I. — ACTION DU SÉRUM NORMAL
A l’état naturel, l’albumine est difficilement attaquée par les ferments protéolytiques, et sa présence entrave l’action de ces ferments sur l'albumine coagulée. On traduit ce fait en disant que l’albumine naturelle renferme un antiferment.
Le sérum, l’ovalbunrine, la gélatine même, jouissent de cette propriété. Le sérum, par exemple, contient une antipepsine, une antitrypsine, une antipapaïne. Les protéases microbiennes sont également sensibles à cette action empêchante.
Nous avons recherché l'action du sérum normal sur les filtrats du Sporogène et de l’Histolytique. Nous avons étudié cette action sur la gélatinase des filtrats, sur leur caséase, enfin sur leur trypsine.
Â. ACTION SUR LA GÉLATINASE. — Par une expérience préliminaire, nous avons déterminé la dose de filtrat qui digérait 2 ce. de gélatine à 10 0/0 en 30 minutes à 37 degrés. Ces doses étaient, respectivement, 0 cc. 2 pour l'Histolytique, et 1 cc. pour le Sporogène.
Nous avons préparé des tubes contenant 2 cc. de gélatine et ces doses types de filtrats. Nous leur avons ajouté des doses variables de sérum de cheval conservé à la glacière, et nous avons ramené tous les tubes à un volume constant avec de l’eau physiologique neutre.
Nous avons examiné les tubes après un séjour de 30 minutes à 31 degrés.
ENST
Résultats. — La gélatinase du Sporogène est déjà empêchée par 0 ce. 02 de sérum (digestion retardée), elle est complètement inhibée par 0 cc. 05 (aucun indice de digestion).
Au contraire, sur la gélatinase de l'Histolytique, les doses faibles, 0 ce. 01, comme les doses très fortes : 2 cc. de sérum, se sont montrées sans action.
Nous avons essayé de favoriser l’action du sérum sur le ferment de l'Histolytique par un contact préalable plus ou moins prolongé du sérum et du filtrat.
Nous avons répété l’expérience ci-dessus, en prenant 0 cc. 2 de filtrat d'Histolytique et 0 cc. 1 de sérum normal, comme doses invariables. Nous avons laissé filtrat et sérum en contact 5 minutes, 15 minutes, 30 minutes, { heure, avant de faire agir le mélange sur la gélatine.
Temps nécessaire à la digestion
Témoins ‘ gélatine seule Coagulation en 2 min. à 12 degrés. gélatine et filtrat. Digestion totale après 30 minutes. Mélanges immédiatement 30 — filtrat-sérum - ÿ minutes — { heure.
à 18 degrés, 15 — = HE après 30 — RATE un contact de { heure — 1, —
Il y a donc un retard de la gélatinase pour les mélanges de sérum et de filtrat pratiqués 5 minutes avant l'addition à la gélatine. Un contact prolongé n’est pas plus favorable. L'arrêt n'est d’ailleurs pas absolu, la digestion s'effectue quand même.
2. ACTION SUR LE LAB ET SUR LA CASÉASE. — Nous avons fait agir 0 ce. 2 de filtrat d'Histolytique ou 1 ce. de filtrat de Sporogène (mêmes doses que pour l'étude des gélatinases) sur 3 cc. de lait chauffé 10 minutes à 105 degrés, additionné de 0 cc. 3 de chlorure de calcium. Nous avons fait deux séries d'expériences avec ou sans addition de sérum normal.
Nous avons précipité immédiatement par l'acide trichloracétique bouillant les tubes témoins, jeté les précipités sur des filtres tarés, desséché et pesé les précipités. Nous avons fait la même opération sur les autres tubes après les avoir laissés 4 jours à l’étuve à 37 degrés.
Action sur le lab. — Les Labs qui coagulent normalement Le lait chauffé calcifié sont totalement empêchés par le sérum normal.
Action sur la caséase. — Les caséases sont presque complètement imhibées par le sérum normal. Tandis que la digestion dans les tubes témoins, sans sérum normal, atteint les 3/10 du poids initial de caséine pour l'Histolytique, les 4/10 pour le Sporogène, l'addition de sérum fait tomber ces proportions à 1/100 pour l'Histolytique, et à 3/100 pour Le Sporogène.
3. ACTION SUR LA TRYPSINE DES FILTRATS. — Dans les tubes contenant 3 ce. de filtrat d'Histolytique ou de Sporogène, nous avons placé des cubes d'ovalbumine coagulée par une température de 115 degrés. Nous avons fait une série de témoins. A une deuxième série, nous avons ajouté 0 ce. 4 de sérum normal de cheval. Après addition de toluène dans les tubes, nous les avons placés à l’étuve à 37 degrés.
Pour les deux filtrats, nous avons obtenu un résultat analogue. Au bout de 6 à 8 jours, le cube d’ovalbumine devient translucide et friable dans Les tubes témoins. Dans les tubes additionnés de sérum, le cube reste intact.
Les filtrats de Sporogène et de l'Histolytique n'échappent
donc pas à l’action empêchante du sérum sur -les ferments solubles. La gélatinase de l'Histolytique paraït seule faire exception. Mais nous savons que, d’une façon générale, si l’on emploie des doses suffisantes de ferment, le sérum normal n'a plus guère d'action empêchante. La gélatinase de l’Histolytique est excessivement puissante. Même à dose très faible (0 cc. 2) elle digère rapidement la gélatine. Vis-à-vis de cette dose le sérum n’a déjà plus d'action. Son pouvoir empêchant “existe cependant toujours, puisque un contact préalable avec le sérum abaisse sensiblement l'action liquéfiante du filtrat d'Histolytique. Remarquons, en passant, que cette Indépendance de la protéase de l'Histolytique envers le pouvoir empêchant du sérum normal pourrait expliquer dans une certaine mesure l'action digestive de ce microbe sur les tissus animaux.