CHAUFFAGE DISCONTINU A BASSES TEMPERATURES

Certains milieux de culture riches en albumine ne peuvent être portés à la température de l'ébullition sans s'altérer notablement et perdre leurs propriétés; tel est le cas du sérum, par exemple.

Pasieur a montré qu'on peut alors remplacer l'action rapide d'une haute température par l'action prolongée d'une température moins élevée (-f- 55° à H- 60°) : c'est la pasteurisation. Mais dans la pratique bactériologique, il faut combiner cette méthode avec celle du chauffage discontinu de Tyndall.

Voici comment on procède :

Le liquide à stériliser est réparti dans des ballons à long col, préalablement flambés, que l'on remplit aux trois quarts et que l'on ferme à la lampe d'émailleur.

Les ballons sont ensuite disposés dans un bain- marie dont on élève progressivement la température à + 56° ou 58°. Un thermomètre plongeant dans le bain-marie permet de suivre à tout instant la marche de la température. Dès que le degré désiré est obtenu, on modère le brûleur, de manière à maintenir la température pendant une heure à ce degré. On laisse alors refroidir l'appareil sans en retirer les ballons.

On recommence l'opération tous les jours pendant une semaine entière; après quoi, la stérilisation peut être considérée comme terminée. Avant d'utiliser les liquides stérilisés, il est prudent de les laisser séjourner deux à trois jours dans l'étuve à 37° pour s'assurer de leur pureté. Tout ballon dans lequel se produirait une culture devrait être rejeté.

Ainsi pratiquée, cette opération est très difficile : on dépasse facilement la température maximale de -+- 58°, les albumines se coagulent et le matériel de culture est perdu. Aussi opère-t-on d'ordinaire à l'aide d'un bain-marie spécial muni d'un régulateur avec lequel on est sûr de ne pas dépasser la température fixée.

L'appareil construit par Wiesnegg se compose d'une chaudière A, disposée sur un brûleur à gaz, munie d'un couvercle F et d'un régulateur de Roux R placé dans un appendice G (Hg. 8).

Fonctionnement. — La chaudière étant emplie d'eau aux trois quarts, les ballons y sont disposés et maintenus immergés par un

14 STÉRILISATION

disque on toile métallique. Placer le couvercle muni d'un thermomètre T. Allumer le gaz. Surveiller le thermomètre. Dès que la température désirée est atteinte, régler le régulateur de la manière indiquée plus loin (Voy. chap. iv), et à partir de ce moment l'opération peut se poursuivre d'elle-même sans surveillance. L'appareil est réglé une fois pour toutes, et les jours suivants on

n'a qu'à allumer le gaz sans se préoccuper du réglage, qui se fart automatiquement. Ajouter de temps en temps de l'eau dans Le bain-marie.

La première fois qu'on utilise l'appareil, il est préférable de le faire fonctionner à blanc et de le régler avant d'y placer les ballons à stériliser; on évitera ainsi tout mécompte. On se conformera poulie reste aux règles indiquées plus haut : faire sept à huit séances de chauffe de une heure de durée chacune.