui donne d’excellents résultats dans l’étude de la karyokinèse, — les figures de la division des noyaux se voient très bien après l'emploi de la liqueur picro-sulfurique; — 3° la safranine. Je me suis servi de ce dernier mode de coloration pour contrôler les

DÉVELOPPEMENT DE LA SEICHE. 7 résultals que me donnaient les deux autres pour l'étude de la division des noyaux.

L’ovaire d’une Seiche examiné au moment de la reproduction renferme des œufs à tous les stades de développement, les plus petits sont à peine visibles à l'œil nu; les autres, plus gros, sont revêtus de leur follicule encore lisse, qui devient réticulé dans les œufs plus avancés, enfin un certain nombre ont abandonné l'ovaire et sont tombés dans la poche péritonéale qui l'entoure.

Je décrirai d’abord les plus petits. Ils consistent simplement en une cellule d'assez grande taille (fig. 1) munie d’un noyau, dépourvue de membrane propre, mais enveloppée d’une couche très mince de cellules aplaties qui forment le rudiment du follicule. Le protoplasma est homogène, sans granulations vitellines ni graisseuses; le noyau ou vésicule germinative, assez volumineux (50 y de diamètre), présente une mernbrane très nette, el un contenu dans lequel on distingue: 1° des globules assez volumineux, sphériques, fortement colorés par le carmin ; 2° des grains évidemment de même nature que les globules, mais beaucoup plus petits qu'eux, et qui forment un passage entre. les globules et les éléments de la troisième catégorie qui sont : 3° des granulations fortement colorées, un peu plus grosses que les granulations du protoplasma de l'œuf, et qui constituent une grande partie du contenu nucléaire. Les globules sont en nombre variable, en général d'autant plus nombreux qu'ils sont plus petits; on en trouve quelquefois seulement un ou deux très gros; mais le cas le plus général est celui que représente la figure 1. En examinant un certain nombre d'œufs, on voit que les variations dans le nombre et dans la grosseur des globules sont telles qu'il est impossible d'attribuer aucune fixité à ces corps, et qu'il paraît évident qu'ils sont capables de se diviser un grand nombre de fois. Les globules et les grains, étant donnée leur coloration intense par le carmin, doivent être considérés comme représentant la substance chromatique du noyau. Une

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telle disposition de la chromatine a été vue dans d’autres œufs. Carnoy (1) a montré que dans le noyau des œufs du Brochet, à un stade jeune la nucléine se présente à lPétat de nombreuses sphérules de tailles diverses; les globules et les grains semblent répondre à ces sphérules; quant aux granulations, on verra par la suite qu’elles dérivent probablement des globules et des grains. Après l’action des réactifs, le contenu du noyau se rassemble souvent en un amas plus fortement coloré que le protoplasma de l’œuf, et qui laisse entre la membrane du noyau et lui-même un espace vide. C’est probablement à tout le contenu nucléaire ainsi condensé et fortement coloré que R. Lankester donne le nom de nucléole. Sa figure 14 (2), et la description qu'il donne ensuite de la disparition du nucléole sont bien d'accord avec cette hypothèse. Ussow (3) a dessiné des vésicules germinatives renfermant un certain nombre de corps sphériques qui correspondent évidemment à mes globules chez Argonauta argo, Ommastrephes todarus, Loligo vulgaris.

Dans des œufs un peu plus gros (fig. 2), le follicule jusqu'alors simple et composé de cellules aplaties se complique; celles de ses cellules immédiatement appliquées sur le protoplasma s’arrangent les unes à côté des autres à la manière d’un épithélium, et forment le feuillet interne —feuillet épithélial (R. Lankester), membrana granulosa (Ussow) tandis que les cellules externes se disposent en un feuillet lamelleux — {heca folliculi (Ussow). — L'œuf qui fait saillie à la surface libre de l'ovaire est rattaché à ce dernier par un pédoncule, et présente dès lors la forme d’un ovoide avec un pôle fixe (celui qui correspond au pédoncule), large et arrondi, et un pôle libre aigu. Des vaisseaux arrivent par le pédoneule, passent entre le feuillet interne et le feuillet externe; puis la membrane granuleuse jusqu'alors lisse, se fronce, et com-

(1) Carnoy, la Biologie cellulaire, p. 223, fig. 80. (2) E. Ray-Lankester, The growth of the ovarian Eggq.…., p. 39-40. (3) Ussow, HaGxmoenia HaxB passntieMB TOIOBOHOTHXE MOMIOCKOEB. Cephalopoda Guv. Moscou, 1879, fig. 1, 4, 6 dans le texte, et 2 À et 5, pl. L. ARTICLE N° 5.

DÉVELOPPEMENT DE LA SEICHE. 9 mence à édifier le système de plis compliqués caractéristique de l’œuf ovarien des Céphalopodes. Pendant ce temps le volume de l’œuf s’est considérablement accru, celui de la vésicule germinative également; cette dernière a maintenant un diamètre double de celui qu'elle avait au stade précédemment décrit. Son contenu à subi en même temps des modifications considérables (fig. 2), le nombre des granulations s’est considérablement augmenté pour répondre à l'accroissement de volume signalé, mais on ne trouve plus un seul globule, et les grains sont devenus très rares, on n'en compte plus que quelques-uns. La disparition des globules et des grains coïncidant avec l'augmentation du nombre des granulations, porte à penser qu'il y a entre ces deux phénomènes une corrélation, et si l’on se rappelle les formes de transition qui existent entre ces divers éléments, il paraît vraisemblable que les globules se sont résolus en granulations. À la suite de ces changements, le contenu de la vésicule germinative devient plus uniforme, il se compose d’un fond de granulations fortement colorées, sur lequel se détachent quelques grains. À cause de la forte coloration des granulations, il reste encore plus coloré que le protoplasma de l'œuf (fig. 2).

Mais à mesure que l’évolution de l'œuf continue, les granulations elles-mêmes deviennent de plus en plus fines et ne se colorent plus aussi vivement ; de sorte que finalement (fig. 3) la vésieule germinative apparait remplie d’une masse très finement granuleuse. Cette masse à tous les caractères du protoplasma ; moins colorée que le protoplasma de l'œuf, elle renferme quelques corpuscules très colorés, mal définis, et qui semblent résulter de l’accolement de quelques-unes des granulations qu'on trouvait au stade précédent. Une telle structure n’est pas sans analogie avec celle que présentent les œufs du Brochet, auxquels j'ai déjà fait allusion; et les transformations de la vésicule germinative chez ce dernier animal concordent assez bien avec celles qui ont lieu chez la Seiche, en ce sens que, dans les deux cas, le contenu du noyau se compose en majeure parte, au début, de chromatine, tandis

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qu’à la fin c’est le protoplasma qui l'emporte de beaucoup en quantité. Carnoy admet que le protoplasma nucléaire provient du protoplasma cellulaire ; chez la Seiche, la transformation de la substance chromatique en protoplasma nucléaire me semble suffisamment prouvée par la disparition progressive de la chromatine à mesure que le noyau grandissant se remplit de protoplasma (1).

La vésicule germinative reste dans cet état environ jusqu'à la déhiscence du follicule. Ray Lankester, qui a suivi avec soin ses transformations, à signalé la disparition du nucléole, qui semble se dissoudre et se perdre dans le contenu de la vésicule germinative. Gelte description concorde parfaitement avec ce que J'ai vu, si lon admet que l’auteur anglais donne le nom de nucléole à tout l'amas de corpuscules chromatiques qui occupe le noyau au début; car, dans ce cas, la transformation de ces corpuscules colorés en un protoplasma pâle et délicat aurait produit exactement l'apparence d’une dissolution et d’une disparition du nucléole.

Dès que la formation des plis du follicule est assez avancée, les cellules de la membrane granuleuse commencent à sécrêter le vitellus nutritif, qui apparaît à la surface des plis comme une couche continue, puis qui se concentre çà et là sous forme de globules s’empilant dans les espaces laissés libres entre les plis. Ces globules sont très réfringents, parfaitement homogènes : ils se colorent fortement par le carmin et par l’hématoxyline. Pressés les uns contre les autres, ils prennent des formes très irrégulières, présentant des dépressions et des crêtes, ou bien des pointes plus ou moins allongées qui leur donnent parfois un aspect étoilé assez semblable à celui de cellules animées de mouvements amiboïdes. Le vitellus nutritif s’accumule au pôle fixe de l'œuf et repousse vers le pôle

(1) Wielowjejski (Zoolog. Anz., 29 juin 1885) a déjà remarqué la possibilité de transformation de la chromaline en la substance pâle et peu colorable du noyau : Das echte chromatin schwindet nach und nach aus dem Kerne sich vielleicht direct in die andere, in typischen Keimbläschen vorfindende und in Methylgrün nicht farbbare Substanz um wandelnd.

DÉVELOPPEMENT DE LA SEICIE. I libre le protoplasma et la vésicule germinative. Comme l’a fait remarquer Ussow, il ne se mélange pas au protoplasma, de sorte que, par son accroissement, il le presse de plus en plus contre la paroi du follicule et le réduit à une lame située audessous de la membrane granuleuse, au pôle aigu de l'œuf. La vésicule germinative renfermée dans le protoplasma se trouve par conséquent repoussée à la périphérie. Elle prend place dans un petit espace cireulaire qui existe au pôle libre de œuf, et vers lequel la membrane granuleuse ne présente pas de plis. Kôlliker (1) paraît l’avoir observée en place sur des œufs durcis.

Lorsque la sécrétion du vitellus nutritif est achevée et que l'œuf à atteint sa grosseur définitive, on voit apparaître audessous de la membrane granuleuse, entre cette dernière et l'œuf, une membrane protectrice spéciale, le chorion. Le chorion apparait d’abord sous la forme d’une substance hyaline qui double les plis de la granuleuse en dedans, et en suit naturellement toutes les inflexions. Il est beaucoup plus épais vers le pôle aigu de l'œuf, dans les limites de son contact avec le protoplasma. Au delà des bords de ce dernier, là où la granuleuse repose directement sur le vitellus de nutrition, il est très mince. Au sommet de l’œuf, les membranes folliculaires offrent une disposition particulière en rapport avec la formation du micropyle. Sur la figure 3, on voit qu'en ce point la membrane lamelleuse externe s’épaissit et forme comme une lentille dont la convexité s'engage dans la granuleuse, en la découpant sur une partie de son épaisseur. C’est en ce point que se formera ultérieurement le micropyle. Cette disposition suffit déjà pour indiquer que c’est bien vraiment le follicule qui sécrète la membrane protectrice et que, par conséquent, le nom de chorion donné à cette membrane par Ussow est bien choisi. Pendant les premiers temps de la formation du chorion, sa face inférieure en contact avec le

(1) Külliker, Entwickelungsgeschichte der Cephalopoden. Zürich, 1844, p. 9 et 10.

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vitellus formatif est découpée sur de nombreux points par des prolongements que le protoplasma envoie à travers son épaisseur. Gette disposition est due, sans doute, à l’activité propre du protoplasma, qui tend à se rapprocher des cellules follieulaires chargées de la nutrition de l’œuf.

Kôlliker avait reconnu l'existence d’un chorion qu'il appelait à tort membrane vitelline. R. Lankester (1) n’a pas vu le chorion, il pensait que l’œuf tombait dans la cavité du corps sans présenter d’enveloppe, et que la membrane percée du micropyle, que l’on trouve autour des œufs pris dans l'oviducte, se formait dans ce conduit. Jai déjà dit qu'Ussow à reconnu la véritable nature du chorion.

Lorsque l'œuf a subi toutes les modifications décrites eidessus, il ne va pas tarder à abandonner ses enveloppes folliculaires pour tomber dans la poche péritonéale; mais, auparavant, la vésicule germinative disparait. On connaît déjà la structure de la vésicule germinative; au moment présent, elle offre quelques déformations qui résultent de la pression exercée sur elle, plus ou moins directement, par le vitellus nutritif; en outre, les corpuscules colorés répandus dans son intérieur sont devenus plus réguliers d’aspeet et forment des petits grains chromaliques très nets. La membrane de la vésicule germinative disparait alors sans laisser de traces; son contenu se mêle d’une façon absolument parfaite avec le protoplasma qui l’entoure, et on ne trouve plus dès lors, dans l'œuf, que le protoplasma et le vitellus nutritif, le noyau a entièrement disparu. Les grains chromatiques contenus dans la vésicule germinative passent dans le protoplasma, en mème temps que la vésicule mêle son contenu à ce dernier, puis s’ordonnent entre eux en formant une couronne (fig. 4).

C'est à ce moment que se produit la déhiscence du follicule. A ce propos, R. Lankester pense que les cellules de la membrane granuleuse, à la fin du développement, émigrent dans l'intérieur de l’œuf, servant ainsi de nourriture à ce dernier et

(1) R. Lankester, Observ. on the develop. of the Cephalopoda, p. 38. ARTICLE N° 5.

amenant en même temps, par la destruction de la granuleuse qui résulte de cette migration, la rupture du follicule. La présence du chorion s'oppose déjà à une telle absorption de la granuleuse; mais, en outre, les figures que donne Lankester pour montrer le passage des cellules dans l'œuf ne me persuadent point. Ainsi dans sa figure 23, planche XII, les points de passage des cellules dans le vitellus sont simplement dus à ce que, en ces endroits, les plis folliculaires ont été coupés obliquement. J’ai représenté (fig. 3), un noyau d’une cellule épithéliale qui semble-précisément pénétrer dans le vitellus ; mais, lorsqu'on examine les coupes qui suivent et celles qui précèdent la coupe dessinée, on voit bien que ce noyau fait partie d’un pli obliquement coupé et qu’il rentre parfaitement à son rang parmi les autres. En outre, les dessins de l’auteur anglais, qui représentent des cellules émigrées de la paroi dans l’intérieur du vitellus, se rapportent sans doute à des globules vitellins déformés. Je n’ai jamais observé la migration des cellules du follicule dans les œufs possédant leur système de plis complètement édifié. Quoi qu’il en soit, la déhiscence du follicule se produit, les plis s’effacent et l'œuf présente dès lors une surface lisse et unie, formée par le chorion. C’est le chorion qui maintient la forme de l’œuf, dont le contenu mou et presque fluide s’écoule en quelque sorte dès que l’on a coupé cette enveloppe. Le chorion est parfaitement transparent; il est souvent recouvert par places de débris épithéliaux provenant de la membrane granuleuse. Comme je l'ai déjà dit, il présente sa plus grande épaisseur au pôle aigu de l’œuf, où il est percé d’un canal très fin à bords Bhrallèles, le micropyle.

Le micropyle se forme au centre de l’aire circulaire laissée libre entre les plis convergents du follicule; cette aire ne se trouve pas absolument au pôle géométrique de l'œuf, mais un peu au-dessous. Le chorion est appliqué immédiatement sur le corps de l’œuf, et l’on ne trouve pas interposée entre les deux une couche d’albumine, comme on l’a constaté chez d’autres Céphalopodes.

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Le chorion mis à part, l'œuf se compose alors du vitellus nutritif qui forme la plus grande partie de sa masse, et du vitellus formatif qui occupe l’hémisphère aigu, sous la forme d’une lame d'épaisseur inégale, assez forte sous la pointe de l'œuf, mais qui va diminuant rapidement vers l'équateur, où elle devient si mince qu'on ne peut l’apercevoir que sur les coupes traitées par l'acide osmique, qui, en faisant ressortir en noir les grains graisseux qu’elle renferme, permet de la reconnaître. En étudiant le bord de cette lame protoplasmique, on voit qu'il s’accroit d’une manière continue aux dépens du vitellus de nutrition, de la même façon que l’on voit se former le protoplasma aux dépens du vitellus des premières sphères de segmentation chez d’autres Mollusques. Il en résulte que l'œuf finit à un moment donné par être entièrement recouvert de protoplasma. Du côté de la face interne (vitelline) du protoplasma, la limite entre ce dernier et le vitellus de nutrition est toujours parfaitement nette et incontestable. Jamais le protoplasma n’envoie de prolongements dans le vitellus, jamais il n'existe entre eux de zone intermédiaire à caractères mixtes el douteux, comme cela se voit dans d’autres œufs méroblastiques. L’œuf de Seiche représente le plus haut type des œufs à vitellus formatif et nutritif séparés, des œufs méroblastiques. Si l’on se rappelle le mode d'apparition du vitellus nutriuf qui repousse au-devant de lui le protoplasma sans se mêler à lui, on voit que la distinction entre les deux vitellus est primitive, contrairement à ce qui se passe dans d’autres œufs où elle ne s'établit qu'après la fécondation (Téléostéens).

Lorsqu'on examine la lame protoplasmique à plat après l'avoir isolée du vitellus de nutrition (fig. 9), on y distingue une série de lignes sombres qui convergent vers un point, mais s'arrêtent à une certaine distance de ce dernier, et quelques-unes d’entre elles se réunissant à ce niveau par des anastomoses circonscrivent une sorte de cirque incomplètement fermé. Ges lignes correspondent à des épaississements en forme de crêtes basses et larges que présente le protoplasma à sa face inférieure ou vitelline. Les crêtes correspondent aux

DÉVELOPPEMENT DE LA SEICHE. 45 plis des follieules, elles sont des lieux d'élection pour l’absorption du vitellus par le protoplasma, absorption qui s’opère de la manière suivante : un globule vitellin, recouvert par le protoplasma, est finalement attiré dans l’épaisseur de ce dernier; lil s’'entoure d’une vacuele claire, se décolore et se fragmente, puis ces fragments eux-mêmes disparaissent et la vacuole subsiste seule à sa place. Ces vacuoles disparaissent aussi après un cerlain temps, ou du moins cela est probable, car on en trouve de toutes les grandeurs, jusqu’à de très petites, ce qui tend à faire croire que leur contenu se répand peu à peu dans le protoplasma.

La disposition des crêtes est la même que celle des plis longitudinaux du follicule, et l'aire circulaire qu’elles entourent répond à l'aire dépourvue de plis dans laquelle se trouve le micropyle. Vers leur périphérie, ces crêtes diminuent de hauteur et de largeur, et, après s'être quelquefois divisées, se perdent dans le protoplasma où elles forment encore parfois des réseaux assez peu nets qui semblent correspondre aux mailles du follicule. Cette disposition tend cependant peu à peu à s’effacer, le nombre des crêtes diminue et l’on voit celles qui restent disparaître progressivement. Il est probable que cette ordonnance des crêtes est commandée par l’arrangement des plis du follicule dont elle est comme un dernier reflet.

La couronne de grains chromatiques que j'ai signalée plus haut se retrouve facilement, mais dans la plupart des œufs elle est devenue la plaque équatoriale d’un fuseau. Ce fuseau (fig. 6) est de petite taille, il est situé obliquement dans l'épaisseur de la lame protoplasmique ; il occupe presque toujours le bord du cirque entouré par les crêtes, et de préférence l'épaisseur d'une des crèles qui en forment la bordure. La direction de ce fuseau par rapport au centre de convergence des crêtes est assez variable, mais en l'absence de point de repère précis, je ne puis la spécifier davantage. Ce fuseau qui provient en somme de la vésiculegerminative puisqu'il se forme autour des grains chromatiques qu’elle renfermait, parait évidemment correspondre au fuseau qui produit les vésicules

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directrices, aussi je le nommerai premier fuseau de direction. Je lai retrouvé dans les œufs pris dans l’oviducte de différentes Seiches. Malgré mes soins, je n’ai jamais pu observer la formation des globules polaires : tous les fuseaux que j'ai examinés se trouvaient à peu près au même point d'évolution, à savoir au moment où les grains chromatiques dessinent la plaque équatoriale.

Külliker (1) avait reconnu que la vésicule germinative a disparu dans les œufs après qu'ils ont abandonné leur follicule. Trente ans après, R. Lankester (2) confirmait ces données. Au contraire Ussow admit dès ses premiers travaux que la vésicule germinative persiste et est divisée en deux par le premier sillon de segmentation. Dans son dernier mémoire, après avoir signalé en note (3) que les transformations de cette vésicule pouvaient bien lui avoir échappé à l’époque où il faisait ses recherches, il reproduit dans le cours du texte et dans ses conclusions son opinion ancienne. Grenacher (4), dans des œufs pondus et non segmentés, n’a pas trouvé de vésicule germinative.

Il importe de résumer rapidement les données que nous avons acquises sur la structure de l’œuf ovarien, ce sera la fin de ce chapitre. L’œuf est au début une simple cellule pourvue de son noyau, et entourée de quelques cellules aplaties qui lui forment un rudiment de follicule. Le follicule se complique bientôt, et présente une couche interne épithéliale, et une couche externe conjonctive et lamelleuse. La couche épithéliale se plisse suivant des méridiens et des cercles de latitude, et commence à sécréter le vitellus nutritif qui ne se mêle pas au protoplasma ovulaire, mais le repousse à la périphérie sous le pôle aigu de l'œuf avec la vésicule germinative qu'il renferme. Les cellules du follicule n’émigrent pas dans l’intérieur

(1) Külliker, Entwick. der Cephal., p. 10.

(2) R. Lankester, Devel. of the Ceph., p. 39. (3) Ussow, Untersuchungen über die Entwik. Ceph., p. 590. (4) Grenacher, Zur. Entwick. der Ceph. (Zeitschrift für wissensch. Zool., XXIV, 1874, p. 424).

DÉVELOPPEMENT DE LA SEICHE. 17 de l’œuf pour servir à sa nourriture, et fournissent simplement à ce dernier leur sécrétion. L’œuf s'accroît; la vésicule germinative s’accroit en même temps et subit des modifications considérables; son contenu, qui consistait principalement, au début, en matière chromatique à différents états de division, ne renferme plus maintenant que quelques grains chromatiques répandus dans une masse considérable de protoplasma finement granuleux. Lorsque les cellules folliculaires ont sécrété tout le vitellus nutritif nécessaire à l’œuf, elles fournissent à ce dernier une enveloppe protectrice munie d’un micropyle : le chorion. La vésicule germinative disparaît alors, mêlant son contenu au protoplasma de l’œuf dans lequel les grains chromatiques qu’elle renfermait, devenus libres, s’ordonnent en une couronne qui deviendra la plaque équatoriale du premier fuseau de direction. À ce mor ent les plis du follieule s’effacent et l’œuf tombe dans la cavité péritonéale. L’œuf est mûr, son vitellus formatif que l’on peut aisément isoler du vitellus nutritif (méroblastie) présente encore quelques traces de la disposition plissée du follicule, sous la forme de crêtes longitudinales (méridiennes) convergentes qui s’arrêtent un peu avant d'arriver à leur pôle de réunion, et circonserivent ainsi une aire Circulaire en un point du pourtour de laquelle se trouve le premier fuseau de direction. Les œufs que l'on trouve dans l’oviducte ne présentent jamais de globules polaires. à