RECHERCHE ET ISOLEMENT
par le krystall-violel phéniqué ou la fuchsine de Ziehl diluée; quelques préparations seront soumises à la réaction de Gram qui colore le Bacille de Nicolaïer.
11 est souvent nécessaire de préparer plusieurs lamelles pour rencontrer le bacille qui existe en quantité minime et dont la présence peut être masquée par le grand nombre des microbes associés. Rarement le bacille est en quantité notable et les microbes associés sont peu nombreux ; la figure 198 reproduit une lamelle de pus obtenue dans un cas de ce genre ; ici, la recherche est facile et rapide.
De ce que l'on n'a pas rencontré le bacille à l'examen microscopique, il ne faut pas rejeter l'hypothèse de son existence, mais soumettre le pus à l'épreuve des cultures.
b. Cultures, isolement. — Kitasato a le premier indiqué une méthode permettant d'extraire le Bacille du tétanos, à l'état de pureté, d'un pus tétanique. Son procédé, modifié depuis par Vaillard et Vincent, est basé sur la résistance de la spore à la chaleur et les propriétés anaérobies du bacille. On opérera ainsi qu'il suit :
1° Ensemencer le pus ou le produit tétaniques dans du bouillon r > de bœuf et cultiver dans le vide à 38°.
2° Dès le cinquième ou sixième jour, le bouillon Iroublé contien de nombreux bacilles en épingle mêlés à d'autres microbes anaérobies; on aspire un peu de la culture dans un tube mince (l'effiluie d'une pipette Pasteur) dont, après remplissage, on scelle les deux extrémités par un trait de chalumeau. Le tube ainsi préparé est soumis pendant une ou deux minutes à la température de 100°. Ce chauffage respecte les spores du tétanos, mais tue la plupart des germes étrangers.
3° Le contenu du tube chauffé est ensemencé en bouillon dans le vide; dans la culture obtenue, le Bacille du tétanos domine et peut même se trouver à l'état pur. En répétant deux ou trois fois le chauffage et la culture dans les mêmes conditions, il est possible d'obtenir le Bacille du tétanos à l'état pur.
4° Souvent, cependant, le Bacille de Nicolaïer reste mélangé au Vibrion septique et à un autre bacille anaérobie, non pathogène et à spore non exactement terminale. Dans ce cas, l'opération devra être terminée par un isolement en tube de Vignal. On ensemence un tube de gélatine avec une trace de culture et on en aspire le contenu dans des tubes de Vignal (Voy. p. 112). On reconnaît aisément les colonies isolées du Bacille de Nicolaïer aux caractères que nous avons exposés plus haut ; on prélève purement une trace d'une colonie et on la reporte en bouillon.
c. Inoculations. — On inocule directement au cobaye ou à la sou-
*0b LE BACILLE DU TÉTANOS.
ris un peu de pus ou un petit fragment isolé dans la plaie télanigène; les symptômes du tétanos apparaissent rapidement chez l'animal inoculé. On soumettra également les cultures à l'épreuve de l'inoculation.
Article IV PROPRIÉTÉS BIOLOGIQUES.
Les spores du Bacille du tétanos sont douées d'une très grande résistance aux agents de destruction. En vase clos, en milieu humide, elles supportent pendant six heures une température de -(-80° et pendant plus de deux heures une température de 90°. Elles résistent trois à quatre minutes à la. température de l'ébullilion, mais sont sûrement détruites à cette température au bout de huit minutes.
Desséchées, les spores mêlées à de la terre et conservées à l'air libre, à l'abri de la lumière, conservent pendant plusieurs mois leur vitalité et leur virulence (Kitasato), mais l'exposition de spores desséchées sur un papier ou un fil de soie à l'air et à la lumière diffuse, ou à la radiation solaire, leur fait subir rapidement des modifications profondes.
Ces modifications varient avec la durée d'exposition des spores. Leur germination devient d'abord moins rapide et leur culture moins active : puis elles ne donnent plus naissance qu'à des bacilles asporogèncs et non pathogènes; enfin elles périssent. Tous les termes de cette série se trouvent réalisés en moins d'un mois. Mais, quand la lumière agit à l'abri de l'air, les spores desséchées résistent mieux et peuvent encore germer et donner des bacilles sporulés et actifs après plus de deux mois dont cinquante-neuf heures d'insolation (Vaillard et Vincent).
Le Bacille du tétanos dans les couches superficielles du sol est donc cxposé à des causes incessantes de destruction et d'atténuation; il disparaîtrait rapidement s'il ne trouvait dans son passage à travers le tube digestif des herbivores des conditions favorables à son entretion et à sa multiplication (Sanchez Toledo et Veillon).
Desséché dans le pus, les liquides albumineux, dans les corps poreux, tels qu'échardes de bois provenant de plaies tétaniques, le Bacille tétanique garde longtemps sa vitalité et sa virulence.
Knud Faber, puis Vaillard et Vincent, en filtrant des cultures de tétanos en bouillon ont obtenu un liquide très toxique dont l'inoculation produit chez les animaux un tétanos typique (1).
(1) Bricçer, Vcrlioogen et lioer, Kilasato avaient isolé des cultures tétanique* de? subs-
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Préparation de la toxine. — On ensemence le bacille dans du bouillon de bœuf peptonisé frais et disposé dans un flacon selon le procédé indiqué page 104. Après quatre à cinq semaines de culture à l'éluve à 38°, à l'abri de l'air, la culture est filtrée sur la bougie Ghambeiiand. On obtient ainsi un liquide très toxique, tuant la souris à la dose de 1/4 000e de centimètre cube injecté sous la peau.
On peut encore augmenter d'une manière remarquable la toxicité des cultures en bouillon en utilisant la propriété du microbe de se développer -dans [un milieu où une première génération a déjà vécu et élaboré son poison. Une culture eu bouillon âgée de vingt jours est filtrée sur la bougie; dans le filtrat, on ensemence de nouveau du Bacille tétanique. Au bout de vingt jours, on filtre une seconde l'ois ; au filtrat on ajoute environ 1/15 de bouillon neuf stérile, puis on ensemence une troisième fois avec le bacille. Cette troisième culture filtrée donne une toxine capable de tuer les souris au 1/ 100000e de centimètre cube.
L'expérience a montré que la composition du milieu de culture influe beaucoup sur l'activité du poison ; le bouillon de bœuf peptonisé est l'un des milieux les plus favorables.
Action de la toxine sur les animaux. — L'inoculation de doses minimes de toxine produit un tétanos mortel.
Les toxines les plus actives obtenues par Vaillard et Vincent tuent le cobaye au millième de centimètre cube, la souris au 1/100 000e.
Quand on injecte une quantité moindre de toxine, on détermine un tétanos local intéressant uniquement les muscles voisins du point d'inoculation; la toxine se comporte alors comme un poison neuromusculaire.
La toxine tétanique se diffuse très rapidement dans l'organisme; si on en injecte une fraction de goutte vers l'extrémité terminale de la queue d'un rat, région où l'absorption est très lente, on peut, trois quarts d'heure après l'injection, sectionner la queue à 2 ou 3 centimètres au-dessus du point inoculé sans que l'évolution de la maladie soit modifiée ; l'animal meurt presque aussi rapidement que le témoin.
Le poison tétanique injecté sous la peau ou dans le sang va atteindre de préférence les cellules de la moelle épinière dont les lésions produisent les contractures caractéristiques : il existe une affinité spéciale entre la toxine tétanique et la cellule nerveuse ; cette affinité se manifeste in vitro.
lances possédant les caractères des ptomaïnes et auxquelles ils attribuaient les symptômes du tétanos; ou sait aujourd'hui que les ptomaïnes ne sont pour rien dans la toxicité des culturcs du Bacille de Nicolaïer.
W assermann et Takaki, mélangeant avec de la toxine tétanique une émulsion de substance cérébrale puis centrifugeant le mélange, obtiennent un liquide opalin ne contenant presque plus de toxine. La toxine n'a pas été détruite par cette opération, mais simplement fixée comme une matière colorante par la substance nerveuse ; elle adhère à cette substance et peut être, mise de nouveau en évidence, sa nature ne s'est pas modifiée (Metchnikoff et Marie, Danysz) : les mélanges neutres de cerveau et de toxine redeviennent toxiques en vieillissant, la toxine diffusant de nouveau dans le liquide ambiant, redevenant libre; au contraire, les mélanges actifs de toxine et d'antitoxine deviennent, avec le temps, moins toxiques (Knorr). Le carmin émulsionné dans la solution physiologique de NaCl agit de la même façon, à la condition de n'avoir été ni stérilisé à la vapeur ni macéré; il fixe la toxine, le filtrat est inactif (Stoudensky). Dans ces mélanges, la toxine est fixée par les grains de substance cérébrale ou de carmin; injectée dans l'organisme, elle n'a pas le temps de diffuser, les leucocytes l'absorbent et la détruisent.
Dans l'organisme il se produit un phénomène analogue à celui que nous venons d'étudier in vitro. La toxine injectée sous la peau du cobaye est lixée après un certain nombre d'heures par les cellules nerveuses de la moelle, et c'est alors qu'éclatent les symptômes tétaniques. La démonstration directe de ce fait est fournie par la gravité de l'inoculation en plein tissu nerveux.
Le lapin est très résistant à l'inoculation du poison tétanique sous la peau ou dans le sang: il faut une dose de 2,5 centimètres cubes de toxine pour le tuer en quatre jours; or, il succombe en moins de vingt heures à l'injection intracérébrale de 10 centimètres cubes de là même toxine. Dans ce cas la maladie évolue suivant un type spécial, c'est le tétanos cérébral de Roux et Borrel ; l'animal présente une excitation extraordinaire, est en proie à des hallucinations, à des terreurs soudaines, à la folie en un mot, puis apparaissent des crises convulsives intermittentes, des troubles moteurs, de la polyurie, la mort arrive enfin. Le cobaye, le rat, prennent de même le tétanos cél ébrai avec des doses minimes de toxine injectées dans la substance des hémisphères.
La résistance du lapin à la toxine inoculée sous la peau ou dans le sang ne tient donc pas à une insensibilité relative des cellules nerveuses, mais à ce que beaucoup du poison injecté n'arrive pas à ces cellules et est détruit dans un endroit indéterminé (probablement les phagocytes) de l'organisme (Roux et Borrel).
Technique. — Après incision des parties molles, faire avec un forêt un trou dans le crâne en limitant la perforation au moyen d'un curseur de façon à ne pas blesser la dure-mère, puis enfoncer l'aiguille de la seringue à la profondeur voulue, déterminée d'avance par un curseur, et injecter la toxine. Les animaux tolèrent très bien ces inoculations intracérébrales, on
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peut sans accident injecter ainsi du bouillon stérile à la dose de 8 gouttes chez le cobaye en deux piqûres, et de 0,5 centimètre cube chez le lapin.
Nature du poison. — Le poison tétanique est exlraordinai renient actif.
Évaporé dans le vide, un centimètre cube d'une toxine tuant la souris à la dose de 1/100000° de centimètre cube donne un résidu fixe de 0?r,0i0 ; soumis à la calcination, ce résidu subit une perte de 0f?r,025 représentant la matière organique; admettons, ce qui est évidemment inexact, que la totalité de la matière organique soit constituée par la toxine elle-même, il en résultera que ces 25 milligrammes de toxine peuvent tuer cent mille souris, ce qui porte la dose mortelle du principe actif à 0er,00000025 pour une souris; or, sur cette quantité, une très large part appartient aux principes inactifs tels que peptones, etc. (Vaillard et Vincent).
Le poison tétanique présente tous les caractères des enzymes ou des diastases; chimiquement, il est très analogue à celui de la diphtérie. 11 est profondément altéré par un chauffage de trente minutes à 65° ; il est détruit complètement en trois heures à 80°.
Conservé en vase clos, à l'abri de l'air et de la lumière, la toxine garde longtemps son activité ; mais elle s'affaiblit rapidement quand elle est exposée à la lumière diffuse et à l'action de l'air; sous l'influence des rayons solaires et de l'air, la toxicité disparait en peu de jours.
Le poison tétanique a la propriété d'adhérer aux précipités amorphes que l'on produit au sein des liquides où il est en dissolution.
L'addition de chlorure de calcium à la toxine détermine un précipité de phosphate de chaux qui entraîne une partie de la substance active ; après un lavage soigneux, un petit fragment de ce précipité gros comme la tête d'une épingle détermine, quand on l'insère sous la peau d'un cobaye, un tétanos mortel en une trentaine d'heures ; après précipitation, il reste encore une grande quantité de toxine en dissolution dans le liquide.
Un peu de toxine tétanique obtenue par filtration, versée dans un tube de gélatine stérile, liquéfie en quelques jours cette gélatine: le phénomène est dû à l'existence dans la toxine d'un ferment diastasique liquéfiant, ferment qui semble être différent de la substance toxique.
Evaporée à + 25° dans le vide sur l'acide sulfurique, la toxine laisse un résidu brun, amorphe, extrêmement actif. L'alcool à 90° dissout une faible quantité de ce résidu et laisse, après évaporation, une substance blanchâtre, d'odeur vireuse et non toxique. La partie du résidu non dissoute par l'alcool est très soluble dans l'eau et donne un tétanos typique au cobaye; l'alcool la précipite de sa solution aqueuse. La substance active contenue dans le résidu dialyse lentement.
[. Hehring et Kilasato échouent à conférer l'immunité aux animaux par l'injection de petites doses répétées de toxine tétanique: les animaux succombent au cours de l'immunisation ; ils emploient alors la méthode des inoculations combinées de toxine el de trichlorure d'iode (Voy. Diphtérie) et arrivent à vacciner les lapin-,
II. — Brieger, Wassermann et Kilasato emploient pour la vaccination contre le tétanos la méthode de l'atténuation des cultures par le bouillon de thymus (Voy. Dipthérie). Une culture de tétanos en solution de peptone neutre, âgée de vingt-quatre heures et par conséquent asporulée, est mélangée à deux volumes de bouillon de thymus et injectée à doses progressives sous la peau des animaux ; cette méthode est compliquée et incertaine.
III. — Vaillard, avant le travail des auteurs précédents, était parvenu à vacciner les lapins et les cobayes en leur injectant des cultures partiellement dépourvues de leur toxicité par le chauffage ; nous lui empruntons la technique de l'immunisation d'un lapin:
A trois jours d'intervalle, ou injecte dans une veine de l'oreille deux doses de 10 centimètres cubes d'une culture filtrée chauffée pendant une heure à G0°. Cinq jours après, ou injecte 10 centimètres cubes du même filtrat chauffé une heure à 55°; enfin, après un nouveau délai de cinq jours, on injecte 10 centimètres cubes de la culture chauffée à 50° pendant une heure. — Dès ce moment, l'animal est immunisé ; on renforce ensuite l'état réfractaire au moyen d'injections de cultures filtrées pratiquées tous les huit ou dix jours à des doses croissantes de 5, 10, 15, 30 centimètres cubes.
IV. — Roux et Vaillard emploient actuellement de préférence, pour pratiquer les inoculations vaccinales, la toxine additionnée de solution iodée (Voy. Diphtérie). Leur toxine est obtenue comme nousl'avons dit plus haut, elle doit tuer la souris à la dose de 1/4 000e de centimètre cube; elle est mélangée à la solution de Gram au moment de l'utilisation. Nous décrirons, comme exemples, l'immunisation d'un lapin et d'un cheval :
Lapin. — Le premier jour l'animal reçoit sous la peau 3 centimètres cubes de toxine additionnés de 1 centimètre cube de solution de Gram.
Le cinquième jour on injecte de même 5 centimètres culu s de toxine 4- 2 centimètres cubes de solution de Gram.
Le neuvième jour on donne 12 centimètres cubes de toxine + 3 centimètres cubes de solution de Grain.
Le dix-septième jour l'immunisation de l'animal est obtenue; son sérum présente la propriété antitoxique; on peut dès lors lui donner de huit jours en huit jours, 5, 10, 15, 20, 30, 40 centimètres cubes de toxine pure; plus tard, on rapprochera les injections et on les pratiquera dans le sang ou le
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péritoine; on peut arriver à donner d'un seul coup jusqu'à 100 et 1*20 centimètres cubes de toxine.
Cheval. — On débute par une dose de I à 5 centimètres cubes d'un mélange à parties égales de toxine et de liqueur de Grain que l'on injecte sous la peau. Les injections sont répétées tous les trois ou quatre jours: drs le quinzième jour, on arrive à 10 centimètres cubes d'un mélange de deux parties de toxine pour une de liqueur iodée; on augmente progressivement la quantité injectée et la proportion de toxine dans le mélange. Du vingt-cinquième au trentième jour, on arrive à donner la toxine pure aux doses croissantes de 10, 15, 20 centimètres cubes, tous les deux ou trois jours ; vers le quarantième jour, on injecte, soit sous la peau, soit dans la jugulaire, des doses croissantes de 50, 100, 150 centimètres cubes. Après les injections massives dans les veines, le cheval peut présenter des accidents passagers tels que sueurs, coliques, diarrhée, élévation de la température de 1° à 2°. L'immunisation est complète vers le troisième mois.
On peut recueillir du sang une dizaine de jours après la dernière inoculation; on maintient l'immunisation par des injections répétées tous les dix ou quinze jours de doses de 200 à 300 centimètres cubes de toxine.
V. — Vaillarda obtenu l'immunisation du lapin, en lut injectant à plusieurs reprises dans le tissu cellulaire sous-cutané de très petites doses de spores tétaniques privées de toxine et additionnées d'un peu d'acide lactique; l'animal ainsi vacciné résiste à l'inoculation de doses ordinairement mortelles de toxine tétanique, mais son sang n'a pas de pouvoir antitoxique appréciable.
§ 4. - SÉROTHÉRAPIE.
Les propriétés antiloxiques du sang des animaux immunisés contre le tétanos ont été mises en lumière par Behring et Kitasato. Le sang d'un lapin immunisé est capable de détruire les toxines sécrétées par le Bacille de Nicolaïer; cette propriété existe dans le sérum dépouillé de tout élément cellulaire et se manifeste in vitro et in vivo ; elle manque dans le sang des animaux non réfractai res.
Le sang des animaux naturellement réfrac-taires, tels que la poule, ne possède pas la propriété antitoxique, mais il l'acquiert facilement quand on injecte à ces animaux de la toxine tétanique : l'injection de deux à trois doses de â0 centimètres cubes de toxine dans le péritoine d'une poule confère, au bout de douze à vingt jours, des propriétés antiloxiques énergiques au sang de l'animal. De même, le sang des lapins immunisés par injection de petites doses de spores ne possède pas de propriétés antitoxiques, mais on lui confère cette propriété en injectant aux animaux de la toxine tétanique.
Le lait des animaux immunisés possède également des propriétés antitoxiques actives; l'albumine de l'œuf des poules dont le sérum a élé rendu anlitoxique se montre inactive.
Roux et Vaillard ont fixé la technique et les indications de la sérothérapie du tétanos.
Préparation du sérum antitoxique. — On s'adresse de préférence au sérum du cheval pour les applications de la sérothérapie aux hommes et aux animaux; pour les recherches de laboratoire, le lapin est une bonne source de sérum.
L'immunisation du cheval est pratiquée comme nous l'avons dit plus haut (I).
Dès le troisième mois, le cheval peut fournir du sérum; on maintient et on exalte la puissance antiloxique de ce sérum en injectant à intervalles de quelques jours des fortes doses de toxine dans la jugulaire ou sous la peau ; après chacune de ces injections massives, la propriété antitoxique du sang diminue momentanément; aussi faut-il attendre une dizaine de jours après l'injection pour prélever le sang.
Le sérum sera conservé avec les précautions ordinaires ; il garde toutes ses propriétés quand on le soumet à la dessiccation dans le vide ; on peut ainsi conserver indéfiniment et sous un petit volume du sérum très actif.
Essai du sérum. — Pour évaluer l'activité du sérum, on adopte la notation de Behring qui mesure cette activité d'après la quantité de sérum nécessaire pour immuniser un gramme de souris. Le sérum obtenu par Roux et Vaillard est actif au 1/10 000 000% c'est-à-dire qu'un dixième de centimètre cube de ce sérum suffit pour immuniser 100 kilogrammes de souris, ou qu'une souris de 20 grammes est rendue réfractaire par l'injection de 2 millionièmes de centimètre cube de sérum.
In vitro, on mesure le pouvoir antitoxique d'après la quantité de sérum nécessaire pour rendre inoffensif un volume donné de toxine d'activité connue ; la propriété immunisante d'un sérum croit parallèlement à la propriété antitoxique.
Propriétés du sérum. — In vitro, le sérum des animaux immunisés mélangé à de la toxine tétanique, la rend instantanément inoffensive ; la dose de sérum à ajouter à un volume donné de toxine pour la neutraliser varie avec l'activité de ce sérum; on peut obtenir un sérum neutralisant vingt fois son volume de toxine.
L'injection dans le péritoine d'un cobaye d'une dose de sérum représentant la trois cent quarante-cinquième partie du poids de l'animal confère rapidement au sang une propriété antitoxique mani-
(1) Pour tous les détails de technique, se reporter à ce que nous avons dit à propos du tri uni antidiphtérique.
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feste- le sang d'un lapin qui a reçu la cent cinquantième partie de son poids de sérum possède la propriété antitoxique et un pouvoir immunisant notable.
L'injection sous-cutanée de un centimètre cube de sérum antitoxique pratiquée dix cà quarante minutes avant l'inoculation de •1/150° de centimètre cube de toxine (dose mortelle en quarantehuit heures pour les témoins), préserve les cobayes du tétanos ; mais, chez les animaux qui reçoivent la toxine moins de quarante minutes après le sérum, la prévention n'est pas complète, il se produit des symptômes tétaniques d'autant moins marqués que les animaux ont reçu le sérum plus longtemps avant le poison, cependant la guérison survient toujours.
11 est beaucoup plus difficile de prévenir le tétanos si on intervient seulement après l'injection de la toxine, pendant la période d'incubation ; de même, il est moins aisé de prévenir l'affection produite par le bacille pullulant dans les tissus.
Roux et Vaillard résument ainsi leurs recherches sur la prévention du tétanos :
« 1° Le sérum antitoxique prévient sûrement le tétanos, même à doses extrêmement petites, lorsqu'il est injecté avant la toxine tétanique. L'immunité conférée par le sérum est passagère; elle diminue vers le quinzième jour et disparait du quarantième au cinquantième jour.
« 2° Lorsque le sérum est injecté en même temps que la toxine, on observe toujours un tétanos local, même quand la quantité do sérum injectée est très grande.
«3°Lorsque lesérumest injectéaprès la toxine, mais avant l'apparition de tout symptôme tétanique, il y a toujours un tétanos local. La dose de sérum nécessaire pour empêcher la mort est d'autant plus forte que celui-ci est injecté plus tard après l'infection. Après un certain temps écoulé, variable avec les animaux, la prévention n'est plus possible, même avec de grandes quantités de sérum.
« \° Le tétanos est plus ou moins rapide et par conséquent plus ou inoins facile à prévenir, selon le lieu où l'injection de la toxine est pratiquée. (Les animaux inoculés à la patte résistent mieux que ceux qui ont reçu la toxine sous la peau du thorax ou de l'abdomen.) « Ces conclusions s'appliquent à des doses moyennes de toxine. «5° Lorsque l'infection est produite par le bacille tétanique pullulant dans les tissus, la prévention dépend encore de la quantité de sérum injecté et du temps écoulé entre le moment de l'infection et celui de l'intervention. Elle échoue le plus souvent quand les animaux sont inoculés de façon qu'ils aient un tétanos à marche rapide. Elle peut réussir dans les infections Lentes, et encore, dans ces cas, la prévention n'est pas toujours définitive si ou n'enlève pas le foyer. La maladie qui paraissait enrayée peut reprendre son cours et la mort survenir après des temps très longs. »
La guérison du tétanos déclaré est donc difficile à obtenir; quand les premiers symptômes ont éclaté, la toxine a déjà agi sur les
éléments nerveux, l'antitoxine détruit le poison circulant dans Je corps, mais ne peut rien sur les lésions acquises. De très fortes doses du sérum le plus actif restent impuissantes contre un tétanos à marche rapide, elles rendent le sang antitoxique et immunisant, mais la maladie suit son cours. Dans les cas de tétanos moins sévères, le sérum prolonge la vie, mais si on n'enlève pas le foyer d'infection la maladie reprendra son évolution quand le pouvoir anliloxique du sang aura diminué. Aussi chez l'homme la sérothérapie du tétanos n'a-t-elle fourni que des résultats plus que médiocres ; le traitement échoue dans les formes graves, il ne semble donner quelques résultats que dans les cas subaigus et chroniques, et on sait que ces cas, traités par les méthodes ordinaires, se terminent souvent par la guérison. Quoi qu'il en soit, la sérothérapie est inoffensive et doit être tentée dans le tétanos humain.
Voici, d'après Roux et Vaillard, la conduite à tenir :
« Injecter aussitôt et d'emblée une centaine de centimètres cubes de sérum très actif, exciser le foyer d'infection. Administrer encore le lendemain et la surlendemain 100 centimètres cubes do sérum par jour. Si le tétanos est enrayé, après une dizaine de jours, surtout si on n'a pas pu enlever le foyer, donner encore du sérum pour prévenir ces retours de tétanos que nous avons signalés chez les animaux. »
Devant l'échec du traitement, on a cherché à prévenir le tétanos. Toutes les fois que l'on se trouve en présence d'une plaie contuse et souillée de terre, il est indiqué d'injecter préventivement 20 à 30 centimètres cubes de sérum antitétanique. Nocard, en médecine vétérinaire, a obtenu de très beaux résultats en faisant l'injection antitétanique préventive dans les cas de blessures du pied et aprè^ la castration.
Inoculations intracérébrales. — En s'en tenant à ce que nous venons de dire, il est difficile de comprendre comment l'inloxication tétanique continue à évoluer chez l'animal ayant reçu de l'antitoxine et dont le sang est devenu préventif et antitoxique. Les récentes recherches de Roux et Borrel ont fait la lumière sur le mode d'action de l'antiloxine et donné un nouvel essor à la sérothérapie du tétanos.
Un mélange neutre de toxine et d'antitoxine est inoffensif pour les cellules nerveuses, il peut être injecté sans inconvénient dans le cerveau du lapin. Or un lapin immunisé par le sérum, non influencé quand on lui injecte sous la peau des doses de toxine cinq fois mortelles pour l'animal neuf, succombe à une dose de 0cc,t de
(i) Cotte ilosn, (|uand on l'injecte souo la peau, est absolument sans action sur un lapin nenf.
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toxine inoculée dans le cerveau. Cependant son sang est tellement antitoxique qu'à la dose de quelques gouttes il neutralise des doses considérables de toxine ; bien plus, une trace de ce sang accidentellement épanchée sur le trajet intracérébral de l'aiguille d'inoculation suffît à neutraliser la toxine injectée et l'animal échappe à la mort.
L'antitoxine injectée sous la peau ou dans le sang des animaux reste dans le sang, elle n'a pas d'affinité pour les éléments nerveux ; ceux-ci, au contraire, extraient et fixent la toxine (Voy. plus haut). Chez un animal tétanique le sérum injecté sous la peau ou dans le sang limite l'intoxication en détruisant le poison circulant, mais il ne vient pas au contact de la toxine déjà fixée par les éléments nerveux, toxine qui va diffuser de cellule à cellule en étendant ses ravages. Ce n'est donc pas dans le sang des tétaniques qu'il faudra introduire l'antitoxine, mais bien dans les centres nerveux. La démonstration de la justesse de ces vues est fournie par les résultats de l'injection directe d'antitoxine dans le cerveau (1).
Roux et Borrel prennent un lot de cobayes auxquels ils inoculent sous la peau une dose mortelle de toxine ; au bout de vingtquatre heures ces animaux présentent des symptômes de tétanos. A quelques-uns d'entre eux on injecte alors un centimètre cube de sérum antitoxique sous la peau : la mort survient néanmoins. Aux autres, au contraire, on donne 4 gouttes du même sérum dans chaque hémisphère cérébral : le tétanos s'arrête et tous les animaux guérissent, mais ils peuvent garder longtemps des contractures localisées ; c'est que, en effet, l'injection a protégé les parties supérieures de la moelle contre la diffusion du poison, mais est restée inefficace vis-à-vis des lésions accomplies, d'où persistance des contractures existant lors de l'inoculation thérapeutique. De plus, quand la partie supérieure de la moelle est atteinte, l'injection arrive trop tard, elle ne sauve plus l'animal.
La guérison du tétanos humain semble devoir être la conséquence de ces recherches ; à l'heure actuelle il faut s'en tenir aux conclusions de Roux et Borrel : « Quelques gouttes de sérum antitétanique dans le cerveau guérissent mieux le tétanos que de grandes quantités introduites dans le sang ou sous la peau. »
(1) L'injection d'antitoxine dans la moelle épinière est très malaisée à pratiquer sans produire de lésions et ne semble pas avoir l'efficacité de l'injection intracérébrale.
