SUPPL. — I
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neux : un bacille sporogkne et un bacille asporogène, découvert par MM. Chamberland et Roux.
I. Bacille sporo gène. — Il peutsemontrer sous trois formes : la forme bacillaire, la forme filamenteuse et la forme sporulaire, qui ne sont au fond, suivant la judicieuse remarque de M. Straus, que les étapes principales d’une succession continue d’états évolutifs.
1° A Y état bacillaire, « la bactéridie apparaît toujours dans le corps des animaux atteints de charbon ; c’est sous cette forme qu’elle a été découverte et décrite tout d’abord ; c’est aussi celle qui, pour nous, est la plus intéressante, puisque c’est toujours à cet état que s’exerce son action pathogène sur les animaux et sur l’homme. — Qu’on prélève sur un animal qui vient de succomber au charbon, une goutte très petite de sang, qu’on l’étale en couche mince sur la lamelle et qu’on examine au microscope, à un grossissement convenable (400 à 500 diamètres) et l’on aura sous les yeux le spectacle saisissant si bien décrit en quelques mots par Pasteur : « des globules rouges plus ou moins agglutinés, coulant « comme une gelée un peu fluide, des globules blancs en « nombre plus grand que dans le sang normal et des bâtonnets « qui nagent dans le sérum limpide ». Ces bâtonnets sont droits, flexibles, cylindriques, immobiles, homogènes, transparents comme du verre. Les uns paraissent constituer un bâtonnet unique, les autres sont formés de deux ou trois articles (rarement davantage) placés bout à bout, séparés par une scissure nette, l’adhérence des segments contigus ne se faisant plus que d’une façon lâche et souvent par un desangles seulement. L’épaisseur des bâtonnets est d'environ 11 à 1,25 p ; la longueur est très variable, entre 5 et 20 p. Tel’ est l’aspect que présente le bacülus anihracis , examiné dansle sang ou dans les produits charbonneux frais, sans autre mode de préparation. (Straus.)
On peut rendre ce bacille encore plus apparent, par la' méthode de coloration avec des couleurs d’aniline.
Il suffit de « placer la lamelle sur laquelle le sang a été étalé* dans une solution hydro-alcoolique de violet de gentiane, de< fuchsine, de rubine, de bleu de méthyle. — La solution bleue de Lôffler donne aussi d’excellents résultats : les bactéridies apparaissent en bleu foncé, les globules en vert pâle. — Les méthodes-' de double coloration de Gram et deWeigert donnent d'excellentespréparations ; la coloration du fond, c’est-à-dire Ici des globules,-
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doit être faite à l’éosine : les bacilles teints en violet foncé tranchent bien sur les globules colorés en rose. Les examens avec coloration de la bactéridie charbonneuse doivent se faire au grossissement de 4 à 500 diamètres avec l’éclairage Abbe » (1).
Il faut remarquer maintenant que, dans le sang et dans les tissus des animaux atteints de charbon, le bacille de Davaine se multiplie uniquement par scissiparité.
2° La forme filamenteuse ou mycélienne de la bactéridie charbonneuse apparaît lorsque ce microbe est placé en dehors de l’économie vivante, dans le monde extérieur, c’est-à-dire j dans un milieu nutritif approprié, liquide ou solide, à une certaine température et en présence de l’oxygène de l’air. — Cette forme du bacille de Davaine a été nettement signalée et bien étudiée par Koch, qui est parvenu, le premier, à cultiver ce bacille dans des gouttelettes d’humeur aqueuse de l’œil du bœuf ou de sérum frais du sang de cet animal mélangées avec une goutte de sang charbonneux. « Si l’on maintient ce mélange à une température de 35 à 37 degrés, au contact de Xair humide , on voit les bacilles s’allonger considérablement, atteindre une longueur 10, 20, 100 fois plus grande, se contourner et former, en s’entremêlant, un lacis inextricable. Ils perdent leur structure uniforme et leur transparence ; leur contenu est finement granulé ; bientôt apparaissent dans leur intérieur des granulations réfringentes, très rapprochées, mais régulièrement espacées. Les bacilles ainsi transformés ressemblent à des chapelets de perles entrelacées. Ces longs j filaments finissent par se dissocier ; à leur place on ne voit plus que des granulations alignées et maintenues en connexion par une substance unissante muqueuse ; les granulations se séparent enfin à leur tour et constituent de véritables spores, identiques à celles des autres bactéries et (observées par F. Cohn » (2).
« Pasteur a appliqué à l’étude de la bactéridie les puissantes et rigoureuses méthodes qu’il avait créées dans ses travaux sur les fermentations. De même qu’il avait cultivé la levure de bière, le ferment lactique, le ferment butyrique, à l’état de pureté, dans des liquides purs et appropriés à la vie
(1) Précis de microbie médicale et vétérinaire, par Thoinot etMasselin, lp. 191.
(2) Koch. Étiologie des affections charbonneuses. (Recueil de méd. vét., 1877, p. 357.)
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de chacun de ces êtres, il fit végéter la bactéridie du charbon, d’abord dans le liquide minéral qui porte son nom, puis dans l’urine stérilisée et rendue légèrement alcaline et il put ainsi en préparer des quantités aussi grandes qu’on pouvait le désirer. Un des milieux des plus favorables à la culture de la bactéridie, et qui est couramment employé, est le bouillon de veau ou de bœuf rendu légèrement alcalin.
Dans un ballon stérilisé contenant du bouillon ainsi préparé, nous portons avec pureté, à l’aide d’un fil de platine ou d’un tube de verre étiré, une gouttelette de sang pris dans le cœur d’un animal qui vient de succomber au charbon; la quantité de sang ainsi apportée dans le liquide est si petite qu’elle n’en trouble en rien la limpidité. Puis on met le vase à l’étuve à la température de 30 à 35°. Au bout de quelques heures on voit des flocons ténus nager dans le liquide ; ces flocons grossissent et conservent une certaine cohésion, de sorte qu’ils résistent à une légère agitation imprimée au liquide qui reste limpide dans leur intervalle. Dans les heures suivantes, ces flocons deviennent assez volumineux pour former comme un nuage au sein du liquide. Cet aspect floconneux de la culture de la bactéridie dans le bouillon est caractéristique.
Si avec une pipette on transporte sur le porte-objet un des flocons de la culture et qu’on l'examine au microscope, on voit qu’il est formé de filaments extrêmement longs, cylindriques, non ramifiés, onduleux, tordus quelquefois les uns sur les autres ou enchevêtrés comme des paquets de corde. Examinés à l’état frais, ces filaments paraissent homogènes dans toute leur longueur, sans trace de séparation transversale, sauf les points où il existe des ruptures. Mais si l’on fait des préparations colorées, on constate que ces filaments sont formés par une gaine hyaline délicate, renfermant une rangée de masses protoplasmiques, cubiques ou allongées ; celles-ci sont séparées les unes des autres par des cloisons transversales et chacune d’elle représente une cellule végétative.
En même temps que s’effectue ce travail de croissance par allongement et segmentation transversale, on voit apparaître dans l’intérieur des cellules végétatives les organes de reproduction proprement dits, les spores. Après quelques jours de séjour à l’étuve, le bouillon dans lequel a poussé la bactéridie a légèrement bruni et est redevenu limpide, et sur le fond du vase s’est déposée une fine poussière qui se soulève quand on agite le liquide. A l'examen microscopique de ce dépôt, on ne trouve plus les longs filaments dont il ne reste que des fragments pâlis. Us ont fait place à des spores nombreuses, réfringentes, les unes libres et animées de mouvement brownien, les autres encore ali-
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gnées à la file et dessinant le filament qui leur a donné nais-» sauce. (Straus.)
La bactéridie se cultive bien dans les milieux solides : gélatine, gélose, pomme de terre.
Dans un tube de gélatine nutritive, la culture prend ordinairement une disposition arborescente ; sur une plaque de même substance, elle forme des colonies arrondies constituées au centre par des filaments mycéliaux enchevêtrés et à la périphérie par des filaments ondulés ; on les a comparés à des « touffes de cheveux frisés ». (Corail et Habès.) — Sur gélose, la culture bactéridienne forme une croûte sèche ; — sur pomme de terre, elle produit des colonies sèches, blanches, limitées ordinairement aux points d’inoculation ; toutefois « lorsque les colonies sont assez rapprochées pour arriver à se fusionner, la pomme de terre semble recouverte d’une couche crémeuse ». (Thoinot etMasselin.) — Ou a encore cultivé la bactéridie dans lelait. (Gamaleïa.)
Mentionnons ici les recherches de Perdrix sur la transformation des matières azotées dans les cultures de bactéridie charbonneuse sporogène. Ces recherches établissent que « la matière azotée des bouillons, celle du sérum, la caséine, par l’action de la bactéridie, en présence de l’oxygène de l’air, sont transformées en ammoniaque. Pour un milieu déterminé, cette transformation s’arrête quand la quantité d’ammoniaque atteint un chiffre déterminé, variable avec la matière albuminoïde et avec la concentration » (1).
3° Les spores du bacillus anthracis naissent d’une granulation très petite qui apparaît dans l’intérieur du protoplasma de la cellule végétative dont il est parlé ci-dessus. « Graduellement cette granulation augmente de volume et apparaît bientôt comme un corps allongé, ovoïde, fortement réfringent qui atteint son complet développement au bout de quelques heures et représente alors la spore parfaite. Cette spore est toujours plus petite que la cellule-mère. Autour d’elle, le protoplasma de la cellule disparaît graduellement et il arrive un moment où il ne reste plus que la membrane mince de la cellule-mère, dans l’intérieur transparent de laquelle la spore apparaît comme suspendue. Une cellule-mère ne donne jamais naisi sance à plus d’une seule spore. » (Straus.)
(1) Annales de l’inst. Pasteur, 1888, p. 363.
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Une fois formées et mûres les spores germent, c’est-à-dire donnent naissance à de nouveaux bacilles si le milieu nutritif n’est pas épuisé, si l’oxygène ne fait pas défaut et si la température est favorable. Cette germination s’effectue de la façon suivante :
La spore augmente de volume et perd ;de sa réfringence; puis, à l’un des pôles du grand axe, apparaît une intumescence qui indique l’émergence du bacille naissant. La membrane d’enveloppe de la spore subit à ce niveau une déchirure ou une déhiscence par oùi le protaplasma fait issue. Cette déchirure, qui est très nette sur un certain nombre d’autres bacilles, n’est pas visible, selon M. de Bary, sur la spore du bacillus anthracis dont la germination s’effectue ■ sans éclatement apparent ni soulèvement de la membrane d’enveloppe. Il est probable que celle-ci subit, dès le début de la germination, une résorption ou une dissolution rapide, d’où l’impossibilité d’en apercevoir ni la rupture ni même les vestiges. Le protoplasma mis en liberté continue sa croissance, s’allonge et prend: finalement la forme d’un bacille. (Straus.)
Examinons maintenant les conditions de vie et de développement de la bactéridie charbonneuse sporogène suivant! qu’on la considère à l’état de bacille ou à l’état de spore,, attendu que ces conditions constituent les bases principalesde l’étiologie.
Le microbe de la fièvre charbonneuse, de même que tous les? végétaux privés de cellules chlorophylliennes, ne peut puiser directement dans l’acide carbonique de l’air ou du sol les éléments nécessaires à sa nutrition, il lui faut, comme aux animaux et aux champignons, pour vivre et se développer, desmatériaux organiques tout préparés, des combinaisons hydrocarbonées et azotées. « Ces matériaux, la bactéridie les trouve1 dans les humeurs ou les tissus des animaux sur lesquels elle vit en parasite, ou bien quand elle se développe en dehors de' l’organisme animal, elle les puise dans les produits morts; d’origine animale ou végétale (sang, urine, débris de tissus? animaux ou végétaux morts).
« La réaction chimique de ces matériaux nutritifs n’est pas? indifférente : la bactéridie vit et végète surtout dans les milieux neutres ou faiblement alcalins ; elle vit péniblement oui périt dans les milieux acides.
« Un certain degré d’humidité du milieu ambiant est également nécessaire à la vie de la bactéridie ; elle périt en peu dee temps si on la soumet à une dessiccation rapide.
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« Une autre condition indispensable à la vie de la bactéridie adulte est la présence d’oxygène libre (ou faiblement lié, comme dans le sang des animaux) ; en mot c’est un type d’organisme aérobie. Koch a montré que, cultivée dans le sang, elle réduit complètement l’hémoglobine et que son développement cesse dès que la réduction est complète. D’après Pasteur, elle absorbe dans les liquides de culture jusqu’aux dernières proportions d’oxygène en dégageant un volume d’acide carbonique sensiblement supérieur.
« La soustraction d’oxygène, pour peu qu’elle se prolonge, empêche non seulement la croissance et la multiplication, mais encore la vie de la bactéridie ; c’est ce que prouve l’expérience déjà ancienne de Davaine, qui constata que du sang charbonneux, renfermé dans un tube de verre scellé, perd toute virulence au bout de quelques jours. C’est pour cette raison aussi que le sang recueilli dans le cadavre intact d’un animal charbonneux, plusieurs jours après la mort, n’est plus virulent et ne contient que des bactéridies en voie de désintégration granuleuse ; elles sont mortes après avoir épuisé toute la réserve d’oxygène du sang.
« Les choses se passent tout autrement pour la spore , arrivée à maturation . Comme toutes les graines, elle renferme dans son intérieur les aliments nécessaires à sa vie latente de germe et elle peut subsister pendant des mois et des années dans des milieux entièrement privés de matériaux nutritifs, à la surface des objets, dans le sable, dans l’eau, etc. Elle résiste de même à la soustraction de liquides, à la dessiccation et à l’absence d’oxygène. On peut donc dire que, dans la spore, la nutrition ainsi que la respiration sont, pour ainsi dire, suspendues. Ainsi s’explique « le long sommeil du germe morbide » et dans certaines circonstances sa résistance aux causes en apparence les plus destructives.
« L’influence de la température est importante à connaître et différente aussi selon quelle s’exerce sur la bactéridie ou sur ses spores. Ainsi la température la plus favorable à la végétation des filaments et à l’apparition des spores est d’environ 35»; déjà au bout de vingt heures les spores sont nombreuses et complètement formées ; à 30°, il faut trente heures; à 18 ou 20°, il leur faut deux à trois jours. A une température inférieure à 18° la formation des spores cesse; au-dessous de 12° le développement filamenteux s’arrête également. A 45°, toute végétation filamenteuse cesse; à 42 ou 43° dans le bouillon
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neutre de poule, la bactéridie se cultiveencore abondamment, mais sans formation de spores. (Pasteur.) Nous verrons plus tard comment cette dernière particularité a été utilisée pour l’atténuation du virus charbonneux.
« L’action d’une température de 50° et au delà sur des liquides contenant des bactéridies adultes amène promptement leur mort. Davaine, déjà, avait montré que du sang charbonneux fortement dilué avec de l’eau perd sa virulence s’il est soumis à une température de 55° pendant cinq minutes, à une température de 48° pendant un quart d’heure et à une température de 50° pendant dix minutes. Du sang charbonneux non dilué perd sa virulence par une température de 51° pendant un quart d’heure. (Davaine.) Toussaint et M. Chauveau ont étudié avec une grande précision l’action du « chauffage » sur la vie, la végétabilité et la virulence de la bactéridie et nous y reviendrons quand nous parlerons de l’atténuation du virus charbonneux.
« La bactéridie résiste beaucoup mieux à l’abaissement qu’à l’élévation de la température. C’est ainsi que M. V. Frisch a soumis, pendant près d’une heure, du sang charbonneux à une température de — 110° obtenue à l’aide de l’acide carbonique liquide, sans lui voir perdre sa virulence ni la faculté de se cultiver dans les milieux appropriés.
« MM. Pasteur et Joubert ont bien mis en lumière la différence de résistance de la bactéridie aux diverses causes de destruction, suivant qu’on la considère dans sa forme bacillaire ou dans celle de « corpuscule-germes » ou de spores. Ils ont montré que, tandis qu’une température bien inférieure à 100“ suffit pour tuer la bactéridie, les spores résistent à la température de l’eau bouillante ; desséchées, elles supportent des températures de 120 à 130°.
« D’après M. Brefeld il faut une ébullition de deux heures de durée pour détruire toutes les spores d’un liquide de culture ; placées dans ce liquide à une température de 105° elles y résistent pendant près d’un quart d’heure; à 107° elles meurent au bout de dix minutes. M. Perroncito a fait des constatations analogues.
« Si l’on fait agir, à l’exemple de MM. Pasteur et Joubert, de l’alcool absolu sur du sang charbonneux (contenant des bacilles sans spores) on constate que les bactéridies contenues dans le coagulum ont perdu toute virulence et sont mortes. La même opération, appliquée aux spores, consei’ve à celles-ci
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leur aspect, leur virulence et leur faculté de développement dans les liquides nutritifs. De môme, M. Brefeld a pu conserver les spores du bacülus anthracis dans l’éther pendant des semaines et les faire bouillir dans ce liquide sans qu’elles subissent de modification.
« L’influence de la lumière solaire sur la bactéridie et ses spores a été l’objet de fort intéressantes recherches de M. Arloing. M. Duclaux, l’un des premiers, avait appelé l’attention sur le rôle du soleil comme agent destructeur des microbes et de leurs germes ; il montra que cette action est différente, selon qu’elle s’exerce sur les micrococcus (dont la plupart, sinon tous, sont privés de spores) ou sur les bacilles sporifères. Les micrococcus exposés, à l’état sec, au soleil de nos contrées, sont tués au bout de quelques heures ou de quelques jours au plus; les bacilles sporifères peuvent résister à cette action pendant six semaines à deux mois.
« M. Arloing a fait des recherches analogues sur le bacillus anthracis; il étudia l’action exercée par le soleil sur cet organisme, non pas à l’état sec, mais immergé dans un bouillon de culture. Il constata que, dans ces conditions, les bacilles adultes périssent plus rapidement qu’à l’état sec et qu’ils meurent au bout de vingt-cinq à trente heures d’insolation. Chose remarquable et en apparence tout à fait paradoxale, les spores fraîchementensemencées dans un bouillon nutritif sont plus rapidement détruites par les rayons solaires que les bacilles adultes; il suffit de deux heures d’exposition au soleilde juillet pour les tuer. M. Arloing pense que cette action du soleil s’exerce sur la spore elle-même; dans ce cas, le phénomène serait tout à fait exceptionnel et la spore de la bactéridie présenterait cette particularité étrange de résister bien plus énergiquement que la bactéridie adulte à tous les agents cosmiques, sauf un : la lumière solaire » (1).
L’expérience si intéressante de M. Arloing peut s’interpréter autrement, dit M. Straus; « il est possible que les rayons solaires agissent dans ce cas sur la spore en voie de germination, sur le bacille naissant que l’on peut supposer plus fragile et plus vulnérable que la bactéridie adulte ». — Et pour vérifier cette hypothèse M. Straus a semé des spores du bacillus anthracis , les unes dans du bouillon nutritif, les autres
(1) Straus. Le charbon des animaux et de l’homme. Paris, 1887, p. 84 et suiv.
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dans de l’eau distillée pure et les deux ballons exposés aux rayons d’un vif soleil d’août : les spores placées dans le bouillon ont été tuées au bout de deux à trois heures d’exposition ;
« les spores placées dans l’eau distillée étaient encore vivantes et susceptibles de végétation après dix heures d’insolation ».
L’observation de M. Straus est exacte, dit M. Arloing,
« mais, si l’insolation des spores dans l’eau distillée est prolongée pendant quinze heures, on finit par éteindre chez elle tout pouvoir végétatif » (1). — Toutefois M. Roux a montré dès 1887 « que les spores insolées dans le bouillon ne croissaient pas, non parce qu’elles avaient péri, mais parce que le bouillon exposé au soleil était devenu impropre à leur germination par suite de modifications chimiques que l’air et la lumière lui avaient fait subir. Et M. Momont a publié en 1892, dans les Annales de l'Institut Pasteur , des recherches expérimentales qui confirment celles de M. Roux.
II. Bactéridie asporogène. — En 1883, MM. Ghamberland et Roux ont publié dans les Comptes rendus de V Académie des sciences , une note dans laquelle ils signalent l’existence de bactéridies virulentes qui ont perdu d’une façon définitive la faculté de donner des spores. Ils ont obtenu cette sorte de bactéridies en cultivant du sang charbonneux dans du bouillon additionné de 1/2000 de bichromate de potasse. Les bacilles qui ont poussé pendant un certain temps dans ce milieu, ne forment pas de germes quand on les ensemence dans du bouillon ordinaire, même dans les conditions d’aération et de température les plus favorables. Gomme ils n’ont pas perdu i leur virulence, on peut les faire passer par un grand nombre d’animaux, cobayes, lapins, moutons, sans qu’ils recouvrent: la faculté sporogène » (2).
Puis Lehman, en 1887, et Behring en 1889, ont égalementt signalé l’existence de bactéridies asporogènes. Et, en 1890,. M. E. Roux a fait connaître, dans le numéro de janvier, des- Annales de l'Institut Pasteur , un procédé très commode pour obtenir des cultures de bactéridies asporogènes (3).
Nous nous bornerons à dire que l’on ensemence du sang, charbonneux dans du bouillon de veau, additionné de 2, 4,
(1) Arloing. Les Virus. Paris, 1891, p. 95.
(2) Annales de l'Institut Pasteur, 1890, p. 26.
(3) Voyez Annales de l'Institut Pasteur , 1890, p. 27 ou Précis de mici'obie par Thoinot et Masselin, 2e édition, p. 231.
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6... 20/10000 d’acide phénique. Les tubes ensemencés sont mis à l’étuve à 30°, 33°, en ayant soin d’agiter le liquide si des flocons se formaient à sa surface, afin de les immerger, car & les bacilles qui croissent ainsi au large contact de l’air, en dehors du liquide antiseptique, ne tardent pas à donner des germes, principalement dans les tubes les plus pauvres en acide phénique ». Il faut laisser les cultures dans l’étuve pendant huit à dix jours pour que la bactéridie perde sa propriété sporogène, tout en conservant sa virulence. Ainsi ces cultures « inoculées aux cobayes, les tuent en trente à trente-six heures et font mourir les lapins en quarante-huit à soixante heures. Au point d’inoculation, l’œdème est très étendu chez le cobaye, il est presque toujours plus considérable que celui qui est produit par la bactéridie ordinaire. Quand on fait passer cette bactéridie asporogène à travers un grand nombre de cobayes et de lapins, en inoculant le sang d’un animal qui vient de mourir à un animal sain, elle ne reprend pas son aptitude à faire des spores dans les cultures bien que sa virulence ait augmenté ». (E. Roux.) — En 1892, M. L. Momont a fait de nombreuses expériences sur l’action de la , dessiccation de l’air et de la lumièi-e sur la bactéridie charbonneuse filamenteuse et il en a déduit diverses conclusions :
« La bactéridie, sans spores, contenue dans le sang desséché, peut rester vivante pendant plus de soixante jours à la température ordinaire. Elle résiste à un chauffage de plus d’une heure et demie à 92°.
« La bactéridie sans spores, cultivée dans le bouillon, résiste moins bien à la dessiccation que celle qui est contenue dans le sang charbonneux. L’action de l’air est [peu marquée sur les bactéridies desséchées. Ces bactéridies desséchées conservées à l’air ou à l'abri de l’air, meurent sans avoir présenté d’affaiblissement de leur virulence.
« Les bactéridies sans spores et desséchées meurent plus vite à la lumière solaire qu’à la lumière diffuse. Les bacilles de culture périssent plus vite que ceux contenus dans le sang. A la lumière, l’action de l’air contribue à tuer les bactéridies sèches. Elles meurent sans que les dernières cultures montrent un affaiblissement dans la virulence » (1).
Enfin, nous ferons remarquer que les recherches de S. Iwanow établissent que le bacille asporogène est un peu
(1) Annales de l'Institut Pasteur, 1892, p. 30.
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moins actif que le bacille sporogène pour la production des acides volatils, — acétique, formique, caproïque, — que l’on trouve dans les cultures charbonneuses et que l’on considère « comme des produits de vie cellulaire et en quelque sorte comme des matériaux d’excrétion » (1).
Anatomie et physiologie pathologiques du charbon bactèridien. — Pour étudier méthodiquement le charbon bactéridien et en bien connaître l’anatomie et la physiologie pathologiques, il faut inoculer de préférence des Rongeurs (souris, cobayes, lapins).
Si l’on iDjecte sous la peau d’un de ces animaux, avec la seringue de Pravaz, quelques gouttes de sang charbonneux frais, ou d’une culture virulente de bactéridies, on verra, au bout de dix à quinze heures, un empâtement œdémateux assez prononcé, facile à sentir par la palpation, se développer au point d'inoculation; en même temps la température centrale de l’animal s’élèvera d’un ou de deux degrés. Les autres symptômes accusés par les animaux sont insignifiants ; ils continuent à manger et à se bien porter en apparence jusqu’à quelques heures avant la mort ; celle-ci survient ordinairement trente-six ou quarante heures après l’inoculation chez le cobaye, quarante-huit à soixante heures chez le lapin. Elle est précédée d’une courte période pendant laquelle l’animal paraît inquiet, change souvent de place, urine fréquemment; la respiration s’accélère; l’animal devient comme indifférent et assoupi; il ne cherche plus à fuir et, quand il le fait, c’est avec des mouvements incertains et mal coordonnés. Puis il tombe dans une sorte de coma, la respiration devient plus superficielle et il meurt après quelques légères convulsions et une température centrale fortement abaissée, à 34°, à 32», quelquefois à 30».
A l’autopsie on ne trouve plus à la peau de trace de la piqûre d’inoculation; mais à ce niveau, dans une étendue parfois fort grande, le tissu cellulaire sous-cutané est le siège d’une infiltration œdémateuse tout à fait caractéristique : c’est un œdème gélatineux, tremblotant, transparent, à peine teinté de rouge, rappelant un peu la consistance du corps vitré de l’œil. Si on examine au microscope une gouttelette de cet œdème, on constate qu’il renferme des leucocytes et des globules rouges en petite quantité et des bactéridies plus longues que celles que contient le sang en nombre relativement faible aussi. En résumé, le bacillus anlhracis par son développement dans le derme ou dans le tissu cellulaire sous-cutané des Rongeurs, y provoque l’exsudation d'une sorte de
(1) Annales de l’Institut Pasteur , 1892, p. 137.
I lymphe coagulable, mais sans issue notable hors des vaisseaux de leucotytes : le microbe du charbon, tout en étant manifestement phlogogène, ne possède point de propriétés pyogènes.
Les ganglions lymphatiques correspondant à la région inoculée présentent des lésions remarquables. Ils sont augmentés de volume, rouges, ccchymotiques, entourés d’une zone d’œdème. A l’examen microscopique on voit que ces organes contiennent un nombre parfois prodigieux de bactéridies répandues dans le suc ganglionnaire, mélangées aux globules blancs ou accumulées en feutrage serré. « C’est avec raison qu’on a comparé l’aspect de ces ganglions qui se trouvent les premiers sur les trajets de la matière virulente à celui de la rate charbonneuse. Les bactéridies, en effet, y prolifèrent avec une extrême rapidité, tandis que dans les autres ganglions, ceux du côté homologue du corps, par exemple, on n’en trouve que très peu, celles qui sont contenues avec le sang dans le réseau capillaire sanguin de l’organe et qui, par conséquent, ne sont pas nées sur place. M. Colin, le premier, a signalé l’infection précoce des premiers ganglions; il montra que les ganglions qui reçoivent les lymphatiques du point inoculé sont doués de virulence bien avant le sang, la rate et les autres organes. Toussaint lit voir que cette virulence précoce est due à l’envahissement rapide de ces premiers ganglions par les bactéridies; ils en sont déjà remplis alors que ni le sang ni les autres organes n’en renferment pas encore.
« Déjà, au bout de douze à seize heures après l’inoculation, chez le lapin et le cobaye, le sang commence à charrierdes bactéridies, en nombre très petit, il est vrai ; mais si leur présence dans le sang, à ce moment, est assez difficile à mettre en évidence par le simple examen microscopique, il est facile de la démontrer par l’inoculation ou par la culture. A ce moment aussi commence à se manifester un certain degré deleucocytose et les globules rouges présentent déjà une tendance à s’agglutiner. Plus tard, quelques heures avant la mort, le sang pullule en bactéridies et offre les autres caractères du sang charbonneux. » (Straus.)
La rate est tuméfiée, diffluente ; le foie, les reins, les poumons sont hyperhémiés, et la pulpe de ces organes renferme une très grande quantité de bactéridies. L’examen histologique de ces organes est particulièrement instructif lorsqu’il porte sur des coupes colorées par des méthodes de double coloration de Gram, de Weigert ou de Kühne-Gram (1).
Ces préparations montrent avec une grande netteté, les bactéridies dans les capillaires et, comme le dit M. Straus, l’injection bactéridienne des vaisseaux capillaires est ainsi prise sur le fait et
(1) Voyez Précis de Microbie, par Thoinot et MasSelin, 2e édition, p. 224.
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peut être étudiée dans ses moindres détails. Toussaint a bien décrit cette injection bactéridienne des capillaires qu’il avait observée non seulement immédiatement après la mort, mais même avant, dans les vaisseaux de l’épiploon, notamment « sur des sujets tués une heure et demie avant le moment où la mort serait survenue » (1).
Les capillaires des villosités intestinales sont aussi très riches en bactéridies ; ceux des muscles, du myocarde, du cerveau, de la peau en renferment relativement moins.
On voit donc que la fièvre charbonneuse est, par son siège, surtout hématique, intravasculaire, ce qui s’explique par la qualité éminemment aérobie du bacillus anthracis , ce microbe se cantonnant de préférence dans le sang puisqu’il y trouve plus d’oxygène libre que dans les tissus. Toutefois, même chez les Rongeurs où le charbon bactéridien revêt sa forme la plus simple, les bacilles ne restent pas toujours dans le système vasculaire ; ils peuvent franchir les parois des capillaires et le revêtement épithôlialdes appareils glandulaires. Ainsi MM. Chamberland et Straus, dans le cours de leurs recherches sur la transmission du charbon de la mère au fœtus, ont étudié « d’une façon méthodique sur des cobayes charbonneux, la bile et l’urine au point de vue de la présence du bacillus anthracis dans ces produits de sécrétion. Nous nous sommes assurés que burine contient presque toujours des bacilles, souvent en très petite quantité, il est vrai ; ce qui le prouve, c’est que parfois on peut semer dans le bouillon de culture des quantités notables d’urine sans qu’il y ait de développement; de même, dans ces cas, on peut en inoculer à un animal plusieurs divisions de la seringue de Pravaz sans résultat. Il faut alors plusieurs tentatives de culture ou d’inoculation pour arriver à un seul résultat positif. Dans d’autres cas, l’urine contient des bacilles en nombre assez abondant ; généralement elle renferme alors en même temps des globules rouges du sang qui témoignent de petites hémorrhagies qui se sont produites dans le rein.
« Labile, fraîchement recueillie sur un lapin ou un cobaye qui vient de succomber au charbon, contient parfois aussi des bacilles, mais toujours en nombre très faible ; il faut toujours ensemencer plusieurs ballons de bouillon avec des quantités notables de bile pour obtenir une culture féconde.
(I) Toussaint, Recherches expérimentales sur la maladie charbonneuse. Paris. Asselin et Cie, 1879, p. 78.
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« Nos recherches nous ont aussi montré que du sang charbonneux semé dans la bile fraîchement recueillie ne donne lieu à aucun développement filamenteux ; au bout de quarante-huit heures de séjour dans la bile, les bactéridies sont mortes ; la bile jouit donc d’une véritable action antiseptique sur la bactéridie.
« MM. Chamberland et Moussous ont montré que le lait, chez les femelles en lactation, peut aussi contenir des bacilles. »
Chez le mouton , les effets de l’inoculation d’une culture charbonneuse ou de sang charbonneux recueilli purement consistent en un œdème, qui apparaît au bout de quelques heures, au point inoculé en même temps que les ganglions voisins s’engorgent.
Puis, le lendemain, la température s’élève de 1 à 2 degrés; néanmoins la plupart des sujets inoculés ne paraissent pas malades ; il en est cependant qui présentent un certain état comateux et qui refusent toute nourriture, tout en grinçant des dents de temps à autre. Toutefois, comme le dit Toussaint, l’animal ne paraît souffrir réellement que trois à quatre heures avant le moment de la mort. « On le voit trembler, chanceler, tomber sur le sol, rejeter par intermittences une urine rosée renfermant des globules sanguins et des bactéridies très longues. Des crampes ou des convulsions apparaissent. En général, les muscles des membres et du cou sont comme tétanisés, la tète se renverse en arrière, les yeux roulent dans l’orbite, puis la respiration devient plus rapide et sifflante. Le sang examiné à ce moment montre une immense quantité de bactéridies ; souvent les capillaires superficiels sont tout à fait exsangues, et il devient nécessaire de faire des incisions profondes ou de blesser de gros vaisseaux pour avoir une goutte de sang, Le pouls devient petit, filant, presque insensible ; les artères revenues sur elles-mêmes sont molles, très dépressibles. Enfin, après une heure au plus, l’animal expire au milieu d’une convulsion tétanique (1). »
Le temps qui s’écoule depuis l’inoculation jusqu’à la mort varie avec les sujets, et suivant la virulence de la matière inoculée, — liquide de culture plus ou moins riche en bacilles,
(1) H- Toussaint. Recherches expérimentales sur la maladie charbonneuse. Paris. Asselin et Cie, 1879, p. 127.
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qui peuvent être eux-mêmes plus ou moins virulents, ou bien sang charbonneux, frais et pur. — Ainsi, dans les nombreuses inoculations que nous avons pratiquées chaque année — de 1879 à 1890 — en vue de notre enseignement à l’Ecole vétérinaire de Toulouse, nous avons vu la mort survenir au bout de trente heures, d’autres fois après soixante-quatorze heures ; généralement entre la quarantième et la cinquantième heure.
Les lésions sont analogues à celle du lapin ; toutefois, chez le mouton, 1a. tendance aux hémorragies internes est plus accusée. Ainsi les ruptures vasculaires sont manifestes dans le rein et dans l’intestin. La rate est très généralement tuméfiée et molle, son tissu contient des myriades de bactéridies.
Dans quelques cas exceptionnels, le mouton résiste à l’inoculation bactéridienne. Alors, cette opération détermine bien de l’hyperthermie, un malaise accusé par de l’abattement et de l’inappétence ; mais, au bout de trois ou quatre jours, les sujets reviennent à la santé et ils sont désormais réfractaires à la contagion charbonneuse.
Chez les animaux d'espèce caprine les effets de l’inoculation charbonneuse sont les mêmes que chez le mouton.
Sur les bêtes bovines , l’inoculation d’une culture virulente ou de sang charbonneux produit des effets bien moins prononcés que chez le mouton et la chèvre. Ainsi il n’est pas rare qu’une vache inoculée se rétablisse après avoir présenté une élévation de température de 1 et même 2 degrés, uni œdème au point inoculé, de l’inappétence et un certain état de prostration.
Chez le cheval, les effets de l’inoculation charbonneuse sont: beaucoup plus prononcés que sur les grands ruminants.
Cette opération est presque constamment suivie de mort.. Voici, à titre d’exemple, une observation parmi celles que nousavons recueillies à Toulouse, au cours de nos expériences.
Une jument du train des équipages militaires, âgée de 20 ans, mais encore très vigoureuse, eu bon état d’embonpoint et de santé au moment de son arrivée à l’Ecole, le 23 avril 1883, fut inoculée le 29 du même mois avec du sang charbonneux recueilli purement au moment même de la mort, dans la jugulaire d’une brebis inoculée elle-même avec un liquide de culture venant du laboratoire Pasteur. On injecta ce sang charbonneux à la dose de deux
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divisions delà seringue de Pravaz pour vaccination charbonneuse, dans le tissu conjonctif sous-cutané de l’épaule gauche.
Le 30, une tumeur œdémateuse de la grosseur d’une noix s’est développée au point inoculé, toutefois la respiration et la circulation ne sont pas sensiblement modifiées, la température est à 38°, 2; l'appétit est conservé.
Le 1er mai, la tumeur du point inoculé est de la grosseur d’un œuf de poule, la bête mange encore, mais le pouls bat 52 fois par minute et le température atteint 41°, 2.
Le 2 mai, le pouls est à 90 ; le nombre des respirations est de 14 par minute et la température s’est élevée à 41°, 4. L'œdème causé par l'inoculation est devenu très volumineux, il s’étend jusqu’à la base de l’encolure. Le pouls est petit, les pulsations sont à peine sensibles, et les muqueuses sont infiltrées et jaunâtres. La jument est triste et se tient à bout de longe. Vers 2 heures elle se couche, pousse des plaintes, se relève et se recouche de nouveau, comme si elle était tourmentée par des coliques sourdes. Par intervalles, la respiration s’accélère et devient difficile et bruyante, puis la dyspnée s’exagère, et, après s’être longtemps débattue, la bête meurt à 3 heures 1/2 du matin, soit quatre-vingts heures et demie après avoir été inoculée.
L’autopsie montre les lésions suivantes : exsudât gélatiniforme de couleur citrine, s’étendant autour du point inoculé jusque sur l’encolure et sur le poitrail, et occupant le tissu conjonctif intramusculaire et sous-cutané. Cet exsudât est parsemé de foyers hémorragiques. Epanchement très abondant de liquide roussâtre dans le sac des plèvres. Exsudât entre les lames du médiastin avec hémorragies interstitielles très multipliées surtout au niveau de la base du cœur. Epauchement de sérosité roussâtre dans le péricarde. Rougeur très prononcée du péritoine qui recouvre le gros intestin. Coloration rougeâtre du grand épiploon. Rate volumineuse, bosselée, à pulpe noire contenant de nombreuses bactéridies. Sérosité du péricarde et des plèvres contenant de longues bactéridies. Liquide obtenu par l’incision du poumon présentant aussi de nombreux bacilles ; il en est de même du sang, qui est en outre noir et poisseux.
Chez le porc, l’inoculation du sang charbonneux frais ou d’un liquide de culture donne lieu à un œdème très prononcé au point inoculé ; toutefois la maladie évolue avec moins de rapidité que chez le cobaye, le lapin et le mouton ; elle dure trois, quatre, cinq et six jours et à l’autopsie on trouve les lésions suivantes :
Au point inoculé, vaste infiltration de sérosité jaunâtre, gélatiniforme. Ganglions correspondants à la région inoculée
Suppl. — I.
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noyés dans l'œdème, hypertrophiés, violacés, l’as de suffusions sanguines sur le péritoine. Rate bosselée à sa hase, mais non hypertrophiée dans toute son étendue, contenant des bactéridies ; le sang en renferme également mais en moins grande quantité que chez le cobaye, le lapin et le mouton.
Il est à remarquer encore que l’inoculation du bacille charbonneux ne produit ordinairement des effets mortels que chez les jeunes porcs ; de plus, il faut inoculer des liquides très virulents pour obtenir ces effets. Il en est de même chez le chien et le chat.
Théorie du rôle de la bactéridie dans le charbon. —
La bactéridie charbonneuse est la cause essentielle de la fièvre charbonneuse. Cette donnée fondamentale a été démontrée par les belles expériences de M. Pasteur, et il serait certainement puéril d’insister aujourd’hui sur ce point. On sait aussi que le bacille charbonneux se multiplie d’abord au point inoculé en formant un œdème qui lui sert de liquide de culture. Puis le parasite se propage ordinairement par la voie lymphatique, le sang est ensuite envahi et par lui l’infection passe aux organes; alors la mort est certaine et la survie n’est plus qu’une question d’heures : la fièvre charbonneuse réalise donc avec une netteté parfaite le type de la maladie infectieuse aiguë. C’est, en un mot, une maladie septicémique, dans le sens propre du mot. Mais, comment le bacille charbonneux agit-il pour déterminer la maladie et entraîner la mort ?
Une première explication séduisante par sa simplicité a été proposée par Pasteur et par Bollinger : la bactéridie est un organisme éminemment aérobie ; dans son conflit avec les globules rouges du sang, elle tendrait à leur enlever l’oxygène et déterminerait ainsi une véritable asphyxie. Cette théorie soulève plusieurs objections : dans un certain nombre de cas, onvoit la mort survenir avec fort peu de bactéridies dans le sang, en nombre évidemment trop faible pour spolier les globules rouges de leur oxygène ; le sang charbonneux présente des caractères spéciaux, tel que l’état agglutinatif des globules rouges, la leucocytose, qui ne sont pas les attributs du sang asphyxiques ; si les animaux présentent souvent, pendant les derniers moments de la vie, les phénomènes d’asphyxie, ceux-ci peuvent aussi faire complètement défaut et la mort survenir presque inopinément (charbon apoplectique).
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D’autres pathologistes pensent que les bactéridies agissent surtout mécaniquement, en obstruant les petits vaisseaux. A l’appui de cette manière de voir, Toussaint, le principal promoteur de cette théorie, invoque les résultats que donne, chez un animal charbonneux vivant, l’examen microscopique direct des membranes transparentes, tels que l’épiploon ou le mésentère ; en modifiant convenablement le dispositif habituellement employé pour l’étude de la circulation, on peut voir les bactéridies s’accumuler dans les capillaires, les obturer partiellement et jouer le rôle de véritables embolies. Cette explication est passible des mêmes objections que la précédente, elle ne rend pas compte de la mort dans les cas où les bacilles sont peu nombreux dans le sang; d’autre part, les lésions anatomiques du charbon ne sont pas celles que déterminent les embolies capillaires.
Il est probable que l’action exercée par le bacillus anthracis sur l’économie de l’animal qui en est envahi, est complexe ; peutêtre doit-on revendiquer le rôle le plus important pour les produits toxiques sécrétés par le microbe, qu’il s’agisse d’un ferment soluble ou d’un alcaloïde (ptomaïne). L’action phlogogène si nette, développée par le parasite au point d’inoculation, la fréquence des hémorragies profondes chez certaines espèces animales, témoignant d’une atteinte spéciale exercée sur les parois des capillaires, l’état agglutinatif des globules rouges du sang sont des arguments qui militent en faveur de cette manière de voir. Depuis longtemps Pasteur attribuait à un ferment soluble, à une diastase sécrétée par le bacille, la production de l’état agglutinatif des globules rouges. L’hypothèse d’un pareil ferment ou d’une ptomaïne rendrait compte delà gravité des symptômes terminaux, des troubles qui surviennent dans les centres nerveux, respiratoire et cardiaque. (Straus.)
On tend à admettre aujourd’hui, d’après les récentes recherches de Hankin et Weshrook, que le bacille du charbon peut produire une diastase protéolytique qui décomposerait les matières protéiques en formant des albumoses ou toxalbumines de Brieger et Fraenkel.
Le bacille du charbon peut produire une autre albuminose directement, c’est-à-dire sans l’intervention d’une diastase. Or, suivant Hankin et Wesbroock, « cette albumose à doses ordinaires ne produit aucun symptôme d’empoisonnement chez les animaux sensibles au charbon », tandis que chez ceux qui jouissent d’une immunité naturelle contre cette maladie, « comme le rat, à l’exception des jeunes, la grenouille, l’écrevisse, cette albumose agit comme une toxine énergique» (1).
(1) Annales de l'Institut Pasteur , 1892, p. 633.
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Ces conclusions ne concordent pas avec celles de Brieger et Praenkel, d’une part, et de Sidney Martin d’autre part, attendu que l’injection d ' anthrax- albumose ou de toxalburnines, c’est-à-dire de matières albuminoïdes toxiques sécrétées par le bacille charbonneux, a déterminé chez les animaux d’expérience des symptômes comparables à ceux du charbon. On voit donc que les propriétés 'des albumoses charbonneuses ne sont pas encore bien connues, et qu’en définitive l’action intime exercée par la bactéridie sur l’économie est à déterminer.
Symptômes et lésions du charbon dit spontané. — Par charbon spontané il faut entendre celui qui se développe par contagion naturelle, sans l’intervention de l’expérimentateur. C’est, en un mot, celui que le praticien observe.
Il est superflu d’ajouter que c’est toujours une seule et même maladie déterminée par la bactéridie charbonneuse.
Chez le mouton , la fièvre charbonneuse est désignée par diverses appellations vulgaires, parmi lesquelles nous retiendrons seulement celle de sang de rate , attendu qu’elle est encore employée dans notre législation sanitaire. Le sang de rate peut être précédé de signes prodromiques ou bien apparaître d’emblée. Dans le premier cas, on remarque que les moutons semblent excités, ils sautent sur leurs voisins? comme pour se livrer au coït; le regard est vif, la face interne des oreilles, la peau des larmiers, le bout du nez, ont une teinte rouge vif.
« Lorsque le troupeau parcourt en liberté, on voit ordinairement lesbêtes les plus belles, les plus jeunes et les plus grassess’arrêter quelques instants, allonger la tête, dilater les narines,, ouvrir la bouche et respirer péniblement ; mais cette dyspnée disparaît bientôt... Ces signes acquièrent une haute importance lorsqu’en forçant les bêtes à uriner, en serrant tout à la: fois la bouche et les naseaux, on voit s’écouler une urine roussâtre, sanguinolente et qu’on s’aperçoit, au parc ou à la bergerie, que plusieurs toisons sont tachées de rouge par burine ' des bêtes déjà malades... Puis la bête à laine cesse de manger, , reste en arrière du troupeau, respire vite et péniblement;, s’ébroue, râle, rejette par les naseaux du sangéeumeux, tombe à la renverse, agite convulsivement les quatre membres, exv puise une petite quantité d’urine sanguinolente et parfois desmatières excrémentitielies teintées de sang et expire aprèsquelques minutes ou au bout de deux ou trois heures ai plus. » (Dclafond.)
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Mais le sang de rate peut apparaître soudainement. Dans ce cas, l’animal qui avait jusqu’à ce moment tous les signes d’une santé parfaite, cesse tout à coup de prendre des aliments « ou s’arrête en les ruminant, tournoie, tombe, se débat convulsivement,expulse avec violence de l’écume sanguinolente par les naseaux, urine quelques gouttes de sang et meurt en cinq à dix minutes. C’est notamment lorsque les bêtes sont exposées à l’insolation, à la poussière et pendant les journées et les nuits orageuses, qu’elles meurent ainsi en présentant les symptômes d'une asphyxie et d’une hémorragie interne.» (Delafond.)
Les lésions sont semblables à celles que l’on observe dans le charbon expérimental ; toutefois elles sont plus accusées sur l'appareil digestif, attendu que, dans le charbon spontané, l’infection s’opère d’abord par les premières parties des voies digestives comme Toussaint l’a démontré nettement. Ainsi le tissu conjonctif du pharynx, de la gorge, du cou, est le siège d’un œdème jaunâtre très étendu parsemé de nombreuses hémorragies et contenant des bactéridies plus longues que celles du sang. Les ganglions de ces régions sont tuméfiés, de couleur foncée, rouges ou noirâtres, souvent tigrés de taches sanguines ecchymotiques ; leur pulpe est très riche en bacilles, tandis que les ganglions des parties postérieures du corps ne sont que faiblement altérés, à moins que l’inoculation charbonneuse ait eu lieu par l’extrémité d’un membre postérieur, comme Toussaint en a observé un exemple. La rate est généralement hypertrophiée, molle et farcie d’une multitude innombrable debacilles. Les premières parties de l’intes tin grêle sont parsemées d’hémorragies ; lesgangiionsgastriques intestinaux, sont rouges ou noirs, leur tissu est marbré par des hémorragies. Les reins sont souvent congestionnés ; la vessie contient une urine sanguinolente.
Les poumons, de couleur rose, sont parsemés de petites taches rougeâtres ou brunes, miliaires ou lenticulaires, dues à des hémorragies. Les bronches sont remplies de spumosités sanguinolentes.
Les vaisseaux sanguins, notamment ceux des régions antérieures, sont gorgés de sang, etc. Tous ces organes contiennent des bactéridies.
Il est à remarquer que ces diverses lésions, notamment les hémorragies, l’hypertrophie de la rate, sont plus prononcées sur les moutons âgés de deux à trois ans, en bon état d’em»
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bonpoint, que sur les bêtes maigres, les agneaux, les vieilles brebis.
Chez les bêles bovines, la lièvre charbonneuse évolue parfois avec une grande rapidité ; « tel sujet qui n’a jamais paru malade est trouvé mort dans l’étable, ballonné, les naseaux remplis de spumosités sanguinolentes, l’anus, la vulve ou le fourreau souillés de matières striées de sang ; tel autre meurt avant l’arrivée du vétérinaire appelé aux premiers signes de malaise (formes foudroyantes). Dans les cas les plus lents, la maladie ne dure guère plus de douze à dix-huit heures.
« Comme toutes les affections graves, la fièvre charbonneuse débute par l’arrêt de la rumination et la perte de l’appétit ; puis surviennent des frissons, des sueurs partielles, de la sensibilité excessive des reins et des parois thoraciques, des douleurs abdominales accusées par des trépignements, l’agitation de la tête, des mugissements plaintifs. Très rapidement les forces diminuent, la marche est chancelante et l’animal peut tomber sans pouvoir se relever. Souvent on observe une diarrhée fétide et sanguinolente. «Le pouls est petit, vite, filant, presque insensible ; les battements du cœur tantôt violents et tumultueux, plus souvent à peine perceptibles. La respiration est plaintive, suspirieuse, haletante ; le muffle sec, la bouche froide, la langue pendante et violacée, les dents grincent. Dès qu’il est tombé, l’animal se ballonne, s’agite violemment et sans interruption jusqu’à ce que la mort s’ensuive.
« Chez le cheval , la fièvre charbonneuse s’accuse au début par une prostration intense qui s’accompagne ordinairement de légères coliques : l’animal trépigne, regarde son flanc, se couche, se relève, se campe, expulse quelques gouttes d’urine ou quelques crottins, puis, appuyant la tête dans le fond de sa mangeoire ou se tenant à bout de longe, acculé sur le derrière, reste ainsi pendant quelques minutes plongé dans une somnolence profonde, pour recommencer bientôt son manège incessant.
« Si on le force à marcher, on remarque un affaiblissement considérable des puissances musculaires : il vacille et titube, le train postérieur s’affaisse ; la peau a perdu sa souplesse ; les poils sont ternes, secs, hérissés ; les crins s’arrachent avec la plus grande facilité.
« Des frissons partiels ou généraux accompagnés de suda • tion s’observent par intermittence, notamment à la base des
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oreilles, aux ars et aux aines, au niveau des muscles olécraniens et cruraux antérieurs ; les sujets nerveux paraissent en proie à une violente surexcitation ; ils deviennent très irritables et peuvent être dangereux.
« Le pouls est vite, petit, filant, parfois insensible, tandis que d’ordinaire le cœur bat violemment contre les parois thoraciques, donnant à l’auscultation un bruit tumultueux, continu et d’un timbre métallique.
« Ce contraste des pulsations artérielles et cardiaques est l'un des meilleurs signes diagnostiques delà maladie.
« A ce moment, la température oscille entre 41° et 42°.
« Si l’on fait une saignée à la jugulaire, le sang s'écoule en nappe, noirâtre, visqueux, peu abondant; il ne se coagule que lentement dans le vase où on l’a recueilli et donne un caillot mou et diffluent ; quelque soin que l’on ait apporté à la fermer, la saignée devient presque toujours le siège d’un volumineux thrombus.
« Il est tout à fait exceptionnel que ces symptômes se dissipent, mêmesous l’influence du traitement le plus énergique ; ordinairement ils s’aggravent : l’agitation devient extrême, les sueurs plus abondantes, les tremblements convulsifs, les coliques intolérables.
« Les muqueuses prennent une teinte violacée, livide ; le rectum menace de se renverser sous des efforts expulsifs indiscontinus qui n’aboutissent qu’au i*ejet d’une petite quantité de matières excrémentitielles, liquides et sanguinolentes- ; la respiration se précipite, les naseaux s’écartent à l’extrême, la face se grippe, les pupilles se dilatent, les extrémités deviennent froides, le faciès exprime toutes les angoisses de l’asphyxie, l’animal chancelle, tombe, puis expire en s’agitant convulsivement.
« Tous ces symptômes se succèdent dans l’espace de douze à vingt-quatre heures ; il est rare que la maladie dure plus longtemps ; parfois les animaux meurent comme foudroyés sans avoir présenté le moindre prodrome. Les chevaux jeunes, sanguins, pléthoriques, semblent résister moins longtemps que ceux qui sont maigres ou âgés. ■*> (Nocârd cité par Straus.)
Les lésions sont semblables à celles que l’on trouve chez le mouton et il est à remarquer que l’œdème, les hémorragies, sont surtout prononcés dans le tissu cellulaire rétro-pharyngien et dans les premières parties de l’appareil digestif, ce qui
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indique bien que la contagion naturelle s’effectue principalement par cet appareil. — C’est donc surtout par l’ingestion d’aliments souillés de germes charbonneux que la transmission du charbon s’opère chez nos animaux.
Chez le porc, la fièvre charbonneuse est susceptible de se développer par contagion naturelle, notamment à la suite de l’ingestion de viscères provenant d’animaux charbonneux, comme le démontrent les observations de Crookshank. Les symptômes consistent en « un énorme engorgement autour de la gorge, une rapide élévation de la température, ordinairement une décoloration de la peau, un malaise général et de la difficulté pour se remuer; l’animal se couche sur le ventre et pousse des cris plaintifs lorsqu’il se remue.
« A l’examen posimorten dans les cas d’ingestion d’issues, le trait caractéristique est l’œdème gélatineux que l’on trouve autour de la gorge. Il y a généralement congestion de tous les organes : engorgement du cœur et des gros vaisseaux, épanchement de liquide dans la poitrine et l’addomen, tuméfaction et hémorragies dans les ganglions lymphatiques. Il y a, dans quelques cas, une inflammation des intestins, des hémorragies sub-muqueuses et sub-séreuses. La rate peut-être normale en volume, pâle et flasque ; le foie seulement congestionné à la surface et friable. — Dans d’autres cas, la rate est le siège d’hémorragies ; elle a une forte couleur pourpre ; le foie peut être aussi fortement congestionné, très friable et marqué de taches pourpres. — L’examen du sang du cœur et delà rate, pour les bacilles charbonneux, doit être poursuivi avec persévérance et discernement, car ils existent en petit nombre et, dans quelques cas, ont entièrement cédé la place aux organismes septiques. L’inoculation avec le sang produira corrélativement le charbon typique ou l’œdème malin, ou quelque autre forme de septicémie. — Il est possible que, dans les cas résultant de l’ingestion d'issues, l’état ulcéré de la gorge donne accès aux organismes septiques. Il peut arriver aussi que le sang en putréfaction contienne les bacilles de l’œdème malin. En présence des organismes putrides, le bacille charbonneux disparaît rapidement ». (Crookshank) (1).
Diagnostic. — Pour établir le diagnostic de la fièvre charbonneuse avec une complète certitude, il faut avoir recours à
(1) Ret ue vétérinaire, 18f0, p. 2'iO,
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l’examen microscopique du sang. Au moyen d’un grossissement de 400 à 500 diamètres, on constate dans le sang, soit pendant les derniers moments de la vie, soit immédiatement après la mort, de très nombreuses bactéridies charbonneuses qui se présentent sous forme de petits filaments droits ou coudés, immobiles ou cylindriques, à deux ou trois, rarement quatre segments, d’une longueur de 5 à 20 p- .
On les distinguera des cristaux par leur résistance à l’action de la potasse et des vibrions par leur immobilité.
Il est à remarquer en outre que les globules ont de la tendance à s’agglutiner, de manière à former des espèces d’îlots entre lesquels on aperçoit le microbe caractéristique de la fièvre charbonneuse; parfois les globules présentent un aspect étoilé, mais ceci n’est point particulier à la maladie qui nous occupe et ne saurait en être considéré comme un caractère distinctif. Pour rendre les bacilles charbonneux plus apparents, on colore le sang qui les contient. A cet effet, on en étale une gouttelette sur une lamelle que l’on sèche rapidement et que l’on dépose, la face enduite en dessous, dans un bain colorant (solution hydro-alcoolique de violet de gentiane, de fuchsine, de rubine, de bleu de méthyle); on l’y laisse pendant quelques minutes — cinq, dix ou quinze — suivant le degré de concentration de la liqueur colorante, puis on la lave, on la sèche et on la monte dans le baume du Canada.
L’inoculation du sang au lapin est également un moyen de diagnostic auquel le praticien doit avoir recours afin d’être éclairé sur la nature de la maladie qu’il observe. A cet effet, on pratique une ou deux piqûres à la face interne de l’oreille ou de la cuisse avec une lancette ou la pointe d’un bistouri droit, chargée de sang suspect. Si l’on a affaire au charbon bactéridien et que le sang soit frais, l’animal inoculé meurt en vingt-quatre ou trente-six heures, parfois seulement au bout de quarante-huit, soixante heures. On peut aussi pratiquer l’inoculation révélatrice sur le cobaye et si l’on a affaire au charbon bactéridien, on observera les effets qui ont été ! décrits précédemment.
Si le sang a été recueilli depuis un ou deux jours et que la : température atmosphérique soit élevée, il peut arriver que l’animal meure de septicémie et l’affection est alors méconnue. Il faut donc, dans la pratique, inoculer le sang d’un animal suspect de charbon, le plus tôt possible après sa mort.
La recherche du bacillus anthracis doit être faite dans la
rate, le foie, le poumon, les ganglions, la moelle osseuse, si l’examen microscopique du sang donne des résultats négatifs. C/est principalement dans l’examen d’une viande ou d’une issue présumée charbonneuse que la recherche de la bactéridie présente parfois des difficultés.
Il faut alors surtout avoir recours aux méthodes de coloration (1).
Toutefois si la provenance de la viande, son aspect, quelque ganglion injecté dont la périphérie présente encore quelque trace d’exsudat gélatineux, font soupçonner le charbon, on saisira la viande. Car, en pareille matière, dans le doute on ne doit pas s’abstenir. Mais, s’il s’agissait d’intenter une action judiciaire, il faudrait prouver que la viande saisie recelait bien le bacille charbonneux que l’on chercherait alors à mettre en évidence soit par l’inoculation, soit par la culture.
Matières virulentes. — Le sang, la sérosité de l’œdème •charbonneux, la lymphe, la pulpe ganglionnaire, la rate, le poumon, les muscles contiennent des bactéridies et, par conséquent, sont doués de la virulence charbonneuse. Davaine a démontré que l’activité virulente du sang charbonneux est telle qu’une goutte de sang charbonneux ayant été diluée dans l’eau, les inoculations faites à des cobayes avec un dixième, un vingtième, un centième, un millième, un dixmillième, un millionnième de goutte, ont déterminé la mort des sujets inoculés dans un délai qui a varié de vingt-trois à quarante-trois heures. Ces expériences donnent la démonstration de l’énergie de l’activité virulente des liquides charbonneux et doivent mettre en garde contre les dangers de leur inoculation.
Le lait des femelles de cobayes, inoculées du charbon, contient quelques rares bactéridies que le microscope est impuissant à révéler, mais que la culture par la méthode Pasteur met en évidence, comme l’ont démontré MM. Chamberland et Moussous (2). Le lait est donc, dans ce cas, doué d’une certaine virulence.
Durée de la période de virulence. — Les recherches de Koch ont démontré que des fragments de rate desséchés au
(1) Voyez Précis de microbie, par Thoinot et Masselin, 189?, p. 222.
(2) Comptes rendus de l’Acad. des Sciences. Séance du 15 novembre 18t3.
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contact de l’air, ont conservé leur virulence pendant quatre ans. Pasteur a également prouvé que la terre des fosses dans lesquelles des cadavres charbonneux avaient été enfouis était susceptible de communiquer le charbon, et cela au bout de douze années. On a vu ci-dessus que le degré de résistance de la bactéridie charbonneuse varie suivant que ce microbe est cà l’état de filaments ou de spores, et la durée de la période de virulence sera plus ou moins longue, selon que la dessiccation des liquides ou des tissus provenant des cadavres charbonneux sera lente ou rapide.
Ces liquides sont-ils en couche mince, ils se dessèchent rapidement, et les bactéridies ne se transforment point en spores; elles deviennent granuleuses et perdent leur virulence; au contraire, la dessiccation est-elle lente, connue cela arrive quand les débris cadavériques charbonneux sont découpés en morceaux un peu épais, et la température est-elle favorable, 25°, 30° et surtout 35°, les filaments bactéridiens donnent rapidement naissance à des spores, et la virulence des débris charbonneux est ainsi ' assurée pour de longues années.
La putréfaction détruit la virulence charbonneuse, du moins quand les bactéridies ne se sont point transformées en spores, car celles-ci résistent à la fermentation putride, et l’observation a appris que les dangers résultant des manipulations auxquelles se livrent les équarrisseurs qui dépouillent les cadavres d’animaux charbonneux sont moins prononcés (et même nuis), quand ces cadavres sont dans un état de décomposition avancée que quand ils sont encore chauds. MM. Pasteur et Joubert ont donné la véritable explication de ce phénomène. « Dès que la bactéridie, sous son état filiforme, est privée du contact de l’air, qu’elle est plongée, par exemple, dans le vide ou dans le gaz acide carbonique, elle tend à se résorber en granulations très ténues, mortes et inoffensives. La putréfaction la place précisément dans ces conditions de désagrégation de ses tissus. »
Etiologie du charbon dit spontané. — On sait pertinemment aujourd’hui que le sang de rate ou la fièvre charbonneuse est déterminée par la bactéridie. Cette donnée fondamentale a été démontrée par MM. Pasteur et Joubert au moyen de la méthode des cultures successives :
Dans un flacon contenant un liquide nutritif pur, le liquide de
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Pasteur par exemple, ou du bouillon de veau alcalinisé, on dépose une gouttelette imperceptible de sang charbonneux frais et on porte à l’étuve à 35°. La végétation mycélienne ne tarde pas à se faire; une gouttelette de ce premier flacon est introduite dans un deuxième et y donne lieu à la même végétation filamenteuse; une gouttelette de ce deuxième flacon, mise dans un troisième, produit un nouveau développement et de même pour un quatrième, un dixième, un vingtième et ainsi indéfiniment.
Dans la vingtième culture ainsi obtenue, il n’y a assurément aucune parcelle de la goutte de sang primitive empruntée à l’économie de l’animal charbonneux.
Ainsi Buchner a calculé que, dans une septième culture ainsi faite et en supposant que la rate entière d’une souris charbonneuse ait été placée dans la première culture, cette rate ne représentait plus que un dix-quatrillionnième de milligramme. Cependant si on inocule à un mouton ou à un cobaye une trace de cette vingtième culture, il meurt comme si on lui avait inoculé le sang d’un animal mort du charbon spontanément. (Straus.)
En d’autres termes, par la méthode des cultures successives, on détruit entièrement tous les globules du sang, tous les éléments anatomiques des tissus et l’on obtient une bactéridie absolument pure, douée de virulence.
Dans ces conditions, il est impossible d’admettre, dirons-nous avec M. Pasteur, qu’elle soit accompagnée « d’une substance soluble on d’un virus partageant avec elle la cause des effets du sang cle rate ou de la maladie charbonneuse proprement dite ».
Cette donnée fondamentale étant établie, il faut rechercher par quelle voie s’effectue la pénétration des bactéridies ou de leurs germes dans l’organisme afin d’en déduire des moyens prophylactiques rationnels. Ces recherches ont été faites sur le mouton par MM. Pasteur, Chamberland et Roux, attendu que c’est chez les Ovidés que le sang de rate ou charbon dit spontané se développe avec le plus de facilité.
Les premières expériences consistèrent à nourrir certains lots de moutons que l’on arrosait de cultures de bactéridies charbonneuses chargées du parasite et de ses germes. Malgré le nombre immense de spores ingérées par tous les moutons d’un même lot, beaucoup d’entre eux échappent à la mort, souvent après avoir été visiblement malades; d’autres, en plus petit nombre,, meurent avec tous les symptômes du charbon spontané et après un temps d’incubation du mal qui peut aller jusqu’à neuf et dix jours, quoique, dans les derniers temps de la vie, la maladie revêt les caractères presque foudroyants signalés par les observateurs et qui ont fait croire à une incubation de très peu de durée, La
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communication de la maladie par des aliments souillés de spores charbonneuses est plus facile encore chez les cobayes que chez les moutons. Les spores, dans ce cas, se retrouvent dans les excréments. On les retrouve également intactes dans les excréments des moutons.
On augmente la mortalité en mêlant aux aliments souillés des germes du parasite des objets piquants, notamment les extrémités pointues des feuilles de chardon desséché, et surtout des barbes d’épis d’orge coupés par petits fragments d’un centimètre de longueur environ.
Il importait beaucoup de savoir si l’autopsie des animaux morts dans ces conditions montrerait des lésions pareilles à celles qu'on observe chez les animaux morts spontanément dans les étables ou dans les troupeaux parqués en plein air. Les lésions, dans les deux cas, sont identiques ; et, par leur nature, elles autorisent à conclure que le début du mal est dans la bouche ou l’arrière-gorge (1).
C’est donc par l’ingestion des spores charbonneuses que le charbon dit spontané se produit. Ces spores proviennent ellesmêmes des cadavres d’animaux charbonneux enfouis dans la terre :
Assistons, par la pensée, à l’enfouissement du cadavre d’une vache, d’un cheval ou d’un mouton morts du charbon. Alors même que les animaux ne seraient pas dépecés, se peut-il que du sang ne se répande pas hors du corps en plus ou moins grande abondance ? N’est-ce pas un caractère habituel de la maladie, qu’au moment de la mort le sang sort par les narines, par la bouche, et que les urines sont souvent sanguinolentes? En conséquence, et dans tous les cas, pour ainsi dire, la terre autour du cadavre est souillée de sang. D’ailleurs, il faut plusieurs jours, avant que labactéridio soit détruite dans le cadavre par les gaz privés d’oxygène libre que la putréfaction dégage, et, pendant ce temps, le ballonnement excessif du cadavre fait écouler les liquides de l’intérieur à l’extérieur par toutes les ouvertures naturelles, quand il n’y a pas, par surcroît, déchirure de la peau et des tissus. Le sang et les matières ainsi mêlées à la terre aérée environnante ne sont plus dans les conditions de la putréfaction, mais bien plutôt dans celles d’un milieu de culture propre à la formation des germes de la bactéridie. (Pasteur.)
Ges vues préconçues, qui découlaient d’ailleurs des obser-
(1) Pasteur, Chamberland et Roux. Sur l'Eiiologie du charbon (C. R. Acad, des Sciences, 1880), et Revue vétérinaire, 1880, p. 441.
vations faites sur la culture de' la bactéridie, ont été pleinement confirmées par les recherches de MM. Pasteur, Chain berland et Roux démontrant que la terre des fosses d’enfouissement contient des spores charbonneuses. On ne peut s’empêcher de remarquer, — comme le fait M. Straus, dans son livre sur le Charbon des animaux et de l'homme — qu’en 1870, c’est-à-dire à une époque où l’on ne s’était pas familiarisé, comme aujourd’hui, avec les diverses méthodes de séparation des germes, c’était un problème singulièrement ardu que de déceler la présence de la spore de la bactéridie dans la terre végétale qui recouvre les fosses, terre si riche en germes de toute sorte. Ce problème a été résolu de la manière la plus décisive par M. Pasteur. « Il lessive la terre suspecte; laisse reposer les [eaux de lévigation et recueille le dépôt qui se forme par le repos et qui est constitué par des microbes et des germes divers. Il tue la plupart de ces germes en soumettant le dépôt pendant vingt minutes, au bain-marie, à la température de 90°. Parmi ceux qui restent, il n’en est plus que deux qui, inoculés aux animaux, soient pathogènes, ce sont les spores du vibrion septique et celles de la bactéridie, c’est le premier organisme qui se développe dans certaines inoculations, le second dans d’autres. M. Pasteur a pu ainsi constater la présence des spores charbonneuses dans la terre recouvrant la surface des fosses où des animaux charbonneux avaient été enfouis depuis plusieurs années, alors qu’on n’en trouvait pas dans les terres voisines de la fosse. Cette recherche a été faite avec succès sur la terre de fosses qui n’avait pas été remuée depuis l’enfouissement, aussi bien que sur celle de fosses dont la surface avait subi, pendant plusieurs années, toutes les opérations de la culture et des moissons.
« M. Pasteur et ses collaborateurs mirent encore autrement en évidence la longue durée de la vie des spores charbonneuses et leur conservation dans les terres cultivées. Un lot de moutons est mis parquer sur des fosses où plusieurs années auparavant avaient été enterrés des animaux charbonneux : un autre lot de moulons est placé dans un enclos situé tout auprès, mais où aucun animal charbonneux n’a été enfoui; au bout d’un certain nombre de jours, plusieurs moutons ayant brouté sur les fosses moururent du charbon alors que tous les moutons témoins demeurèrent bien portants. » (Straus.)
On pourrait rapprocher de ces expériences, les faits consi-
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gnés dans une note adressée, en 1865, à M. Tisserand, Directeur de l’ Agriculture, par M. de Seebach, alors Ministre de Saxe à Paris et communiquée à l’Académie de médecine, par M. Pasteur, en 1880. Dans cette note, M. de Seebach relate des observations qui montrent combien la terre des fosses d’enfouissement des animaux charbonneux et les herbes qui y croissent constituent des agents redoutables de la transmission du charbon (1). Puis, le fait observé par Marret d’Allanche, sur des bêtes bovines qui étaient nourries avec du foin récolte dans les montagnes dangereuses (2). Il serait facile de multiplier les exemples. Ainsi, M. Leblanc, au nom de la Commission du charbon , nommée par la Société centrale de médecine vétérinaire, en 1880, a rapporté plusieurs faits observés par M. Robouam, qui témoignent de la contagion par l’herbe ayant poussé sur les fosses d’enfouissement (3). Ces faits prouvent que les germes de la bactéridie résistent à toute assimilation végétale et que le rôle dépurateur de la végétation, à la surface du sol, n’a pas la puissance qu’on était porté à lui attribuer.
Comment les spores formées autour du cadavre charbonneux, enfoui plus ou moins profondément, arrivent-elles à la surface du sol de la fosse? On pourrait penser tout d’abord que ce transport s’effectue par le déplacement incessant des eaux qui imprègnent le sol, mais nous savons par les expériences de MM. Pasteur et Joubert. que la terre, en certaine épaisseur, joue le rôle d’un filtre et débarrasse les liquides qui la traversent de toutes les particules solides, même les plus ténues. C’est pour cela que les eaux de source, qui proviennent d’une profondeur même faible, sont privées de tous germes, et, semées dans les milieux de culture les plus appropriés, ne donnent lieu à aucun développement. M. Pasteur a montré que ce transport des spores charbonneuses, de la profondeur à la surface du sol, est, en grande partie, dû aux vers de terre :
(1) Voyez Pasteur. Nouvelles observ. sur la prophylaxie et V étiologie du charbon. Bullet. de F Acad. de médecine, 1880, t. IX, p. 1138, et Recueil de méd. vétér., 1880, p. 1178.
(2) C. Baillet. Rapport sur les pâturages de l’Auvergne dans lesquels se produit la maladie charbonneuse connue sous le nom de mal de montagne, 1870, p. 67.
(3) Voy. Bulletin de la Soc. cent, de méd. vétér. (Séances des 10 mars et 22 décembre 1881.)
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« Ce sont les vers de terre qui sont les messagers des germes et qui, des profondeurs de l’enfouissement, ramènent à la surface> du sol les terribles parasites. C’est dans les petits cylindres de> terre à très fines particules terreuses que les vers rendent et déposent à la surface du sol, après les rosées du matin ou après> la pluie, que se trouvent, outre une foule d’autres germes, Ies> germes du charbon. Il est facile d’en faire l’expérience directe : que dans la terre à laquelle on a mêlé des spores de bactéridieson fasse vivre des vers, qu’on ouvre leur corps après quelques^ jours, avec toutes les précautions convenables, pour en extraire: les cylindres terreux qui remplissent leur canal intestinal, on y retrouve en grand nombre les spores charbonneuses. Il est de toute évidence que si la terre meuble de la surface des fosses à animaux charbonneux renferme les germes du charbon et souvent en grande quantité, ces germes proviennent de la désagrégation par la pluie des petits cylindres excrémentitiels des vers. La poussière de cette terre désagrégée se répand sur les plantes à ras du sol et c’est ainsi que les animaux trouvent au parcage et dans certains fourrages les germes du charbon par lesquels ils se contagionnent. »
Ces vues de Pasteur sur l’étiologie du charbon ont été contestées par Koch, mais l’expérience qu’il a faite pour les réfuter est loin d’être concluante.
Ainsi on a mis dans un vase « 300 grammes de terre de jardin mélée à une grande quantité de spores charbonneuses ; des vers de terre y furent placés et, au bout d’un, certain nombre de jours, le contenu de l’intestin de ces vers^ fut inoculé à des souris, en même temps qu’on inoculait à d’autres souris de la terre que renfermait le vase. L’expérience montra que cette terre conférait le charbon bien plussûrement que l’inoculation du sable contenu dans l’intestin, des vers. M. Koch en conclut que les vers de terre sont « de. très mauvais messagers des germes » et que si eux seuls, ainsi! que les spores profondément développées dans la terre autour du cadavre agissent pour perpétuer le contage, il y a longtempsque le charbon aurait dû disparaître. Et cependant l'expérience de M. Koch ne prouve qu’une chose, c’est que la terre renfermée dans l’intestin des vers peut être moins riche en spores que la terre dans laquelle ces vers ont été placés ; mais elle ne prouve nullement que ces vers ne puissent puiser des spores dans une terre qui en est souillée et les transporter dans les parties du sol qui en étaient indemnes.
« Pour M. Koch, les fosses où un cadavre çharbonneux a
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été enfoui ne sont contaminées qu’à la surface , par les bactéridies déposées à fleur de sol au moment de l’enfouissement, avec le sang, les urines et les liquides qui s’échappent du cadavre, et qui trouvent à la surface du sol les conditions de chaleur, d’humidité nécessaires à la formation des spores. Mais il est impossible d’expliquer ainsi la longue durée de la persistance des germes charbonneux à la surface des fosses. Si les spores ne se formaient qu’à la surface, aux dépens des bactéridies qui ont souillé le sol au moment de l’enfouissement, ces spores ne tarderaient pas à être disséminées au loin et à disparaître rapidement sous l’influence des eaux pluviales, du vent, de l’action des rayons solaires, etc. Leur longue persistance à la surface du sol de la fosse montre bien qu’elles se renouvellent constamment, et ce renouvellement ne peut guère s’expliquer que par un transport incessant s’effectuant de la profondeur de la fosse à la surface du sol. Du reste, hâtons-nous de le dire, si les vers de terre sont des agents certains de transport des spores, ils n’en sont pas les agents uniques ; les labours un peu profonds, les défoncements du sol agissent dans le même sens.
On comprend ainsi, comme le résume très clairement M. Chamberland, pourquoi il y a des champs maudits , c’est à-dire des champs où l’on ne peut pas faire paître les animaux sans provoquer la maladie charbonneuse. Ce sont des champs où on a enfoui des animaux charbonneux, ou bien où l'on a amené de la terre ou des engrais renfermant des débris charbonneux. Ces germes peuvent, à leur tour, être transportés sur les champs de plusieurs manières. Les pluies et surtout les pluies d’orage, en entraînant les particules terreuses, entraînent aussi les germes. Une partie de ceux-ci se déposent sur les terres, le long des fossés des routes, etc. ; une autre partie est entraînée jusqu’au ruisseau le plus voisin, lequel, s’il vient à déborder, va également semer des spores sur ses rives. Il est même très probable que ces spores, se trouvant parfois dans des eaux stagnantes plus ou moins chargées de matières organiques, germent, se reproduisent et donnent de nouvelles spores comme dans les cultures artificielles.
C’est probablement là la cause des épidémies charbonneuses qui se déclarent parfois dans les prairies à la suite des inondations. Une autre cause de dissémination des spores est dans les engrais qui, souvent, proviennent d’étables où sont morts des animaux charbonneux, ou même des fumiers sur lesquels on a jeté les animaux ou des débris d’animaux morts du charbon.
Enfin, nous avons démontré qu’en faisant manger des spores
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charbonneuses à des moutons, tous ne succombent pas. Chez ceux qui survivent, les spores ingérées ne sont pas détruites par leur passage à travers le canal intestinal. On les retrouve vivantes et virulentes dans les excréments. De sorte que des moutons qui ont absorbé des spores sur un champ maudit, par exemple, peuvent ensuite, suivant le chemin parcouru par les animaux, les répandre à des endroits variables. Voilà beaucoup de causes auxquelles, sans doute, on pourrait encore en ajouter d’autres, qui nous permettent de comprendre comment les germes se disséminent à la surface de la terre (1).
D’autre part Kitt, cité par Straus, a fait à l’Ecole vétérinaire de Munich des expériences qui démontrent que la bouse du bœuf, surtout quand elle est mélangée de sang et de mucus, constitue un milieu de culture très favorable pour les bactéridies ; de telle sorte que les matières fécales du gros bétail charbonneux détermineraient les endémies charbonneuses que l’on observe dans les Alpes bavaroises.
Nous avons constaté, en 1890, la fièvre charbonneuse sur des bêtes bovines d'un grand domaine de Mazamet (Tarn). Ces bêtes étaient placées pendant une partie de l’année dans des pâturages irrigués avec les eaux de lavage des laines ; cedles-ci provenaient de peaux de moutons de Buenos-Ayres, peaux qui sont quelquefois charbonneuses. Or, d’après ce que nous savons sur la vitalité des spores, on conçoit que la fièvre charbonneuse puisse se déclarer dans cette circonstance.
Il est encore à remarquer que des expériences faites par • Soyka (de Prague) démontrent que la terre constitue un excellent milieu de culture pour la bactéridie, et dans quelle mesure tel ou tel degré d’humidité du sol peut exercer son influence (2).
En 1892, le Dr Diatroptoff, de la station bactériologique d’Odessa, a trouvé « des germes charbonneux dans la vase' du fond d’un puits ». On présumait que l’eau de ce puits ■ avait produit « une épizootie de fièvre charbonneuse dans un troupeau de moutons ». Les recherches bactériologiques convertirent cette présomption en une preuve certaine et indis- • cutable dont la conséquence prophylactique — la suppres- ■
(1) Straus. Le charbon des animaux et de l’homme, p. 102.
(2) Sotk.a. Bodenf'cuchtigkeit , und MiUbrandbacillus (Fortschritte der ' Med., 1836, p. 281).
sion du puits — découlait tout naturellement : « le puits comblé, l’épizootie cessa » (1).
En somme, ce sont les cadavres des animaux charbonneux qui sont la principale cause de propagation de la maladie et leur destruction totale est donc la mesure prophylactique qui découle tout naturellement de nos connaissances sur l’étiologie de la fièvre charbonneuse.
Voies de pénétration des germes. — Chez le mouton, la pénétration du bacillus anthracis ou de ses spores se fait principalement par les voies digestives comme le démontrent les recherches de Toussaint, les expériences de Pasteur et de ses collaborateurs, ainsi que celles de Koch.
De plus, les expériences de Koch établissent que « si l’on fait avaler aux moutons des spores charbonneuses en grande quantité, ces animaux meurent tous, infailliblement et à bref délai, après l’ingestion ; si au contraire on leur en fait prendre journellement de petites quantités (comme cela se passe sur les pâturages, dans les pays à charbon), ils meurent moins sûrement et à des intervalles plus éloignés. Ces différences s’expliquent aisément si l’on ne perd pas de vue que la plupart des spores ingérées n’arrivent pas à germer dans l’intestin et sont évacuées par les selles ; il s’ensuit naturellement que plus le nombre des spores avalées est grand, plus grand est le nombre de celles qui arrivent à se développer dans l’intestin, et plus sûres et plus rapides aussi sont les chances d’infection. » [Straus (2).]
Chez le bœuf, de même que chez le mouton, l’infection charbonneuse se fait principalement par les voies digestives. Il paraît en être de même chez le cheval, d’après ce qu’il m’a été donné d’observer dans une endémie de charbon spontané.
La contagion peut aussi s’effectuer par la voie pulmonaire, mais ce mode d’infection est bien plus rare que le précédent.
Il a été étudié expérimentalement par H. Buchner. Des souris blanches furent placées dans un espace clos dans l’air duquel on répandait des poudres inertes, du charbon pulvérisé ou du talc, auxquelles on avait mêlé des spores desséchées de bactéridies. Une spule séance d'inhalation, d’une durée variant d un quart d’heure
(1) Annales de l'Institut Pasteur, 1893, p. 286.
(2) KocH. Ueber die Milzbrandimpfunç/. Cassel. 1882. — Koch, Gaffkÿ et Lœffler. Experimentelle Studien über M ilzbr andin fection dur ch Fiittcrung (Mitth. d. k. Gesundhcitsamte, Bd II, 1884, p. 147.)
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à deux heures, suffit pour donner régulièrement le charbon à ces animaux. Dans cette expérience, l’infection s’est faite par la voie pulmonaire et ne peut êlre attribuée à la déglutition des spores et à leur pénétration dans le tube digestif, car on sait qu’il est difficile de faire périr les souris en leur faisant ingérer des spores, à moins, toutefois, qu'on n’emploie de grandes quantités de matière virulente; or Buchner a pu faire avaler à des souris, sans aucun résultat, des doses de spores infiniment plus fortes que celles qui servaient à contaminer l’air dans ses expériences d'inhalation. [ Slraus (1).]
La contagion peut encore s’effectuer par des plaies récentes, qui ne sont pas encore recouvertes de bourgeons charnus, attendu que ceux-ci s’opposent à la pénétration du bacillus anihracis ou de ses spores dans l’économie, comme le démontrent les expériences de MM. Laulanié et Jeannel. Il peut arriver que des moutons soient infectés par les morsures que leur infligent des chiens qui viennent de dévorer des débris de cadavres charbonneux et dont la bouche et les dents sont souillées de sang charbonneux. Les bœufs, les chevaux peuvent être inoculés accidentellement aux endroits où la peau est mise à vif par le joug ou par le collier ; mais ce ne sont là, somme toute, que des cas sporadiques et exceptionnels ; on peut admettre, en règle générale, que les endémies ou les épidémies charbonneuses sont toujours dues au charbon intestinal, c’est-à-dire à celui qui se transmet par les voies digestives.
On a fait intervenir dans la contagion du charbon les piqûres de mouches, en s’appuyant sur les expériences de Raimbert et Davaine, mais ces expériences n’autorisent pas une semblable affirmation. Tout ce que l’on peut dire à ce sujet, c’est que si les mouches peuvent être quelquefois des agents de la contagion, c’est en se posant sur des plaies vives, alors que leur suçoir ou leurs pattes se trouvent imprégnés de sang charbonneux. Remarquons cependant qu’il est des mouches piquantes — dites mouches charbonneuses — comme les stomoxes, qui peuvent communiquer la fièvre charbonneuse par leurs piqûres, attendu qu’elles se posent sur les cadavres et que leur rostre peut être chargé ainsi de
(1) Buchner (H.). Zur Æliologie der Infectiomkrankheiten ( Vorlràge gehalten im œrtzlichen Vereinin Münchnn, 1881, p. 2f3). — Versuche über die Entstcliung des milzbrandes durch Einathmung ( Nœgeli's Untersuchungen über niedere Pilze, Munich, 1882, p. 118).
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sang charbonneux. Néanmoins il n’est pas « bien prouvé que les stomoxes puissent prendre leur nourriture sur les cadavres. Ce n’est donc guère qu’après avoir piqué un animal malade du charbon, que les mouches dont il s’agit seraient susceptibles de transmettre la maladie ». (A. Railliet.)
Contagion à l’homme. — On a cité de nombreux cas de transmission du charbon à l’homme, particulièrement chez les bouchers et les équarrisseurs qui dépouillent et dépècent les cadavres de bœufs ou de vaches affectés de charbon.
Les piqûres de mouches peuvent ici jouer un certain rôle. Elles déterminent, comme on sait, une douleur vive et prurigineuse ; dès lors, elles peuvent donner lieu à une petite plaie qui constitue une voie ouverte à la contagion, chez les personnes qui manipulent les débris cadavériques charbonneux, ou bien les peaux, comme les tanneurs, les mégissiers.
L’accident initial est constitué alors par la pustule maligne.
La fièvre charbonneuse peut se transmettre par l’ingestion de viandes charbonneuses ( charbon intestinal ) ; elle peut se communiquer encore par la pénétration dans les voies respiratoires de poussières chargées de spores charbonneuses [charbon pulmonaire ), notamment chez les chiffonniers, les trieurs de laine.
Réceptivité des diverses espèces animales pour le charbon. — Le mouton tient îe premier rans? par sa facilité à prendre le charbon, tant par la voie intestinale que par inoculation sous-cutanée, et c’est avecraison que l’Association médicale d’Eure-et-Loir plaçait cet animal en tête de tous comme réceptivité pour le charbon. Mais, même pour le mouton, cette réceptivité varie avec l'âge, avec certaines conditions individuelles, encore inconues et surtout avec la race; nous verrons, en effet, plus tard, la grande résistance qu’offrent au charbon les moutons algériens, ainsi que l’ont établi les expériences de M. Chauveau. Les chèvres paraissent se comporter à l’égard du charbon à peu près comme le mouton.
Les rongeurs (souris, cobayes, lapins) si sensibles à l’inoculation sous-cutanée, se montrent infiniment plus résistants que le mouton à l’infection par la voie intestinale. Les rats sont assez difficiles à infecter, non seulement par l’ingestion de matières charbonneuses, mais aussi par l'inoculation sous-
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cutanée, surtout, au dire de Fesser, les rats nourris à la viande.
Les animaux d'espèce bovine contractent assez facilement le charbon par la voie intestinale, ainsi que le montrent les ravages que cette maladie exerce, dans certaines régions, sur les troupeaux. Mais les expériences déjà anciennes de l’Association médicale d’Eure-et-Loir, celles d’OEmler, de Pasteur, de M. Chauveau, établissent la résistance très notable de ces animaux à l’inoculation sous-cutanée. OEmler, qui a fait de si nombreuses expériences sur l’inoculabilité du charbon chez les diverses espèces animales, a inoculé 41 bovidés, dont plusieurs à un grand nombre de reprises et avec de grandes quantités de sang charbonneux; un seul mourut du charbon (1). M. Chauveau a observé le même fait, non seulement chez le bœuf, mais aussi chez le veau Dans ces expériences, dit-il, les bœufs français se sont montrés aussi réfractaires à l’infection bactéridienne que les moutons de l’Algérie, et il ajoute que « la fréquence du charbon sous forme épizootique dans l’espèce bovine est encore assez grande pour paraître un peu contradictoire avec la grande résistance des sujets de cette espèce à l’inoculation expérimentale (2).
« Dans nos contrées, les chevaux comptent parmi les animaux domestiques qui sont le plus rarement atteints du charbon, tandis qu’en Algérie, dans certaines provinces de la Russie, en Sardaigne, ils sont souvent frappés en grand nombre, presque toujours du charbon intestinal. Les expériences d'OEmler ont montré qu’ils contractent plus facilement que les bovidés la maladie par la voie hypodermique. » (Straus.)
En 1882, nous avons observé la fièvre charbonneuse à Montauban. sur les chevaux du 17° escadron du train des équipages militaires : trente chevaux sur soixante-six qui composaient l’effectif des animaux logés dans le même quartier, succombèrent à cette maladie. Dans ce cas, nous avons
(1) OEmler. Expérimente Lie Beitrage zur Milzbrandf rage. ( Arch . f. wissensch. u practis. Thierhedkunde , t. II, p. 257 ; t. III, p. 97 et 257; t. IV, p. 261 : t. V, p. 16 i et t. VI, p. 401.)
(2) Chauveau. Sur la résistance des animaux de l'espèce bovine au sang de rate , etc. (C. R. de l'Académie des sciences, 1880, t. 91, p. 1526.)
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montré que l’infection s’était faite par les voies digestives (charbon intestinal).
Le porc est susceptible do contracter la fièvre charbonneuse ou bactéridienne soit par contagion naturelle , comme le démontrent les faits observés par Villain, complétés par les recherches de Nocard (1), ceux qui ont été publiés dans la Revue vétérinaire de Toulouse, en 1890, par Crookshank (2), soit par contagion expérimentale comme cela a été établi par M. Cornevin (3) et par nous-même (4). Le porc n’est donc pas réfractaire au charbon, comme Toussaint l’a avancé par erreur (5) et comme on l’a répété après lui (Straus, OEmler); toutefois, la lenteur relative avec laquelle la maladie évolue chez le porc indique que la multiplication du bacillus anthracis se fait avec une certaine difficulté dans l’organisme de cet animal. Néanmoins, Crookshank, après avoir démontré que le charbon dit spontané existe bien réellement, conclut « qu’il ne faut pas manger des jambons, des saucisses ou saucissons, etc., crus, car la virulence de la viande charbonneuse suggère une explication possible de ces cas obscurs d’empoisonnement par la viande, qui ont été constatés en Angleterre. Il est possible, en effet, que la chair de porcs morts du charbon ait été employée à la préparation des saucisses (ou saucissons), pâtés de porc, etc., et que la cuisson n’ait pas été suffisamment complète pour priver la viande de ses propriétés toxiques ». D’autre part, nos expériences indiquent que la salaison ne détruit la virulence de la viande de porc charbonneux qu’autant qu'elle est bien complète, ce que l’on reconnaît à la fermeté de la viande, à l’odeur agréable qu’elle exhale et à l’aspect uniformément rouge de la coupe.
Le chien n’est pas un animal « entièrement réfractaire au charbon et qui ne se contagionne pour ainsi dire jamais, par la voie intestinale» (Straus); il est susceptible de s’infecter par cette voie, du moins quand l’animal est jeune et qu’il existe quelque plaie sur la muqueuse buccale, comme le prouve le fait suivant que nous avons observé à Toulouse.
(1) Voyez Bulletin de la Société centrale de médecine vétérinaire. Séances des 26 mars et 13 août 1885.
(?) Revue vétérinaire, 1890, p. 169 et 225.
(3) Le charbon symptomatique du bœuf, 1887, p. 90.
(4) Revue vétérinaire, 1887, p. 506 et 568.
(5) Recherches sur la maladie charbonneuse, p. 123.
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Une brebis étant morte depuis quelques heures du charbon bactéridien, on fait manger une partie de la rat-; de cet animal, environ les deux tiers, à un petit chien d’arrêt, âgé de trois mois On lui présente également quelques morceaux de foie qu’il dévore avec gloutonnerie. Une chatte, âgée d’un an, prend part à ce repas et mange, avec Don moins d’avidité que le petit chien, des morceaux de foie et de rate très riches en bacilles charbonneux. Soixante heures après, le chien meurt et le sang de la jugulaire, examiné immédiatement, renferme une quantité innombrable de bactéridies Séance tenante on l’inocule, par quatre piqûres, à la face interne de la cuisse d un fort lapin. Puis on continue l’autopsie et l'on constate les lésions suivantes :
Près de la pointe de la langue, a la face inférieure de cet organe et vers le bord gauche, on voit une petite plaie grisâtre, résultant sans doute d une morsure que le chien s’est faite lui même. Cette plaie est entourée d’un bourrelet rougeâtre, qui forme une sorte de tumeur lisse et arrondie, de la grosseur d’un pois, dont le centre est déprimé. A partir de cette lésion, la muqueuse buccale est le siège d’une infiltration gélatiniforme, jaunâtre, surtout prononcée sur la lace latérale gauche de la langue, qui est boursouflée. Cette infiltration a pénétré jusque dans les muscles de la langue. Elle a envahi aussi la muqueuse pharyngienne, qu’elle ne dépasse point toutefois.
Les ganglions sous-glossiens du côté gauche sont hypertrophiés et entourés d’une infiltration de sérosité jaunâtre, qui s’étend dans le tissu conjonctif sous-cutané du bord inférieur du cou jusqu'à l’entrée de la poitrine.
Sur la muqueuse stomacale, on constate une ecchymose lenticulaire intéressant toute l’épaisseur de celte membrane Dans la plus grande partie de l’intestin grêle et surtout dans le duodénum, la muqueuse présente une vive rougeur et même deux ulcérations ovalaires, d’un centimètre de longueur. La rate est hypertrophiée, brunâtre et très molle ; son tissu contient une très grande quantité de bactéridies. On en trouve également dans la tumeur linguale, dans la sérosité de l’œdème buccal, dans la pulpe des ganglions sous-glossiens. D’ailleurs, le lapin inoculé avec le sang frais de la jugulaire a succombé en quarante-cinq heures et l’autopsie a permis de constater toutes leslésions produites par le bacillus anthracis. Par conséquent, le chien qui avait mangé une partie des viscères de la brebis charbonneuse est bien mort du charbon bactéridien. Quant à la chatte, qui avait pourtant pris une large part à ce repas de contagion, elle a parfaitement résisté.
Les lésions que nous venons d’exposer sommairement indiquent que la contagion s’est effectuée par la plaie de la langue ; l’œdème sous-muqueux et sous-cutané, la tuméfaction des ganglions sousglossiens du côté correspondant à la plaie en témoignent. Et notre
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observation montre — une fois de plus — que le bacillus anthracis peut pénétrer dans l’économie par les voies digestives, notamment quand il existe une solution de continuité sur la muqueuse buccale. Elle nous fait voir encore que le charbon est susceptible de se développer chez les carnivores qui mangent des débris charbonneux, surtout lorsque ces animaux sont jeunes.
Cette conclusion n’est pas en concordance avec l’opinion des auteurs qui invoquent d’une part « l’habitude séculaire qu’ont les bergers de nourrir impunément leurs chiens avec la viande des animaux de leur troupeau qui succombent au sang de rate» et, d'autre part, les expériences de M. Colin et celles de M. tStraus. Il est bieu vrai que le chien résiste souvent aux inoculations charbonneuses : nous l’avons montré bien des fois à nos élèves de l’Ecole de Toulouse, mais il est inexact de le considérer comme « entièrement réfractaire au charbon».
— D’ailleurs les expériences de Malin, faites à l’Institut Pasteur. démontrent que le charbon peut s'inoculer au chien surtout par injeeiion intra veineuse ; sur 17 chiens inoculés ainsi, 7 y succombèrent.
Suivant Gerlach, Colin et OEmler, cités par Strausjes chats résisteraient moins que le chien à l’inoculation sous-cutanée du charbon, ils paraissent aussi plus aptes à le contracter par la voix intestinale.
Le lion est susceptible de contracter le charbon bactéridien par « l’ingestion de viandes charbonneuses » comme M. Trasbot l’a prouvé péremptoirement (1). A ce sujet, M. Ménard a déclaré « que l’apnarition du charbon est l’accident que craignent le plus pour leurs grands carnassiers les propriétaires de ménageries ». Et M. Mégnin a ajouté que, suivant M. Rebourgeon, les « lions adultes qui meurent au Jardin des Plantes sont charbonneux. »
Le renard paraît réfractaire au charbon (OEmler). Le cerf ; le daim , le chevreuil contractent facilement le charbon. L'ours peut aussi en être atteint, notamment dans les forêts de la Russie et de la Finlande. On parle même de la transmission du charbon à l’homme par la peau de cet animal. Mais il ne faut considérer comme probants que les faits dans lesquels on a constaté l’existence du bacillus anthracis.
(1) Voyez Bulletin delà Société centrale de médecine vétérinaire. Séance du 9 août 18d3, p. 306.
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Les oiseaux sont très réfractaires au charbon . Cependant OEmler, à la suite d’inoculations sous-cutanées réitérées, est parvenu à transmettre le charbon à 9 canards sur 28, à 11 poulets sur 31 et à 15 pigeons jeunes sur 38. Straus a pu faire mourir du charbon, avec beaucoup de bactéridies dans le sang, un jeune pigeon auquel il avait placé à diverses reprises des fragments de rate de cobaye charbonneux sous la peau de la région pectorale. Les moineaux aussi peuvent contracter le charbon.
« Dans les conditions ordinaires, la poule résiste à toute tentative d’inoculation. Pasteur a montré, en 1878, que, par un dispositifspécial, on pouvait triompher de la résistance de la poule. Pour cela il suffit d’abaisser sa température en maintenant le tiers inférieur de son corps dans l’eau froide. Les poules, fixées verticalement sur des planchettes de bois et plongées dans des seaux remplis d’eau froide à 25°, succombent toutes quand on vient à les inoculer du charbon, tandis que les témoins inoculés, mais non réfrigérés, survivent.
« Wagner a indiqué un moyen original de triompher de la résistance de la poule : ce procédé consiste à maintenir la température constamment au-dessous de la normale par des injections répétées d’antipyrine : 6 poules sur 11 inoculées dans ces conditions succombèrent au charbon. » (Thoinot et Masselin.)
Wagner a recherché encore si l’on ne pourrait pas vaincre l’immunité naturelle sans abaisser la température du corps, mais en agissant « sur l’activité des leucocytes de façon à favoriser le développement du charbon ». A cet effet il a employé l’hydrate de chloral : 1 poule sur 8 inoculées du charbon puis soumises à l'action du chloral, succomba (1).
La transmission du charbon au pigeon a été l’objet d’intéressantes recherches de la part de Metchnikoff. Ainsi cet expérimentateur a vu que, « si dans les conditions ordinaires les pigeons supportent bien l’inoculation sous-cutanée ou dans les muscles, ils succombent en grand nombre quand on introduit le virus dans l’œil. — L’inoculation sous-cutanée devient elle-même mortelle quand on inocule un virus qui a déjà passé plusieurs fois de pigeon à pigeon : sur 28
(1) Annalôs de l'Institut Pasteur, 1890, p. 598.
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pigeons, M. Metchnikoff en a tuè 23 avec un virus de passage.
« Le passage de pigeon à pigeon renforce donc le virus à tel point qu’avec un virus de long passage on arrive à tuer les poulets, animaux si réfractaires.
« Les jeunes pigeons sont plus sensibles que les pigeons adultes » fl).
« Les amphibies et les poissons sont doués d’une résistance encore bien pins grande; toutefois OEmler dit avoir fait périr du charbon, à la suite de l’inoculation sous-cutanée de sang charbonneux, ô grenouilles sur 27. M. Gibier a obtenu le même résultat, mais plus constant, en élevant la température des grenouilles soumises à l’inoculation. OEmler pense aussi avoir réussi à inoculer, dans quelques cas, le charbon à des poissons (carpes, cyprins). » (Straus.)
Transmission du charbon de la mère au fœtus. — Pendant longtemps, on a pensé que le charbon, qui peut se développer sur une femelle en état de gestation, ne se transmettait pas au fœtus et l’on considérait le placenta comme une barrière infranchissable pour la bactéridie. — Cette conclusion a même été érigée en loi, tellement elle semblait constante et exacte : la loi Brauell-Davaine,pouv rappeler les noms des deux savants sur les expériences desquels elle reposait.
Les observations et expériences de Brauell remontent à 1858; elles sont « au nombre de 4 et portèrent sur le sang d’un fœtus de jument, morte de charbon, et sur celui de 3 fœtus de brebis ayant succombé à la même maladie. Il constata que le sang de ces fœtus, à l’examen microscopique, ne contenait pas de bactéridies ; ce même sang fut inoculé sans résultat à des moutons. Il fut ainsi conduit à formuler la conclusion suivante :
« Les embryons des animaux morts de charbon ne présentent aucune des altérations anatomiques propres au charbon. Le sang lui-même n’offre rien d’anormal : de ces faits observés par moi, ainsi que des résultats négatifs des inoculations du sang fœtal, on peut conclure que le charbon ne passe pas de la mère au fœtus. »
Neuf ans plus tard, en 1867, Davaine répéta ces expériences avec le même résultat :
(1) Thoinot et Masselin. Précis de Microbie, 2e édition, p. 218.
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J’ai inoculé, dit-il, un cobaye en état de gestation très avancé avec du sang charbonneux. Le cobaye étant mort deux jours après l’inoculation, offrait dans son sang et dans celui du placenta des myriades de bactéridies; mais il n’y avait aucun de ces corpuscules visible dans le sang ou dans les organes du fœtus qui se trouvait seul dans la matrice.
Quatre cobayes alors furent inoculés, l’un avec le sang du placenta, qui contenait des bactéridies, et les trois autres avec celui du cœur, de la rate et du foie du fœtus, qui n’en contenait pas. Or, le premier cobaye mourut, le lendemain, infecté de nombreuses bacléridies, tandis que les trois autres, inoculés avec le sang du fœtus, ne furent nullement malades, et je les conservai vivants pendant plusieurs mois encore.
Bollinger, M. Chauveau répétèrent ces expériences sur des brebis pleines et obtinrent le même résultat. Mais, MM. Straus et Chamberland démontrèrent très nettement, en 1882, que dans le charbon, chez le cobaye , la barrière placentaire est souvent franchie, que le sang fœtal peut contenir des bactéridies et être virulent.
Nos expériences portèrent sur des femelles de cobaye, au nombre de plus de vingt, à diverses périodes de la gestation. Elles furent inoculées soit avec de la culture virulente de charbon, soit avec de la culture atténuée (deuxième vaccin de Pasteur), virulente encore pour le cobaye. Ces animaux succombèrent au charbon type dans un temps variant entre trente-six et soixante heures.
Immédiatement après la mort, les fœtus étaient extrai'S rapidement et avec soin et plongés aussitôt dans de 1 eau bouillante pendant un temps plus que suffisant pour tuer les quelques bacilles provenant du sang maternel ou placentaire qui aurait pu souiller leur peau. Les vases recevant les fœtus après leur extraction, les instruments destinés à les ouvrir étaient rigoureusement flambés, de telle sorte que nul soupçon de contamination par le sang maternel ne pouvait subsister.
Des prises de sang furent faiœs, à l'aide d’une pipette effilée, sur chaque fœtus, dans le foie et dans le cœur; la surface de ces organes, par surcroît de précaution, était toujours brûlée au point où la pipette allait puiser le sang. Le sang ainsi recueilli fut : 1° examiné au microscope ; 2° semé dans du bouillon de veau neutralisé et mis à l’étuve à 37°; 3° inoculé à un certain nombre de cobayes. L’examen microscopique du sang fœtal (que nous pratiquâmes, il est vrai, à cette époque, sans recourir aux procédés de coloration) ne nous permit point de constater la présence de bactéridies. Les globules rouges du sang fœtal n’offraient pas non plus l’état agglutinatif caractéristique du sang charbonneux. A cet égard,
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les faits paraissaient donc, de prime abord, conformes à ceux observés par Brauell, Davaine, etc.
Il en fut tout autrement des résultats que donnèrent les cultures. Plusieurs éventualités se présentèrent : dans quelques cas, les plus rares, le sang puisé dans tous les foetus que renfermait la mère demeura stérile Dans d’autres cas, chez la même femelle dont l'utérus contenait une portée de deux, trois, quatre ou cinq fœtus, le sang d’un seul, ou de deux, trois, etc., fut semé avec succès, le sang des autres fœtus se montrait stérile. Enfin, dans certains cas, tous les petits d’une même portée donnèrent du sang dont la culture fut féconde. Nous avions soin de semer, dans plusieurs flacons de bouillon, du sang recueilli sur un même fœtus et de le semer en quantité notable (plusieurs gouttes pour un flacon). Or, des cas se sont présentés où quelques-uns de ces flacons demeurèrent stériles, taudis que d’autres flacons, ensemencés avec le même sang, cultivèrent. Cela prouve combien est petit le nombre des bacilles contenus dans le sang fœtal : ils y sont, pour ainsi dire, par uniiés, puisqu’on peut prélever sur des fœtus une quantité notable de sang (plusieurs gouttes) qui ne donne rien par la culture et par conséquent ne reuferme aucune bactéridie.
La culture nous révéla donc la présence dans le sang fœtal de bacilles en très petit nombre. Cette, notion inattendue nous engagea à pratiquer un certain nombre d’inoculations avec du sang de fœtus sur des cobayes variés. Nous eûmes soin d’employer pour cette inoculation une dose relativement considérable de sang fœtal (deux à trois divisions de la seringue de Pravaz).
Dans un certain nombre de cas, ces inoculations échouèrent; dans d’autres, elle ^ donnèrent au contraire des résultats positifs et les inoculés succombèrent. D’où cette conclusion que, dans un certain nombre de cas, le sang du fœlus est virulent (1).
Les expériences de Straus et Chamberland ont été répétées par Perroncito, par Koubassoff et les résultats ont été identiques; de plus Koubassoff ayant constaté « par l’examen de coupes colorées des divers organes du fœtus, que le bacillus anthrucis se rencontre constamment dans ces organes, conclut que la transmission s’effectuerait toujours sur tous les fœtus d’une même portée ». Cette assertion n’est pas exacte, comme le démontrent les recherches de Malvoz qui établissent que le passage du bacille charbonneux de la mère au fœtus n’est pas un fait constant; qu’il est la conséquence de lésions placentaires, notamment d’hémorragies : « Il suffit qu’en quelques points il se développe de petits foyers
(i) Stracs. Charbon des animaux et de l'homme, p. 136.
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destructifs pour mettre en rapport immédiat et le sinus placentaire charriant le sang maternel et le capillaire d’une 'villosité choriale. De la sorte, les bacilles pénètrent, par une véritable effraction, peut-on dire, et non par filtration, jusque dans le sang fœtal » (1).
Atténuation du virus charbonneux. — La virulence est une propriété susceptible de se modifier, de s’atténuer ou de s’exalter suivant les circonstances. Nous avons à examiner ici T atténuation du virus charbonneux, c’est -à- dire sa transformation en un virus à effets bénins, susceptible de conférer l’immunité contre la contagion charbonneuse.
C’est Toussaint qui, le premier, en 1880, parvint à atténuer la virulence charbonneuse en chauffant à 55°, pendant dix minutes, du sang charbonneux défibriné et à obtenir ainsi un vaccin capable de donner aux moutons l’immunité charbonneuse (2). Ce fait annoncé par Toussaint est de la plus rigoureuse exactitude, dit Pasteur; puis il ajoute :
Trois cas peuvent se présenter : 1“ La bactéridie périt par la chaleur et, dès lors, le sang charbonneux ne saurait servir à des inoculations préventives ;
2° La bactéridie ne périt pas, mais elle garde une virulence qui tue les moutons.
3° La bactéridie est modifiée ; dans ce dernier cas, seul, il est possible qu’elle préserve, c’est-à-dire qu’elle provoque un charbon qüi s’arrête et n’aboutit pas à la mort de l’animal.
Bref, si l’on voulait inoculer des troupeaux de moutons par le procédé artificiel de M. Toussaint, on pourrait être exposé à de grandes pertes, bien que cependant on puisse assurer que ceux des moutons qui survivraient seraient préservés d'un charbon ultérieur. En outre, la méthode suppose que l’on a à sa disposition une grande quantité de sang charbonneux, ce qui est un assez grave inconvénient. (Acad, des sc., séance du 21 mars 1881.)
Dans cette même séance, Pasteur a annoncé à l’Académie des sciences que la question de vaccination préventive du charbon était complètement résolue et il a communiqué une note sür le Vaccin du charbon.
Le procédé employé pour obtenir ce vaccin repose sur la même propriété que celui qui avait été découvert par Pasteur, dès le commencement de l’année 1880, pour obtenir le
(1) Annales de l'Institut Pasteur , 188?, p. 129.
(2) H. Toussaint. Comptes rendus de l'Acad. des sciences (séance du 12 juillet 1880) et Bulletin de l'Acad. de médecine (séance du 3 août 1880).
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vaccin du choléra des poules. En d’autres termes, l’atténuation du bacille charbonneux résulte pour ce microbe, comme pour celui du choléra des poules, de l’action prolongée de l’oxygène de l’air en présence duquel la culture s’effectue. Toutefois, pour appliquer ce procédé d’atténuation aux cultures du bacillus anthracis, une difficulté en apparence très grande se présentait: le microbe du choléra des poules se multiplie simplement par scission et ne donne pas de spores ; la bactéridie charbonneuse, au contraire, dans ses cultures* donne naissance à des filaments qui, très rapidement, au bout de moins de vingt-quatre heures, se remplissent de spores. Or nous savons que ces spores sont extrêmement résistantes et que ni le vieillissement, ni l’action de l’oxygène de l’air, même très prolongée, ne modifie en rien ni leur vitalité ni leur virulence. Pasteur et ses collaborateurs, MM. Chamberland et Roux, tournèrent la difficulté en empêchant la formation des spores.
Dans le bouillon neutre de poule, la bactéridie ne se cultive plus à 45°. La culture y est facile au contraire, et abondante, de 42° à 43°, mais à cette température les spores ne se forment plus.
En conséquence, on peut maintenir au contact de l’air pur, entre 42° et 43°, une culture mycélienne de bactéridies entièrement privée de germes. Alors apparaissent les très remarquables résultats suivants : après un mois d’attente environ, la culture est morte. La veille et l’avant-veille du jour où se manifeste cette impossibilité du développement, et tous les jours précédents, dans fintervalle d’un mois, la reproduction de la culture est, au contraire, facile. Voilà pour la vie et la nutrition de l’organisme. En ce qui concerne sa virulence, on constate ce fait extraordinaire que la bactéridie en est dépourvue déjà après huit jours de séjour à 42° ou 43° et ultérieurement; aù moins, ces cnltures sont inoffensives pour le cobaye, le lapin et le mouton, trois des espèces animales les plus aptes à contracter le eharbon. Nous sommes donc en possession, non pas seulement de l’atténuation de la virulence, mais de sa suppression en apparence complète, par un simple artifice de culture. En outre, nous avons la possibilité de conserver et de cultiver, à cet état inoffensif, le terrible microbe. Qu’arrive -t-il dans ces huit premiers jours à 43° qui suffisent à priver la bactéridie de toute virulence? Avant l’extinction de sa virulence, le microbe du charbon passe par des degrés divers d’atténuation, et, comme pour le microbe du choléra des poules, chacun de ces états de virulence atténuée peut être reproduit par la culture. Enfin, puisque le charbon ne récidive pas, chacun de ces microbes charbonneux atténué constitue pour le hïicrobe
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supérieur un vaccin, c’est-à-dire un virus propre à donner une maladie plus bénigne Quoi de plus facile dès lors que de trouver dans ces virus successifs des virus propres à donner la lièvre charbonneuse aux moutons, aux vaches, aux chevaux, sans les faire périr et pouvant les préserver ultérieurement de la maladie mortelle (1)?
« Morphologiquement, la bactéridie atténuée ne diffère que peu ou point de la bactéridie la plus virulente; les filaments, cependant, paraissent un peu plus courts et plus divisés et la culture, moins abondante, forme sur les patois du ballon un dépôt uniforme, alors qu’à l’état virulent on la voit le plus souvent en flocons cotonneux, constitués par de très longs fils. Mais il suffit d’attendre la formation des spores et de faire de celles-ci une culture nouvelle pour voir reparaître les formes de développement de la bactéridie virulente. Fait extrêmement intéressant, les spores ainsi développées fixent les virulences de leurs bactéridies propres; « autant de bac- « téridies de virulences diverses, autant de germes dont « chacun est prêt à reproduire la virulence de la bactéridie « dont ii émane ».
« Quand la bactéridie charbonneuse a été privée de toute virulence pour le cobaye, le lapin et le mouton, on peut lui restituer son activité par des cultures successives dans le corps de ces animaux. La bactéridie, inoffensive pour le cobaye de plusieurs années, d’un an, de six mois, d’un mois, de quelques semaines, de plusieurs jours, peut encore tuer le cobaye d’un jour. Si alors on passe d’un cobaye d’un jour à un autre, par inoculation de sang du premier au deuxième, de celui-ci à un troisième et ainsi de suite, on renforce graduellement la virulence de la bactéridie, ou, en d’autres ternies, son pouvoir de se développer dans l’économie. Bientôt, par suite, on peut tuer le cobaye de trois et de quatre jours, d’une semaine, d’un mois, de plusieurs années ; enfin les moutons eux-mêmes. La bactéridie est revenue à sa virulence d’origine et elle la conserve indéfiniment si on ne fait rien pour l’atténuer de nouveau » (2).
Ces faits servent de bases à la vaccination charbonneuse.
(1) Pasteur, Chamberland et Roux. De l'atténuation des virus et de leur retour à la virulence. (C. R. de l’Acad. des sciences, 1831, t. XCII, p. 429.) — Le vaccin du charbon. (Ibid., p. 66d.)
(2) Straus. Le charbon de l’homme et des animaux, p. 147.
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D’autre part MM. Pasteur et Chamberland ont établi, dès 1880, que l’affection charbonneuse ne récidive pas ; qu’en d’autres termes, une première inoculation charbonneuse confère l’immunité aux animaux qui en ont été l’objet. L’expérience a été faite chez le mouton, chez la vache et chez le cheval et elle fut décisive. Dès lors, on conçut l’espoir de conférer l’immunité charbonneuse aux animaux susceptibles de contracter le charbon spontané en leur inoculant un virus charbonneux atténué.
Cette prévision fut confirmée d’une manière éclatante par les célèbres expériences commencées le 5 mai 1881 dans la commune de Pouilly-le-Fort, près Melun, dans une ferme appartenant à M. Rossignol.
Le 5 mai 1881, dit M. Pasteur, on inocula, au moyen d’une seringue de Pravaz, 24 moutons, 1 chèvre et G vaches, chaque animal par V gouttes d’une culture d’un virus charbonneux atténué. Le 17 mai, on réinocula ces 24 moutons, la chèvre et les 6 vaches, par un second virus charbonneux également atténué, mais plus virulent que le précédent.
Le 31 mai, on procéda à l’inoculation très virulente qui devait juger de l’efficacité des inoculations préventives des 5 et 17 mai. A cet effet, on inocula, d’une part, les 31 animaux précédents, vaccinés, et, d’autre part, 24 moutons, 1 chèvre et 4 vaches. Aucun de ces derniers animaux n’avait subi de traitement préalable.
Le virus très virulent qui servit le 31 mai était régénéré des corpuscules-germes du parasite charbonneux conservé dans mon laboratoire depuis le 21 mars 1877.
Afin de rendre les expériences plus comparatives, on inocula alternativement un animal vacciné et un animal non vacciné. L’opération faite, rendez-vous fut pris par toutes les personnes présentes, pour le jeudi 2 juin, par conséquent après quarantehuit heures seulement depuis le moment de l’inoculation virulente générale.
A l’arrivée des visiteurs, le . 2 juin, les résultats émerveillèrent l’assistance. Les 24 moutons et la chèvre qui avaient reçu les virus atténués, ainsi que les 6 vaches, avaient toutes les apparences de la santé; au contraire, 21 moutons et la chèvre qui n’avaient pas été vaccinés, était déjà morts charbonneux ; 2 autres des moutons non vaccinés moururent sous les yeux des spectateurs, et le dernier de la série s’éteignit à la fin du jour.
Les vaches non vaccinées n’étaient pas mortes. Nous avons déjà prouvé antérieurement que les vaches étaient moins sujettes que les moutons à mourir du charbon, mais toutes avaient des
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œdèmes volumineux autour du point d’inoculation, derrière l’épaule. Certains de ces œdèmes ont pris, les jours suivants, de telles dimensions, qu’ils contenaient plusieurs litres de liquide, déformaient l’animal : l’un d’eux môme touchait presque à terre. Leur température s’éleva de 3 degrés. Les vaches vaccinées n’éprouvèrent ni élévation de température, ni tumeur, pas la moindre inappétence, ce qui rend le succès des épreuves tout aussi complet pour les vaches que pour les moutons.
Le vendredi 3 juin, une des brebis vaccinées mourut. L’autopsie en fut faite le jour même par M. Rossignol et par M. Garrouste, vétérinaire militaire. La brebis fut trouvée pleine, à terme, et l’agneau mort dans la matrice depuis douze à quinze jours. L’opinion des vétérinaires qui ont fait l’autopsie est que la mort de cette brebis devait être attribuée à la mort du fœtus.
Les expériences dont je viens de présenter un compte rendu sommaire ont excité la plus vive curiosité dans le département de Seine-et-Marne et dans les départements voisins. Elles ont eu pour témoins plusieurs centaines de personnes, parmi lesquelles je citerai le président de la Société d’agriculture de Melun, M. de la Rochette ; M. Tisserand, directeur de l’Agriculture ; le préfet de Seine-et-Marne, M. Patinot;un des sénateurs du département, M. Foucher de Careil, président du Conseil général; M. Bouley, membre de cette Académie; le maire de Melun, M. Marc de Haut,, président, et M. Decauville, vice-président du comité de Seine-et- Marne ; plusieurs conseillers généraux; tous les grands cultivateurs de la contrée; M. Gassend, directeur de la Station agronomique de Seine-et-Marne; M. le Dr Rémilly, président, et M. Pigeon, vice-président de la Société d’agriculture de Seine-et- Oise; M. de Blowitz, correspondant du Times ; les chirurgiens et vétérinaires militaires en garnison à Melun ; enûn, un grand nombre de vétérinaires civils, parmi lesquels je nommerai, outre M. Rossignol, de Melun; MM. Garnier et Percheron, de Paris; No-card, d’Alfort; Verrier, de Provins; Riot et Grand, de la Société médicale de l’Yonne; Thierry, de Tonnerre; Butel, de Meaux; Borgnon, de Couilly ; Caffm, de Pontoise; Bouchet, de Milly ; Pion, de Grignon; Mollereau, de Charenton; Cagnat, de Saint-Denis, etc.
Je ne cacherai pas que j’éprouve ici une vive satisfaction à donner les noms des vétérinaires quo le désir de connaître la vérité appela à Pouilly-le-Fort dans la ferme de leur confrère M. Rossignol. Le plus grand nombre d'entre eux, sinon tous,, avaient accueilli avec incrédulité l’annonce des résultats de notre programme. Dans leurs conversations, dans leurs journaux, ils se montraient fort éloignés d’accepter comme vraie la préparation artificielle des virus-vaccins du choléra des poules et de l’aiTection charbonneuse. Ce sont aujourd’hui les plus fervents apôtres de la nouvelle doctrine. La confiance de l’un d'eux, le plus sceptique au début, allait jusqu’à vouloir se faire vacciner.
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C’est d’un bon augure. Ils deviendront les propagateurs de la vaccination charbonneuse. Notre concours leur est acquis. Il importe essentiellement que les cultures vaccinales soient, pour un temps du moins, préparées et contrôlées dans mon laboratoire. Une mauvaise application de la méthode pourrait compromettre l’avenir d’une pratique qui est appelée à rendre de grands services à l’agriculture. (Pasteur.)
Cette expérience de Pouilly-le-Fort eut un grand retentissement ; elle fut suivie d’autres expériences publiques analogues instituées tant en France qu’à l’étranger, en Autriche- Hongrie, en Allemagne, en Italie, en Belgique (1) : elles confirmèrent pleinement les premiers résultats obtenus. Aujourd’hui les inoculations préventives sont entrées dans la pratique courante et l’on trouvera ci-après, dans le paragraphe qui traite de la vaccination pastorienne, les résultats économiques extrêmement importants qu’elles ont donnés.
Il est possible d’obtenir des virus charbonneux atténués uniformément par le chauffage du sang charbonneux suivant le procédé indiqué par M. Chauveau (2).
On peut aussi atténuer les cultures artificielles du bacillus anthracis par le chauffage, l’oxygène comprimé, les . antiseptiques et la lumière solaire.
1° Atténuation par le chauffage. « — En 1883, M. Chauveau démontra que l’on pouvait atténuer directement et rapidement les cultures virulentes du bacillus anthracis par l’action de la chaleur. La réussite est certaine si l’on opère sur des cultures contenant du mycélium sans spores. Pour obtenir ces cultures, il suffit de les faire à la température de 42-43° indi- ' quée par Pasteur.
« M. Chauveau emprunte la semence au sang charbonneux frais dont les bacilles sont, comme on sait, toujours dépourvus de spores et la dépose dans des matras chargés d’un bouillon de poulet peu concentré. Après vingt heures de séjour dans une étuve à 42-43 degrés, le bouillon est trouble ettient en suspension erflde nombreux filaments fragmentés dans lesquels l’auteur a signalé non de vraies spores, mais seulement des corpuscules réfringents plus petits, peu résistants qu’il a désignés sous le nom de spores
(1) Voyez. Chamberland. Le charbon et la vaccination charbonneuse , ‘Paris, 1883.
(2) Journal de méd. vét. et dè zootech., publié à l’Ecole de Lyon, 1882, jj5 !p. 337.
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rudimentaires. La qualité du bouillon ou de la semence précipite ou ralentit l’évolution du mycélium. Dans le premier cas, la culture est retirée de l’étuve avant la vingtième heure ; dans le second elle y est laissée plus longtemps.
« M. Chauveau transporte ensuite ces cultures dans une étuve chauffée à 47°. Elles ne forment plus de mycélium. Toutefois la vie n’y est pas entièrement suspendue, car le nombre des spores rudimentaires s’accroît à l’intérieur des bacilles. Mais simultanément! leur virulence s’amoindrit progressivement d’heure en heure. Au bout de trois heures de chauffage à 47°, les cultures sont inoffensives pour le cobaye adulte. L’atténuation réalisée de cette manière est passagère et essentiellement propre aux filaments mycéliens soumis à la chaleur. Si la température reste quelque temps à la température eugénésique de 35-38° les bacilles forment de vraies spores qui, à leur tour, donnent des microbes virulents.. Aussi M. Chauveau a-t-il abandonné bientôt cette technique pouir se consacrer à l’atténuation transmissible par génération » (1). Ce résultat important a été atteint de la manière suivante :
« Le procédé modifié comprend quatre temps successifs : dansle premier, on cultive une goutte de sang charbonneux, à l’intérieur d’un matras chargé d’un bouillon léger, à la température' de 42°, 5. Au bout de vingt heures environ, la culture est peuplée^ de beaux filaments mycéliens asporogènes. Dans le second, on: amoindrit la virulence de ces filaments en portant la culture.1, pendant trois heures, dans une étuve à 47 degrés.
« Dans le troisième, on expose la culture à une température eugénésique (35-37 degrés) ou bien on en sème une parcelle dans? du bouillon neuf, et l’on attend que l’évolution bacillaire aboutisse à la formation de spores, c’est-à-dire cinq à sept jours en moyenne. .
« Ces spores, d’une belle apparence, sont déjà douées d’un commencement d’atténuation, mais elles ont surtout la propriété des’atténuer davantage sous l’influence du chauffage. Si donc, dam? le quatrième temps, on soumet les cultures sporulées à 80 degrés? pendant une heure à une heure et demie, elles sont modifiées auu degré voulu pour ne plus tuer le mouton, sauf de rares exceptions. En outre, la germination de ces spores atténuées fournit du mycélium possédant la même virulence. » (Arloing.)
Dans la préparation du vaccin charbonneux en grande masses M. Chauveau chauffe les cultures à 84° pour obtenir le premier vac cine t à 82° pour le deuxième vaccin, afin d’atténuer uniformémen tous les bacilles contenus dans de grandes quantités de cultures.
« Le procédé de M. Pasteur et celui de M. Chauveau abouti) Arloing. Les virus. Paris, 1891, p. 309.
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tissent au même résultat. Pourtant, ils utilisent, en apparence, des facteurs différents. M. Pasteur attribue l’atténuation cà l’oxygène de l’air, M. Chauveau, à la chaleur. Mais on remarquera que dans l’un et l’autre procédé, chacun des facteurs invoqués n’agit pas isolément et exclusivement. Ainsi, dans le procédé de M. Pasteur, les cultures mycéliennes sont gardées dix à quinze jours à la température dysgénésique de 42°, 5; dans celui de M. Chauveau, les cultures mycéliennes ou sporulées sont chauffées en présence de l’air. A quel facteur convient-il d’attribuer l’atténuation?
« M. Chauveau a creusé cette question avec le concours de M. Wosnessenski. Il s’est convaincu que, dans sa méthode d’atténuation par le chauffage rapide, l’influence de l’oxygène est absolument nulle. Plusieurs expériences lui ont même démontré que l’atténuation par la chaleur est plus rapide dans le vide qu’en présence de l’oxygène.
« Dans la méthode de M. Pasteur, ce gaz ne joue pas non plus le rôle prépondérant qui lui fat attribué. L’oxygène n’intervient, comme force atténuante, que sur les cultures dont l'évolution est arrêtée par l 'abaissement de la température.
« Toutefois, M. Chauveau reconnaît que l’oxygène joue un rôle indirect très important dans la production de l’affaiblissement transmissible par hérédité. En effet, l’atténuation est d’autant plus sûrement transmissible qu’elle s’opère sur des bacilles en voie d’évolution lente. Par conséquent, pour que la température dysgénésique de 42°, 5 exerce pleinement son influence atténuante , il faut que les bacilles évoluent en sa présence; or l’oxygène est indispensable à cette évolution. Il est donc permis de croire que la méthode de M. Pasteur donnera, au point de vue de la persistance de l’atténuation, un résultat plus satisfaisant que le chauffage rapide du mycélium à + 47 degrés et des spores à + 80 degrés.
« En réduisant à d’étroites et justes proportions le rôle de l’oxygène de l’air dans les phénomènes que nous décrivons, M. Chauveau a rendu un grand service à l’expérimentation appliquée à l’atténuation des virus. Il a concouru a élargir brusquement les vues du chercheur; celui-ci pouvait croire, avant son travail, que l’atténuation n’avait et n’aurait pas d’autres facteurs que l’atmosphère. Il en est résulté plus de variétés dans la technique de l’atténuation ét aussi plus de confiance dans l’avenir de la question : car, de prime abord, l’atmosphère ne paraissait pas être un modificateur qu,e l’on
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tînt bien en main et dont on pût faire varier l’action au gré de l’expérimentateur et selon la résistance des organismes.
« Aussi M. Chauveau ne doit-il pas regretter le temps et la peine qu’il a consacrés à démêler la part respective de l’oxygène et de la chaleur dans l’atténuation du Bacillus antliracis. Au surplus, il a la satisfaction de voir aujourd’hui son opinion partagée par l’un des réprésentants les plus distingués de l’école de M. Pasteur. Effectivement, M. Roux, revenant en 1887 sur l’atténuation du virus charbonneux, a écrit ces mots : « C’est à l’action combinée de l’air et de la chaleur sur les filaments du bacillus anthracis dépourvus de spores que MM. Pasteur, Chamberland et Roux ont attribué l’atténuation du bacille du charbon, cultivé à une température de 42-43 degrés. » (Arloing.)
2° Atténuation par V oœy gène ou l'air comprimé. — En s’inspirant des recherches de PaulBert qui démontrent qu’aucune cellule vivante ne résiste à l’oxygène sous la tension de 20 à 40 atmosphères, M. Chauveau se demanda « si ce gaz, agent de vie à la tension où il se présente dans l’air, agent de léthalité à la tension de 20 à 25 atmosphères, si ce gaz, dis-je, sous une tension inférieure à celle qui tue le protoplasma, ne serait pas un simple agent d’atténuation, et il soumit cette hypothèse au contrôle de l’expérimentation. » (Arloing.) Après diverses expériences dont les résultats ne semblaient pas être ceux que les propriétés de l’oxygène comprimé permettaient de prévoir, M. Chauveau a adopté la technique suivante pour atténuer le bacillus anthracis et le transformer en virus vaccinal.
1° On sème une goutte de sang charbonneux ou des spores dans quelques petits matras Pasteur chargés de bouillon nutritif; 2° on enferme ces matras dans un récipient en acier, solide et bien clos; puis, par des manœuvres appropriées, on substitue de l’oxygène pur à l’air atmosphérique du récipient et on accumule ce gaz jusqu'à 2 atmosphères 1/2; 3° on dépose le récipient dans une étuve chauffée à 35-36 degrés pendant quinze à trente jours, en ayant soin de maintenir constamment la pression intérieure à 2 atmosphères 1/2; 4° à partir du quinzième jour, on emprunte de la semence à quelques cultures et on la propage dans de grands flacons, afin d’obtenir une abondante quantité de virus atténué.
Dans le quatrième temps, M. Chauveau enferme d'abord une mince couche de bouillon dans les grands flacons où il propage les bacilles atténués; la semence étant sans cesse en contact avec une masse d’air considérable fournit une récolte très abondante au
bout de plusieurs semaines. Lorsque la pullulation est aussi avancée que possible, M. Chauveau dilue les cultures avec du bouillon stérilisé et leur donne le volume de 2 litres environ. Cinq gouttes de cette dilution introduites sous la peau du bœuf et deux gouttes sous la peau du mouton procurent à ces animaux une solide immunité contre le charbon.
L’oxygène comprimé assure une atténuation plus uniforme, plus certaine et plus persistante que la chaleur seule ou combinée à l’oxygène sous la tension normale. Par exemple, les virus conservent leurs propriétés acquises au moins pendant deux mois sans modification sensible.
Des vaccins expédiés au Chili donnèrent, après ce long voyage et mille péripéties qui en retardèrent l’utilisation, d’excellents résultats pour le bœuf. Mais, passé deux mois, certains bacilles peuvent récupérer une virulence dangereuse, comme on l’a vu dans une expérience entreprise sous les auspices de la Société d’agriculture de Melun.
a L’un des effets les plus curieux de l’oxygène comprimé est d’affaiblir profondément la toxicité des cultures en respectant la propriété vaccinale. Ainsi, telle culture qui est incapable de tuer le mouton confère néanmoins à cet animal une solide immunité. Quel immense avantage pour le vaccinateur d’autant plus exposé à semer la mort qu’il cherche à réaliser une préservation plus complète !
« Cette précieuse transformation a été obtenue plus complètement encore par M. Chauveau (1889) en soumettant de nouveau à l'action de l’oxygène comprimé le bacillus anthracis déjà très atténué. A un moment donné, le bacille, alors sur le point de perdre le pouvoir végétatif, peut créer l’immunité tout en se montrant absolument incapable de tuer le cobaye le plus sensible au charbon. Propagé sous cet état, le bacillus anthracis fournit le vaccin idéal, celui qui préserve du charbon sans jamais causer d’accidents mortels. » (Arloing.)
3» Atténuation par les antiseptiques. — « Les antiseptiques, associés au bouillon à doses convenables, pourraient-ils agir sur les bacilles du charbon à la manière de la température dysgénésique de 42°, 5, c’est à-dire arrêter la végétation à la phase mycélienne et permettre à l’oxygène d’exercer son influence atténuante comme dans le procédé de M. Pasteur ? Tel est le problème que MM. Chamberland et Roux se sont posé et ont résolu en 1883.
« Ils ont modifié les qualités nutritives du bouillon soit avec l’acide phénique, soit avec le bichromate de potasse.
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« Ajouté au bouillon dans la proportion de 1/500°,! l’acide phénique arrête la végétation du baciUus anthracis ; dans la proportion de 1/1200°, il permet à la végétation d’atteindre son terme naturel; enfin, dans la proportion de l/800e environ, il laisse pulluler le mycélium, mais s’oppose à la formation des spores. Les bacilles qui croissent et se multiplient en dépit de l’acide phénique perdent graduellement leur virulence : douze jours après le début des cultures, ils ne peuvent plus tuer le mouton, mais sont encore dangereux pour le lapin et le cobaye ; au bout d’un mois, ils respectent tous ces animaux.
« Le bichromate de potasse procède de la mêmefaçon, toutefois il se montre efficace à une dose plus faible et au bout d’un temps beaucoup moins long. A la dose de l/500e à 1/2000° il supprime la faculté sporogène des bacilles, et diminue leur virulence, en l’espace de trois jours, au point qu’ils ne tuent plus que la moitié des moutons inoculés.
« Reportés dans du bouillon normal, les bacilles atténués se propagent avec leur atténuation en présence de l'acide phénique et du bichromate de potasse. Cependant les bacilles rendus asporogènes par l’action du bichromate de potasse continuent à s’atténuer dans les cultures en bouillon normal, si bien qu’après une quinzaine de jours, elles se montrent incapables de tuer le mouton et, plus tard, de tuer même le cobaye. » (Arloing.)
Les recherches de Gamaleïa sur la vaccination charbonneuse établissent que lorsqu’on cultive le bacillus anthracis dans du bouillon additionné de bichromate de potasse stérilisé « de manière à avoir une concentration de 2 à 4 millièmes de cette substance », on remarque des changements de forme de la bactéridie virulente, qui correspondraient, suivant Gamaleïa, à des phases d’atténuation de ce bacille.
Ainsi outre les formes connues dites involutives, qu’on trouve dans chaque culture charbonneuse, on y décèle les suivantes. — Les plus nombreuses et constantes sont les formes diminuées dans toutes les dimensions. Le bacille charbonneux devient deux à trois fois plus court ; c’est surtout l’épaisseur qui s’amoindrit manifestement et qui peut n’être plus que le tiers de la forme virulente semée. Cet amincissement de la bactéridie virulente dans les cultures au bichromate doit être considéré comme le phénomène morphologique principal puisqu'il marche de pair avec l’atténuation (i).
(1) Ann. de l'Institut. Pasteur, 1888. p. 518.
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« MM. Chamberland et Roux ont encore modifié le bacillus , anthracis en le maintenant au contact de l’acide phénique en solution aqueuse à 1/900.
« Au bout d’un mois de séjour dans la solution phéniquée, les bacilles sont encore virulents pour le cobaye et le lapin ; si le séjour se prolonge pendant trois mois, ils sont incapables de tuer ces animaux. Par conséquent, l’acide phénique atténue le bacillus anthracis en dehors des milieux nutritifs; mais l’atténuation précède de fort peu la destruction du virus.
« Ces auteurs ont aussi entrepris de modifier les spores du bacillus anthracis , afin d’obtenir ultérieurement des cultures mycéliennes atténuées. Ils ont eu recours cette fois à un modificateur puissant, l’acide sulfurique à 2 p. 100. De deux en deux jours, des spores étaient transportées dans des matras chargés de bouillon normal.
« Les cultures issues de ces spores accusaient un affaiblissement de la virulence. Celles dont la semence avait subi l’action de l’eau acidulée pendant huit jours tuaient les cobayes et ne tuaient plus les lapins. Celles qui dérivaient de spores immergées dans la solution acide pendant quatorze jours laissaient vivre une partie des cobayes inoculés.
« L’atténuation des bacilles ou de leurs germes parles antiseptiques est donc transmissible par génération. Mais MM. Ghamberland et Roux ont fait, à cette occasion, une remarque très intéressante. Sous l’influence de l’acide sulfurique, les spores modifiées éprouvent une sorte d’adaptation de la virulence à une espèce donnée. Ainsi, telle culture fille, qui respecte tous les lapins, tue encore les moutons dans la proportion de sept sur dix » (1).
Remarquons enfin que du sang charbonneux, de la pulpe de rate charbonneuse, traités par l’essence de moutarde, donnent aux moutons et aux lapins l’immunité contre le charbon (2).
4° Action des essences sur la bactéridie charbonneuse. — M. Chamberland a fait sur ce sujet deux sortes de recherches : les unes ont pour but de déterminer l’action des vapeurs d’un grand nombre d’essences sur la bactéridie charbonneuse, les autres consistent à étudier l’action des essences mises en con-
(1) Arloing. Les virus, p. 325.
(2) Roux. Annales de l'Institut Pasteur , 1891, p. 519.
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tact direct avec la bactéridie ou ses germes et de comparer cette action à celle des antiseptiques les plus connus, comme l’acide phénique, l’acide thymique, le sulfate de cuivre et le sublimé.
La première partie de ces recherches vise une question « d’une grande importance surtout au point de vue des conséquences à en tirer pour la désinfection des appartements, des navires, des écuries, etc. Sans doute, on connaît déjà nombre de substances qui par leur contact direct tuent les microbes ou empêchent leur développement, mais il me paraît bien difficile, surtout dans un appartement, de mettre tous les objets souillés au contact de ces substances antiseptiques. Il y a de grandes probabilités pour que, dans la pratique, quelques parties échappent à la désinfection. » (Chamberland.) C’est pour ce motif que M. Chamberland a étudié l’action des vapeurs répandues par les essences sur la bactéridie charbonneuse.
Or, il résulte des nombreuses recherches faites par M. Chamberland et consignées dans un mémoire publié par les Annales de l'Institut Pasteur , en 1887, que l’essence de cannelle de Ceylan « paraît être la seule dont les vapeurs ont tué les germes de bactéridies au bout de quatre jours ». D’autre part, « la plus active des cinq essences : vespetro, angélique, géranium d’Algérie, origan, cannelle de Chine, essayées sur la bactéridie filamenteuse, est celle de vespetro ».
Dans la deuxième partie de son travail, M. Chamberland étudie « l’action des essences mises directement, en solutions plus ou moins concentrées, au contact de la bactéridie ou de ses germes » et il expose ainsi qu’il suit les résultats de ses recherches :
« Les essences qui agissent le plus efficacement en solution, sont celles de :
« Origan.
« Santal citrin.
« Cannelle de Ceylan.
c Cannelle de Chine.
« Ces deux dernières essences en solution ont sensiblement le même pouvoir antiseptique que celui du sulfate de cuivre, mais il est plus faible que celui du bichlorure de mercure.
« Il est à remarquer que trois de ces essences ont à la fois le plus grand pouvoir antiseptique, soit qu’elles agissent par leurs vapeurs, soit qu’elles agissent en solution.
Ce sont celles de :
a Cannelle de Ceylan. Origan.
« Cannelle de Chine.
« Il est assez curieux de remarquer que la science moderne nous
Surfine de girofle.
Genièvre surfin.
Artemisia annua.
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conduit à des résultats qui paraissaient connus des anciens Egyptiens. On sait, en ellet, le rôle important que faisait jouer ce peuple aux parfums, et surtout aux essences de cannelle, pour l’embaumement de ses momies. Ces essences avaient évidemment pour but de s’opposer à la putréfaction des corps.
« Je n’ai pas besoin de dire que les essences doivent être employées à l’état frais. Lorsqu’elles ont été au contact de l’air pendant un certain temps, elles s’oxydent et perdent une partie de leurs propriétés.
« J’ai fait une expérience directe pour comparer l’action antiseptique de différents sels et de l’acide thymique sur la bactéridie.
« J’ai constaté que les sels les plus actifs sont ceux de :
« Bichlorure de mercure.
« Bichlorure de mercure et d’ammoniaque.
« Nitrate d’argent fondu.
« Ils stérilisent à la dose de 1/80000.
« Viennent ensuite l’acide thymique, le persulfate de fer, le sulfate de quinine, le bichromate dépotasse, qui tous sont plus actifs que le chromate neutre de soude, le chlorure de zinc fondu et l’acétate de cuivre. » (I)
Atténuation par les rayons solaires / — La lumière, dit M. Arloing, étant un modificateur puissant des végétaux supérieurs, nous avons pensé qu’elle serait capable d’agir sur les microbes pathogènes.
■< Après avoir constaté que les rayons solaires traversant un liquide transparent altèrent les bacilles charbonneux et les spores suspendues dans sa masse, au point de retarder l’évolution des cultures fécondées avec ces bacilles et de diminuer l’abondance de la récolte, et même de les tuer complètement, nous nous sommes occupé de chercher le rapport qui pourrait exister entre la végétabilité et la virulence chez des microbes exposés au soleil. Or, dans plusieurs expériences, nous avons vu la virulence diminuer en même temps que le pouvoir végétatif, mais non proportionnellement. Ainsi, une semence ensoleillée pendant dix-neuf heures fournit une culture qui tue le cobaye, à la dose d’une goutte; ensoleillée pendant vingt heures, une culture ne tuant qu’un cobaye sur deux; ensoleillée pendant vingt- cinq heures, une culture ne tuant plus les cobayes, mais les vaccinant, et dont la végétabilité est considérablement ralentie.
« Nous nous sommes demandé ensuite s’il ne serait pas possible d’atténuer d’emblée des cultures abondantes, de manière à obtenir d’assez grandes quantités de virus vaccinal. Nous avons résolu cette
(1) Chamberland. Annales de l'Institut Pasteur , 1887, p. 162.
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question par l’afürmative; cependant la solution présente certaines difficultés. L’atténuation par la lumière exige que les rayons solaires pénètrent jusqu’au centre de la culture. Cette condition n’est pas toujours réalisée, car, si la culture est opalescente et se présente à la lumière sous une grande épaisseur, les couches superficielles, frappées les premières, font office d’écran pour les couches plus profondément situées. De là, la nécessité d’étendre les cultures avec du bouillon neuf ou de l’eau stérilisée pour en augmenter la transparence et de les répartir dans de petits tubes plats ou en couche mince dans des matras. On exposera ensuite les cultures au soleil pendant les heures les plus claires du jour jusqu’à ce que, les séances étant additionnées, on arrive au nombre total de vingt-six heures. Dans l’intervalle des séances d’insolation, les cultures seront déposées dans un endroit dont la température ne favorisera pas le développement de nouveaux bacilles.
« Si l’on voulait conférer l’immunité avec ces cultures atténuées, il serait bon de faire deux inoculations successives « (1).
Immunité. — Elle peut être naturelle ou acquise à la suite de vaccination ; dans l’un et l’autre cas, les animaux immunisés résistent à l’infection charbonneuse.
L’immunité naturelle s'observe sur les animaux réputés réfractaires à la contagion naturelle, notamment chez le chien, le chat, les oiseaux. En examinant la réceptivité des diverses espèces animales pour le charbon, nous avons indiqué les particularités qu’elles présentent sous ce rapport. ( Voy . p. 334.) Mais l’immunité naturelle peut s’observer sur des animaux appartenant à des espèces qui se contagionnent facilement, comme les espèces ovines. Cette propriété remarquable a été constatée expérimentalement par M. Chauveau, pour les moutons indigènes de l’Algérie.
Les moutons algériens sur lesquels j’ai expérimenté en France, dit M. Chauveau, étaient tous en provenance de Philippeville : « c'étaient des moutons à grosse queue dits moutons syriens, plus connus dans le pays sous le nom de moutons tunisiens ou barbarins, et des moutons des Abd-en-Nour. Parmi ceux qui ont servi à mes expériences d’Alger, les uns étaient nés dans la plaine de la Mitidja, d’autres provenaient d’Aumale, quelques-uns avaient été achetés à Djelfa, les plus beaux étaient originaires des environs de Tiaret. Je n’ai pas constaté de différences sensibles d’aptitude entre ces divers sujets. Dans le nombre, il s'est trouvé deux mou-
(1) Arloing. Les virus, p. 312.
tons d'un an qui avaient du sang mérinos. La marque n’était visible que dans la toison, mais cette empreinte était extrêmement nette. Or, ces deux sujets ont parfaitement résisté aux inoculations de sang de rate qui leur ont été faites. — En résumé, tous les moutons indigènes de l’Algérie jouissent, à un degré plus ou moins marqué, de l’immunité contre le sang de rate et peuvent la communiquer aux moutons européens. » (A. Chauveau.)
Cette immunité peut être renforcée par des inoculations répétées de très petites doses de virus, c’est-à-dire de sang charbonneux frais de lapins ou de cochons d’Inde. La première des inoculations détermine, chez les moutons algériens, une tuméfaction des ganglions lymphatiques qui reçoivent les vaisseaux afférents de la région inoculée, puis « la température rectale, qui, normalement, est environ de 39°, 5. arrive facilement à 41°, et peut même dépasser 42°. Cette élévation de température commence à se marquer vingt-quatre à trentesix heures après l’inoculation, et dure de trois à six jours ». (Chauveau.) Elle est accompagnée parfois d’abattement et d’anorexie.
Lorsque cette première inoculation a exercé nettement son action préventive à l’égard des inoculations subséquentes, c’est-à-dire au bout de quinze jours, si l’on procède à une deuxième, suivie elle-même de plusieurs autres, cinq ou six par exemple, « les suites de ces nouvelles inoculations ne ressemblent plus du tout à celles de la première : les animaux ne paraissent nullement impressionnés par ce nouveau contact avec les agents infectants du sang. Cette innocuité est surtout frappante chez les sujets que la première inoculation a sensiblement éprouvés. Non seulement ces sujets gardent la vivacité et l’appétit qu’ils avaieut perdus au moment de la première inoculation, mais de plus, on ne voit pas survenir d’engorgement ganglionnaire appréciable ; c’est à peine si l’on a le temps de constater une prompte et fugitive élévation de la température rectale. » (Chauveau.) — Le renforcement que l’immunité naturelle éprouve ainsi est susceptible de se transmettre de la mère au fœtus. La résistance du jeune sujet à l’infection charbonneuse est alors aussi complète que possible.
C’est, dit M. Chauveau, le 24 septembre 1879 que j’ai constaté ce fait pour la première fois sur un agneau, né le 8, d’une mère qui avait été inoculée le 5 et le 21 juillet précédent. « Littéralement couvert de piqûres d’inoculations, à diverses reprises, cet agneau
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ne présenta jamais trace de tuméfaction ganglionnaire, ni d’élévation de la température rectale. Il en fut exactement de même sur deux autres agneaux dont les mères avaient été inoculées trois et quatre semaines avant la mise bas, avec de notables quantités de virus introduites par injections sous-cutanées. »
C’est à l’occasion de cette importante expérience que M. Chauveau, après avoir rappelé l’expérience de Davaine tendant à démontrer que la bactéridie charbonneuse ne se multiplie pas dans le sang du fœtus, que M. Chauveau, disonsnous, formulait les conclusions suivantes sur le mécanisme de l’immunité : « 1° le contact direct de l’organisme animal avec les éléments bactéridiens n’est pas nécessaire à la stérilisation ultérieure de cet organisme ; 2° les inoculations préventives agissent sur les humeurs proprement dites, rendues stériles et stérilisantes, soit par soustraction de substances nécessaires à la prolifération bactéridienne, soit plutôt par addition de matières nuisibles à cette prolifération » (1).
Ces conclusions, formulées en 1880, donnaient à entendre que l’immunité était due à des produits chimiques élaborés par les microbes : elles s’ajoutaient aux réflexions émises quelques mois auparavant par M. Pasteur, dans une note sur le choléra des poules. « ün peut, dit M. Pasteur, se rendre compte des faits de non récidive en admettant que la vie du microbe, au lieu d’enlever ou de détruire certaines matières dans le corps des animaux, en ajoute au contraire qui seraient pour ce microbe un obstacle à son développement. Les excrétions nées d’un fonctionnement vital peuvent s’opposer à un fonctionnement de même nature. »
Parmi les facteurs susceptibles d’exercer de l’influence sur l’immunité, il faut citer l’âge des sujets. Ainsi, une culture atténuée du charbon, qui est inoffensive pour les lapins et les cobayes adultes, tue les animaux plus jeunes ou nouveaunés. (Pasteur.) — Il est constant aussi que l’inoculation du sang charbonneux ou de cultures virulentes réussit beaucoup mieux sur les jeunes chiens, sur les porcelets, que sur les chiens et les porcs adultes.
« U alimentation paraît susceptible de jouer un certain rôle ; d’après Peser, les rats soumis à un régime carnassier seraient plus résistants au charbon que les autres ; néanmoins, j’ai
(1) Journal de Méd. vétér. et de Zootech., publié à l'Ecole de Lyon, 1880, p. 511.
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réussi à communiquer le charbon à des rats nourris exclusivement de viande pendant plusieurs semaines. » (Straus.)
La température animale exerce aussi de l’influence. Ainsi, la poule qui est si réfractaire au charbon meurt de cette maladie si, après l’avoir inoculée, on abaisse sa température, qui est normalement de 42°, en plongeant le tiers du corps de cet animal dans de l’eau à 25°, comme M. Pasteur l’a péremptoirement établi le premier. — Inversement, en élevant la température des grenouilles, on surmonte leur résistance naturelle au charbon. (P. Gibier.)
Parmi les animaux de laboratoire, il en est un qui jouit d’une immunité sujette à des variations bien remarquables : c’est le rat blanc.
Behring a érigé en axiome la non-réceptivité du rat pour le charbon : pour lui, le rat blanc occupe le premier rang parmi les animaux à sang chaud réfractaires à la bactéridie. Les vieux rats, en particulier, possèdent une immunité presque absolue. Après injection de fortes doses de charbon virulent, ils n’éprouvent ni réaction locale, ni trouble quelconque.
G. Franck, sur 22 rats, n’a eu qu’une mort ; les 21 autres ont eu une lésion locale des plus nettes (œdème charbonneux), mais ont guéri.
La vérité ne paraît pas être dans les opinions de ces auteurs.
Lôffler, en 1881, avait soigneusement étudié cette question. De 52 rats inoculés, 22 seulement succombèrent à la première inoculation ; mais les 20 autres n’avaient pas l’immunité à la suite de cette inoculation car, réinoculés, ils succombèrent à la deuxième, troisième... et même sixième injection.
M. Straus dit : <v Tous ceux qui ont expérimenté sur les rats, ont pu s’assurer du fait suivant, que j’ai été souvent à même de constater : c’est que l’on peut, un nombre variable de fois, leur inoculer sans résultat des matières charbonneuses ; puis, un beau jour, une inoculation de la même matière, en même quantité, leur communique le charbon. »
M. Metchnikoff est, plus récemment, arrivé aux mêmes résultats que MM. Lôffler et Straus.
Il a vu en outre que les jeunes rats sont beaucoup plus sensibles que les rats adultes. En commençant une série expérimentale par de tout jeunes rats, et en faisant passer le virus de rat à rat, en choisissant ces animaux de plus en plus âgés, on arrive à tuer du premier coup de vieux rats (1).
Ces faits, de même que ceux qui ont été exposés précédem-
(1) Thoinot et Masselin. Précis de microbie , 2e édition, p. 219.
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ment sur la réceptivité des espèces animales pour le charbon, montrent « que l’immunité, quelque solide qu’elle paraisse, n’est pas une propriété immuable, et qu’elle peut naître et disparaître sous l'influence d’agents modificateurs très simples ». (Straus.)
L’immunité contre le charbon peut être conférée soit par l’inoculation du sang charbonneux défibriné, chauffé à 55°, comme H. Toussaint l’a établi le premier, soit par l’inoculation d’une culture contenant des bactéridies atténuées dans leur virulence, — suivant la méthode de M. Pasteur. Elle peut être obtenue aussi par l’inoculation répétée de très petites quantités d’éléments virulents, comme M. Chauveau l’a annoncé.
On peut encore réaliser l’immunité en injectant dans le tissu conjonctif sous-cutané, ou dans une veine, du sang charbonneux dans lequel toutes les bactéridies ont été détruites par le chauffage à 55-58° ; pratiquée d’après la méthode de M. Roux (1), cette opération est très délicate, car il faut non seulement tuer toutes les bactéridies — ce que l’on reconnaît par les cultures, ensemencements et inoculations — mais il faut respecter la matière vaccinale soluble qui est très altérable par la chaleur. M. Roux est parvenu cependant à en surmonter toutes les difficultés et à démontrer — comme il l’avait déjà fait pour la septicémie, mais avec moins de difficultés — que l’immunité charbonneuse peut être conférée par les matières solubles qui se trouvent dans le sang charbonneux, dont les bactéridies sont mortes, et dont les « cadavres jouent peutêtre un rôle comme substance chimique ». En d’autres termes, M. Roux a prouvé que l’immunité charbonneuse peut être obtenue par vaccination au moyen de substances chimiques. — Mais l’immunité produite par cette vaccination est de courte durée, puisque vingt-quatre jours après l’inoculation vaccinale « 1 seul mouton sur 3 est encore réfractaire au charbon » parmi ceux qui avaient été inoculés dans le tissu cellulaire sous-cutané.
Or, l’immunité conférée par l’injection, dans les veines, de sang charbonneux sans bactéridies vivantes, est encore plus faible. « Les substances vaccinales sont sans doute détruites en partie par l’oxydation ou éliminées par les reins ou par une
(1) Voyez Annales de l'Institut Pasteur, 1888, p. 413.
CHARBON
autre voie. Il n’est donc pas indifférent de les injecter sous la peau ou de les mettre d’emblée dans la circulation sanguine. » (Roux.)
« M. Gamaleïa, en traitant la rate d’animaux charbonneux par de l’alcool fort, puis en épuisant le coagulum par l’eau, a obtenu un liquide qui cause aux lapins auxquels on l’injecte dans les veines une forte fièvre, mais il n’a pas recherché si les animaux qui avaient reçu cette substance extraite des rates charbonneuses avaient acquis l’immunité pour le charbon. » Or, M. Roux a constaté, par des expériences faites sur 3 moutons, dont un témoin, que cette substance ne confère pas l’immunité ; qu’il en est de même de celles qui ont été faites avec du sang charbonneux filtré ; toutefois, dans ce dernier cas, l’injection ayant été faite seulement dans les veines, M. Rcux fait remarquer que c’est une condition défavorable.
On peut aussi obtenir l’immunité par l’injection de cultures virulentes atténuées par les antiseptiques, par les rayons solaires. Les bactéridies éprouvent dans ces diverses circonstances des modifications qui les transforment en vaccins. Or, M. Gamaléia (d’Odessa) a étudié d’une manière approfondie : 1° les vaccins préparés par la méthode des antiseptiques de MM . Ghamberland et Roux ; 2° la fièvre vaccinale; 3° et 4° le mécanisme de l’acquisition de l’immunité ; 5° la théorie de la fièvre vaccinale ; 6° la théorie de l’immunité acquise. Et il résume tout son article dans les conclusions suivantes :
« La vaccination charbonneuse est un effet de la vie et de la multiplication des vaccins dans le corps des animaux. A cette reproduction est nécessairement liée la formation de produits toxiques, peut-être d’alcaloïdes spécifiques, et elle se traduit au dehors par les phénomènes de la fièvre vaccinale.
« Cette culture passagère des vaccins dans le corps a pour effet l’assuétude de toute l’économie vis-à-vis de l’action nocive spécifique de la bactéridie charbonneuse. Cette assuétude se fait probablement dans toutes les cellules : nerveuses, leucocytaires et endothéliales. Habituées à ce poison, ces cellules ne se paralysent plus par son action, et peuvent se comporter vis-à-vis de la bactéridie virulente comme vis-àvis d’une bactérie banale ou d’un corps étranger quelconque. Ainsi, par exemple, les cellules endothéliales des capillaires, au lieu de se contracter pour laisser échapper l’exsudation séreuse, ne laissent passer que les leucocytes, et ces derniers, Suppl. — I.
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au lieu d’être paralysés dans leurs fonctions, détruisent énergiquement les microbes et sécrètent peut-être une substance antiseptique.
« Cette explication de l’immunité acquise me semble la seule qui rende compte de tous les faits de la vaccination par éléments figurés de celle qui a fait l’objet de notre étude, et qui soit en accord avec l’existence de la vaccination chimique » (I).
L’important mémoire de M.Gamaleïa a été suivi, à l’Institut Pasteur, de divers travaux se rattachant à la question si complexe de l’immunité et qu’il nous paraît utile de résumer ici. Nous signalerons d’abord des recherches expérimentales sur le mode d’action du vaccin charbonneux, dues à Mme 0. Metchnikoff.
« Les bacilles du vaccin charbonneux produisent leur effet en se cultivant au point d’inoculation, sans se propager nécessairement dans l’organisme ; ils ne pénètrent qu’exceptionnellement et à un faible degré dans les organes. La vaccination est donc due aux produits des bacilles, qui se diffusent du point d’inoculation dans l’organisme.
« La destruction des bacilles a lieu au point d’inoculation et s’opère par l’activité phagocytaire des micro et macrophages .
« La vaccination consiste sans doute dans l’accoutumance des éléments cellulaires aux produits toxiques des bacilles.
« Cette dernière conclusion est appuyée sur le fait que, chez l’animal vacciné, les vaccins et le virus se développent normalement dans l’humeur aqueuse, dépourvue de cellules, tandis qu’ils sont détruits dans l’organisme où ils deviennent accessibles à l’influence de ces dernières »(2).
En regard de ces conclusions nous placerons une expérience très originale faite par M. Nocard, démontrant que le bacille virulent du charbon peut se conserver pendant plus de deux mois dans l’organisme d’un animal vacciné.
« Les chèvres laitières succombent facilement au charbon, si on leur injecte de la bactéridie virulente dans la mamelle par le conduit du ti'ayon, sans produire de blessure. La même inoculation est inoffensive chez une chèvre vaccinée,
(1) Ann. de L'Instit. Pasteur, 1888, p. 551.
(2) Annales de l'Institut Pasteur, 1891, p. 156.
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mais la bactéridie introduite dans la glande y reste inoffensive pendant un temps encore indéfini (plus de deux mois). Le lait de chaque traite est charbonneux ; inoculé à des moutons, il leur donne un charbon mortel. Pendant cette longue série de générations dans une humeur d’un animal immunisé, le bacillus anthracis n’a pas été affaibli » (1).
Il nous paraît intéressant de rapprocher de cette expérience les résultats obtenus par le Dr Malm, de Christiana, dans les nombreuses recherches qu’il a faites à l’Institut Pasteur, à l’instigation de M. Roux, afin d’étudier la question si controversée de l’atténuation de la virulence par le passage sur un animal réfractaire.
« 1° La bactéridie du charbon ne s’atténue pas par passage dans un animal naturellement réfractaire (chien) ou rendu artificiellement résistant (lapin) ;
« 2° La bactéridie, en passant par un animal réfractaire, se renforce, et dans une mesure parfois assez grande ;
« 3° Cette exaltation de la virulence se fait, tant dans l’oedème produit par une inoculation sous-cutanée, que dans le sang et la rate, après une injection intraveineuse;
« 4° Chez les chiens non réfractaires, l’augmentation de virulence est irrégulière ;
« 5° Il n’y a pas d’augmentation de virulence dans les cultures en bouillon ;
« 6° Aucun des chiens de nos expériences ne s’est montré absolument réfractaire au charbon;
« 7° Une injection antérieure par voie sous-cutanée ou intraveineuse, renforce l’immunité du chien jusqu ’à la rendre absolue ;
« 8° La résistance des chiens à l’inoculation intraveineuse est moindre qu’à l’inoculation sous-cutanée;
« 9° Les chiens noirs sont beaucoup moins réfractaires au charbon que les autres ;
« 10° Certains chiens succombent à la suite de l’incision du charbon, sans qu’on trouve de bactéridies à l’autopsie ;
« 11° Chez les chiens absolument indemnes, les bactéridies ont disparu déjà après dix-huit heures. On les retrouve après vingt-quatre heures dans le sang, et après trois jours dans la rate chez les chiens qui ont l’immunité naturelle » (2).
(1) Nocard, cité par Roux. Discours sur L’Immunité {Ann. de l'Instil. Pasteur , 1891, p. 526).
(2) Ann. de l'Institut Pasteur , 1890, p. 533.
Telles sont les principales données expérimentales que nous possédons sur l’immunité charbonneuse et qui peuvent contribuer à nous en faire comprendre le mécanisme, et à provoquer ainsi des recherches susceptibles de découvrir de nouveaux vaccins.
Vaccination pastorienne. — Cette vaccination comporte deux inoculations : la première est faite avec un liquide contenant une bactéridie très atténuée par le chauffage à 42°, 43°, comme il est dit ci-dessus. Ce liquide constitue le premier vaccin et il ne donne aux animaux qu'une fièvre très légère, qui passe généralement inaperçue. La seconde inoculation est faite douze à quinze jours plus tard avec un liquide contenant une bactéridie plus virulente (deuxième vaccin) qui tuerait un certain nombre d’animaux s’ils n’étaient pas déjà en partie préservés par l’inoculation précédente. Mais par suite de cette préservation partielle, les animaux n’éprouvent encore qu’une légère fièvre ; alors ils sont tout à fait vaccinés, c’est-à-dire qu’ils sont devenus réfractaires au charbon bactéridien.
Pour se procurer du liquide vaccinal, il faut s’adresser à l’Institut Pasteur, service des vaccins, 25, rue Dutot, à Paris, en ayant le soin d’indiquer le nombre d’animaux (bœufs, vaches, chevaux, moutons ou chèvres) que l’on se propose de vacciner. Ce liquide est envoyé à destination ou à la gare la plus rapprochée, dans des tubes fermés par un bouchon.
Manuel opératoire. — On effectue la vaccination charbonneuse au moyen d’une seringue de Pravaz, d’une capacité d’environ 1 centimètre cube 1/2. La tige du piston présente huit divisions équidistantes correspondant chacune à une capacité d’environ 18 centièmes de centimètre cube. Sur cette tige se trouve un petit curseur que l’on peut très facilement faire mouvoir, de manière à limiter exactement le jeu du piston. Cette seringue est contenue dans une boîte qui renferme également trois aiguilles cannelées de diverses dimensions.
Il faut d’abord remplir la seringue de liquide vaccinal. « Pour cela on enlève le petit fil métallique qui est dans l’aiguille, et qui n’a d’autre utilité que d’empêcher celle-ci d’être bouchée par quelque corps étranger, on ajuste l’aiguille sur la canule, on enlève le bouchon du tube à vaccin après avoir agité ce tube, et on aspire le liquide en soulevant doucement le piston.
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* Si la seringue fonctionne très bien, elle se remplira complètement de liquide en laissant seulement une très petite bulle d’air sous le piston.
« Mais il arrive fréquemment que le piston est plus ou moins desséché, ou que l’aiguille ne s’ajuste pas très bien sur la canule, alors le liquide ne remplit pas complètement la seringue, et une bulle d’air assez grosse reste sous le piston. Il faut rajuster l’aiguille sur la canule et rejeter le liquide dans le tube. On recommence la même manœuvre deux ou trois fois, alors le piston est mouillé, et si l’aiguille est bien adaptée sur la canule, la seringue se remplit complètement. Cette première condition est indispensable. »
La seringue étant complètement remplie, on tourne le petit curseur qui est en haut de la tige du piston, de façon à le faire descendre jusqu’à la division 1 s’il s’agit d’inoculer des moutons ou des chèvres, et seulement jusqu’à la division 2 pour les bœufs ou les chevaux, auxquels on injecte ainsi une dose double de celle qui est nécessaire pour les petits ruminants.
Moutons, chèvres. — Pour vacciner ces animaux, il importe dé diviser préalablement la bergerie en deux compartiments, au moyen d’une claie, de manière à faire passer les moutons un à un et à séparer ceux qui sont vaccinés de ceux qui ne le sont pas, afin qu’aucun d’eux n’échappe à l’opération ou ne reçoive une double dose de vaccin.
Tout étant ainsi disposé, l’opérateur se place sur la limite de séparation. Un aide amène le mouton à vacciner, un autre le saisit et le renverse de manière à le présenter à l’opérateur comme pour le bistournage. Celui-ci introduit l’aiguille sous la peau vers le milieu de la cuisse droite, puis pousse le piston jusqu’à ce que le curseur touche la seringue. L’inoculation du premier animal est ainsi faite. On retire la seringue et on tourne le curseur en sens contraire de la première fois, jusqu’à l’amener à la division marquée 2 sur la tige. On inocule alors le second mouton. On amène le curseur à la division 3, et chaque seringue suffit à vacciner 8 moutons. On remplit de nouveau la seringue et ainsi de suite. Avec un peu d’habitude on arrive facilement à inoculer 150 moutons par heure.
Douze à quinze jours après, on pratique la même opération avec le deuxième vaccin, mais en piquant cette fois la cuisse
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gauche, c’est-à-dire celle qui n’a pas reçu la première inoculation.
Vaches, bœufs et chevaux. — On se sert du même vaccin que pour les moutons et les chèvres, mais on l’introduit à dose double, c’est-à-dire qu’on fait descendre le curseur à la division 2, puis on l’amène à la division 4, puis 6, etc., chaque seringue servant à vacciner 4 animaux au lieu de 8. Au lieu de faire la piqûre à la cuisse, on la fait derrière l’épaule, pour les vaches et les bœufs, et à l’encolure pour les chevaux, de façon à ce que le collier ne porte pas sur les piqûres.
La peau des vaches et des bœufs étant quelquefois assez difficile à percer avec l’aiguille, il faut avoir soin d’appuyer l’aiguille exactement suivant l’axe de la seringue, pour ne pas la briser. Il est bon aussi de faire un pli à la peau avec la main gauche pour faciliter l’introduction de l’aiguille. La même aiguille qui a servi pour les moutons peut aussi servir pour les vaches et les bœufs, mais, par mesure de précaution, il y a dans la boîte à seringue une aiguille plus forte pour la vaccination des gros animaux.
Remarque très importante. — Il importe extrêmement que le liquide vaccinal soit introduit sous la peau à l’état de pureté parfaite. Si ce liquide était impur, en effet, c’est-à-dire s’il était souillé par de l’eau qui n’a pas été bouillie, par des poussières, des saletés quelconques, on introduirait, en même temps que la bactéridie atténuée, des organismes étrangers qui pourraient, ou bien donner une maladie à l’animal (septicémie, phlegmon, etc.), ou bien empêcher la vaccination. Pour cela, le liquide est envoyé tout à fait pur, et on l’aspire directement dans le tube, mais il faut aussi que la seringue soit pure. Cette condition est remplie pour les seringues neuves, qui n’ont jamais servi, mais quand elles ont servi à une inoculation il faut les remettre à neuf. Cette opération est assez délicate, et il est nécessaire de renvoyer la seringue au fabricant qui la répare, aiguise les aiguilles, remet tout à neuf, et la rend prête à resservir pour de nouvelles inoculations. En un mot, il ne faut pas que la seringue serve à plusieurs jours d’intervalle sans avoir passé par les mains du fabricant.
Pour que le liquide vaccinal conserve toute sa pureté, il faut le mettre au frais, autant que possible dans une cave ; et il ne faut pas qu’un tube qui a été ouvert serve le lendemain ou les jours suivants. Par conséquent, tout tube ouvert doit
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être employé dans la journée et le reste du tube doit être absolument rejeté.
Suites de la vaccination. Résultats pratiques. — Les suites de la vaccination sont généralement très simples et le plus souvent les animaux vaccinés ne paraissent nullement se ressentir de l’inoculation dont ils ont été l’objet. Toutefois, sous ce rapport, quelques différences méritent d’être signalées, suivant les espèces animales.
Ainsi les animaux d’espèce chevaline présentent parfois, après la seconde vaccination, des engorgements œdémateux qui n’apparaissent point chez le mouton.
Ces engorgements peuvent aussi apparaître chez les animaux d’espèce bovine et entraîner des pertes de lait et des pertes de travail pendant quelques jours, comme M. Duclaux l’a observé, en 1882, dans certaines communes du Cantal.
Pour prévenir ces inconvénients passagers de la vaccination pastorienne, M. Uuclaux conseille de vacciner dans le Cantal « à la fin de l’hiver, un mois ou un mois et demi avant le part, lorsque le travail des champs n’est pas pressant et que les vaches ne sont pas en lactation. On pourrait aussi se servir de vaccins plus atténués, attendu que les admirables procédés de M. Pasteur donnent à volonté les vaccins à tous les degrés d’atténuation. D’ailleurs, aujourd’hui, l’Institut Pasteur livre un vaccin charbonneux dont la préparation ne laisse rien à désirer : les accidents sont nuis et la vaccination charbonneuse se propage de plus en plus. Ainsi les statistiques établies par divers observateurs mettent bien en évidence les résultats de la vaccination pastorienne. Nous nous contenterons de citer les chiffres suivants :
Depuis la célèbre expérience de Pouilly-le-Fort jusqu’au 1er janvier 1894, on a eu, à l’Institut Pasteur, « des renseignements précis sur 1.788.677 moutons et 200.962 bœufs ou vaches, soit environ sur la moitié des animaux vaccinés en France.
« La mortalité sur les moutons et les bœufs est un peu plus grande après le premier vaccin qu’ après le second. Ce fait nous paraît s’expliquer aisément. Les animaux signalés morts comprennent en effet ceux qui ont pu succomber aux suites de la vaccination, et ceux qui, étant sous le coup de la maladie, sont morts de charbon spontané. Or, au moment de l’inoculation du deuxième vaccin, les animaux sont déjà en
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partie préservés, d’où une mortalité moins grande par le charbon spontané, par suite un total moins élevé.
« La perte totale sur les moutons oscille autour de 1 p. 100. La moyenne pour les douze années est de 0,94 p. 100. On peut donc dire que la perte moyenne totale sur les moutons vaccinés, que cette perte résulte des vaccinations ou de la maladie spontanée, est environ de 1 p. 100.
« La perte sur les bœufs ou vaches vaccinés est encore moins élevée. Elle est pour cette même période de douze années, de 0,34 p. 100, soit 1/3 p. 100 environ.
« Ces résultats sont extrêmement satisfaisants. Il faut remarquer, en effet, que la moyenne delà mortalité annuellepar le charbon avant la vaccination, moyenne qui est donnée dans les mêmes rapports, est évaluée à 10 p. 100 sur les moutons et à 5 p. 100 sur les bovidés.
« En admettant seulement une perte de 6 p. 100 sur les moutons et de 3 1/3 p. 100 sur les bœufs ou vaches; en évaluant, d’autre part, à 30 francs la valeur d’un mouton et à 150 francs celle d’un bœuf ou d’une vache, chiffres qui sont certainement au-dessous de la moyenne réelle, un calcul très simple permet d’établir que les bénéfices pour l’agriculture française résultant de la pratique des vaccinations se chiffrent par cinq millions de francs environ pour les moutons, et à deux millions pour les bovidés. Ces chiffres sont plutôt trop faibles que trop forts » (1).
Tels sont les résultats obtenus en France par l’emploi des vaccins charbonneux préparés à l’Institut Pasteur. A l’étranger, ces résultats ne sont pas moins importants ; c’est par milliers que l’on compte les vaccinations charbonneuses pratiquées sur les moutons, les bœufs, les chevaux, soit avec les vaccins de l’Institut Pasteur, soit avec ceux que l’on prépare dans les laboratoires de Vienne, Madrid, Turin, Buenos- Ayres, etc.
Pour retirer de cette opération tous les avantages qu’elle présente, il faut la pratiquer une fois, chaque année, car l’immunité qu’elle confère ne dure généralement pas plus de douze à quinze mois. Dans les localités où le charbon est endémique, il ne faut pas attendre que la fièvre charbonneuse se soit déclarée pour vacciner les bêtes bovines : il faut les inoculer à l’automne, à l’entrée de l’hiver ou bien au prin-
(1) Chamberland. Annales de l'inst. Pasteur, 1894, p, 163.
temps. Par ce moyen, ou préviendra le retour d’une endémie ou d’une épidémie charbonneuse, sans avoir à craindre aucun accident. Car en opérant lorsque la maladie règne, on est exposé à inoculer des animaux chez lesquels la fièvre charbonneuse est sur le point d’apparaître et l’on pourrait attribuer à la vaccination, comme cela a été fait, ce qui est, en réalité, la conséquence de la contagion naturelle.
C’est donc, en résumé, une opération de précaution qu’il faut surtout pratiquer.
Vaccination par la méthode de M. Chauveau. — En cultivant du « virus charbonneux fort, bacilles du sang ou spores de cultures normales » dans du bouillon stérilisé « qu’on place dans une étuve spéciale, où l’air est comprimé à 8 atmosphères et entretenu à la température + 38°, -+- 39° », on obtient un premier virus atténué qui sert à faire « une deuxième génération, puis une troisième et une quatrième exactement dans les mêmes conditions que la première ». Ün obtient ainsi un virus dont « une seule inoculation confère une solide immunité » ; de plus, « malgré cette activité du virus, il est au moins aussi inoffensif que celui qui est préparé par les autres méthodes ; les cultures gardent leurs propriétés plusieurs mois, sans qu’il soit nécessaire de prendre aucune précaution pour assurer leur conservation ». (A. Chauveau.) C’est ainsi que, dans des expériences faites à Santiago, avec du virus atténué, dont une partie avait été préparée depuis environ dix mois (1), ce virus s’est montré actif : il a conféré l’immunité à des animaux d’espèce bovine qui ont résisté à des inoculations de contrôle faites avec du sang charbonneux virulent.
Cette inoculation se pratique à la base de l’oreille, au moyen d’une seringue de Pravaz avec laquelle on injecte de II à IV gouttes de liquide vaccinal, dans le tissu conjonctif sous-cutané. Une seule injection suffit pour que les animaux acquièrent l’immunité sans qu’il survienne d’œdème, ni aucun accident. « Plusieurs troupeaux de bœufs ou vaches, sous le 'coup d’une explosion du sang de rate, ont été inoculés eD Suisse, par les soins du directeur et des professeurs de l’école de Berne, en application de la nouvelle
(1) Voy. Journal deMéd. vêt. et de Zootech., publié à l’École de Lyon, 1886, p. 70.
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législation sanitaire. Dans tous ces troupeaux, la maladie a cessé d’exercer ses ravages après l’inoculation (1). »
Charbon symptomatique.
Définition. — On appelle charbon symptomatique une maladie contagieuse, caractérisée habituellement par une tumeur crépitante qui siège sur la partie supérieure des membres, où elle acquiert en peu de temps un volume considérable. Cette affection s’accompagne d’une fièvre intense, ss. marche est rapide et sa terminaison souvent mortelle. Elle est déterminée par un microbe, qui a été découvert en 188C0 par MM. Arloing, Gornevin et Thomas, et qu’ils ont proposé d’appeler bactérium Chauvœi, du nom de leur Maître,. M. Chauveau, qui leur a prêté « son bienveillant concours » pendant toute la durée de leurs recherches. D’autres auteursdésignent ce microbe sous le nom de bacille du charbon symptomatique.
Fréquence. — Cette maladie, qui est encore appelée charbon bactérien, charbon essentiel de Chabert, charbon emphysémateux du bœuf , sévit principalement sur les bêtes bovines danstoutes les parties du monde. Elle est assez fréquente en France et en Algérie.
Nous l’avons observée, en 1885, dans le département de la Haute-Garonne, non loin de Saint-Gaudens. Elle se montre tantôt isolément, tantôt en même temps que la fièvre charbonneuse avec laquelle on la confondait souvent sous le terme générique de charbon, avant les recherches de MM. Ar— loing, Cornevin et Thomas.
Symptômes. — Le charbon symptomatique se déclare ordinairement sur les jeunes bovidés de 6 mois à 4 ans. Parfois, cependant, il se montre sur des animaux plus âgés. On l’observe assez souvent sur des sujets en bon état d’embonpoint.
« La maladie débute toujours soudainement, mais de deux manières différentes : tantôt son existence se révèle brusquement par l’apparition d’une tumeur (charbon essentiel de Chabert), tantôt celle-ci est précédée de symptômes plus ou moins graves (charbon symptomatique du même) : fièvre, raideur générale, arrêt de la digestion et de la rumination, tremblements partiels aux fesses et aux épaules, frissons,
(1) Journal de Méd. vét.etde Zoolech., 1886, p. 395.
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sécheresse du mufle, tristesse, inappétence, refroidissement des extrémités, accompagnés d’une boiterie dont la cause échappe tout d’abord, mais que l’on ne tarde pas à pouvoir attribuer au développement d’une tumeur sur l’un ou l’autre membre. 11 y a souvent une détente après son apparition, les animaux cherchent à manger et même ruminent un peu, mais c’est un symptôme fallacieux qui a fréquemment égaré les jeunes praticiens et les propriétaires, en les portant les uns et les autres à croire à une guérison qui ne se produit pas.
« La tumeur peut siéger sur les parties les plus diverses du corps, être très apparente ou cachée et impossible à découvrir du vivant du malade. Habituellement elle se développe dans les parties les plus riches en masses musculaires. Le plus souvent elle apparaît sur les rayons supérieurs des membres et dans les muscles avoisinants, autour de l’épaule ou du bras (mal d’épaule, avant-cœur, anti-cœur), de la croupe, de la cuisse (mal de cuisse), de la jambe (mal de jambe), des parties génitales (trousse-galant). Dans quelques cas, c’est sur la tête, l’encolure et le tronc qu’on la constate, par exemple sur les masséters, dans l’auge (estranguillon), à la gorge (esquinancie gangreneuse), le long de la gouttière de la jugulaire, aux pectoraux, sur les côtés de la poitrine, à la région lombaire ou enfin à la mamelle (1). »
11 est à remarquer que les tumeurs n’apparaissent point à la partie libre de la queue et à l’extrémité inférieure des membres, c’est-à-dire dans des régions où le tissu conjonctif est très dense et les muscles fort rares.
La tumeur du charbon symptomatique se montre plus souvent sur la moitié droite du corps que du côté opposé (Hess). Elle progresse avec une grande rapidité et en huit ou dix heures elle a acquis un énorme développement.
Cette tumeur est d’abord uniformément consistante et très douloureuse, mais elle ne tarde pas à devenir crépitante, sonore et insensible. Si on l’incise elle laisse écouler du sangnoir, puis une sérosité bulleuse, ordinairement roussâtre, sanguinolente.
En même temps que la tumeur charbonneuse évolue, la fièvre se déclare, le pouls bat 90, 100 à 110 fois par minute;
(1) Le Charbon symptomatique du bœuf, par MM. Arloing, Cornevin et Thomas, 2e édit. Paris, Asselin et Houzeau, 1887, p. 52.
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la respiration est plaintive, accélérée ; il est des sujets qui présentent des coliques violentes ; la température s’élève à 39°, 5, 40°, 5, 41°, et si l’on ponctionne la jugulaire le sangqui s’en écoule présente les mêmes caractères physiques qu’à l’état normal. L’animal est indifférent à tout ce qui l’entoure; il devient de plus en plus faible, se couche et reste étendu sur le sol ; la température s’abaisse et la mort survient généralement « de la trente-sixième à la cinquante-cinquième heure après l’apparition des premiers symptômes ».
Indépendamment de la forme grave du charbon symptomatique exposée ci-dessus, il est une autre forme qui ne se traduit « que par des frissons, un peu de fièvre et de l’inappétence ». Sous cette forme, le charbon symptomatique guérit spontanément : il peut donc facilement passer inaperçu.
Terminaisons. — Le charbon symptomatique se termine ordinairement par la mort. Quand il en est autrement, la convalescence est généralement longue: la tumeur charbonneuse suppure et, peu à peu, l’œdème qui l’entourait se résorbe. Mais cela a lieu avec une grande lenteur. Parfois même « les sujets succombent à une pleurésie métastatique au bout d’un mois ou deux » .
Lésions. — Le cadavre se ballonne rapidement et par suite il s’écoule par les naseaux et par l’anus du sang spumeux.
En enlevant la peau, on voit que le tissu conjonctif souscutané est le siège d’un emphysème surtout au niveau de l’épaule et du dos ; les infiltrations gazeuses peuvent même s’étendit à la croupe, aux fesses, à la face interne des cuisses.
On remarque ensuite que « les masses musculaires présentent une ou plusieurs tumeurs caractéristiques. Les muscles qui constituent le centre de ces tumeurs ont une teinte noire très foncée, caractère justificatif du nom de charbon, donné par nos devanciers à la maladie que nous décrivons. Si l’on incise une tumeur, on s’assure que la coloration noire s’atténue du centre à la périphérie. Elle passe successivement de la couleur lie de vin foncé au rouge, au rose, au jaunâtre. Des stries noirâtres parcourent les portions les moins foncées. Il faut ajouter que la coloration des parties centrales se modifie au contact de l’air; tel muscle ou tel groupe musculaire qui offre la coloration noire sur la tranche au moment où l’on vient de le diviser, prend une teinte rutilante au bout de quelques instants. Cette modification est analogue au
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changement que subit la couleur du sang veineux en présence de l’atmosphère.
« Autour de la tumeur, surtout si elle siège dans une région riche en tissu conjonctif lâche, existe un œdème considérable. Près des muscles malades, cet épanchement a les caractères de l’œdème passif, il est incolore ou légèrement citrin (1). »
La tumeur charbonneuse est généralement le siège d’infiltrations gazeuses, qui la pénètrent de toutes parts, la dissèquent pour ainsi dire et peuvent former parfois des espèces de poches du volume du poing. Sa présence est ordinairement facile à constater; elle peut cependant se trouver sur des parties où d’habitude on ne s’attend pas à la rencontrer, telles que le diaphragme, les cornets ethmoïdaux. Dans les cas où rien ne décèle une tumeur à l’extérieur, on devra toujours, à l’autopsie, chercher avec le plus grand soin dans la profondeur des muscles thoraciques et pelviens, soulever l’épaule et examiner attentivement les muscles qu’elle cache, particulièrement l’extrémité du grand dentelé. On est à peu près sur d’y trouver quelques infarctus, une coloration lie de vin ou noire d’un ou plusieurs faisceaux de fibres musculaires, en un mot quelques lésions qui eussent pu passer facilement inaperçues si l’on n’eùt pas été averti à l’avance de diriger ses investigations de ce côté. (Arloing, Cornevin et Thomas.) L’examen microscopique de la tumeur montre que les fibres musculaires ont éprouvé la dégénérescence graisseuse et la dégénérescence cireuse; la substance contractile présente des cassures autour desquelles les microbes caractéristiques du charbon symptomatique sont très nombreux. On les rencontre aussi « autour des faisceaux et dans les espaces lymphatiques du tissu conjonctif intra-musculaire ».
Dans la cavité abdominale, on trouve assez souvent une certaine quantité de sérosité jaunâtre ou roussâtre. Parfois l’épiploon est transformé en une nappe sanguine, le péritoine et le mésentère sont parsemés détachés ecchymotiques. (Delamotte.)
Les organes digestifs présentent des altérations, notamment dans la forme charbonneuse désignée sous le nom de glos-
(1) Le Charbon symptomatique du bœuf, par MiYI. Arloing, Cornevin et Thomas, 2e édit., p. 63.
santhrax. Alors les parois du pharynx, de l’œsophage, sont noires, friables, et ces lésions peuvent s’étendre aux muscles de la base de la langue et au voile du palais. L’intestin montre, par places, des rougeurs, des suffusions sanguines.
La rate n’éprouve aucun changement notable ni dans son volume, ni dans sa consistance, contrairement, à ce que l’on observe dans la fièvre charbonneuse, ce qui permet à pre* mière vue de distinguer l’une de l’autre les deux maladies charbonneuses ; toutefois, la différenciation ne peut être sûrement établie que par l’examen microscopique de la pulpe splénique. Par ce moyen, on constatera la présence du bâclérium Chauvæi — que nous décrivons ci-après — si l’on a affaire au charbon symptomatique et celle du bacillus anthracis s’il s’agit de la fièvre charbonneuse.
Le foie n’offre pas non plus d’altérations, seulement la bile est riche en microbes.
Les reins sont normaux, parfois leur périphérie est infiltrée de sang par suite du voisinage d’une tumeur. De même l’appareil génital du mâle est le siège de lésions lorsqu’une tumeur charbonneuse s’est développée dans son voisinage.
La muqueuse de l’appareil respiratoire est souvent très congestionnée et même noire dans les parties supérieures de cet appareil, les poumons sont simplement engoués, les plèvres contiennent parfois une sérosité sanguinolente, les muscles thoraciques sont noirâtres lorsque la tumeur siège sous l’épaule.
Le péricarde contient de la sérosité, « le myocarde présente çà et là quelques taches hémorrhagiques; l’endocarde est généralement coloré dans les deux cœurs, surtout vers les sommets. Le sang qui remplit les cavités cardiaques et les gros vaisseaux est coagulé comme à l’état normal ».(Arloing, Gornevin, Thomas.)
Les ganglions lymphatiques sont altérés, notamment ceux du côté où siège la tumeur ; ils sont rouges et infiltrés. Il en est de même des ganglions viscéraux lorsque les organes internes présentent les lésions que nous venons de décrire.
Microbe du charbon symptomatique. — ■ La tumeur, la sérosité environnante, les ganglions lymphatiques, les viscères, la rate notamment et même le sang renferment un microbe qui est l’agent de la virulence. Nous en empruntons la description à MM. Arloing, Gornevin et Thomas.
A. Distribution , forme , dimensions. Réactions. — Le sang est le
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plus souvent très pauvre en microbes pendant la vie des malades. Mais, après la mort, et surtout plusieurs heures après la mort, il jse peuple abondamment d’organites microscopiques qui s’offrent à l’observation sous les deux formes suivantes : 1° celle de microcoques, souvent très pâles, et par suite difficiles à voir au sein du plasma; leur présence est principalement révélée par les ébranlements qu’ils communiquent aux hématies en s’agitant au sein du véhicule; on peut les mettre plus nettement en évidence à )il’aide du bleu d’aniline ou de la vésuvine, etc.; ces corpuscules i mesurent environ 0 mm. 002 de diamètre ; 2° celle de bactéries longues de 0 mm. 005, 0 mm. 008, larges de 0 mm., 001, homogènes, douées d’une grande mobilité. Ce dernier microbe monte et descend avec agilité dans la couche de liquide qui compose la préparation microscopique, s’infléchit en arc ou en S, pirouette sur lui-même de manière à se présenter dans le sens de sa longueur ou obliquement, ou par l’une de ses extrémités.
H change donc d’aspect, pour ainsi dire, à vue d’œil.
Ces deux formes se rencontrent dans la sérosité des œdèmes qui avoisinent les tumeurs musculaires : elles y sont en plus grande quantité que dans le sang et associées à une troisième forme, celle d’une bactérie pourvue d’un corpuscule brillant ou d’une spore à l’une des extrémités.
Le bactérien nuclée mesure 0 mm. 005 à 0 mm. 010 de longueur sur 0 mm. 0011 et 0 mm. 0013 de largeur; le corpuscule brillant occupe environ le tiers de la longueur. Il est moins mobile que le bactérien homogène, se déplace en oscillant, sans jamais s’infléchir en arc ou en S. Lorsqu’il est très long, il est quelquefois pourvu d’un corpuscule à chaque extrémité et articulé dans son I milieu.
La forme du microbe du charbon symptomatique offre certaines i variétés intéressantes. Ainsi, la partie qui renferme, la spore est parfois légèrement renflée, ce qui donne à l’organisme l’apparence d’un battant de cloche. Souvent aussi, vingt-quatre à trente-six heures après la mort, il devient fusiforme. Ce changement, qui lui donne les caractères attribués autrefois au genre Clostridium i se présente sur les microbes sporulés et non sporulés.
Ce microbe est très abondant dans le tissu conjonctif et dans le i sang répandus entre les faisceaux primitifs contractiles, il pénètre i même à l’intérieur de ceux-ci, à la faveur des déchirures du sarcolemme, de la fragmentation du contenu et de ses mouvements. Il en résulte qu’il est difficilement entraîné par la sérosité qui • s’écoule d’une petite blessure faite aux tumeurs. Si on veut l’ob- ( tenir pour l’étudier ou l’inoculer, il faut l’extraire par raclage ou i par trituration du tissu conjonctif inter et intramusculaire où il i est en quelque sorte cantonné. On le retrouve avec les mêmes caractères dans les parenchymes, foie, rate, rein, poumon et dans
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les glandes lymphatiques. Il va sans dire que ce microbe résiste très bien à l’action des alcalis et des acides. Sous l’influence de la teinture d’iode, il prend une teinte violette, surtout lorsqu’il est à l’état de bactérie non sporulée. De forts grossissements permettent de voir que la teinte violette est fixée sur des granulations disséminées dans le protoplasma. L’éosine supprime rapidement les mouvements de ce microbe. Si on fait une simple dissociation de l’œdème et que, dans le but de la conserver, on l’additionne de glycérine ; non seulement les bactéries continuent à s’y mouvoir, mais elles s’y segmentent, et, au bout d’un ou deux jours, elles sont remplacées par des corpuscules mobiles.
B. Moyens d'étude. — Sous la forme de bâtonnets, le microbe du charbon symptomatique est toujours très facile à voir à l’état frais. En raclant les muscles, ou en les triturant dans quelques gouttes d’eau, on obtient aisément les éléments d’excellentes préparations, sur lesquelles les personnes les moins exercées saisiront immédiatement tous les caractères du micro-organisme.
Mais l’on n’a pas toujours un animal récemment mort ou une pièce fraîche sous la main pour faire des préparations extemporanées. Il devient donc nécessaire de monter le microbe en préparations persistantes.
Le micro-organisme du charbon symptomatique n’est pas de ceux qui fixent facilement les couleurs d’aniline. Il ne faudra donc pas s’étonner si l’on ne réussit pas parfaitement dès les premières tentatives.
Cornil a indiqué le procédé suivant pour colorer ce microbe : dissocier une parcelle d’œdème musculaire sur une plaque de verre, colorer, laisser sécher à l’air, passer dans la flamme d’une lampe à alcool, éclaircir avec l’essence de girofle, ajouter une goutte de baume du Canada, puis recouvrir d’une mince lamelle. On obtient de la sorte des préparations persistantes.
Nous recueillons de très bons résultats d’une méthode qui consiste à étendre une goutte de suc musculaire ou de sérosité sur une lame de verre où on la laisse se dessécher ; on recouvre d’une petite quantité de solution alcoolique concentrée de violet d’aniline pendant dix à quinze minutes ; on lave à l’eau ordinaire, on fait sécher une seconde fois, on éclaircit, puis on monte dans le baume du Canada.
Pour obtenir des microbes débarrassés de particules étrangères, nous employons le moyen suivant : on triture un morceau de tumeur dans un mortier, en ajoutant quelques centimètres cubes d’eau ; on exprime à travers une mousseline fine et on laisse reposer dans un vase à pied étroit ou dans un tube à essai ; au bout de quelques heures, lorsque les parcelles étrangères ont été entraînées au fond d vuase, on aspire, près de la surface, avec un
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tube capillaire: on étale le liquide sur des lamelles de verre; on fait sécher et on colore selon les procédés classiques, avec le violet ou le bleu d’aniline ou avec la fuchsine; le lavage des lamelles sera fait avec de l’alcool étendu. Lorsque les bâtonnets sont dépourvus de spores, ils restent unifoimément colorés. S’ils ren- ! ferment des spores, celles-ci retiennent la matière colorante ; le corps du bâtonnet a des contours vaguement indiqués. Souvent, dans ce cas, la place des microbes esc marquée par de simples taches ovales colorées en bleu ou en violet; on devine plutôt qu'on ne voit le reste de ces organismes.
Contagion. — On la divise en expérimentale et en spontanée ou naturelle.
I. Contagion expérimentale. — Le microbe du charbon symptomatique s’inocule aux animaux suivants ; bœuf, mouton,
. chèvre, cobaye ; ce dernier animal est le réactif par excellence. Les autres animaux — notamment le lapin auquel on inocule si facilement la fièvre charbonneuse — sont réfractaires au charbon symptomatique.
« Ou peut réussir à infec'er le lapin par quelques artifices qui diminuent ou abolissent sa résistance. C’est ainsi qu’en inoculant le virus desséché, préparé avec la tumeur charbonneuse d’un mouton, dans les deux cuisses d’un lapin qui avait reçu dans les muscles six heures auparavant une injection de XX gouttes d’acide lactique au 1/5, MM.Nocard et Roux ont pu tuer l’animal, qui succomba en cinquante-huit heures avec des tumeurs énormes.
« M. Royer tue aussi le lapin en lui injectant de la triméthy lamine en même temps que le virus du charbon symptomatique.
« Le même auteur produit la mort de lapins auxquels il injecte en même temps que les bacilles du charbon symptomatique des cultures vivantes ou stérilisées de microbacillus prodigiosus. Il arrive au même résultat par l’injection de culture de staphylocoques pyogènes et de proteus vulgaris. Enfin, d’après le même auteur, les bacilles du charbon symptomatique introduits dans la chambre antérieure de l’œil déterminent la mort de l’animal. Enfin, M. Ruffer se croit autorisé
Îpar ses expériences à conclure que l’immunité du lapin est relative et non absolue. Il a tué, en effet, facilement des lapins en leur introduisant sous la peau des doses fortes, 0,05 et plus, du 2e vaccin (1). »
(1) Tholnot et Masselin. Précis de microbie , 2e édition, p. 330.
Suppl. — I.
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D’autre part, M. Dnenschmann a démontré que le microbaci/lus prodigiosus, qui facilite le développement du charbon symptomatique chez le lapin, espèce réfractaire à cette maladie, retarde et même empêche le développement du badèrium chauvœi chez le cobaye, c’est-à-dire sur un animal normalement très sensible à l’action de ce microbe. Suivant M.Duenschmann, ces deux phénomènes s’expliquent d’une façon naturelle par l’action du prodigiosus sur les phagocytes. « Dans le premier cas, il les paralyse ; dans le second, il les excite » (1).
Les effets de l’inoculation expérimentale consistent généralement en une tuméfaction parfois crépitante du point inoculé, de l’hyperthermie, de la fièvre et la mort du sujet en vingt-quatre ou quarante-huit heures, avec des lésions de même nature que celles qui résultent de la contagion naturelle.
Mais ces effets varient suivant l’activité du virus, le mode d’inoculation, la région où cette opération est pratiquée, la dose employée. Et ces variations nous permettent de nous rendre compte de l’évolution naturelle de la maladie tout en nous conduisant à une prophylaxie rationnelle. Il est donc utile de nous y arrêter quelques instants.
1° Activité du virus, — La pulpe musculaire, c’est-à-dire le produit obtenu en triturant avec de l’eau stérilisée une certaine quantité des tissus les plus noirs de la tumeur charbonneuse, convient bien pour les inoculations. La bile, le liquide amniotique, la sérosité des œdèmes entre autres, sont riches en bacilles spécifiques et leur inoculation détermine la maladie, Le sang n'est virulent que quelques instants avant la mort. Si on le recueille purement sur un animal qui vient de mourir et qu’on le place pendant vingt-quatre heures à l’étuve, le bacille qu’il contenait d’abord en petite quantité se multiplie avec rapidité.
Ce bacille est anaérobie, il ne se cultive que dans le vide ou en présence de gaz inertes. Sa culture est difficile; elle peut être faite notamment « dans le bouillon de poulet additionné d’une petite quantité de glycérine et de sulfate de fer » ou « bien dans le bouillon de bœuf additionné d’acide lactique ». Les cultures perdent rapidement leur virulence. Il en est autrement des produits de l’organisme, par exemple, le tissu
(1) Anna/es de l’Institut Pasteur, 1894, p. 434.
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musculaire, surtout dans les points où les tumeurs charbonneuses se sont développées. Ce tissu est très riche en bacilles, et quand il a été desséché rapidement à l’étuve, à une température de 35°, il conserve sa virulence pendant « deux ans au moins » ; d’ailleurs, il est à remarquer « que la résistance du virus desséché est beaucoup plus considérable que celle du virus frais » . (Arloing, Cornevin, Thomas.) Or, le virus frais peut supporter un froid de « — 70° et — 76» », môme de « — 120° ou 130° » sans perdre ses propriétés. Il est détruit par une température de 100°, tandis qu’il faut élever la température à 110° pour obtenir ce résultat avec le virus desséché.
La putréfaction ne détruit pas la virulence du charbon bactérien; il en est de même de l’association du microbe de cette maladie avec d’autres microbes anaérobies ou bien aérobies, comme le bacillus anthracis, de telle sorte que les deux charbons (fièvre charbonneuse et charbon symptomatique) peuvent exister sur le môme animal.
Parmi les substances chimiques qui détruisent les propriétés du virus à l’état frais, nous signalerons entre autres, d’après MM. Arloing, Cornevin et Thomas, l’acide phénique en solation aqueuse à 2 p. 100;' le sublimé corrosif à 1/5000; le sulfate de cuivre au 1/5; l’acétate d’alumine à 1/200; les vapeurs de brome, de chlore et de sulfure de carbone. Quant au virus desséché, il n’est détruit que par les vapeurs de brome, et par quelques désinfectants employés en solution, notamment l’acide phénique à 2/100, le sublimé à 1/1000, le sulfate de cuivre au 1/5.
Il est à remarquer que l’essence de térébenthine, qui détruit si sûrement la virulence du bacillus anthracis , n’agit point sur le microbe du charbon symptomatique même quand ce microbe se trouve dans les tissus frais et que le contact se prolonge pendant quarante-huit heures.
La virulence du charbon symptomatique est susceptible d’être atténuée ou augmentée. Ainsi, la chaleur, avant de détruire cette virulence, l’affaiblit peu à peu et la rend vaccinale, tandis que l’acide lactique l’exalte, comme le démontrent les expériences de MM. Arloing et Cornevin (1).
En outre ces expérimentateurs ont transformé «la virulence mortelle de la sérosité fraîche d’une tumeur symptomatique
(1) Le Charbon symptomatique du bœuf , 2e édit. Paris, 1887, p. 165.
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en virulence vaccinale à l’aide delà glycérine phéniquée, du sublimé corrosif à 1/5000, de l’eucalyptol et du thymol. Ils ont encore atteint ce résultat en mettant le virus en contact avec une solution de galactose alcalinisée, pendant vingtquatre heures (1).
2° Mode d'inoculation. — C’est dans le tissu conjonctif souscutané ou dans les muscles que le virus doit être déposé pour pi'oduire ses effets toxiques; injecté dans les veines, il confère l’immunité. Cet important résultat peut encore être obtenu par l’injection sous-cutanée [de virus atténué. Déposé dans l’épaisseur de la peau, par piqûres sous-épidermiques au moyen de la lancette, le virus évolue lentement et ne détermine la mort qu’au bout « de trois jours environ » ; il peut se faire aussi que le sujet résiste. Injecté dans la trachée, le virus produit une maladie avortée et les sujets d’expérience acquièrent l’immunité. Administré par les voies digestives, il peut déterminer une infection générale suivie demort, lorsque son activité a été renforcée par addition d’acide lactique.
3° Région inoculée. — Dans les régions où. le tissu conjonctif sous-cutané est lâche : fanon, épaule, bras, cuisse, tous les effets locaux de l’inoculation se produisent facilement, tandis qu’ils peuvent faire défaut dans celles dont le tissu cellulaire est dense : extrémité des membres, queue. Mais la structure anatomique de la région n’est pas la seule cause de ces différences dans les effets de l’inoculation, car MM. Arloing et Cornevin ont démontré que la température de ces parties placées en appendice — la queue notamment — étant moins élevée que celle des autres parties du corps, il en résulte que l’évolution du virus y est lente ou même nulle. Mais si, après l’inoculation, l’on enveloppe l’extrémité de la queue avec du coton afin d’élever sa température, une tumeur se forme au point inoculé. Ces recherches nous expliquent pourquoi on n’observe point de tumeurs charbonneuses à l’extrémité des membres ou. de la queue, lorsque la maladie évolue par contagion naturelle.
4° Dose de virus. — « Si l’on pousse dans le tissu cellulaire sous-cutané ou intra-musculaire un peu de sang ou de pulpe musculaire infectieuse (de une goutte à un centimètre cube), on obtient des accidents toujours mortels. » Si l’inoculation est faite avec une dose moyenne (1/10 de goutte d’une pulpe
(1) Les Virus, p. 311.
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musculaire très active), les accidents locaux sont nuis ou peu marqués ; mais, au moment où l’on suppose que l’animal est hors d’affaire, apparaît une tumeur plus ou moins éloignée du point d’inoculation, laquelle évolue comme la tumeur déterminée par l’inoculation d’une forte dose et, conséquemment, entraîne la mort de l’animal.
« Lorsqu’on introduit dans le tissu cellulaire une très petite dose de virus ou du virus peu actif, tantôt on n’obtient aucun effet, tantôt on produit une maladie légère qui se borne à quelques symptômes généraux : tristesse, diminution de l’appétit, élévation de la température. » (Arloing, Gornevin et Thomas.)
II. Contagion naturelle. — Les microbes générateurs du charbon symptomatique sont répandus à profusion dans les milieux extérieurs — le sol et l’eau notamment — surtout par les cadavres d’animaux atteints de cette maladie. Les manipulations dont ces cadavres sont l’objet, leur dépeçage, leur enfouissement, entretiennent la maladie en semant, pour ainsi dire, des germes dans la terre et. dans les eaux ; d’autre part, l’extrémité vitalité du bactérium Chauvæi, si bien mise en évidence par les belles expériences de MM. Arloing et Cornevin, constitue une cause puissante de contagion; on a vu, en effet, que ce microbe résiste aux froids les plus rigoureux et aussi à la putréfaction. On conçoit dès lors qu’il puisse se conserver dans le sol pendant longtemps, plusieurs années sans doute. Ainsi « dans un pré faisant partie d’un domaine où depuis plusieurs années le charbon symptomatique n’avait pas été constaté, M. Gotti fit recueillir de la terre à 0 m.40 de profondeur sous gazon.
« L’eau de lavage de cette terre, inoculée d’abord au cobaye, le fit mourir; le liquide de pulpe exti’ait des muscles de cobaye et inoculé à la génisse la fit périr avec les signes les mieux caractérisés du Charbon symptomatique. Une autre génisse inoculée directement avec l’eau de lavage de la même terre fut très malade, mais guérit et acquit l’immunité (l).f»
La durée de la conservation de la virulence dans le sol infecté est évidemment subordonnée à sa composition chimique et à son état physique. Ainsi, dans les terrains argileux, la pénétration de l’air est difficile ou nulle en raison de leur compacité, et par suite le bacille du charbon symptoma-
(1) Le Charbon symptomatique du bœuf, 2e édit., p. 159.
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tique, qui est anaérobie, conserve ses propriétés ; tandis que dans les terrains légers, perméables, de nature silico calcaire, l’air pénètre facilement et brûle pour ainsi dire le virus.
La conservation du virus dans le sol dépend aussi des diverses matières qui peuvent être associées aux débris cadavériques. Ainsi on a remarqué que, dans les pays où les bêtes bovines sont entretenues pour la production du lait et dans lesquels la fabrication du beurre et du fromage se fait sur une grande échelle, les cas de charbon symptomatique sont plus fréquents que dans les pays où l’on se livre à l’engraissement et à l’élevage du gros bétail. Or, les recherches expérimentales de MM. Arloing et Cornevin nous apprennent que l’acide lactique renforce la virulence du bacterium Chauvæi ; dès lors, il est permis de se demander, à l’exemple desauteurs précités, si dans les pays d’industrie beurrière et fromagère la fréquence du charbon symptomatique ne tiendrait pas à ce que les chances de contact enti’e les microbes du charbon et ceux de la fermentation lactique sont plus grandes.
Le microbe du charbon symptomatique peut aussi se conserver dans les eaux stagnantes, dans les marais, les étangs, etc,; il peut être entraîné au loin par les inondations, déposé ainsi à la surface des prairies, et finalement pénétrer dans l'organisme des bêtes bovines par l'eau des mares, par l’herbe des prairies. C’est ainsi qu’en 1885 nous avons observé, dans les environs de Saint-Gaudens, une endémie de charbon symptomatique sur des bêtes bovines qui avaient pâturé dans des prairies longées par la Garonne, inondées quelque temps auparavant. D’ailleurs, cette circonstance qui favorise la contagion a été signalée depuis longtemps, de même que l’influence de la constitution géologique du sol ; mais, à l’époque où ces causes ont été invoquées, on en était réduit à constater leurs conséquences, sans pouvoir les interpréter ni les prévenir, comme nous sommes en mesure de le faire aujourd’hui.
Enfin, pour le charbon symptomatique, comme pour la fièvre charbonneuse, la cohabitation des animaux malades avec les animaux sains est une cause de contagion. Car l’infection peut alors s’opérer par les litières, les fourrages souillés par des déjections des animaux malades ; elle peut avoir lieu aussi par les ustensiles qui servent à distribuer la nourriture aux animaux.
Il est à remarquer que le charbon symptomatique ne se
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transmet pas à l’homme et que, parmi les animaux de la ferme, ce sont les bêtes bovines qui sont principalement frappées et exceptionnellement les jeunes animaux d’espèce ovine, les agneaux.
Chez les bêles bovines la maladie se déclare principalement sur celles qui sont âgées de 6 mois à 4 ans. Elle peut cependant se montrer sur des veaux et même sur des bêtes adultes et vieilles, comme M. Tambareau (de Sainl-Gaudens), notamment, l’a observé.
On ne connaît pas bien l’influence des saisons sur le développement du charbon symptomatique. Cependant on admet, en France et dans l’Italie septentrionale, que cette maladie exerce surtout ses ravages par bouffées au printemps et à l’automne, c’est-à-dire lorsque les animaux quittent 1’ « étable pour vivre au pâturage et lorsqu’ils abandonnent le pâturage pour vivre à l’étable » (1). Nous l’avons vue sévir, en janvier 1885, dans le département de la Haute-Garonne, par un froid assez rigoureux.
D’après des statistiques faites dans le canton de Berne, les cas de charbon symptomatique seraient plus fréquents sur les animaux mâles que sur les femelles.
Immunité. — Elle peut être naturelle ou bien acquise. On a remarqué que, parmi les animaux qui vivent dans un pays où sévit le charbon symptomatique, il en est qui présentent la maladie sous forme bénigne et acquièrent ainsi l’immunité; sur d’autres l’affection passe inaperçue et ils n’en deviennent pas moins réfractaires à des inoculations de contrôle. On admet, d’après des recherches expérimentales, que, dans ces eas, les animaux se sont pour ainsi dire vaccinés en absorbant peu à peu de petites quantités de virus normal ou plus ou moins affaibli par les influences cosmiques et telluriques.
Les recherches de MM. Arloing, Gornevin et Thomas démontrent que l’immunité peut être conférée, soit en inoculant le virus naturel tel qu’on l’extrait d’une matière fraîche, soit en inoculant le virus atténué. Dans le premier cas, les expérimentateurs précités ont réussi « à donner l’immunité en insérant le virus à doses très faibles dans le tissu conjonctif d’un point quelconque de l’économie, ou à doses plus considérables dans le tissu conjonctif sous-cutané d’une région déterminée, dans les veines et dans les voies respiratoires».
(I) Loc. cit., p. 44.
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Dans le second cas, l’immunité est conférée par l’injection sous-cutanée de virus atténué.
Il est à remarquer que l’on peut encore communiquer l’immunité au cobaye soit par l’injection sous-cutanée de cultures achevées du charbon symptomatique, puis chauffées « dans l’autoclave à 115 », soit encore et même d’une manière plus sûre, par l’injection sous-cutanée de la sérosité de l’œdème filtrée sur porcelaine, comme cela a été démontré par M. Roux. Il est facile, dit cet habile expérimentateur, de rendre les cobayes réfractaires au charbon bactérien, en leur injectant chaque jour sous la peau un centimètre cube de sérosité filtrée. Au bout de 10 à 12 injections, l’immunité est acquise (1).
L’étude de la sérosité de l’œdème du charbon symptomatique a été reprise par M. Duenschmann, à l’Institut Pasteur, qui est parvenu à préparer avec cette sérosité une toxine dont il a étudié les effets sur le cobaye. Voici les conclusions de son travail :
« 1° La toxine du charbon symptomatique retirée des cultures sur viandes et non altérées ne vaccine pas contre le virus vivant. Les cobayes qui la reçoivent paraissent, au contraire, plus sensibles à l’action de ce virus ;
2° Les cobayes qui ont reçu la toxine sont pendant longtemps moins résistants à l’action de cette toxine que les cobayes neufs ;
3° La sérosité filtrée des animaux qui ont succombé au charbon symptomatique est vaccinante, non parce qu’elle contient de la toxine, mais parce qu’elle renferme la substance préventive qui existe dans les tumeurs des animaux immunisés ;
« 4° Le baçtêrium Chauvæi peut persister longtemps, vivant et virulent, dans le corps des animaux vaccinés ;
5° Des lapins qui succombent à l’inoculation de ce microbe peuvent fournir un sérum préventif ;
«5° Les animaux immunisés contre le virus vivant peuvent donner un sérum qui manifeste des propriétés antitoxiques in vitro et dans le corps d’un autre animal (2). »
Diagnostic. — Il importe essentiellement, au point de vue
(1) Roux. Ann. de l’Insl. Pasteur , 1888, p. 53.
(2) Ann. de l'inst. Pasteur , 1894, p. 430.
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de la prophylaxie, de distinguer le charbon symptomatique delà fièvre charbonneuse. Cette distinction peut être faite pendant la vie des animaux et surtout après leur mort.
Du vivant des animaux, l’apparition, en quelque sorte exclusive, de la maladie sur de jeunes animaux d’espèce bovine, la formation d’une ou plusieurs tumeurs à développement rapide, permettront de ne pas confondre le charbon symptomatique avec la fièvre charbonneuse, car, dans cette dernière maladie, on ne constate ni boiterie, ni tumeur, et l’affection se développe sur les bovidés de tout âge ainsi que sur les moutons et même les chevaux.
Toutefois le diagnostic différentiel ne peut être sûrement établi que par l’examen microscopique et par l’inoculation au lapin du sang recueilli sur un animal qui est sur le point de succomber. Dès lors, c’est le plus souvent à l’autopsie de l’animal présumé charbonneux que la différenciation sera faite; d’ailleurs, avant d’avoir recours à l’inoculation et à l’examen microscopique, l’examen du cadavre fournira des données importantes. Ainsi, dans le charbon symptomatique, on constatera des tumeurs charbonneuses, des infiltrations gazeuses et d’autres lésions que l’on ne trouve point dans la fièvre charbonneuse. — Par l’examen microscopique on verra le baclérium Chauvæi notamment dans la tumeur charbonneuse, dans la rate, etc., si l’on a affaire au charbon symptomatique ; tandis que s’il s’agit de la fièvre charbonneuse, ce sera le bacillus anthracis. — Si cet examen ne paraît pas suffisamment concluant, l’inoculation au lapin fera disparaître toute incertitude, car cet animal, qui est réfractaire au charbon symptomatique, contracte facilement la fièvre charbonneuse.
Pronostic. — Avant la découverte de l’inoculation préventive par MM. Arloing, Gornevin et Thomas, le charbon symptomatique faisait de nombreuses victimes parmi les animaux d’espèce bovine, soit en France, soit à l’étranger, en Suisse notamment. On estime que, depuis l’application de cette mesure prophylactique, la mortalité déterminée par le charbon symptomatique est sept à dix fois moindre qu’auparavant. Il est à remarquer que la mortalité résultant de l’évolution naturelle de la maladie varie ; tantôt elle est de 25 p. 100, d'autres fois de 15 p. 100 et, dans certaines localités, elle descend à 2 ou 3 p. 100, même à « 1,56 p. 100 » (1).
(1) Loc. cit., p. 279.
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Traitement . — Il offre peu d’importance, car son efficacité est des plus douteuses, tandis que celle de l’inoculation préventive, dont nous parlons ci-après, est certaine. On recommandait beaucoup autrefois le trochisque de racine d’hellébore noire, et, aujourd’hui encore, il est des praticiens qui l’emploient comme moyen préventif. On applique cet exutoire au fanon. Un grand nombre de médicaments ont été conseillés pour combattre les maladies charbonneuses: il n’en est aucun qui jouisse de propriétés curatives certaines. Les excitants diffusibles, l’ammoniaque et ses composés, l’huile phosphorée, ont joui d’une grande vogue; aujourd’hui, leur emploi paraît à peu près abandonné.
Les toniques anti-périodiques, le quinquina et ses composés, le sulfate de quinine, ont été aussi prônés avec enthousiasme, mais il ne paraît pas que leur emploi se soit généralisé et que les espérances que l’on avait fondées sur leurs propriétés réputées curatives du charbon, se soient réalisées. Il en est de même de l’iode et de l’acide phénique que l’on a considérés comme des spécifiques. Dès lors, nous nous contenterons de faire connaître sommairement les principales médications conseillées pour combattre le charbon chez les animaux d’espèce bovine.
L’huile phosphorée, à la dose quotidienne de 40 à 50 gouttes dans un litre de décoction de graine de lin, a été chaudement recommandée . Le sulfate de quinine à la dose de 2 à 3 grammes dissous dans quantité suffisante d’eau de Rabel, a été employé. Cette solution acide est étendue, pour l’usage, dans un litre d’eau ordinaire. On a signalé autrefois les bons effets de l’acide phénique, à la dose de 20 à 40 grammes par jour.
La méthode anti-virulente de Cézard, qui consistait dans l’emploi de Fiode intus et extra , est aujourd’hui abandonnée. Divers praticiens, notamment MM. Garrey, Thomas, Font employée infructueusement.
A ces diverses médications internes on ajoute l’emploi des révulsifs: frictions avec le vinaigre chaud, frictions sinapisées, enveloppement du malade dans de chaudes couvertures, cautérisation profonde des tumeurs avec le fer rouge. Au début de l’apparition des tumeurs charbonneuses, MM. Arloing, Cornevin et Thomas estiment, d’après leurs recherches expérimentales qui démontrent les propriétés antivirulentes des solutions d’acide phénique à 2 p. 100 ou d’acide salicylique à 1 p. 1.000, qu’il est indiqué de faire, au pourtour
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des tumeurs charbonneuses, « des injections d’eau phéniquée ou mieux salicyliquée, dont les effets inflammatoires sont moins prononcés ».
Malgré ces moyens énergiques, le traitement du charbon bactérien est souvent infructueux, et. en définitive, on est conduit à cette conclusion que, dans la pratique, l’inoculation préventive est le seul moyen sur lequel on puisse compter, le seul qui soit suivi de véritables succès.
Inoculation préoenHve. — Cette opération consiste à inoculer le charbon symptomatique sous forme bénigne, afin de rendre les animaux réfractaires à cette maladie. Elle a été pratiquée pour la première fois en 1880, dans le département du Rhône, par MM. Arloing et Cornevin ; puis en 1881, sous les auspices du Ministère de l’Agriculture, dans le Bassigny (Haute-Marne), en Algérie, dans le pays de Gex, en Suisse. Elle fut faite d’abord par injection intra-veineuse, puis, à partir de 1883, par injection sous-cutanée de virus atténué. Elle a pris, depuis cette époque, une grande extension, notamment en Suisse. Nous l’avons pratiquée, dans le département de la Haute-Garonne, en 1885, avec notre collègue M. Cadéac et M. Tambareau, vétérinaire à Saint-Gaudens. Les virus atténués dont nous nous sommes servis avaient été envoyés par M. Arloing à M. Baillet, alors directeur de l’École vétérinaire de Toulouse.
La préparation des virus atténués se fait en mélangeant « une partie de virus desséché à deux parties d’eau ordinaire » et en chauffant ce liquide à la température de 100° pendant sept heures pour obtenir le premier vaccin et à la température de 85° pour le deuxième vaccin. Les produits ainsi obteuus sont réduits en poudre et ils se conservent pendant un an en ayant le soin de les placer dans un endroit sec. On trouve aujourd’hui dans le commerce ces poudres vaccinales (1).
« M. Kitt, de Munich, a tenté d’obtenir l’immunité à l’aide d’un seul vaccin qu’il prépare en soumettant le virus à la température de 90°. MM. Arloing et Cornevin ont aussi obtenu, par l’emploi de la chaleur, un vaccin unique (2). »
L’étude de l’inoculation préventive des virus atLénués comprend leur préparation pour les mettre dans un état physique compatible avec leur mode d’introduction dans l’économie
(1) S’adresser à M. G. Fromage, 28, rue Lebrun, Paris.
(2) Les Virus, p. 310.
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animale, des instruments et ustensiles nécessaires à l’opération, et enfin le manuel opératoire. Nous ne saurions faire mieux que de reproduire ce qui a été écrit sur ce sujet par les auteurs de l’inoculation préventive :
A. Choix de la région. — En principe, tous les points de l’organisme sont aptes à recevoir les inoculations. Néanmoins, comme il importe que celles-ci produisent l’effet préventif cherché sans donner lieu localement au développement d’une tumeur, il nous a paru bon de choisir une région où ce développement est rare et difficile.
D’après les observations cliniques et les expériences citées plus haut, l’extrémité inférieure de la queue, celle qui est connue sous le nom de toupillon à cause des poils qui la garnissent, semble réunir ces conditions.
Vers le milieu du toupillon, la queue forme un léger renflement en fuseau. Ce point est celui que nous avons choisi pour pratiquer les inoculations. On l’atteint par la face antérieure après avoir coupé les poils qui la garnissent.
On a déjà pratiqué un grand nombre d’inoculations dans cette région. Beaucoup de vétérinaires n’ont fait aucune objection à son choix ; mais quelques-uns ont trouvé qu’en raison de la densité du tissu conjonctif sous-cutané, l’injection pénétrait difficilement et dès lors ils ont pensé qu’il conviendrait de déterminer un autre lieu d’élection. Nous avons tenté de donner satisfaction à ce vœu. Des expériences furent entreprises pour juger du degré de réceptivité des régions facilement accessibles à l’opérateur. Elles oat démontré que l’on pourrait, avec beaucoup de chances de succès, inoculer à l’oreille et aussi à la face externe de l’épaule un peu en avant de la partie proéminente de l’acromion, au lieu d’inoculer à la queue. Les injections seront poussées dans le tissu conjonctif assez dense situé sous la peau de la face extex-ne de la conque, aussi loin que possible de la hase de l’organe.
Trois régions sont donc laissées au choix de l’opérateur. Sans présenter en faveur de l’inoculation à l’oreille un chiffre aussi considérable d’opérations qu’en faveur de l’inoculation à la queue, nous pouvons néanmoins les recommander à l’attention des praticiens.
B. Instruments ou ustensiles nécessaires . — Les virus atténués sont injectés sous la peau, il faudra donc une seringue pour pousser l’injection. Mais, comme les virus atténués sont pulvérulents et secs, il importe de les mettre en suspension
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i dans l’eau : pour cela ou doit disposer d’un petit mortier en h porcelaine.
1° Seringue. — Toutes les seringues à injections hypoder-
imiques peuvent, à la rigueur, servira nos inoculations. Pourtant à cause de la constitution particulière des régions où elles se pratiquent et de la prompte exécution de l’opération, il est utile de prendre un instrument approprié. M. Lépine, fabricant d’instruments de chirurgie à Lyon, a construit une seringue ad hoc.
Elle se compose d’un corps de pompe de 5 centimètres cubes de capacité, muni de deux anneaux à sa base, afin de permettre à l’opérateur de s’en servir avec une seule main. Grâce à sa taille, la seringue peut servir à l’inoculation de dix animaux sans être rechargée. On évite donc, par là, une perte de temps assez considérable.
Elle est accompagnée de deux courtes tiges d’acier de 5 à 6 millimètres de circonférence, pourvues à l’une des extrémités d’un renflement que les doigts saisissent et maintiennent aisément, taillées en pyramide trifaciée, à l’autre extrémité. comme la tige des trocarts. Ges tiges aiguës sont destinées à creuser une galerie en cul-de-sac dans le tissu conjonctif à l’extrémité delà queue. Elle est pourvue de deux canules volumineuses et mousses qui s’adaptent à frottement au corps de pompe lorsqu’on veut pousser le liquide vaccinal dans la galerie de la région caudale. On a émoussé l’extrémité, afin d’éviter qu’elle ne pénètre dans les parois de la galerie et qu’elle ne cause à l’animal des souffrances inutiles. Au surplus il ne faut pas oublier qu’on l’engage dans un trajet préparé à l’avance.
Dans le cas où l’on désirerait faire l’inoculation à l’oreille, on a muni la seringue d’une canule tranchante assez forte pour être introduite sans difficulté sous la peau qui recouvre la face externe du cartilage conchinien. L’adjonction de cette canule à l’instrument le rend propre à tous les services que l’on attend d’une seringue à injections hypodermiques.
2° Mortier. — On choisit un mortier en porcelaine de 4 à 5 centimètres de diamètre à l’entrée. Les légères rugosités du pilon en porcelaine sont favorables à la trituration du vaccin pulvérulent et à son association à l’eau qui sert de véhicule. Le mortier de verre augmente les difficultés de cette opération et la rend plus imparfaite.
3e Accessoires. — Il est bon que l’opérateur soit muni d’un
petit entonnoir et d’un filtre en toile de batiste stérilisée à l’eau bouillante, d'une paire de ciseaux plats ou courbes et de ficelle de la grosseur de la ficelle de fouet.
Manuel opératoire. — Il comprend les préparations du liquide vaccinal et l’opération.
1° Quand on le peut, il faut préparer le liquide nécessaire à l’inoculation de dix bêtes. Si on en prépare moins, on perdra du temps et de la matière ; si on en prépare davantage, on s’expose à ne pas l’obtenir jusqu’au bout parfaitement homogène. On déposera donc au fond du mortier, passé préalablement à l’eau bouillante, le contenu d’un paquet de poudre vaccinale (1). On remplit la seringue d’eau propre ou mieux d’eau récemment bouillie. Puis on verse avec cet instrument environ 1 centimètre cube d’eau sur la poudre. On triture avec le pilon, patiemment et longuement, jusqu’à ce que l’on obtienne une sorte de pâte semi-fluide; alors on ajoute peu à peu le contenu de la seringue en ayant soin de délayer la pâte aussi exactement que possible.
Lorsque cette manipulation est bien faite, dans d’excellentes conditions de propreté, on aspire immédiatement le liquide dans la seringue, sans rien laisser au fond du mortier. Si on apercevait quelques grumeaux volumineux ou des corps étrangers on les retiendrait sur un filtre. Le filtre ayant été mouillé à l’avance, on doit obtenir environ 5 centimètres cubes de liquide, quantité nécessaire pour charger la seringue.
2° Pour pratiquer l’inoculation à la queue, il faut s'y prendre de la manière suivante : un aide saisit l’animal par les cornes; un second lui maintient la croupe appuyée contre un obstacle, une muraille, par exemple. Ce mode de fixation suffit.
L’opérateur s’approche alors de l’animal à vacciner, lui saisit la queue de la main gauche et coupe, sur une étendue de 7 à 8 centimètres, les crins qui garnissent la face inférieure ou antérieure de la partie terminale de l’organe dite vulgairement toupillon. Il nettoie ensuite avec soin la surface de la peau, avec un linge humide, de manière à faire disparaître toutes les souillures quelles qu’elles soient. Puis, entonçant la tige du trocart annexée à la seringue un peu en dehors de la ligne médiane, il creuse parallèlement à la peau une galerie aussi profonde que possible. Il retire l’instrument et
(1) Chaque paquet contient dix doses de poudre vaccinale.
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( infléchit l’extrémité de la queue de manière à placer en haut i l’orifice de la galerie sous-cutanée. Alors, prenant la seringue i de la main droite, le pouce sur l’extrémité du piston, l’index et le médius passés dans les anneaux qui garnissent le corps ! de pompe, il engage la canule mousse de l’instrument dans la galerie, l’applique aussi exactement que possible contre les i parois en pressant avec le pouce de la main gauche, et injecte > 1 centimètre cube ou XX gouttes du liquide vaccinal s’il s’agit d’un animal de 18 mois et au-dessus, et seulement X, XII, XV gouttes, selon le poids des sujets, s’ils sont âgés de 6 à 18 mois.
On a eu soin de régler ces quantités à l'avance avec le curseur dont est munie la tige du piston. Lorsque l’injection est faite on retire la canule et on exerce une légère pression sur l’orifice de la galerie pour prévenir la sortie d’une partie du liquide virulent.
Quelques opérateurs se sont plaints que cette précaution était souvent insuffisante. Nous conseillons d’employer un moyen absolument efficace, proposé simultanément par M. Strebel, vétérinaire à Fribourg, et par M. Perin, vétérinaire à Étain (Meuse). Ce moyen consiste à appliquer deux ou trois tours de ficelle sur l’orifice de la galerie avant de retirer le pouce de la main gauche. La ligature emprisonne sang et virus au fond de la plaie. Seulement il ne faut pas oublier d’enlever cette ligature au bout d’une heure au plus. On pourrait remplacer la ficelle par de petits anneaux en caoutchouc.
Remarque très importante : avant chaque injection, il est indispensable d’imprimer à la seringue des mouvements de bascule, afin de mettre les particules virulentes uniformément en suspension dans le liquide qui remplit le corps de pompe.
Tel est le manuel opératoire qu’il faut suivre pour pratiquer l’inoculation caudale.
3° Pour faire l’inoculation à l’oreille, la préparation du liquide vaccinal reste la même ; la différence porte sur l’opération. Dans ce cas, pendant qu’un aide maintient l’animal par les cornes, l’opérateur saisit une oreille de la main gauche, coupe les poils sur une partie de la face externe ; puis, s’emparant de la seringue munie de sa canule tranchante, il ponctionne la peau de la main droite et fait courir la canule dans le tissu conjonctif entre le tégument et le car-
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tilage (1) ; il presse enüa sur l’instrument avec le pouce de la main gauche et injecte le liquide vaccinal dans le tissu cellulaire. Cette dernière partie de l’opération exige une certaine poussée, car les mailles du tissu conjonctif se prêtent assez difficilement à la pénétration d’un liquide. Lorsqu’on a pratiqué 10 inoculations, on prépare le virus pour 10 autres animaux et ainsi de suite.
4° Inoculation à la face externe de l'épaule. — On emploie la même canule piquante que pour l’inoculation à l’oreille ; on l’engage entre la peau et l’aponévrose scapulaire, au voisinage et en avant de la partie proéminente de l’apophyse acromienue, et l’on injecte le vaccin.
L’inoculation à l’oreille ou à l’épaule se fait plus rapidement qu’à la queue, aussi doit-on l’employer de préférence quand on a un grand nombre d’animaux à inoculer.
Quand la séance d'inoculation est achevée, l'opérateur doit nettoyer soigneusement la seringue en se servant d’abord d’un grand volume d’eau, puis d’antiseptiques énergiques.
Tel est le manuel opératoire de l’inoculation préventive du charbon symptomatique. Pour assurer le succès de cette opération de la manière la plus complète, il importe de tenir compte de l’âge des sujets, de l’état de gestation et de la saison dans laquelle on opère. Il faut inoculer de préférence les animaux âgés de 6 mois à 3 ans, puisque c’est à cette période de la vie que le charbon fait le plus de victimes. Par surcroît, on inoculera les animaux adultes et l’on s’abstiendra pour les vieux animaux. « Si le charbon se déclarait dans un lot de veaux de lait, nous conseillerions d’inoculer. Mais comme ces animaux perdent rapidement l’immunité, il convient de répéter l’inoculation aussitôt qu’ils auront franchi la première année (2). »
Si l’on a affaire à des vaches en état de gestation, il faut s’abstenir, car les expériences de MM. Arloing et Cornevin ont démontré « que les placentas étaient quelquefois le siège de localisations très dangereuses pour ia vie de la mère et du jeune sujet ».
On s’abstiendra d’inoculer par les temps chauds et orageux. Les meilleures saisons sont la fin de l’hiver et l’automne.
(1) On peut aussi engager d’abord l’aiguille sous la peau de la face externe de l'oreille, puis adapter ensuite la seringue et faire l’injection.
(2) Loc. cil., p. 242.
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Suites des inoculations préventives. — Nous reproduisons textuellement ce que MM. Arloing, Cornevin et Thomas ont écrit en 1887, sur ce point important :
« Ordinairement les effets immédiats de l’inoculation sont insignifiants et passent inaperçus, On a signalé bien rarement un état fébrile digne d’être noté. Voilà pour les effets généraux. Quant aux effets locaux, ils se bornent habituellement à un engorgement chaud et douloureux de l’extrémité de l’appendice caudal, qui, règle générale, se dissipe promptement. Par exception on a vu survenir au point d’inoculation un abcès consécutif à l’introduction de quelque corps étranger au moment de l’inoculation, ou à la blessure d’une vertèbre caudale ou d’un disque cartilagineux inter-vertébral. Le plus souvent cet accident s’est terminé simplement ; parfois, il a entraîné la chute ou la déviation de l’extrémité de la queue. Si l’inoculation a été faite à l’oreille, la conque devient chaude ; une légère induration fugace apparaît au point d’inoculation, et les ganglions sous-maxillaires s’engorgent modérément.
« Voilà pour les accidents locaux.
« On ne saurait insister plus longuement sur ces complications légères.
« Il vaut mieux envisager de près la possibilité de voir survenir après l’inoculation du virus atténué un charbon symptomatique complet et mortel. Cet accident est toujours possible avec l’emploi des virus atténués, et il s’explique fort bien, puisque l’immunité subséquente résulte de l’évolution imparfaite d’une maladie semblable à celle que l’on veut prévenir. Moins le virus sera atténué, plus grande sera la préservation et plus grande aussi sera la chance de voir évoluer une maladie mortelle. Il ne sei'ait évité que si l’on pouvait à coup sûr atténuer uniformément toutes les parcelles du virus et si l’on pouvait pz'oportionner l’atténuation au degré de réceptivité et d’impressionnabilité des sujets. Malheureusement nous sommes loin de ce degré de perfection, car si l’on assimile l’organisme des animaux à un milieu de culture, il présente, par le fait même de la nutrition, des changements de composition qui tantôt augmenteront, tantôt diminueront sa réceptivité. Or, on conçoit qu’il est impossible, dans l’état actuel de la science, de connaître ces changements.
« Puisqu’il faut se résigner à prendre la méthode avec ses Suppl. — I.
imperfections, voyons exactement l’importance des dangers auxquels elle expose.
« Nous avons fait sur ce point une enquête minutieuse. Nous avons prié tous les vétérinaires français et suisses qui ont pratiqué des inoculations du mois d’octobre 1883 au mois de mai 1884 et pendant 1885, de vouloir bien nous communiquer le chiffre des animaux qu’ils avaient vaccinés et le nombre des cas de mort qu’ils pouvaient imputer à l’inoculation. Le plus grand nombre ont répondu à notre appel et nous sommes heureux de les en remercier.
« Or, sur 5.825 animaux inoculés par des vétérinaires français, on a observé 8 cas de mort, et sur 23 682 animaux inoculés par des vétérinaires suisses en 1884, on a signalé 13 cas de mort.
« D où il résulte que, pendant la campagne 1883-1884, la mortalité, suite de l’inoculation contre le charbon symptomatique, a été :
« En France, de 1,50 p. 1.000;
« En Suisse, de 0,54 p. 1.000.
« Si l’on totalise les nombres de vaccinés et les chiffres de la mortalité, sans distinction de pays, on arrive à la moyenne de 1,02 p. 1.000.
« Il faut ajouter que les accidents mortels se montrent avec une irrégularité que l’on s’explique difficilement jusqu’à ce jour. Tel vétérinaire vaccine 1000 à 1.2 )0 bêtes sans observer 1 cas de mort, tel autre inocule une dizaine d’animaux et eni perd 2 ou 3.
« Les moindres détails qui accompagnent les inoculationsdevraient donc être notés avec le plus grand soin par les vaccinateurs, des renseignements très précis devraient être recueillis sur l’âge, le régime, le sexe des animaux, la température, etc., afin que les conditions dans lesquelles se produisent ces accidents puissent être déterminées et conséquemment évitées. »
Actuellement les perfectionnements apportés dans la préparation des vaccins et dans le manuel opératoire rendent cette opération tout à fait inoffensive : aussi ne saurait-on trop la. recommander.
Police sanitaire.
Les mesures de police sanitaire applicables à la fièvre charbonneuse et au charbon symptomatique sont prescrites:
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par le décret du 28 juillet 1888 et l’arrêté ministériel rendu à la même date, pour l’exécution du décret précité.
Article premier. — Dans le cas de charbon (sang de rate, fièvre charbonneuse, ou de charbon symptomatique, le préfet prend un arrêté pour mettre sous la surveillance du vétérinaire sanitaire les animaux parmi lesquels la maladie a été constatée, ainsi que les locaux : cours, enclos, herbages et pâtures où ils se trouvent.
Art. 2. — La surveillance cesse quinze jours après la disparition du dernier cas de maladie.
Art. 3. — Aussitôt qu’un animal est reconnu malade il est isolé et mis à l’attache.
Art. 4. — Le maire prescrit d’urgence les mesures suivantes, dont il surveille l'exécution :
1° Destruction des cadavres en totalité, ou enfouissement dans les conditions prescrites par l’article 4 du décret du 22 juin 1882, après que la peau a été tailladée ;
2° Destruction avec les cadavres, des parties de litière, de fourrages, etc., qui ont été souillées par les animaux malades.
3° Désinfection des locaux et tous emplacements où ont séjourné les animaux malades, ainsi que des objets qu’ils ont pu souiller.
Art. 5. — Il est interdit de hâter, par effusion de sang, la mort des animaux malades.
Art. 6. — Pendant toute la durée de la surveillance, les animaux sains qui ont été exposés à la contagion, ne peuvent êlre vendus que pour la boucherie.
Dans ce cas, il est délivré un laissez-passer qui est rapporté au maire dans le délai de cinqjours avec un certificat attestant que les animaux ont été abatius. Ce certificat est délivré par l’agent préposé à la police de l’abattoir ou par l’autorité locale dans les communes où il n’existe pas d’abattoir.
Art. 7. — Il est interdit pendant cette période de surveillance d’introduire dans les troupeaux, bergeries, écuries, pâturages, etc., infectés, de nouveaux animaux des espèces ovine et bovine s’il s’agit du sang de rate ou fièvre charbonneuse, ou de nouveaux animaux de l’espèce bovine s’il s’agit du charbon symptomatique. Exception est faite pour les animaux qui ont été soumis à l’inoculation préventive.
Art. 8. — Les propriétaires qui voudront mettre en œuvre l’inoculation préventive devront en faire préalablement la déclaration au Maire de leur commune. Un certificat du vétérinaire opérateur indiquant la date à laquelle l’inoculation a été terminée, le nombre et l’espèce des animaux inoculés, est remis au Maire immédiatement après l’opération. Le Maire informe simultanément le
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pendant une durée de quinze jours, non compris celui de la dernière opération, aura les animaux inoculés sous sa surveillance, Pendant la durée de cette surveillance il est interdit de se dessaisir des animaux inoculés pour aucune destination.
Art. 21. — La constatation du charbon, sang de rate (fièvre charbonneuse), du charbon symptomatique, de la tuberculose, du rouget ou de la pneumo-entérite infectieuse dans les arrivages par terre ou par mer, entraîne l’abatage des animaux malades. Les animaux qui sont exposés à la contagion sont repoussés après avoir été marqués, à moins que le propriétaire ne consente à ce qu’ils soient sacrifiés sur place pour la boucherie.
Art. 22. — Lorsque le charbon (sang de rate, fièvre charbonneuse), le charbon symptomatique, est constaté sur un champ de foire ou un marché, les animaux malades sont mis en fourrière et séquestrés.
Pendant la durée de la séquestration, le propriétaire peut faire abattre ses animaux malades ; les cadavres sont enfouis ou livrés à l’atelier d’équarrissage. Le transport à l’atelier d’équarrissage a lieu sous la surveillance d’un gardien spécial. Les animaux qui ont été en contact avec les bêtes reconnues malades sont signalés au maire des communes où ils sont envoyés.
Désinfection. — Dans le cas de fièvre charbonneuse, la. désinfection doit être pratiquée d’après les règles de l’article • 24 de l’arrêté ministériel du 12 mai 1883.
Art. 24. — 1° Arrosage à fond des litières, fumiers et déjections avec la dilution d’essence de térébenthine ;
2° Enlèvement des litières et fumiers désinfectés, qui sont déposés dans une fosse spéciale, saupoudrés de chlorure de chaux et recouverts d’une épaisse couche de terre -,
3° Lavage du sol de l’étable ou de la bergerie avec le même liquide, après l’enlèvement des litières et fumiers ;
4° Les cadavres des animaux morts de maladies charbonneuses (1) sont arrosés avec de l’essence de térébenthine ; les orifîcesnaturelS' en sont baignés et l’on prend les précautions nécessaires pour: qu’il ne s’en échappe rien pendant le transport soit à la fosse d'enfouissement, soit à l’atelier d’équarrissage.
Enfouissement. Crémation. — L’article 14 de la loi de 21 juillet 1881 prescrit d’enfouir « avec la peau tailladée » les cadavres ou débris d’animaux morts du charbon ou ayant été abattus comme atteints de ces maladies, et l’article 31 de h i
(1) Ces mots ne s’appliquent qu'à ta fièvre charbonneuse, car pour 1 charbon symptomatique, il faut d’autres désinfectants.
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même loi punit « d’un emprisonnement de deux à six mois et d’une amende de 100 à 1.000 francs, ceux qui, sans permission de l’autorité, auront déterré ou sciemment acheté des cadavres ou débris d’animaux abattus comme atteints de charbon ».
Il est à remarquer toutefois que les dispositions de l’article 14, relatives à l’enfouissement total des cadavres charbonneux, ne seront appliquées qu’autant qu’il ne sera pas possible d’envoyer les dits cadavres « à un atelier d’équarrissage régulièrement autorisé», car les procédés mis en usage dans les établissements de cetlenature détruisent plussùrement la virulence que l’enfouissement, touten transformant en produits industriels des matières qui pourraient servir de véhicule à la contagion. M. Nocard a cependant recueilli des faits de contagion du charbon par l'épandage d’engrais composés de sang desséché ou de raclure de peaux provenant d’animaux charbonneux. Donc, l’utilisation des débris pour l’équarrissage ne doit être tolérée qu’autant qu’ils seront soumis à une coction complète ou bien mélangés avec des agents chimiques (acides ou solutions métalliques concentrées) qui détruisent sûrement la virulence.
Lorsque les circonstances ne permettent pas de livrer à l’équarrisseur les cadavres charbonneux, il faut les enfouir à une profondeur de 1 m. 50 au moins et, pour prévenir les émanations qui se dégagent des cadavres, on a conseillé de les recouvrir de chaux vive ou de plâtre coaltaré, ou bien de mélanger à la terre des fosses d’autres substances vermicides comme le sulfure de carbone, par exemple, ou mieux l’essence de térébenthine, s’il s’agit du charbon bactéridien, et les solutions de sublimé, de sulfate de cuivre ou d’acide phénique, si l’on a affaire au charbon bactérien.
Mais « la démonstration étant faite de l’existence de spores des bactéridies au-dessus des fosses d’enfouissement et de l’aptitude de la terre à servir de milieu de culture pour les bactéridies, il faudrait substituer à l’enfouissement un procédé de destruction plus complet, plus rapide, comme par exemple, i la crémation des cadavres tout entiers, la peau y comprise, à ; l’aide de fours banaux que l’on pourrait construire et entretenir à frais communs dans les pays où le charbon sévit, et assez rapprochés les uns des autres pour que le trajet entre eux et les fermes ne constitue pas un trop long parcours. De préférence, on pourrrait utiliser pour cet usage les fours am-
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bulants proposés par M. le Dr Kuborn et Jacques, ingénieur civil » (1). Cet appareil a été employé avec un plein succès en Allemagne pour incinérer les cadavres provenant d’animaux atteints de la peste bovine.
Il présente les avantages suivants : incinération complète, combustion parfaite des gaz et des miasmes ; fonctionnement facile et régulier de l’appareil; construction et installation simples; frais peu élevés.
« La crémation conviendrait surtout pour les cas où le nombre des cadavres est si considérable que leur enfouissement peut devenir pour la localité une condition d’infection qui se perpétue indéfiniment (2). »
Agents désinfectants. — Les recherches de Davaine, de Pasteur et celles de MM. Arloing, Cornevin et Thomas nous ont fait connaître le degré d’activité antivirulente des agents désinfectants, soit à l’égard de la bactéridie charbonneuse, soit en ce qui concerne le microbe bactérien.
Ces recherches nous montrent la très grande vitalité des germes du charbon et la nécessité d’employer des désinfectants très énergiques pour éteindre les foyers de cette maladie.
Il est à remarquer que certains agents qui ont été recommandés pour la destruction de la bactéridie charbonneuse, l’essence de térébenthine notamment, n’ont pas d’efücaeité contre la bactérie du charbon symptomatique. Il en serait de même du chlore, d’après d’anciennes expériences de Renault. Or les vapeurs chlorées détruisent le virus frais du charbon symptomatique. L’acide sulfureux, que Ton a quelque tendance à considérer comme le meilleur désinfectant dans tous les cas, est sans action sur le microbe du charbon bactérien. L’acide tannique, la chaux vive ne détruisent pas non plus le microbe dont il s’agit. Le sulfate de fer, le chlorure de manganèse, dont l’emploi a été recommandé pour la désinfection des fumiers, « laissent entière la virulence des déhris charbonneux » (3).
Donc, les agents désinfectants qu’il convient d’employer varient suivant que l’on a affaire au charbon bactéridien ou au charbon bactérien. Toutefois, on devine que, dans l’un et l’autre cas, il conviendra de commencer la désinfection par l’enlèvement des litières, des fumiers, le lavage à grande eau,
(1) H. Bouley. Recueil, de médecine vétérinaire , 1879, p. 1034.
(2) Ibid., 1880, p. Il 64.
(3) Journal de Médecine vétérinaire et de Zootechnie, 1882, p. 286.
CHARBON
, et spécialement à l’eau bouillante, du sol, des murs, etc., c’est, i. à-dire par les opérations préliminaires applicables à toute désinfection. Cependant lorsqu’il s’agit du charbon, le sol de : l’étable doit être l'objet d’une attention toute particulière, surtout lorsqu’il est composé de matériaux très perméables, qui sont imprégnés et même infiltrés à une certaine profondeur par les matières excrémentitielles, par le sang que les animaux charbonneux expulsent au moment de la mort par la bouche, l’anus et les voies urinaires, ou bien que les cadavres laissent échapper à mesure qu’ils se ballonnent, ce qui arrive très promptement dans le cas de charbon.
En pareille circonstance, il convient toujours de défoncer le sol à 25 ou 30 centimètres de profondeur et de remplacer la terre enlevée par de la terre nouvelle, seule ou mélangée de plâtre coaltaré.
Il faut maintenant examiner les agents désinfectants qu’il convient d’employer soit pour le charbon bactéridien, soit pour le charbon bactérien.
1° Désinfectants à employer pour la fièvre charbonneuse (charbon bactéridien). — L’iode, les acides sulfurique, nitrique et chlorhydrique, le permanganate de potasse, la liqueur de Labarraque, l’acide phénique, tels sont, classés suivant, leur activité, d’après Davaine, les désinfectants qui détruisent la bactéridie charbonneuse. De plus, suivant les recherches de Pasteur, l’essence de térébenthine tue la bactéridie charbonneuse et ses spores ; donc il convient de considérer cette substance comme le désinfectant spécifique du charbon.
Bien que des recherches n’aient pas encore été faites en vue de déterminer l’action désinfectante de la chaux vive et de certains sels métalliques, on recommande cependant ces matières pour la désinfection des fumiers charbonneux. Ainsi, les solutions de sulfate de cuivre, de sulfate de fer, de chlorure de zinc, de nitro-sulfate de zinc, sont conseillées pour cet usage. L’arrosement des fumiers et déblais de l’étable avec de l’acide sulfurique étendu d’eau dans la proportion de 10 p. 100 est un moyen économique et sûr. Après leur désinfection, les fumiers doivent être laissés en tas isolés ou enfouis en terre, en ayant soin de creuser les fosses destinées à les recevoir dans des endroits où des animaux ne puissent pas pacager.
Le sol, les murs de l’étable, les râteliers, les mangeoires, doivent être badigeonnés avec l’essence de térébenthine.
CHARBON
2° Désinfectants à employer pour le charbon symptomatique . — Les recherches de MM. Arloing, Cornevin et Thomas démontrent que les solutions de sublimé corrosif au 1/5000, de nitrate d'argentau 1/1000, d’acide phénique au 1/200, de sulfate de cuivre au 1/5 et d’autres encore, détruisent le virus du charbon symptomatique. La solution de permanganate de potasse au 1/20, 1 acide oxalique en solation saturée, qui agissent sur le virus frais, n’exercent aucune action sur le virus desséché ; tandis que les solutions précédentes, de même que les acides minéraux (borique, azotique, sulfurique, chlorhydrique) agissent dans l’un et l’autre cas. MM. Arluing, Cornevin et Thomas ont établi, parleurs recherches expérimentales, que la résistance du virus desséché est beaucoup plus considérable que celle du contage frais ; toute substance capable de détruire l’activité du premier anéantit celle du second, tandis quel’inverse n’est pas vrai.
« La destruction du virus frais répandu sur le sol ou dans les étables peut se faire aisément ; on a le choix entre plusieurs agents, et notamment entre les acides phénique, salicylique, borique, le sulfate de cuivre, le sublimé et les vapeurs de chlore, de brome et même de sulfure de carbone. Celle du virus desséché présente plus de difficultés : dans ce cas, les vapeurs brômées offrent seules une sécurité complète. Pour les lavages, si le sublimé n’était pas un agent aussi dangereux à manier, nous n’hésiterions pas à lui accorder la préférence, mais son activité nous fait un devoir de recommander, si l’on en fait usage, de surveiller avec grand soin l’écoulement des eaux qui le tiennent en solution afin qu’elles ne puissent amener d’intoxication. Les dissolutions de sulfate de cuivre, d’acide phénique à 2/100 ou d’acide salicylique au 1 /1000 nous paraissent devoir être utilisées. » Telles sont les principales données qui résultent des recherches de MM. Arloing et Cornevin sur la destruction du microbe du charbon symptomatique. Ajoutons que, quand la désinfection a été pratiquée consciencieusement, rieu ne s’oppose à ce qu’on introduise des animaux dans l’étable quatre ou cinq jours après.
F. Peuch.
