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Graphique N° 4.

Après avoir ainsi étalonné notre prisme standard du colorimètre d’AUTENRIETH-HELLIGE, nous avons pu facilement établir avec les solutions d’hématine MERCK la courbe correspondante pour notre cellule photoélectrique. Nous donnons ci-dessous les valeurs et les degrés opacimétriques ainsi relevés:

Tableau VII.

da de en rire le LACS nues Ts PC électrique : | bine sur la base | d'Hématine Merck DR 00

A A NT ‘ao ie 17525 0 120 0,100 16,5 1/36 18 100 0,090 15,0 1/38,5 24 93 0,084 14,0 1405 27 88,8 0,080 15, 1/44 34 82,2 0,074 1255 1/46 98 78,0 0,070 11,66 1/47 40 75,5 0,068 LES 17/54 48 66,6 0,060 10,0 1/60 54 60,0 0,054 9,0

Le graphique N° 5 représente la courbe qui correspond à ces valeurs et qui permet de lire directement le pourcentage d’hémoglobine d’un sang préparé selon la technique d'AUTENRIETH et dont on a déterminé à la cellule photoélectrique le degré opacimétrique.

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Graphique

Nous pouvons donc résumer le mode opératoire pour la détermination du taux d’hémoglobine d’un homme de la facon suivante:

Préparer une solution étalon d’hématine:

Hématine MERCKk: 0,009 à 0,010 gr. (en solution acétique).

Glycérine pure: 5 gr.

Eau distillée q.s.p.: 100 cc.

Etalonner cette solution pour déterminer la valeur phy-

siologique moyenne normale de la région, où se trouve le laboratoire.

A cet effet prélever chez dix hommes sains du sang, qui doit répondre aux conditions expérimentales de NAEGELI.

Technique du prélèvement et de la préparation du sang:

Laver la pointe d’un doigt ou d’une oreille du sujet à examiner au moyen d’éther sulfurique.

Effectuer à ce niveau stérilisé une petite piqûre au moyen de l’aiguille de FRANK ou de BENSAUDE.

Préparer une pipette spéciale, jaugée à 1/100; nous utilisons une pipette, dont la partie capillaire contient 20 mm et la partie élargie en ampoule, servant comme mélangeur, contient 2000 mm. Nous obtenons ainsi 2 cc. de liquide, largement suffisant pour nos besoins.

On aspire une goutte de sang dans la pipette jusqu’au trait inférieur (marque 2).

Puis nous remplissons la pipette jusqu’au trait supérieur (marque 202) à l’aide d’acide chlorhydrique N/10.

On ferme les extrémités de la pipette avec deux doigts et on mélange intimement en secouant fortement.

Exactement cinq minutes après le mélange dans la pipette on procède à l'examen colorimétrique en introduisant le liquide de chlorhydrate d’hématine dans la cuve de la cellule photo-électrique ou du colorimètre d’AUTENRIETH.

On détermine la moyenne des degrés opacimétriques des sangs normaux et on ajuste la solution acétique de l’hémaüne MERCK, servant dans l’avenir d’étalon, à ce degré opacimétrique.

Par des dilutions successives de cette solution étalon on établit la courbe hématimétrique donnant alors pour chaque sujet de la région en question les valeurs absolues du taux d’hémoglobine sanguin. )

On voit que cette technique facilite énormément le travail de laboratoire et elle permet d’obtenir des résultats suffisamment exacts et sensibles pour toutes les exigences cliniques. Ces résultats sont exprimés en valeurs absolues, c’est-à-dire corrigées selon les principes de BürKER et par conséquent toujours comparables et identiques d’un laboratoire à l’autre.

Importance pralique du dosage de l'hémoglobine:

Les travaux récents de DUuLiÈRE et ADANT (63) semblent démontrer que: le volume globulaire, la concentration en fer ou en hémoglobine et la capacité de fixer l’oxygène d’un sang, sont des quantités liées entre elles par une relation linéaire du premier degré; autrement dit, il est possible, d’après ces auteurs, de calculer trois de ces facteurs après avoir expérimentalement déterminé l’un d'eux. Les auteurs ont dressé un graphique à ce sujet, qui facilite ce calcul.

Ces grandeurs définissent l’activité d’un sang comme vecteur d'oxygène. L'étude de l’affinité du sang pour loxy- “ène se raménerait donc au dosage de l’hémoglobine physiologiquement active dans l'organisme. On voit donc que la détermination du taux d’hémoglobine, par un microdosage

facile, rapide et cependant exact a un très grand intérêt et donnera des indications autrement importantes que peut le faire la numération seule des globules rouges, que l’on pratique habituellement.

A l’aide de notre technique il est possible de déterminer partout la valeur globulaire exacte d’un sang, c’est-à-dire le rapport entre la grandeur proportionnelle et la charge totale en hémoglobine d’une hématie et ceci grâce à l’emploi d’une solution standard étalon stable et facile à préparer.