INFLUENCE DU MODE OPÉRATOIRE ADOPTÉ

— Ordre de distribution des réactifs. — Plusieurs essais nous ont montré qu'il n’est pas indifférent de distribuer le complément avant l’antigène ou inversement (le sérum étant toujours distribué en premier) : si on laisse 20 minutes en contact l’antigène et le sérum avant d'ajouter le complément, le nombre d'unités 5o 0/0 fixées est toujours inférieur à celui fixé lorsque l’on ajoute le complément avant l’antigène : le complément se fixe mieux sur un complexe réagine-cardiolipine en train de se former que sur un complexe déjà formé (Goldsworthy) [38].

— Temps et température de fixation. — Indépendamment du rôle qu'ils

jouent dans la destruction spontanée du complément, le temps et la

Î hh RÉACTION QUANTITATIVE DE FIXATION DU COMPLÉMENT

température ont une influence capitale sur l'intensité de la fixation. En étudiant le système polysaccharide du pneumocoque IT — sérum homologue, Rice [30] a montré qu'il se fixe deux à trois fois plus de complément à 3°-6° pendant 24 heures qu'à 37° pendant 1 h. 1/2. On note une influence comparable de ces deux facteurs lorsque l’on étudie le système réagine-

cardiolipine. Dans la figure 5 sont représentés les résultats que nous avons

Unités 50 0 de complement fixees

Céurbe N°1 température de fixation : 6-8° M LE 2 “ 7 7 18-209 ", 1 à [72 “ 4 36°

temps en heures

CE PEER CS ES ES AC PE RS CRE jee > 10 15 20 25 Fig. 5. — Variations du titre apparent d’un sérum syphilitique en fonction

de la température ef du temps de fixation adoptés dans la réaction.

obtenus en mesurant le titre d’un même sérum syphilitique dans différentes conditions de temps et de température. Cette expérience répétée avec d’autres sérums permet de constater que ces deux facteurs ont une influence relative plus où moins marquée suivant le sérum (donc suivant la qualité de la réagine). Mais l'allure générale des courbes est toujours la même pour une température donnée : le nombre d'unités 50 0/0 fixées croît avec

le temps jusqu'à atteindre un certain maximum ; on peut tirer de ces courbes les conclusions suivantes :

— La fixation est plus lente mais atteint un niveau plus élevé à basse température qu’à 37°. |

— L'intensité de la fixation est pratiquement la même à 20° et à 6° mais la vitesse est plus grande à 20°.

— Les différents points de ces courbes expriment les titres d’un même sérum lorsque la réaction est pratiquée dans des conditions différentes elles montrent done nettement la nécessité d'opérer toujours dans des conditions rigoureusement identiques de temps et de température.

Nous avons choisi la température de 6°-8° parce qu'il est plus facile de la maintenir constante dans un réfrigérateur à thermostat, Le temps relativement court de 6 heures nous à paru préférable car ainsi la relation linéaire du type y=+ qui doit exister entre la quantité de réagine du sérum et le nombre d'unités 50 0/0 fixées est mieux respectée que lorsqu'on pro-

longe de temps de fixation pendant 16 ou 18 heures.