PRÉPARATION DES GLOBULES ROUGES DE MOUTON
Le sang de mouton est prélevé aseptiquement, avec les précautions habituelles, par ponction à la jugulaire. Le mouton doit être en bonne santé et ne doit pas être soumis à des saignées fréquentes. Le sang est recueilli dans un flacon stérile contenant Tr volume d'une solution stérile de citrate de sodium à 10 o/o pour g volumes de sang à prélever. Le flacon doit être soigneusement agité pendant la prise de sang. Il vaut mieux recueillir le sang sur anticoagulant que de le défibriner par agitation avec des billes de verre, ce qui entraîne une certaine altération des globules. Le sang citraté conservé stérile à la glacière et sans antiseptique est utilisable pendant au moins 15 jours ou 3 Semaines.
: Avant d'être employés dans la réaction d’hémolyse, les globules doivent être soigneusement lavés à l’eau physiologique pour les débarrasser de toutes traces de plasma et surtout de citrate de sodium qui possède la propriété de bloquer l’hémolyse par le complément. Les globules sont séparés du plasma par une première centrifugation. Le culot est repris par de l’eau à 8,5 0/00 de CINa ; les globules sont remis en suspension et centrifugés
à nouveau. Il faut faire trois lavages. Les globules en culot devront être
RÉACTION QUANTITATIVE DE FIXATION DU COMPLÉMENT Il
utilisés dans la journée, car ils se conservent mal même s'ils sont encore stériles, En effet, les hématies conservées en milieu isotonique, mais privées de protéines sériques sont plus fragiles que les hématies conservées dans leur plasma. C'est pourquoi Mayer [»1] ajoute à la solution servant à préparer la suspension globulaire 06,1 0/0 d'albumine de bœuf cristallisée. La Iÿse spontanée des globules est ainsi ralentie.
Si l’eau du troisième lavage est colorée, les globules ne doivent pas être