I]. — OBTENTION DU LIQUIDE ARTICULAIRE

La plupart des épanchements séreux qui ont servi à nos expériences, provenaient de ponctions évacuatrices. C'est dire que la petite opération permettant d'obtenir le liquide nécessaire au séro-diagnostic doit être conduite selon les procédés ordinaires. L'’asepsie absolue de la région, l'aiguille de Tuffier stérilisée et, au besoin, l'aspiration à l'aide d’une seringue, telles sont les quelques indications que le lecteur trouvera décrites dans tous les manuels de médecine opératoire. Au cas où le pouvoir agglutinant du sang serait positif, il est une condition nécessaire à observer pour recueillir le liquide, c'est que ce dernier ne soit pas hématique. C’est ainsi, par exemple, que le séro-diagnostic d’une hémarthrose n'aurait aucune signification au cas où le sang du sujet agglutinerait. Quelques gouttes de sérosité suffisent amplement pour la séro-réaction, mais il nous paraît préférable, si l’intérèt du malade ne s’y oppose pas, d’en recueillir une quantité un peu plus abondante, ce qui permettra de contrôler les résultats

à l’aide d’une inoculation au cobaye de 5 à 10 €.c. et de faire la cytologie. Pour être adressé au laboratoire, le liquide sera introduit dans un tube à essai, autant que possible stérilisé et fermé par un bouchon de liège paraffiné.

Il =—='OSTENTION DÉ TA CULTURE

La culture (1) homogène est celle qui se développe en bouillon en donnant un trouble uniforme dans lequel les éléments sont isolés les uns des autres et non en grumeaux ou en voile. C’est en accoutumant progressivement des cultures d'origine humaine entretenues sur pomme de terre, à vivre en bouillon olycériné, que le professeur Arloing montra la possibité d'obtenir des cultures homogènes de bacilles de Koch. Toutes les tuberculoses sont aptes à fournir des cultures homogènes et il existe au laboratoire de Médecine expérimentale 7 échantillons homogènes (humaine, bovine, aviaire, etc.).

Mais MM. Arloing et P. Courmont ont bien insisté sur ce fait que la propriété d'agelutinabilité n'appartenait pas d’une façon identique à toutes les

(1) S. Arloing: « Sur l’obtention de cultures, et d’émuisions homogènes du bacille de la tuberculose humaine en milieu liquide » (Compte rendu de l'Acad. des Sciences, Paris 9 mai 189$).

Feitu : Thèse, Lyon 1900.

S. Arloing et P. Courmont: « Le séro-diagnostic de la tuberculose (Gazette des Hôpitaux, 1°' décembre 1900).

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cultures homogènes de bacilles de Koch (1). Le bacille A (Arloing) réunit entre tous les conditions voulues pour la culture et l’agglutinabilité. 11 suffit d’ailleurs de demander un échantillon de culture mère au laboratoire de Médecine Expérimentale de Lyon et de le cultiver en bouillon glycériné à 5 o/o dans des matras agités tous les jours soit à la main, soit à la machine (2) et placés à l’étuve à + 38.

Les ensemencements seront toujours pratiqués avec la culture mère âgée d'un mois. Si l'agitation est faite à la main, elle sera nécessaire deux fois par jour afin de dissocier les éléments et de fournir de l’oxygène au bacille de Koch aérobie.

Dans leurs premiers essais MM. Arloing et Courmont se servirent de cultures récentes âgées de quelques jours ; ils setrouvaient donc, dans ces conditions posséder un matériel très agglutinable, mais doué de propriétés peu constantes et non toujours comparables; de plus les ensemencements par trop fréquents et par suite les dangers de contamination étaient un inconvénient de la méthode. Ils utilisèrent dès lors des cultures plus âgées, un mois par exemple ; mais ces dernières, à partir d'un certain degré de développement, se densifient de plus en plus; ils employèrent donc des cultures diluées et les contrôlèrent par l'emploi du sérum étalon.

(1) S. Arloing et P. Courmont: Variation de l’agglutination des bacilles de la tuberculose (Revue de la Tuberculose, 1904, n° 3 et 5).

(2) Etuve agitatricc du Professeur Arloing.

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Le procédé de choix sera par conséquent le suivant:

Laisser la culture s'enrichir à l’étuve pendant un mois environ, puis la garder à’ l'obscurité à une température:de +1101+4:1120,

Lors des besoins en prélever 1 c.c. et diluer celuici avec du sérum artificiel à 7/1000. La seule difhiculté de cette dilution est qu’elle ne peut se faire à un taux fixe ct varie du 1/50 au 1/100 ; l'habitude seule (et elle s'acquiert vite) guidera l’opérateur ; cet obstacle, d’ailleurs, sera facilement tourné par l'emploi d’un « sérum étalon » conservé au froid et à l'obscurité et dont le pouvoir agglutinant, connu par des expériences antérieures, servira à contrôler le degré d’agglutinabilité des cultures diluées (1).