Pneumocoques dans la salive (d'après Biondi
LE PNEUMOCOQUE.
d. Colokation des courus. — 1. — Les coupes seront soumises de préférence à la double ou à la triple coloration selon la méthode de Gram (procédés recommandés p. 228). On pourrait encore utiliser le procédé de Weigert (p. 224).
IL — La coloration des capsules dans les coupes présente quelque difficulté, on l'obtiendra par un des procédés suivants :
Procédé de Friedlànder. — 1° Plonger la coupe pendant vingt-quatre heures dans la solution suivante:
2° Au sortir du bain colorant la coupe est lavée à l'alcool, puis portée pendant deux minutes dans une solution d'acide acétique à 2 p. 100;
3° Laver à l'eau distillée ; déshydrater par l'alcool absolu ; éclaircir par l'essence de girofles et le xylol; monter dans le baume.
Procédé de Ribbert. — 1° Colorer la coupe pendant quelques minutes dans la solution suivante:
Eau distillée 100 grammes.
Alcool à 95° 50 —
Acide acétique cristallisuble 12sr,50
Violet dahlia Q. S. pour saturer à chaud.
2o Au sortir du bain colorant laver la coupe à l'eau; déshydrater par l'alcool absolu, éclaircir par l'essence de girofles et le xylol ; monter dans le baume.
B. Aspect dans les cultures. — Dans les cultures en milieux artificiels le Pneumocoque n'est pas encapsirfé ; on ne retrouve des capsules que dans les cultures en sérum liquide ou en bouillon-sang.
Dans les cultures le Pneumocoque donne tantôt des grains lancéolés, tantôt des grains arrondis qui se rencontrent parfois à l'exclusion des formes lancéolées. Les grains sont isolés, associés en diplocoquesou en chaînettes courtes de trois à huit éléments: les chaînettes sont composées de diplocoques, le grand axe des grains se trouve dans le sens des chaînettes ; celles-ci sont surtout nombreuses et longues dans les cultures en bouillon.
Fuchsine
Alcool absolu
Acide acétique cristallisé Eau distillée
1 gramme.
.') grammes.
Conditions de culture. — Le Pneumocoque est un aérobie facultatif. 11 ne se développe pas au-dessous de -f 24°, aussi ne peuton le cultiver sur la gélatine ordinaire. La température optima de
PROPRIÉTÉS BIOLOGIQUES
culture est aux environs de 35°-37°. Le développement s'arrête à 42°; il est plus actif dans les milieux liquides que sur les milieux solides et exige une légère alcalinité du milieu.
Gélose. — Après vingt-quatre heures à 37°, il se développe sur la gélose un fin semis de petites colonies transparentes, difficiles avoir, jamais confluentes, ressemblant à des gouttes de rosée.
Sérum coagulé. — Mêmes colonies que sur la gélose ; parfois les colonies se réunissent et forment un mince voile semi-transparent.
- Bouillon. — A 37°, très léger trouble au bout de vingt-quatre à trente-six heures, puis précipitation d'un dépôt minime, pulvérulent.
Bouillon additionné de sang de lapin. — Pour préparer le milieu, recueillir aseptiquement du sang dans la veine auriculaire du lapin (p. 194) et ajouter ce sang à du bouillon stérilisé (une partie de sang pour trois à quatre parties de bouillon). Dans ce milieu, à 37°, le Pneumocoque cultive abondamment; il se produit un trouble notable, puis il se forme un précipité muqueux très riche en microbes.
Sérum liquide. — Le sérum qui convient le mieux est celui que l'on prépare avec du sang de lapin jeune, recueilli aseptiquement et non chauffé. Dans ce sérum à 37°, on obtient une culture très abondante ; il se produit d'abord une augmentation de consistance du milieu en même temps qu'un trouble notable, puis un précipité abondant constitué par des Pneumocoques capsulés.
Lait. — Le Pneumocoque cultive dans le lait en le coagulant.
Pomme de terre. — Le Pneumocoque ne s'y développe pas.
Article IL — PROPRIÉTÉS BIOLOGIQUES .
§ 1er. VITALITÉ ET VIRULENCE.
I. — Dans les crachats, les exsudats albumineux, le Pneumocoque peut conserver longtemps sa vitalité et sa virulence et même résister à une dessiccation prolongée (Bordoni) ; de même le Pneumocoque semble capable de vivre assez longtemps dans la terre les pous sières : Emmerich a trouvé un Pneumocoque virulent dans les pous sières de l'entrevous d'une salle où se trouvaient des pneumoniques;
Besson. — Techn. microb.. 2» édit. 23
Fig. 188. — Pneumocoque. — Strie sur gélose au troisième jour.
354 LE PNEUMOCOQUE.
Uffelmann aurait rencontré le Pneumocoque dans l'air d'une cave.
II. — Dans les cultures, le Pneumocoque perd rapidement sa virulence et même sa vitalité. Les cultures sur sérum solidifié et sur gélose meurent au bout de quatre à cinq jours ; dans les cultures en milieux solides, la vitalité persiste plus longtemps, mais la virulence a disparu le septième jour. L'atténuation se produit d'autant plus vite que le milieu convient moins au Pneumocoque ; elle est plus tardive dans les cultures en bouillon-sang que dans le bouillon ordinaire. D'après Bezançon et Griffon, le Pneumocoque peut vivre une année dans du sang défïbriné mélangé de sérosité ascitique (1).
La virulence s'affaiblit rapidement dans les cultures successives, elle disparait dès la troisième culture.
Les cultures sont stérilisées en vingt-quatre heures par une température de 42°, en dix minutes à 56°, instantanément à 65°-70° ; la dessiccation les tue rapidement.
Pasteur a montré que l'atténuation des cultures est due en grande partie à l'action de l'oxygène de l'air. Il en résulte que le Pneumocoque conserve plus longtemps sa virulence dans les cultures anaérobies (Frànkel) ; dans les cultures en œuf pratiquées comme il est dit page 55 (A), il resterait actif pendant plusieurs mois (Bunzl- Federn). Un procédé efficace pour conserver du Pneumocoque virulent consiste à inoculer la culture à un lapin, puis à prélever à l'autopsie un peu de sang du cœur et à l'inclure dans une pipette scellée; le sang garde ainsi sa virulence pendant fort longtemps; pour l'utiliser, on commence par pratiquer un ensemencement en bouillon, puis on inocule la culture obtenue au bout de vingtquatre à trente-six heures.
Une autre cause d'atténuation et de mort du Pneumocoque dans les cultures est le développement rapide d'une acidité notable due en grande partie à de l'acide formique. L'addition de carbonate de chaux aux milieux de culture produit la saturation de l'acide à mesure de sa formation et permet de conserver le Pneumocoque vivant pendant plus d'un mois (Wurtz et Mosny).
Restitution et exaltation de la virulence. — a. On peut restituer sa virulence à un pneumocoque affaibli en injectant au lapin une quantité assez considérable (un centimètre cube) de culture en bouillon associée à une quantité égale de culture filtrée de Profeus vulgaris : l'animal succombe à la septicémie pneumococcique et son sang contient le microbe virulent.
(1) Dans te milieu, le Pneumocoque prend l'aspect en chaînelles; repiqué ensuite sur gélose ou en bouillon, il conserve héréditairement cet aspect, mais reprend sa forme en diplocoques dans le sérum de lapin.
PROPRIÉTÉS BIOLOGIQUES
6. Les passages successifs par le lapin augmentent la virulence du Pneumocoque ; l'inoculation intraveineuse convient mieux dans ce but que l'inoculation sous-cutanée, mais le procédé le plus sûr est celui d'Issaëff, par les inoculations intrapéritonéales.
On injecte dans le péritoine d'un lapin A, 1 centimètre cube à lcc,5 du sang d'un lapin qui vient de succomber à la septicémie pneumococcique ; on fait un deuxième passage avec le sang du lapin A, et on continue la série jusqu'au huitième ou neuvième passage; à partir de ce moment on diminue la dose de sang injectée dans le péritoine; pour le onzième lapin, par •-•xemple, il suffira d'inoculer 6 à 8 gouttes de virus.
A partir du douzième passage environ le sang perd la propriété de se coaguler et devient extrêmement toxique et virulent; les Pneumocoques y abondent. Une goutte de ce sang introduite dans le péritoine d'un lapin suffit pour le tuer en dix ou douze heures ; si l'on augmentait la dose d'une manière trop considérable, si on injectait par exemple I à 2 centimètres cubes, le lapin succomberait très rapidement (cinq à six heures) à l'intoxication par les toxines contenues dans le sang, mais non à l'infection pneumococcique.
L'injection sous-cutanée de 4 à 6 gouttes de sang à virulence exaltée tue le lapin en douze à quinze heures. Au bout d'un grand nombre de passages par le péritoine du lapin, la virulence du Pneumocoque s'affaiblit, mais il suffit de deux ou trois passages intrapéritonéaux chez des cobayes ou des chiens pour rétablir toute la force du virus.
1. — Les cultures filtrées de Pneumocoque sont peu actives et il faut en injecter de grandes quantités dans les veines du lapin pour obtenir des effets toxiques se traduisant par une élévation passagère de la température et une diminution de poids ; d'ordinaire la mort ne survient pas. On obtient des résultats un peu plus satisfaisants en tuant les microbes dans les cultures par le chloroforme ou par la chaleur (une température de 58°, pendant deux heures, suffit pour détruire le Pneumocoque sans altérer la toxine). Le sérum du sang du lapin jeune est le milieu qui donne les cultures les plus toxiques.
Les cultures à l'abri de l'air, celles faites dans du bouillon ou du sérum maintenus alcalins n'ont aucun avantage au point de vue de la production de la toxine.
En précipitant par l'alcool ou le sulfate d'ammoniaque des cultures en bouillon filtrées, les frères Klemperer ont isolé une toxine ; le fait a été confirmé par Foa et Carbone. Andréini attribue la toxicité des cultures à une base alcaloïdique.
II. — Emmerich obtient une toxine plus active en broyant et exprimant les organes de lapins ayant succombé à la septicémie
3îSfi LÉ PNEUMOCOQUE.
pncumococcique et en Jillrant à la bougie le suc obtenu ; Mosny modifie ainsi le procédé d'Eminerich :
Aussitôt après la mort, les organes des lapins sont hachés et mis à macérer dans le double de leur poids d'eau ; on ajoute quelques fragments de thymol pour empêcher la putréfaction. Au bout de vingt- quatre heures, le liquide est filtré plusieurs fois sur papier puis sur une bougie Chamberland.
111. — Issaëff retire du sang des lapins uéspar son Pneumocoque exalté (Voy. plus haut) une toxine capable de tuer le lapin, par injection intraveineuse, à la dose de 1 p. 100 du poids de l'animal. Il opère de la manière suivante :
1° Recueillir purement, dans le cœur, le sang de trois ou quatre lapins ayant récemment succombé à l'inoculation du Pneumocoque virulent (on doit obtenir de 80 à 100 grammes de sang) el réunir dans un vase stérilisé les divers échantillons de sang obienus.
2° Ajouter au sang son volume d'eau stérile, glycérinée à-1 p. 100 et additionnée, pour 100 cenlimètres cubes, de 5 à 6 gouttes d'une solution saturée de bicarbonate de sodium. Mélanger.
3° Filtrer le mélange sur une bougie Chamberland.
La toxicité du produit diminue considérablement par un chauffage à 70° et disparaît à 100°.
En filtrant les exsudats péritonéaux et pleuraux de lapins ayant succombé à l'inoculation de virus exalté, Issaëff a également obtenu une toxine assez active pour tuer le lapin.
1. Par les toxines. — En injectant à l'animal des cultures filtrées ou des toxines obtenues par les procédés d'Emmerich, de Mosny et d'Issaëff, on peut le vacciner contre le Pneumocoque, mais l'immunisation ainsi produite dure peu et pour la prolonger il faut injecter des cultures vivantes à l'animal rendu réfractaire.
A. — Chauffer à 58° le sérum des lapins qui viennent de succomber à l'infection pncumococcique et injecter dans la veine auriculaire d'un lapin neuf des doses de ce sérum allant de 10 à 20 centimètres cubes; au bout de quatre à cinq inoculations répétées à intervalle de quelques jours, l'animal résiste à l'inoculation de cultures virulentes (Foa).
B. — On arrive au même résultat en injeciant de la même façon des toxines obtenues par les procédés d'Eminerich ou de Mosny.
C. — Issaëff rend les lapins réfractaircs en leur injectant successivement dans le sang des doses de 10 à 50 centimètres cubes de cultures stérilisées (bouillon ou sérum). Ces injections provoquant une réaction assez intense, il ne faut pratiquer la deuxième inoculation que lorsque les animaux paraissent guéris de la première.
PROPRIÉTÉS RtOLOGIQUES.
Le même auteur a également immunisé des lapins en leur injectant des toxines retirées du sang par le procédé exposé plus haut; il suffit d'une seule injection de 10 centimètres cubes de toxine dans le sang ou le péritoine des lapins pour les rendre réfractaires à un haut degré à l'infection pneumococcique.
Issaëff soumet les animaux immunisés à une double épreuve à l'aide de sang frais de lapin venant de succomber à la pneumococcie ; il inocule sous la peau la première fois 2 à 4 gouttes et la seconde 0CC,5 de sang virulent. Pour maintenir l'immunité on doit répéter ces inoculations tous les mois, sans jamais dépasser la dose de 0CC,5 sous la peau. Il importe, pour l'inoculation d'épreuve, d'attendre que l'animal soit complètement 'remis des malaises liés à l'immunisation et particulièrement que le poids ait repris une marche ascendante.
Les lapins vaccinés par les toxines sont complètement réfractaires à l'infection par les cultures vivantes, mais ils gardent leur sensibilité vis-à-vis des toxines et réagissent même plus énergiquement que les lapins neufs quand on leur injecte ces toxines.
IL Par les cultures atténuées. On peut immuniser les animaux en leur inoculant des cultures vivantes atténuées par le vieillissement ; on injecte, par exemple, d'abord des cultures en bouillon âgées de cinq à six jours, pour arriver à donner, après des inoculations intermédiaires, des cultures de vingt-quatre heures ou du sang virulent (Foa et Scabia, Netter).
§ 4. — SÉROTHÉRAPIE.
I. — Le sang des animaux naturellement réfractaires ne possède aucune propriété thérapeutique ni immunisante.
II. — Le sang des animaux vaccinés n'est pas antitoxique ; il est incapable de stériliser les toxines du Pneumocoque in vitro, ou dans l'organisme (Issaëff).
Pour démontrer ce fait, on mélange in vitro du sérum de lapin vacciné avec un volume égal d'une toxine active. On injecte le mélange dans la veine auriculaire d'un lapin neuf ; un lapin témoin reçoit la même quantité de toxine mélangée à du sérum normal. Les deux lapins réagissent d'une manière analogue.
III. — Le sérum des animaux vaccinés ne possède, in vitro, aucune action bactéricide sur le Pneumocoque; il permet le développement de ce microbe qui y conserve toute sa virulence, malgré quelques modifications de forme (Behring et Nissen, Issaëff) ; les cultures sont un peu grêles, les formes arrondies y dominent, les microbes sont agglutinés.
Quand on veut vérifier la virulence d'un Pneumocoque cultivé dans le sérum d'un animal vacciné, il faut se mettre à l'abri de la cause d'erreur
LE PNEUMOCOQUE.
liée à l'inoculation de la culture entière. Cette culture se compose de deux éléments; 1° les microbes; 2° le sérum oïi ils ont poussé; or ce sérum a, comme nous le verrons tout à l'heure, lu propriété de conférer l'immunité; si on injecte la culture entière on immunise l'animal avec le sérum en môme temps qu'on l'inocule avec les microbes, l'animal guérira et on conclura à l'action bactéricide du sérum. Pour éviter cette erreur il faut recourir à l'un des artifices suivants :
a. Ensemencer une trace de la culture en sérum dans un tube de bouillon neuf et inoculer la culture fille ainsi obtenue ; ce procédé peut prêter à la critique.
b. Jeter sur un filtre de papier stérilisé la culture en sérum ; laver deux ou trois fois les microbes restant sur le filtre avec delà solution aqueuse stérilisée de NaCl à 7 p. 1 000; recueillir le résidu sur le filtre avec un pinceau, le délayer dans 2 centimètres cubes de la solution stérile à 7 p. 1 000 de NaCl et injecter le mélange sous la peau.
IV. — Inoculé sous la peau chez un animal neuf, le sérum des animaux vaccinés le préserve contre l'infection pneumococcique et semble même capable de guérir l'infection déclarée. Cette action est indépendante de toute influence bactéricide ou antitoxique et relève de la phagocytose.
Le sérum du lapin vacciné est très actif : 2 à 4 gouttes de sérum d'un lapin solidement vacciné suffisent pour immuniser une souris (Foa et Carbone).
G. et F. Klemperer ont arrêté la septicémie pneumococcique chez le lapin infecté depuis vingt-quatre heures en lui injectant 8 centimètres cubes de sérum de lapin vacciné.
Les mêmes auteurs ont constaté qu'au moment de la crise, dans la pneumonie humaine, le sérum de l'homme, toxique pendant la période fébrile, devient immunisant et thérapeutique.
Applications thérapeutiques. — Les résultats obtenus sur les animaux encourageaient à essayer chez l'homme la sérothérapie de la pneumonie ; plusieurs auteurs ont injecté à l'homme du sérum de lapin vacciné ou d'un pneumonique arrivé au moment de la crise ; les résultats obtenus, bien que satisfaisants, ne sont pas encore assez démonstratifs pour que cette méthode de traitement se soit généralisée, la production du sérum antipneumonique étant d'ailleurs fort malaisée.
Klemperer a établi l'innocuité du sérum antipneumonique inoculé à l'homme sain; chez des pneumoniques il injecta sous la peau des doses de 6 centimètres cubes de sérum de lapin vacciné et obtint des résultats favorables. Foa et Carbone provoquèrent la crise au quatrième jour par deux injections consécutives de 5 centimètres cubes de sérum de lapin vacciné. Foa et Scabia, Janson obtinrent de même une amélioration rapide dans plusieurs cas de pneumonie par l'injection de 5 à 25 centimètres cubes de sérum de lapin vaccine.
PROPRIÉTÉS BIOLOGIQUES
Audéoud a injecté avec succès à des pneunioniques des doses .de 2 à -1 centimètres cubes de sang provenant de pneunioniques ayant fait leur crise; dans deux cas il a obtenu une amélioration considérable et la chute de la température dans les quinze heures qui ont suivi l'injection. Bouchard, Roger, Charrin, Maragliano ont obtenu des effets favorables dans les mêmes circonstances.
Pour ces recherches on peut prélever sans inconvénient du sang chez les pneunioniques entrant en convalescence, en employant la technique exposée page 193 : le sang est puisé dans une veine du pli du coude à l'aide de la seringue de Debove.
Agglutination. — Dans les affections à Pneumocoque, le sérum de l'homme et des animaux acquiert la propriété d'agglutiner le Pneumocoque. Le pouvoir agglutinant reste toujours faible et ne peut être démontré par le procédé de Widal ; il apparaît dans les cultures en sérum non dilué (Bezançon et Griffon).
Le sérum recueilli purement ne doit pas être imprégné d'hémoglobine. 11 est. ensemencé avec une trace de culture en sérum de lapin neuf et est placé à l'étuve à 37° pendant quinze à seize heures.
L'agglutination peut être macroscopique , ou ne devenir évidente qu'à l'examen microscopique ; elle est très visible sur une goutte de culture étalée, séchée et colorée (aspect en tête de méduse, de Bezançon et Griffon). Dans le sérum normal d'homme, de lapin, de chien, l'agglutination ne se produit jamais.
Dans les pneumonies, broncho-pneumonies, angines à Pneumocoque, etc., la réaction est toujours positive, mais elle diminue à la défervescence et disparaît vite.
La réaction ne se manifeste pas avec tous les Pneumocoques, elle est en quelque sorte individuelle ; très souvent les Pneumocoques du laboratoire donnent des résultats négatifs et on n'obtient l'agglutination qu'avec le microbe isolé du malade (Bezançon et Griffon).
LE DIPLOCOQUE INTRACELLULAIRE.
Sousle nom de Diplococcus intracellularis meningitidis (1), Weichselbaum a décrit un microbe qui semble l'agent de la méningite cérébro-spinale épidémique; il convient de dire cependant que le microbe de Weichselbaum n'a pu être incriminé dans tous les cas de méningite cérébro-spinale épidémique et (pie parfois le liquide céphalo-rachidien contient du Pneumocoque type (Wolf). Les recherches de Weichselbaum ont été confirmées par de nombreux auteurs (Jaeger, Scherer, Bonome, Bezançon et Griffon, etc.). Schiffatrouvé leMéningocoque dans les fosses nasales d'individus sains.
Maladie expérimentale. — Le lapin et la souris sont réceptifs et présentent les réactions que nous avons étudiées à propos du Pneumocoque Le lapin jeune est plus sensible que le lapin adulte.
(I) Synouymie : Mêningocoque ; Streptococcus meningitis capsulatus.
LE DIPLOCOQUE INTRACELLULAIRE
Le cobaye no succombe qu'à 1 inoculation de fortes doses de cultures virulentes dans le péritoine ou les poumons.
Recherche et diagnostic. — Chez l'homme vivant, recueillir du liquide céphalo-rachidien par ponction lombaire (Voy. p. 201); examiner aussi le mucus nasal. Sur les cadavres, rechercher le microbe dam le sang, le* exsudais méningés, le liquide céphalo-rachidien, etc.
Préparer des lamelles pour l'examen microscopique; cultiver eu sérum de lapin jeune et inoculer à la souris et au lapin.
Un des caractères les plus importants pour le diagnostic est l'inclusion de la plupart des microbes à l'intérieur des leucocytes ; la présence presque exclusive dans lesculluresenbouillon âgéesde trois à cinq jours <le longues chainettes à éléments assez régulièrement arrondis, l'agglutination des cultures en sérum normal de lapin jeune sont aussi de bons caractères.
Aspect microscopique. — Dans les exsudais le Méningocoqui présente sous la forme de diplocoques lancéolés, rappelant l'aspect du Pneumocoque et parfois celui du Gonocoque; ça et là on trouve quelques grains isolés ou de très courtes chaînettes. Certains éléments semblent dépourvus de capsule. Le plus grand nombre des méningocoques se trouvent inclus dans le proloplasma des leucocytes ou des globules de pus.
Dans les cultures en milieux liquides on trouve, a côté de quelques grains isolés, de nombreuses chainettes, parfois très longues» constituées par des éléments arrondis et qui ne sont pas groupés par paires aussi nettement que dans les chaînettes du Pneumocoque. Le microbe est capsulé dans les cultures en milieux albumineux.
Coloration. — Le Méningocoque se colore facilement par les couleurs basiques d'aniline et prend le Grain ; cependant, dans les lamelles préparées avec les exsudats, de nombreux microbes se décolorent quand on les soumet à l'épreuve de cette méthode : ce sont vraisemblablement des cadavres de Méningocoques ayant subi un commencement de désintégration.
Cultures. — Le Mëningocoque ne cultive pas à la température ordinaire (1); la température optima est 37°.
Indifféremment aérobie, il aime les milieux qui conviennent au Pneumocoque. 11 perd rapidement, au moins pour lë diplocoque type, sa virulence dans les milieux de culture ordinairement employés. Nous n'insisterons pas sur les caractères des cultures en bouillon, sur gélose, sérum coagulé, qui se rapprochent de ceux des cultures du Pneumocoque. Dans le sérum liquide de lapin jeune et neuf, on observe un phénomène important: la culture est abondante, composée de chaînettes, mais il se produit une véritable agglutination analogue à celle que l'on observe en cultivant le Pneumocoque dans le sérum de lapin immunisé.
(1) Thiercelin cl Rosentlial ont étudié un échantillon de Mëningocoque qui poussait sur gélatine à 15°; mais par d'autres caractères ce microbe semble se différencier du Diplocoque de Weichsclbaum.
d'après Wcichselbaum .
L'ENTÉROCOQUE.
L'ENTÉROCOQUE.
Escherich, 'Pavai, Eguet ont signalé depuis longtemps des streptocoques encapsulés dans l'intestin des nouveau-nés; en 1894-1897 nous avons étudié chez deux malades atteints de suppurations post-typhoïdiques (pleurésie purulente, arthrites suppurées multiplesUin nouveau « streptocoque encapsule ». C'est ce microbe qui a été définitivement décrit par Thiercelin sous le nom d'Entérocoque.-
L'Entéroeoque de Thiercelin cause un grand nombre d'entérites et d'entéro-colites chez lés enfants, l'entérite muco-membraneuse de l'adulte; il semble jouer un rôle dans la pathogénie de l'appendicite, de l'embarras gastrique, de certains ictères ; il cause certaines complications delà fièvre typhoïde, etc. 11 est un hôte habituel de l'intestin, à l'état normal.
Maladie expérimentale. — La souris est très sensible; après l'inoculation sous-cutanée, elle succombe en vingt-quatre heures à la septicémie; on trouve l'Entérocoque dans le sang et le contenu diarrhéique de l'intestin.
Le lapin est moins réceptif; il ne succombe qu'à l'inoculation de fortes doses de cultures en bouillon; les lésions intestinales (diarrhée, sécrétion de mucus) sont constantes. L'Entérocoque que nous avons isolé du pus d'un typhique tuait le lapin en quinze à vingt jours avec des suppurations articulaires multiples (inoculation intraveineuse).
Le cobaye n'est pas réceptif (Thiercelin); cependant, d'après Rosenthal, « les cobayes tués par injection intraveineuse » présentent des lésions intestinales.
Recherche et diagnostic. — Dans les selles normales on recherche l'Entérocoque par l'examen microscopique; les cultures échouent d'ordinaire.
Dans le pus, les selles de l'entérite, l'examen microscopique- donne souvent l'apparence d'une culture pure de Pneumocoque. Les cultures sont aisées à réussir ; on pourra pratiquer des isolements sur gélatine ou gélose, puis des ensemencements en bouillon. Les inoculations seront prat iquées avec une culture en bouillon âgée de vingt-quatre heures chez la souris et le lapin.
Le diagnostic sera basé sur plusieurs points : 1° culture à la température ordinaire; 2° culture minime en sérum liquide; 3° culture minime à l'abri de l'air; 4° formes nombreuses en streptocoques dans les cultures.
Caractères microscopiques. — Dans les selles normales, l'Entérocoque se présente sous l'aspect d'un diplocoque à grains arrondis ou plus ou moins lancéolés, de volume très variable, rarement encapsulés.
Dans le pus, les selles de l'entérite, la forme est la môme, mais beaucoup de grains sont encapsulés, on trouve aussi des chaînettes de deux diplocoques. Thiercelin a décrit des formes en diplobacilles.
Dans les culture* jeunes, on trouve de nombreux diplocoques et de courtes chaînettes ; plus tard les chaînettes deviennent longues et sont réunies en amas, comme agglutinées.
Coloration. — L'Entérocoque se colore aisément par les couleurs basiques d'aniline et prend le Gram.
Cultures. — L'Entérocoque cultive à la température ordinaire : la température optima est de 3à°-37°. Le sérum liquide convient mal; le bouillon est très favorable. L'Entérocoque pousse mal à l'abri de l'air. Dans tes cultures en milieux liquides, il conserve fort longtemps sa vitalité et sa virulence : Thiercelin a pu réensemencer au bout de plusieurs semaines une
L'ENTÉROCOQUE.
culture eu bouillon; nous-mème avons obtenu la mort chez le lapin avec une culture de sixième passage en bouillon-sang.
D'après Thiercelin, l'Entérocoque formerait des spores.
Bouillon. — Trouble au bout de vingt-quatre heures, puis le liquide s'cclaircit et il se forme au fond du tube un dépôt inuqucux blanchâtre.
Bouillon-sang . — D'abord trouble léger, puis séparation d'une gangue muqueuse englobant de nombreux microbes, flottant pendant douze jours dans le liquide puis tombant au fond du vase. Chaînettes, diplocoques capsulés.
Sérum liquide. — Culture grêle, petit dépôt glaireux formé par des grains et des chaînettes encapsulés.
Gélose. — Petits points arrondis, d'abord transparents puis opaques, donnant l'aspect d'une culture de Streptocoque.
Gélatine. — Petits points blancs, opaques, arrondis, analogues aux colonies de Streptocoque. Pas de liquéfaction.
Lait. — Culture très grêle ; pas de coagulation.
Pomme de terre. — Pas de développement apparent ; le raclage et l'examen microscopique de la surface de la pomme de terre dénotent un développement évident.
En résumé :
L'Entérocoque présente un certain polymorphisme ; il est intermédiaire au Pneumocoque (aspect microscopique) et au Streptocoque pyogône (caractères des cultures) et forme une transition entre ces deux espèces.
