LE VIBRION SEPTIQUE

Bacilles du tétanos et de la diphtérie, cultivent uniquement au point d'inoculation. Alors que les toxines de ces derniers microbes amènent la mort des petits animaux de laboratoire à des doses presque infinitésimales, le filtrat des cultures du Vibrion septique ne produit une maladie mortelle, chez les mômes animaux, qu'autant qu'on en injecte plusieurs centimètres cubes.

En filtrant sur la bougie de porcelaine la sérosité des muscles de cobayes et de lapins ayant succombé à la septicémie, Roux et Chamberland obtiennent un liquide qui, injecté dans le péritoine d'un cobaye, entraîne la mort à la dose de 40 centimètres cubes.

11. — Besson a repris l'étude du poison septique; il a utilisé des cultures filtrées à la bougie Cliamberland, et aussi, après semblable filtration, de la sérosité recueillie sur des animaux venant de sucomber à la septicémie expérimentale aiguë.

a. Pour les cultures, il faut choisir un milieu permettant au microbe de fabriquer la plus grande quantité possible de toxine. Les cultures en bouillon ordinaire conviennent mal : leur filtrat est peu toxique. On obtient de meilleurs résultats avec les cultures en pulpe de viande. *

Dans un flacon de 1 200 à 1 500 centimètres cubes de capacité, on met 500 grammes de viande de bœuf hachée et quelques centimètres cubes d'une solution de soude à 1 p. 100; le flacon, bouché à l'ouate, est porté à l'autoclave à 1 15° pendant vingt minutes. Après refroidissement, on ensemence avec un peu de sérosité prise sur un cobaye mort de septicémie. Au bouchon de ouate, on substitue un bouchon de caoutchouc stérilisé portant deux tubes dont l'un plonge dans le contenu du flacon, se recourbe à angle aigu et se termine par une extrémité effilée : il servira à décanter le liquide, après culture. L'autre tube s'arrête à la partie supérieure du flacon ; à l'extérieur il est coudé à angle droit, renferme une bourre de ouate et porte un étranglement près de son extrémité. C'est à ce dernier tube que l'on adapte la machine à vide. Le vide fait dans le flacon, le tube est fermé d'un trait de chalumeau, au niveau de l'étranglement, et le flacon est porté à l'étuve à 37°. Au bout d'une vingtaine d'heures, de nombreuses bulles de jjaz viennent crever à la surface de la bouillie pâteuse que contient le flacon, la viande prend une teinte rose vif caractéristique, et il tend à se former deux couches : dans un liquide trouble et rougeâtre, baigne une masse semi-solide, crevassée, irrégulière. Vers la fin du deuxième jour, il est utile de casser avec une pince l'extrémité du tube que l'on a fermé au chalumeau : les gaz dégagés par la culture s'échappent immédiatement en sifflant, et une odeur infecte se répand dans la salle : ces gaz, formés en grande abondance et comprimés dans le flacon, gênent la culture et, faute de leur donner issue, on n'obtiendrait jamais qu'un produit peu toxique. Après leur évacuation, la culture se produit à l'abri de l'air, le flacon étant constamment rempli, à la pression atmosphérique, par l'acide carbonique et l'hydrogène dégagés par le développement du vibrion.

L'expérience a montré que le maximum de toxicité des cultures se ren-

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contre vers le sixième jour, puis leur activité baisse rapidement : c'est donc à ce moment que le flacon sera retiré de l'étuve. La partie liquide est décantée, la partie solide est passée à la presse à viande et la sérosité obtenue est mêlée au produit de la décantation ; le tout est filtré sur une bougie Chamberland.

La toxine ainsi obtenue est plus active que celle de Roux et Chamberland. Une dose de 3 à 5 centimètres cubes, injectée dans le péritoine, confère aux cobayes de 450 à 600 grammes une affection passagère dont les symptômes rappellent les phénomènes terminaux de la septicémie, mais qui guérit rapidement. Des doses analogues ou plus considérables, injectées dans le tissu cellulaire sous-cutané, ont beaucoup moins d'influence sur l'état général et ne font guère varier la température : mais, localement, elles produisent de l'œdème ou une escarre.

L'injection intrapéritonéale de doses comprises entre Set 10 centimètres cubes tue rapidement des cobayes de 300 à 400 grammes.

Chez le cobaye et le lapin les injections fréquemment répétées de petites doses de toxine produisent d'ordinaire une intoxication chronique aboutissant à la moii.

Quand la mort succède à une injection intrapéritonéale de toxine, on trouve, à l'autopsie, l'intestin congestionné, le péritoine rougehortensia, et il existe un peu de sérosité stérile dans la cavité péritonéale.

L'addition de solution iodée semble modifier très peu les propriétés de la toxine septique. La chaleur a plus d'action : le chauffage des cultures à 80° et 100° diminue notablement l'activité du poison.

Le vieillissement de la toxine à la température de 35°, à la lumière diffuse, en altère rapidement les propriétés. Il n'en est pas de même du vieillissement en vase clos, à l'abri de l'air et de la lumière, à la température du laboratoire : dans ces conditions, le poison conserve toute son activité.

b. Le produit obtenu en filtrant delà sérosité d'œdème d'animaux morts de septicémie s'est montré beaucoup moins actif que la toxine fournie par les cultures en viande. Injectée à la dose de 2 à 10 centimètres cubes dans le péritoine de cobayes de 280 à 350 grammes, cette sérosité filtrée a toujours été inoffensive. Chez le cobaye de 300 grammes, en obtient une maladie plus ou moins grave, mais aboutissant toujours à la guérison avec une dose de 15 à 20 centimètres cubes. La mort n'a été obtenue qu'après injection intrapéritonéale de 30 à 40 centimètres cubes.

Propriétés chimiotaxiques. — La toxine du Vibrion septique possède des propriétés chimiotaxiques négatives (Besson).

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On MpiFe de U tOXiue dans des tubes capillaires, puis avec un léger Irait de chalumeau on ferme ceux-ci à une extrémité : on obtient ainsi de petits tubes, longs de 2 à 3 centimètres, pletai de toxine et ouverts à un seul bout. Ces tubes sont introduits, au moyen de très petites incisions, sous la peau de lapins et de cobayes; au bout de huit, dix et vingt heures, on les enlève et on examine leur contenu. Tandis que des tubes témoins renfermant un peu du bouillon qui a servi à la culture et introduits en môme temps sous la peau, contiennent à ce moment un liquide louche, très riche en leucocytes, le contenu des tubes de toxine est reslé limpide 'et l'examen microscopique n'y décèle aucun leucocyte. Ce n'est que pour des durées d'inclusion de vingt-quatre à trente heures que ces derniers tubes peuvent présenter des leucocytes, soit qu'au contact prolongé des tissus vivants les propriétés du poison aient subi des modifications, soit que la toxine ait diffusé et ait été remplacée par de la lymphe.

Le chauffage à 85° pendant deux à trois heures modifie complètement les propriétés chimiotaxiques de la toxine : de négatives, elles deviennent positives, et les tubes insérés sous la peau des lapins et des cobayes ne tardent pas à se remplir de leucocytes.

Roux et Chamberland sont parvenus à vacciner le cobaye en lui injectant à plusieurs reprises dans la cavité péritonéale de fortes doses de cultures en bouillon chauffées dix minutes à 110°; après injection en trois fois à trois jours de distance de 120 centimètres cubes de culture chauffée, les animaux ont acquis l'immunité.

L'immunisation par injection de doses progressives de cultures en viande filtrées est très laborieuse (Besson), le plus grand nombre des animaux ainsi traités succombent à une cachexie chronique. . Roux et Chamberland ont conféré l'immunité aux cobayes en leur injectant à sept ou huit reprises 1 centimètre cube de sérosité d'œdème sepfique filtrée sur la bougie de porcelaine.

Nous avons réussi à immuniser le lapin par des inoculations répétées de sérosité septique entière dans le tissu cellulaire de l'oreille ; la première fois, on inocule un dixième à un cinquième de goutte à l'extrême pointe de l'oreille, il se produit une vive réaction, la partie inoculée prend un aspect érysipélateux; on répète les inoculations tous les huit ou dix jours en portant successivement les doses à un quart, une demie et une goutte et en se rapprochant chaque fois de la base de l'oreille. Au bout de cinq à sept semaines l'animal peul recevoir une goutte de sérosité virulente sous la peau de l'abdomen ; on renforce l'immunité par des injections successives dans le tissu cellulaire du tronc; quand on arrive à injecter de fortes doses, il n'est pas rare de voir se produire des abcès où la phagocytose est intense et qui abou-

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tissent à la guérison. L'immunité ainsi acquise est très solide et peut être transmise héréditairement par la mère.

§ 4. — SÉROTHÉRAPIE.

Leelainche a obtenu un sérum très actif en pratiquant chez l'àne, animal peu sensible, des inoculations intraveineuses, puis intramusculaires multiples de sérosité virulente.

Un mélange de 2 centimètres cubes de ce sérum et de 5 gouttes de sérosité septique ne produit aucun accident quand on l'inocule au cobaye. Les animaux ainsi traités ne présentent par la suite aucune immunité et succombent aussi vite que les témoins aux inoculations d'épreuve.

Le sérum antigangreneux est sans action sur le virus du charbon symptomatique (Voy. p. 272).

Agglutination. — Le sérum de Leelainche agglutine en quelques minutes les cultures jeunes de vibrion en bouillon Martin. Cette action agglutinante se produit aux dilutions de 1 p. 30 à J p. 30000; elle est plus marquée au contact qu'à l'abri de l'air. Le Bacille du charbon symptomatique n'est pas agglutiné par le sérum antigangreneux.