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tions de peptone de 4 p. 100 à 5 p. 100 dans l'eau distillée. On peut obtenir des rendements semblables avec des solutions de peptone de 0,5 à 0,1 p. 100, en additionnant le milieu de substances minérales. Le degré d’hydrolyse des peptones n’a pas d'effet sur la facilité de leur assimilation : nous avons obtenu des accroissements journaliers semblables en présence de peptone Chapoteau, de « peptone pepsique de muscle de bœuf », de « peptone pancréatique très aminée » (Vaillant) ou d’ « éreptone ».

Le racreur aciniré. Evocurion pu pH pes crzrures. — Le pH des milieux de culture a été mesuré par voie colorimétrique (indicateurs de Clark et Lubs). L'expérience montre que l'acidité d'une même culture en milieu liquide est différente à des hauteurs différentes. Pour mesurer le ÿH au niveau où s'effectue la croissance du mycélium, nous procédons de la façon suivante : une pipette efhilée chargée d’une solution indicatrice est introduite jusqu’au fond du tube de culture, puis retirée doucement le long de la paroi, de façon à ce que le liquide indicateur s’en échappe progressivement ; il se forme ainsi une traînée verticale de liquide coloré; quand la diffusion de ce liquide est suffisante, on obtient la gamme entière des valeurs de pH dans toute la hauteur de la colonne liquide. Naturellement, il faut maintenir le tube vertical pendant toutes ces opérations et éviter soigneusement toute cause pouvant provoquer la convexion des différentes couches de la solution.

Les limites du pH de départ des cultures dépendent de la constitution du milieu : de nombreuses substances(par exemple, des sels minéraux) dont l’action ne se fait pas sentir au voisinage de la neutralité exercent un effet inhibiteur sur le développement à des valeurs de pH trop élevées ou trop basses. Dans les meilleurs conditions que nous ayons pu réaliser (en milieux peptonés), les valeurs limites du pH de départ correspondent approximalivement à 4,4 — 4,6 du côté acide et à 8,5 — 8,8 du côté alcalin.

En présence de sels (phosphates, acétates),nousavons observé une élévation de la limite inférieure à pH — 5,5 et un abaissement de limite supérieure à pH— 8,0. Etant donné que le champignon peut modifier dans une lirge mesure le pH du milieu,

re RARE:

l'évaluation du pH initial doit être effectuée au moment même du départ des cultures, au point précis où le mycélium se développe.

En présence de peptones comme seul aliment organique, le pH des cultures (quelle que soit sa valeur initiale) tend d'abord vers la neutralité; puisils'élève, dans les cultures âgées, jusqu'à des valeurs de pH — 7,6 — 7,8. En présence d’un petit nombre d'acides aminés ou d’un amino-acide unique, l'élévation de pIl est plus marquée et peut atteindre des valeurs de 8.2 —8,4. Dans ce dernier cas, l'élévation de pH varie en fonction du rapport C/N de l'amino-acide présent. L’adjonction d’une source de carbone supplémentaire (glycérine) permet au champignon de maintenir le milieu de culture à pH —6,9 — 7,1. Par contre, il suffit d'ajouter au milieu une petite quantité d’un sucre fermentescible, pour que le pH tombe rapidement. Cette chute du pH est plus rapide en présence d'un acide aminé ou d’un sel ammoniacal qu’en présence de peptones. Tant que le milieu n’a pas atteint un pH de 5,5 environ, celte acidification n’a pas de répercussion sur l'accroissement du mycélium. Au delà de ce point, la croissance se ralentit progressivement. Si le pH atteint la valeur limite de pH — 4,4 — 4,6, l'accroissement devient nul; l’acidification s’arrête alors elle aussi. Si à ce moment on alcalinise légèrement le milieu, la culture repart et le pH redescend progressivement jusqu'à la valeur critique de 4,4 — 4,6. L'expérience montre que l'arrêt du développement tient bien à la réaction du milieu et non point à l'épuisement d'une substance alimentaire indispensable. Mais il suffit que le mycélium atteigne dans sa croissance la surface du liquide, pour que les condilions soient tout aussitôt complèlement modifiées : un disque mycélien se forme aussi rapidement que si le milieu était neutre ; en même temps, le pH du milieu remonte. En déposant de toutes petites gouttes de solutions indicatrices à la surface du disque, on s'aperçoit qu'elle présente une réaction neutre ou alcaline (jusqu’à ÿH — 8,0). La physiologie du champignon est donc très différente suivant que le mycélium se développe sous l’eau ou en surface. Il est vraisemblable que l'acidification du milieu résulte d’une fragmentation fermentative des sucres fermentescibles par le mycélium immergé; le mycélium émergé consommerait les acides organiques précé-

dernment formés. Cette hypothèse esl corroborée par le fait que, dans les milieux exempts de sucres fermentescibles, on ne constate point celte forte différence de pH au niveau du disque émergé et dans le liquide sous-jacent (1).

En résumé, en présence d’un sucre fermentescible (et quelle que soit la source d'azote), le mycélium immergé n’est capable que d'une acidification du milieu; en présence d’acides aminés comme source unique de carbone et d'azote, il n’est capable que d’une alcalinisation ; enfin, il est susceptible d'une équilibration bilatérale du pl en présence d'acides aminés et d’une source de carbone indépendante, non fermentescible (comme la glycérine), ou en présence de peptones.