‹ Sur la concentration et la purification de la toxine et du toxoïde formé tétaniques par le sulfate de soude et la chromatographieChapitre 3 sur 7 · NUS · texte numérisé non relu

NUS

Tableau 6. Attraction d’eau pendant la dialyse.

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FPE nl 1053 1038 1021 U. F./cc. 1b4 18 25

mgr. N./cc. 4,9 5.46 4,83 Ras 10 000 20 000 10000

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dialyse dialyse dialyse 20% | 54 or NN SR EN AT 12

21-250, | - 76 E33 104 A 43 des 26—300h | 62 +56 AE es 78 | +12 SE 63 RUN ER PR Ne + 50 36—40% | 63 + 24 106 | +25 | 103 +50 41—45%0 | 62 + 22 205 | +45 93 + 35 PPT TR 182 | +a7 | 47 + 49 51—550% | 57 +38 | 185 | +62 86 + 88 el Qt 54 + 82 Æ Æ = —

Les mousses recueillies à basse salure sont moins hygroscopiques que celles obtenues avec de fortes concentrations salines. Tandis que dans les expériences 2 et 5, nous ne notons pas de courbe régulière, l’essai No. 4 accuse une courbe régulièrement ascendante, où l’attraction de l’eau est en fonction directe du taux de sel. Les pourcentages sont calculés par rapport au volume initial du concentré; ils correspondent au quotient :

(volume avant la dialyse) — (volume après dialyse) (volume avant la dialyse)

Dans le tableau suivant, nous résumons les titrages de l’azo-

te et de l’antigène :

SG £8°r ££°£08 8T 97°S Fc 88c ET 06°F os:

l V an + DE TE & ë | 0G ST‘ 0/5 0995 OL t0‘9 Hi 0 v9*E è (ra 6I'T 0/9 SS—TS VI LO'£ O‘SSTT & TS ë 08 YS'T 0/9 0S—9ÿ OT 80°£ 0'S8c yT 66'£ ê | (ra 8c'L 0/0 SY—LY | £& 0£°9 SARA SRE : 0‘Fca S& 09°S 0/0 07— 9€ 09 £6'9 £6'£T OLG 9ÿ°9 ZT T9 06 09°S 0/5 SE—TE SIT L9*°S L9*9 OLG OV'T SO‘£T (22 yL'S 0/0 06 —98 O0T ; 86‘0 98€ 06€ &LT Fs'8 00S Lay 0/0 S&— LG | IT Sg'0 EVE | 85 v8‘0 é ; 08 LL‘ 0/0 08 2} j'A 29/N ‘18 ‘X'A/N 4 | 99/"T'(] 29/N "ISUr "TA/N 4 2/)"A'A PRINT) e 91JU99U07) S 17 & Les

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Chaque anatoxine létanique possède son individualité physico-chimique : taux variable d’azote, taux variable d’antigène, comportement variable à l’égard du sulfate de soude. Cependant, de l’ensemble du tableau 7, il se dégage quelques principes généraux, qui sont mieux marqués encore dans le résumé suivant (tableau 8). Jusqu'à 20 % de salure, l’antigène qui précipite entraîne encore beaucoup de substances protéiniques; l’optimum se situe, pour les 3 anatoxines tétaniques, entre 21 et 25 % de salure. Les concentrés recueillis lorsqu’on rajoute du sel entraînent proportionnellement plus de protéines que d’antigène.

Tableau 8. Index C de Nebntntion et Index P de purification :

Expérience No 2 4 5 | Concentré à Index C Le P|Index C| Index P | Index C| Index à 20 %/ Le = 3,2 | 20,9 0,4 6,7 21—25 % [29,4 1! | 33,8 || | 16,1 || | 78,6 || 4,0 | |19,7 Ï 26— 30 %/o 50 | on | ar | 45 |46]| 3,9 31—35 0/0 ET 5,5 460 MAIS ON 127 2,4 1,7 IEP 0/0 ee 1,5 1,3 2 re 0,9 | 0,7 41— 45 ” Re. 0,8 ; 1,2 0,6 1,0 46—50 CRIER 0,1 | 0,3 0,6 0,9 51—55 °/o RE mit ve | 0,4 0,3

pot — maxima

L’index C n’est pas un critère absolu : il est l’image de la concentration obtenue pour un échantillon déterminé; mais sa valeur dépend en grande partie de la quantité de liquide ajoutée à la mousse avant la dialyse, puis de l’eau attirée dans le sac de cellophane pendant la dialyse. Ainsi, en reprenant une mousse dans 200 ce., au lieu de 100 cc. d’eau, on obtient un

index C 2 fois plus faible. L’index P par contre représente une valeur absolue, traduisant l'intensité de la purification; pour une même anatoxine et un même taux de salure, que le concentré soit fortement étendu ou non, il reste constant. Son optimum reste régulièrement accroché aux échantillons recueillis entre 21 et 25% de salure. L’anatoxine de l’expérience No 4 par exemple accuse un index optimum de 78,6, c’est-à-dire que l’'U. F. du concentré à 21-25 % de sulfate de soude contient 78,6 fois moins d’azote que l’'U. F. du produit original : on a done obtenu une élimination de

À partir de 35—40 % de salure, les concentrés contiennent moins d’U. F. et autant, voire même plus d’azote que le toxoïde tétanique original, ce qui signifie qu’à partir de ce taux salin, il n’y a plus ni concentration ni purification.

Qu’en est-il maintenant des pertes au cours de l’opération ?

100 — 98,741/o de l’azote.

Tableau 9. Récupération des U.F.

(calculées selon le même mode que pour le tableau 5)

Expérience No 2 | 4 | 5 DEC RS de M A |

20 %/0 | Que 1,4 0,1

< 26—30%/ | Ke 25,9 9,9 4,0

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