B. — DIGESTION DU SÉRUM DANS LES FILTRATS
4. Sérum cru. — Nous avons utilisé des filtrats sur bougie CHAMBER- LAND F de cultures à l’air libre de Sporogène (cultures de 72 heures), ou d'Histolytique (24 heures). Pour avoir un ferment plus actif, nous avons précipité ces filtrats par 6 volumes d'alcool à 96 degrés, desséché les précipités, enfin repris par l’eau physiologique les précipilés de façon à réaliser une concentration 20 fois plus grande que celle du filtrat initial.
Nous avons ajouté à 3 cc. de ces précipilals 3 ce. de sérum cru, puis nous avons placé les tubes à l’étuve à 37 degrés, après les avoir additionnés d'un centimètre cube de toluène.
Nous avons précipité immédiatement par l'acide trichloracétique bouillant une série de tubes témoins. Nous avons précipité les autres tubes après 4 jours d’étuve. Comme toujours, les précipités étaient jetés sur des filtres tarés, puis pesés.
Digestion du sérum cru par les précipitats.
RE PORN on GE ns Pepe CS Quantité Poids Quantité
DURS employée [des précipités| digérée SpOrOgÈne. ML ST ED ER TD 0 gr. 221 0 gr. 049 “Histolytique . . . . . .| Ogr.252 | Ogr. 243 0 gr. 009
Comme nous le montre ce tableau, les filtrats n’ont pratique ment aucune action sur le sérum cru. Il n'apparait pas d’albumoses dans les liquides qui filtrent, ce qui dénote l'absence de
digestion.
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La concentration en ions H des précipitats était de pH — 7,0. Nous n'avons pas mesuré la protéolyse dans d’autres concentrations, car alors ce n’est plus du sérum naturel que l’on a dans les tubes, mais du sérum dénaturé (par les bases ou par les acides) dont les conditions de protéolyse sont très diffé-
rentes.
ee IE. — DicesTION PAR LES FILTRATS DU SÉRUM COAGULÉ 1. — DIGESTION MACROSCOPIQUE DES CUBES DE SÉRUM COAGULÉ. —
Le Sporogène a une action rapide, dès le premier jour le cube devient transparent sur les bords. La fonte est complèteen une semaine environ.
L’Histolytique attaque difficilement le sérum coagulé. Le cube devient friable, mais ne disparaît jamais complètement.
Le calcium favorise l’action du Sporogène. Le sérum chauffé à 90 ou à 100 degrés est plus facilement attaqué que le sérum chauffé préalablement à 120 degrés. ne
On peut mettre en évidence l'apparition de peptones dans les tubes où l’on remarque une digestion macroscopique.
2. PROTÉOLYSE DU SÉRUM COAGULÉ. — Nous avons pris des filtrats sur
bougie CHamBERLAND F de cultures à l’air libre de Sporogène (72 heures d’étuve) ou d’Histolytique (24 heures). Ces filtrats avaient une concentration pH — 7,0 pour le Sporogène, pi = 6,7 pour l’Histolytique. . À 2 cc. de ces filtrats nous avons ajouté 3 ec. de sérum chauffé. Comme témoins, nous avons utilisé 2 ec. de filtrats bouillis additionnés de 3 ec. de sérum chauffé. Nous avons fait deux séries d'expériences, avec du sérum chauffé 30 minutes à 60 degrés et avec du sérum chauffé 10 minutes à 100 degrés. Nous avons placé les tubes à l’étuve à 37 degrés après addition de toluène pour éviter les contaminations. Au bout de 6 jours, nous avons dosé les acides aminés dans les tubes par la méthode de SŒRENSEN. ;
Nosrésultats ontété négatifs, En effet, constamment, les tubes témoins ont présenté une proportion d’azote titrable au formol plus forte que celle des tubes en expérience. Nous en concluons
que les filtrats ne donnent pas d’acides aminés dans leur attaque du sérum coagulé.
Résumé. — Le sérum à l’état cru ou coagulé est attaqué par les deux microbes, qui poussent d'emblée la désintégration jusqu'aux acides aminés.
Les filtrats ne digèrent pas le sérum cru, et donnent seulement des peptones sur le sérum coagulé.
Le Sporogène paraît dans tous les cas plus actif que l'Histolytique.
Les microbes et leurs filtrats attaquent plus facilement le sérum chauffé à 100 degrés que le sérum coagulé à 60 degrés ou que le sérum coagulé à 120 degrés.