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0/0 d’hémolyse . . .|18 35 L2 48 £o 52 52 54 55 55
C) INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS ET CALCUL DU TITRE DU SÉRUM HÉMO- EYTIQUE. — On constate que le pourcentage d'hémolyse croît rapidement d’un tube à l’autre dans les premiers tubes du titrage, jusqu'au premier tube où l'hémolyse est voisine de 5o 0/0. La dose de sérum hémolytique contenu dans le tube est la dose oplima (soit 0,21 cm° de sérum hémolytique au 1/200° dans l'exemple choisi). Dans les tubes suivants le pourcentage d'hémolyse augmente encore d’un tube à l’autre, mais beaucoup plus lentement (En effet, une augmentation de la dose d'hémolysines se traduit tou- Jours par une légère augmentation du pourcentage d'hémolyse). On peut exprimer graphiquement ces résultats en traçant la courbe représentative
des variations du pourcentage d’'hémolyse en fonction de l'augmentation du
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ai CE "21 12 res RL Ee Cent ue GRR RE 0,05 010 015 0,20 0,25 030 035 (3) 045 0,50 cm;de sérum hemolytique au 1/200°
Fic. 3. — Courbe permettant le calcul de la dose optima de sérum hémolytique (cf. Tableau 5).
volume de sérum hémolytique au 1/200° utilisé. Cette courbe, d’après Kent [0], est une hyperbole. L’abscisse du point où cette courbe devient pratiquement parallèle à l'axe des abscisses représente la dose optima d'hémolysines. La figure 3 représente la courbe tracée d’après les chiffres du tableau 5.
Si l’hémolyse n'atteint 50 0/0 que dans le dernier tube du titrage c’est que la dose de 0,50 cm de sérum hémolytique au 1/200° ne représente pas un excès suffisant d’hémolysine : ce sérum n'est pas assez actif et ne doit pas être utilisé.
Si au contraire l’hémolyse atteint 50 0/0 dans tous les tubes sauf dans le premier, ou dans le premier et le deuxième, c’est que le sérum est très actif, dans ce cas pour calculer la dose optima avec plus de précision on
doit recommencer le titrage en partant d’une dilution mère au 1/600°.
En pratique nous utilisons dans la réaction d'hémolyse à 50 o/o non pas une, mais deux doses optima d’hémolysines, et sous le volume de 0,50 em° : de cette façon on a toujours un excès de sérum hémolftique représentant une marge de sécurité suffisante, Ainsi, pour le sérum étudié la dose
optima étant de 0,21 cm° de sérum hémolytique au 1/200°, nous utilisons
r . L “ r x — 2 dans les réactions ce sérum dilué à = = 1/240°. 200 X 0.50 0,42
En résumé : pour que l'unité bo o/o de complément soit la plus petite possible, donnant ainsi à la réaction d'hémolyse sa sensibilité maxima et pour que la valeur de cette unité ne dépende que de F'activité du complément que l’on utilise, on doit toujours employer pour sensibiliser les hématies de mouton
— un sérum hémolytique de bonne qualité ;
— un excès titré de ce sérum hémolytique.