PROCÉDÉ DÉ L' AUTEUR

Dès 1896 nous avons fait subir au procédé d'Elsner des modifications rendant son emploi plus aisé et plus efficace dans les analyses d'eau. Les procédés à la gélatine ne permettent l'ensemencement que de petites quantités d'eau, même si on multiplie le nombre des plaques, ce qui complique beaucoup les recherches ; de plus, les plaques d'Elsner sont souvent liquéfiées dès le second jour par des saprophytes, et la recherche se trouve interrompue. Une pratique de plusieurs années nous fait préférer le procédé suivant, qui a l'avantage d'éliminer rapidement les saprophytes et de permettre l'ensemencement de quantités notables d'eau.

i° Dissoudre à chaud dans 1 000 grammes d'eau 20 grammes de peptone Chapoteaut, 5 grammes de sel marin et 2 grammes de phosphate de soude. Ne pas alcaliniser ; porter à 115°, filtrer, répartir en tubes à raison de 10 centimètres cubes par tube ; stériliser à 115°. Au besoin, on peut remplacer cette solution par le bouillon peptonisé ordinaire.

2° Au moment de l'emploi, prendre une dizaine de tubes d'eau de peptone; à chaque tube ajouter 15 à 30 gouttes de solution de Gram (Voy. p. 145), récemment préparée, puis 10 centimètres cubes de l'eau suspecte.

La quantité de liqueur de Gram à ajouter varie un peu avec la composition du bouillon; les premières gouttes ajoutées se décolorent rapidement, puis vient un moment (15e à 25e goutte) où le milieu garde une légère teinte brun rose qui disparaît en cinq à six minutes : c'est le moment où il faut arrêter l'addition de liqueur de Gram.

3° Porter les tubes à l'étuve à 37°-38°. Dans ces conditions le Colibacille pousse dès la huitième-douzième heure, le Bacille d'Eberth,