FAT

critiquée; d’autres explications de l’immunité sont formulées. Tous les savants reconnaissent d’ailleurs la valeur des arguments tirés de l'étude du savant russe sur la grenouille,

Aux premières critiques contre sa théorie, M. Metchnikoff (39) répond en mettant bien en évidence que « l'humeur » de la grenouille, seule, n’a pas d’action dans la destruction des bactéridies L'humeur aqueuse de l'œil est un milieu pauvre en leucocytes; non seulement la bactéridie n’y est pas détruite, mais ses spores y germent en longs articles; 18 à 24 heures après l'inoculation dans la chambre antérieure de l'œil, les leucocytes commencent à affluer, englobent et digèrent les microbes.

Mais l'humeur aqueuse peut avoir une composition différente du plasma lymphatique. Aussi M. Metchnikoff montre-t-il que les spores charbonneuses germent dans un sac préparé avec la moelle du Phragmites communis, et mis sous la peau du dos de la grenouille. Le plasma lymphatique pénètre dans le sac et une belle végétation bactéridienne se produit. Au contraire, les spores portées directement dans le sac dorsal, sans être protégées, sont englobées ou bien à l’état de spores, ou bien à l’état de bâtonnets très courts. Les leucocytes les englobent sans leur laisser le temps de donner de longs articles.

Ea question semble donc résolue sans conteste, et M. Hueppe, convaincu par l'évidence des faits, voit là l'experimentum crucis

de la théorie phagocytaire de l’immunité.

M. Lubarsh (30), dans un 1° mémoire, conclut dans le même sens, en s'attachant surtout à ce fait que les bacilles, avant de mourir, perdent leur virulence. Il prétend même que l'alté-

nuation a lieu pour les bacilles extracellulaires seulement. En

effet, quand on fait une injection de microbes par Îa veine

abdominale, l’englobement par les phagocytes est bientôt

complet, et il n’y a pas atténuation. En cette même année 1888, l'explication donnée par

M. Metchnikoff de l'immunité naturelle de la grenouille pour le

charbon, va être combattue à la fois dans le laboratoire de M. Baumgarten et dans celui de M. Flügge, par les partisans de la doctrine de l'assimilation et par ceux de la RroRtEe baciéricide des humeurs.

- À Kôünigsberg, c’est M. Petruschky (51) qui cherche à réfuter

les expériences de M. Metchnikoff, Il inocule des cultures de

charbon dans le sac dorsal et conclut de ses observations que : 1° Tous les microbes ne sont pas englobés ;

20 Des phénomènes de dégénérescence se produisent de préférence chez les microbes libres ;

3° La lymphe de la grenouille, alors que tous les microbes ne sont pas englobés, ne tue plus É souris.

Cette atténuation est d’ailleurs passagère, car des cultures sur gélose donnent des colonies charbonneuses virulentes. M. Petruschky trouve à côté de ses colonies de charbon des colonies d’autres microbes ; et c’est sans doute à ces impuretés qu'est dû l’insuccès de ses inoculations de Iymphe. Il revient aussi à l’idée de M. Koch que les leucocytes constituent un milieu favorable pour la bactéridie charbonneuse.

M. Petruschkvy reprend l'expérience des tubes de moelle de roseau sous une autre forme ; il emploie des boudins degrenouille, séchés et débités en petits tubes bien clos; il les remplit de culture de charbon en milieu liquide. Il trouve seulement une

petite quantité de bacilles dégénérés ; au bout de 4 jours, ces :

bacilles ont encore conservé leur virulence. Il explique cette conservation de la virulence par le liquide de culture qui est resté, et les phénomènes de dégénérescence par le plasma lymphatique qui a pénétré.

Enfin, M. Petruschky examine l’action d'une température élevée sur les grenouilles inoculées avec des bacilles ou des spores. Dans Le 1* cas, la mort survient dès 25 ou 30°; dans le second à 35-37° seulement. Il y a phagocytose au point d'inoculation, mais plus faible que chez les grenouilles à 15-200.

Ceci s'explique, dit M. Petraschky. par le fait que, dans toutes les cultures, il y a des microbes moins vivants que les autres:

ceux-là ne supportent pas la transplantation sur un autre milieu. |

Chez les grenouilles chauffées, cela n'est vrai que pour une petite quantité de microbes ; pour les grenouilles froides cela

est vrai pour tous. Ainsi io M. Petruschky croit à une mort.

des microbes à 15-20° par suite du mauvais milieu nutritif. Pour expliquer la croissance des bactéridies chez les grenouilles chauffées, il donne à choisir entre deux hypothèses :

1° Celle de l'assimilation, d’après laquelle Le corps des gre-

nouilles est un milieu nutritif suffisant pour les bacilles et les

spores à 28-30°, pour les « Keimlingen der Sporen » seulement à 35-370 ;

2° Celle du pouvoir bactéricide (Gifttheorie) : une substance bactéricide existerait chez la grenouille, mais elle n'empêcherait pas le développement du charbon à 28-300. $

Pourquoi? C’est ce que M. Petruschky ne dit pas ; on ne voit pas non plus pourquoi il a des préférences pour la Gifttheorie.

Ces préférences sont plus accentuées dans un second mémoire (52) : ce serait la présence de l'acide carbonique qui empêcherait la croissance des bactéries ; à 30°, la concentration de cet acide étant plus faible, le développement pourrait avoir lieu.

Ces travaux, exécutés sous la direction de M. Baumgarten (1), sont approuvés par le professeur de Künigsberg qui, lui, penche pour la théorie de assimilation.

. Dans le laboratoire de M. Flügge, à Breslau, de nombreux élèves travaillent à démolir les diverses théories de l’immunité, aussi bien celle de l'épuisement d’une substance utile, que celle dé l’adjonction d’une substance nuisible, et autant ces théories chimiques que la théorie cellulaire de la phagocytose.

Nous ne retiendrons de ces travaux que celui de M. Bitter (3) consacré uniquement à la critique de la théorie de M. Metchnikoff, et celui de M. Nuttall.

M. Nuttali (48-49) reprend les expériences de M. Metchnikoff sur les grenouilles. Comme lui, il inocule desmorceaux d’organes charbonneux dans le sac lymphatique dorsal.

Il ue nie pas l'importance de la phagocytose au point d'inoculation; mais il observe qu'il y a toujours autant de microbes extracellulaires que d’intracellulaires ; que la dégénérescence va aussi vite pour les uns que pour les autres ; qu’il ÿ a toujours parallélisme entre la rapidité d'apparition des phénomènes de dégénérescence des bactéridies et la rapidité d’englobement par les leucocytes. Et de cet ensemble d'observations, il conclut que les

bacilles pris par les leucocytes sont morts ; le plasma lympha-

tique aurait donc détruit les bactéridies et les leucocytes seraient

de simples nécrophages.

Pourtant, certains faits signalés par M. Nuttall semblent plaider contre sa manière de voir.

Ainsi, après avoir opéré à 10-16, il fait des expériences à

23° et il constate que les microbes poussent un peu. Malgré cela, la proportion des microbes initracellulaires aux extracellulaires est la même. Il semble donc, comme le fait remarquer M. Duclaux (9), que, puisque l’action des leucocytes augmente suivant les besoins, ils servent à quelque chose.

Contrairement à l'opinion de ses prédécesseurs, M. Nuttall déclare qu’il n’y a pas atténuation de la bactéridie dans le corps de la grenouille. Aux températures basses de ses premières expériences, la lymphe, extraite 17 jours après l’inoculation, tue la souris sans retard sur le témoin.

À haute température, les expériences paraissent moins nettes; à 25-309, la majorité des grenouilles succombent déjà, avec une faible phagocytose. À 35-379, les grenouilles n'ont jamais vécu plus de 14 heures.

Après avoir démoli, M. Nuttall cherche à reconstruire. Il explique l’immunité naturelle de la grenouille pour le charbon, par le pouvoir bactéricide des humeurs de cet animal. C’est le moment où la théorie de M. Fodor commence à être en honneur, et M. Nuttall cherche à l’appuyer par un certain nombre de faits tirés de la façon dont les bactéridies se comportent dans des gouttes de sang d'animaux variés.

* L'année 1888 ne se termine pas sans une réfutation des faits avancés par MM. Petruschky et Nuttall. M. Metchnikoff reprend les expériences des deux savants allemands. Il constate que la virulence de la bactéridie se conserve beaucoup plus longtemps dans les boyaux employés par M. Petruschky qu’en dehors de ces boyaux. Quant aux bacilles dégénérés, il est probable que M. Petruschky les introduisait lui-même dans le boyau, puisqu'il se servait d’une culture en bouillon où ces formes ne sont pas rares.

M. Metchnikoff (40), en opérant avec du sang d’an cobaye venant de succomber au charbon, ne constate pas de formes d’involution, même au sixième jour. En introduisant des spores dans le beyau, il constate aussi que ces spores donnent un beau développement de charbon, et, au bout de quelques jours, apparaissent des formes dégénérées, comme il s’en produittoujours dans les meilleurs milieux de culture. Enfin, M. Metchnikoff,

pour répondre à cette objection possible que les diastases bacté-

ricides du plasma peuvent ne pas traverser les parois du boyau,

RÉSISTANCE DES VERTÉBRÉS INFÉRIEURS. ï

emploie du papier buvard plié; il y met des spores. Le plasma arrive au contact des spores avant les leucocytes ; et les résultats observés concordent avec ceux des boyaux.

Dans son premier travail, M. Metchnikof® avait d’ailleurs indiqué que les spores, mises directement sous la peau du dos, sont englobées à l’état de spores, ou de bä&lonnets courts. C'était admettre implicitement que le plasma n'empêche pas leur croissance.

M. Trapeznikoff (59), plus tard, reprend la question avec beaucoup de soin, et montre que, sauf à des températures basses comme 12-149, 1l y a bien croissance des spores en bâtonnets dans le plasma lymphatique ; mais que cette croissance est vite interrompue, les courts bâtonnets formés étant englobés par les leucocytes.

Le charbon pousse donc bien dans le liquide de la lymphe; c'ést un point hors de conteste, et il est-étonnant que M. Lubarsh, dans son dernier mémoire (36), nie le fait et en tire une objection contre l'explication de l'immunité de la grenouille par là phagocytose.

Ilest un autre point qui paraît également bien établi : c’est que les leucocytes sont pour quelque chose dans la destruction des bactéries.

Leur rôle est-il important? C'est sur ce point que porte la réponse de M. Metchnikoff à M. Nutiall. La proportion des microbes englobés aux microbes libres n’augmente pas avec le temps, dit M. Nuttall. Mais les nombres qu’il donne avec un si grand cachet d’exactitude sont entachés d’erreur pour deux raisons :

1° Les rates charbonneuses sont difficilement pénétrables par .les bactéridies ;

2° Les préparations de M. Nuttall sont mal faites : ses figures prouvent qu'il a observé des leucocytes en mauvais état ; beaucoup ont dû se briser dans les manipulations, surtout ceux bourrés de microbes, et les bactéridies qu’ils contenaient sont comptées comme libres.

En somme, dit M. Metchnikoff (et plus tard M. Lubarsh (35) appuiera cette opinion), il est fort difficile d’avoir une idée des microbes englobés et libres. — Tout ce que M. Metchnikoff affirme, c'est que les leucocytes ont un rôle important dans la

destruction des-microbes; et c’est la seule partie de l'organisme pour lequel ce rôle soit incontestable.

M. Nuttall prétend aussi que l'humeur aqueuse à des propriétés bactéricides en goutte pendante. M. Metchnikoff montre qu’il n’en est rien chez la grenouille et les animaux immunisés.

Nous ne reviendrons pas sur la critique que M. Metchnikoff (42) a faite du mémoire de M. Fahrenholtz (1889).

Plus intéressant est le travail de M. Lubarsh (32) de la même année, dont les résullats ont été repris et développés dans son long mémoire de 1891.

Il est d'accord avec M. Metchnikoff sur la présence.et l’importance de la phagocytose chez les grenouilles inoculées du charbon.

Mais il est convaincu que chez ces grenouilles et chez les torpilles, où la phagocytose est active, elle ne suffit pas à elle seule à expliquer l’immunité. Il y a toujours, dit-il, un reste*de bacilles charbonneux extracellulaires.

Bien plus, les leucocytes de la grenouille ne réagissent pas contre les bacilles de la septicémie des souris ; et pourtant la grenouille a l'immunité contre cette maladie ; les souris, qui ne l'ont pas, montrent à la mort de nombreux bacilles dans leurs cellules blanches.

Les ascidies et les crustacés résistent au charbon et présentent pourtant une bien faible phagocytose. De tout cela résulte clairement, pour M. Lubarsh, que d'autres facteurs que la phagocytose doivent entrer en ligne de compte dans le mécanisme de l'immunité..

Toutes ces prétendues exceplions contre la phagocytose seront détruites peu à peu. M. Kowalewsky (28) a montré en

effet que, pour les invertébrés, et en particulier les crustäcés. visés par M. Lubarsh, il y a bien résistance phagocytaire, mais

elle se localise dans certains organes que l’auteur allemand n’a pas observés.

La théorie bactéricide des humeurs, vite battue en brèche, a un moment fait place à une théorie atténuante des humeurs.

Naturellement on a cherché à expliquer l’immunité des grenouilles par cette théorie. Certains faits avancés par les auteurs y prêtaient d’ailleurs : MM. Metchnikoff (38), Lubarsh (30), Petruschky (51), Fischel (12), s’accordaient pour affirmer que les

bacilles charbonneux s’atténuent assez rapidement dans le corps de la grenouille. Il n’y avait plus qu’à prouver que cette atténuation est due à l'humeur de la grenouille ‘. M. Sanarelli (57) s'attache uniquement à démontrer ce fait, et, en expérimentant surtout in vitro, il établit que la lymphe, débarrassée de ses leucocytes, enlève toute virulence aux bacilles charbonneux en 1 à 2 jours, et aux spores en 2 à 3 jours. Mais il ne cherche pas à faire concorder ces faits soigneusement observés avec ce qui se passe chez l’animal vivant pour la bactéridie au contact de la lymphe in vivo. Nous verrons que les choses se passent différemment.

En tout cas, M. Sanarelli déclare que l’aitlénuation observée est passagère. En passant de la lymphe sur gélose, on a des colonies qui ont recouvré la virulence primitive.

MM. Ogata et Jasuhara (50) arrivent aux mêmes résultats que M. Sanarelli. — Ils prétendent même que la lymphe de grenouille inoculée à des souris, en même temps que le charbon, ou à un moment variant entre 72 heures avant et 5 heures après, empêche ces animaux de contracter la maladie mortelle. M. Roudenko (55) a montré l’inexactitude de ces résultats.

Jusqu'ici, nous avons assisté à la lutte entre ceux qui veulent voir dans les cellules de l’organisme le siège de l’immunité, et ceux qui le recherchent dans les humeurs du corps.

Depuis 2 ans, les humoristes ont fait des concessions à leurs adversaires, et, tout en maintenant le rôle bactéricide des humeurs, ils admettent que les substances bactéricides, les alexines, sont secrétées par les leucocytes. M. Hankin (16) s’est fait l’apôtre de cette nouvelle théorie, et a voulu l’appuyer sur des ‘faits solides en déterminant quels étaient les leucocytes producteurs d’alexines, les alexocytes. — D'expériences com-

pliquées et qui ne paraissent avoir donné de résultats que chez

le lapin, il conclut que ce sont les granulations éosinophiles (en réalité il s’agit de granulations pseudo-éosinophiles, comme M. Metchnikoff (43) l’a fait remarquer, et comme M. Hankin (17) lui-même le reconnaît dans un 2° mémoire) qui constituent

l’alexine. Ces glandes minuscules sécrètent leur poison dans le

plasma quand il en est besoin.

4. Nous avons déjà cité une preuve indirecte donnée par M. Lubarsh,

Des compatriotes de M. Hankin ont cherché à appliquer la nouvelle théorie au cas de la grenouille. Jusque-là les auteurs ne s'étaient pas préoccupés de la qualité des leucocytes qui apparaissent dans le sac dorsal après l'inoculation. MM. Kanthack et Hardy (23), en appliquant les méthodes d'Ehrlich, ont reconnu qu’une proportion notable des globules blancs de l’exsudat était constituée par de vrais éosinophiles, et ils ont cherché à établir que :

1° Les microbes sont d’abord entourés par une sorte de plasmodium d’éosinophiles; ils sont tués par le contenu des glandules éosinophiles secrété en dehors des cellules;

20 Postérieurement à cette mort, les microbes sont englobés par les leucocytes ordinaires.

C'est une façon toute nouvelle d'expliquer l’immunité de la grenouille contre les invasions microbiennes.

Les arguments les plus importants que les auteurs anglais émettent en faveur de leur doctrine sont malheureusement tirés en grande partie d'expériences in vitro. Ils prennent une goutte de lymphe et l’ensemencent avec une espèce microbienne, la bactéridie charbonneuse par exemple. La préparationest observée en goutte pendante : ils décrivent des plasmodes de cellules éosinophiles entourant les microbes; puis des plasmodes de cellules hyalines.

Aucun des nombreux savants qui ont étudié la réaction de la grenouille contre la hactéridie charbonneuse n’a ni figuré ni décrit de semblables associations de leucocytes. — MM. Kanthack et Hardy ont dû avoir affaire à des produits artificiels.

Ils parlent bien d'expériences sur l'animal vivant, de charbon inoculé dans le sac lymphatique dorsal, et de lymphe retirée à des heures variables après l'inoculation. Mais de ces expériences ne ressort aucun argument convaincant en faveur de leur suggestive hypothèse. Ils disent, il est vrai, que les premiers leucocytes attirés par les microbes sont uniquement des éosinophiles. Ce fait, à lui seul, ne prouve rien. Dans un nouveau mémoire (24), ces savants cherchent à étendre leurs con-

clusions au mode de réaction d’un grand nombre de mammi-

fères ; mais ils emploient toujours le même genre de preuves. De tout cet ensemble de travaux, dont j'ai cherché à mettre en évidence les faits généraux, il résulte que, pour expliquer : ÿ

l’immunité des grenouilles contre le charbon à la température ordinaire (15-20°), on ne nie plus guère l'intervention des leucocytes.

Je me suis atlaché, dans cette étude, à montrer que cette intervention est une action phagocytaire, au sens que M. Metchnikoff a attaché à ce mot en le créant.

J'ai examiné cette action chez les poissons où les leucocytes intervenant sont d'une seule sorte; puis chez la grenouille où la présence des éosinophiles rend plus complexe l'interprétation des phénomènes.

J'ai vérifié les faits paradoxaux avancés par M. Lubarsh concernant la réaction des grenouilles vis-à-vis de la septicémie des souris.

J'ai cherché à me rendre compte de la façon dont se comporte la bactéridie dans le corps de la grenouille à 35°.

Enfin, j'ai rassemblé quelques documents nouveaux éclairant un peu l'histoire encore si obscure des cellules éosinophiles.