C. — Toxicité des filtrats
En même temps que j'avais stérilisé par l'éther les cultures du Proteus Tr destinées aux expériences que je viens de rapporter, j'avais filtré sur bougie Chamberland n° 3 des cultures de même âge obtenues dans les mêmes conditions. J'ai déterminé leur toxicité pour le cobaye de la même façon qu'avec les cultures totales et les résultats ont été Les suivants :
a) Filtrat culture en bouillon Martin.
Toxicité pour le cobaye (Poids moyen 500 gr.). Voie intra-péritonéale. — Dose mortelle : supérieure à 12 ec. Voie intra-veineuse. — Dose mortelle : supérieure à 5 ce.
b) Filtrat culture acides aminés de la caséine (hydrolyse acide). Toxicité pour le cobaye (Poids moyen 500 gr.). Voie intra-péritonéale. — Dose mortelle : supérieure à 12 ce. Voie intra-veineuse. (Non étudiée).
c) Fültrat culture peptone de caséine.
Toxicité pour le cobaye (Poids moyen 500 gr.).
Voie intra-péritonéale. — Dose mortelle 8 cc. ; mort en moins de 18 heures.
Voie intra-veineuse. — Dose mortelle 2 ce. 5 ; mort entre 18
et 24 heures.
d) Filtrat culture acides aminés de la viande (Hydrolyse diastasique).
Toxicité pour le cobaye (Poids moyen 500 gr.). Voie intra-péritonéale. — Dose mortelle : supérieure à 12 cc. Voie intra-veineuse. — Dose mortelle 4 ce.; mort en 20 heures.
e) Filtrat culture milieu chimiquement défini.
Toxicité pour le cobaye (Poids moyen 500 gr.).
Voie intra-péritonéale. — Dose mortelle : supérieure à 10 cc.
Voie intra-veineuse. — Dose mortelle : supérieure à 5 ce.
Au point de vue de la formation de produits toxiques solubles c'est donc la peptone pancréatique de caséine qui m'a donné les meilleurs résultats.
Tito Carbone ayant montré que dans les cultures de Proteus on trouve des bases comme la choline, l’'éthylènediamine, le gadinine et la triméthylamine j'ai essayé de déterminer la part qui revient à ces substances dans les cultures totales du Proteus Tr.
Dans ce but j'ai pris une culture de 7 jours en bouillon Martin, stérilisée par l’éther et dont la dose mortelle par voie intra-péritonéale était de 5 ce. pour un cobaye d'environ 500 grammes ; je l'ai additionnée de 10 volumes d'alcool à 96° et j'ai laissé reposer le mélange pendant 24 heures.
Je l'ai alors filtré sur papier pour séparer le précipité formé et
(1) Des cobayes témoins ne présentaient aucun signe d’intoxication lorsqu'on leur injectait dans les veines 5 ec. de la solution stérile de peptone de caséine.
J'ai distillé dans le vide à 50° le liquide clair obtenu. J'ai repris le résidu de cette distillation par de l’eau physiologique (1) en quantité telle que le volume de la solution ainsi obtenue soit le dixième de celui de la culture employée.
Les poisons de nature albuminoïdique ayant été précipités par l'alcool, cette solution ne renfermait guère comme substances très nocives que les substances alcaloïdiques ; elle donnait d’ailleurs un précipité avec les acides phosphotungstique ou silicotungstique etavecune solution 1odo-iodurée. Je l'ai éprouvée sur le cobaye par voie intra-péritonéale et j'ai trouvé que la dose mortelle était de 4 ce. Cette dose représentant 40 cc. de la culture primitive on voit donc que les ptomaïnes ne constituaient qu'une très faible part des produits toxiques élaborés dans les cultures par le Proteus Tz.
(1) Solution aqueuse de NaCI à 7,5 pour 1.000.