PROCÉDÉS APPLICABLES AUX COUPÉS
Les méthodes que nous venons d'indiquer s'appliquent, après de légères modifications, à la coloration des coupes; la particularité capitale est que la coloration doit toujours être faite à froi'l.
Procédé de Ziehl-Nelsen.
Procédé recommandé.
lo Colorer la coupe par un séjour d'un quart d'heure dans la fuchsine de Ziehl, à froid.
2o Faire agir pendant quelques secondes la solution acide: laver.
3° Achever la décoloration par l'alcool absolu jusqu'à ce que la coupe n'ait plus qu'une teinte rose pâle. Laver.
4° Colorer le fond avec la solution aqueuse de bleu de méthylène.
5° Laver, puis faire agir rapidement l'alcool absolu, l'essence de girofle et le xylol; monter dans le baume.
Procédé de Kûhne.
Procédé recommandé.
Ce procédé inédit de Kiihne a été rapporté par Borrel ; il réussit en particulier pour la coloration des coupes du poumon. L'action du chlorhydrate d'aniline est moins brutale que celle des acides minéraux et n'altère pas la disposition et la forme des cellules.
lo Faire agir sur la coupe l'hématoxyline de Bœhmer ou l'hématéine (p. 227) pendant deux minutes, pour colorer les noyaux des cellules. Laver à l'eau distillée.
2» Colorer quinze minutes à froid dans la fuchsine de Ziehl.
3° Faire agir sur la coupe, pendant quelques secondes, une solution aqueuse à 2 p. 100 de chlorhydrate d'aniline. 4° Décolorer à l'alcool absolu.
TD
Fig. -228. — Tubercule fibreux du poumon. — Méthode de Zielil-INelsen.
Après cette décoloration, les cellules du fond sont incolores (sauf les noyaux) ; on peut faire agir la solution aqueuse de jaune-aurantia qui colore en particulier les globules sanguins ; après l'action de l'aurantia, on déshydrate par l'alcool absolu.
5° Éclaircirpar l'essence de girofle, le xylol et monter dans le baume.
Procédé d'Ehrlich.
1° Colorer à froid pendant douze heures dans le violet aniliné.
2° Décolorer pendant quelques secondes avec l'acide nitrique au tiers. Laver.
3° Achever la décoloration à l'alcool absolu.
4° Faire agir pendant quelques minutes une solution aqueuse saturée de vésuvine.
o° Déshydrater rapidement à l'alcool absolu ; éclaircir par l'essence de girofle et le xylol. Monter dans le baume.
Procédé de Letulle.
1° Colorer les noyaux à l'hématoxyline, comme dans le procédé de Kuhne. Laver à l'eau distillée.
2° Faire agir pendant quinze minutes la fuchsine de Ziehl à froid Laver rapidement à l'eau distillée.
3° Laver pendant trente secondes à l'alcool absolu.
4° Faire agir pendant cinq minutes la solution suivante :
Vert d'iode ,
c ... , , 1 gramme.
Eau pl.6n.qu6e a 2 p. 100 100 cenliraôlrcs cubes.
5° Décolorer à l'alcool absolu.
6° Éclaircir à l'essence de girofle, au xylol. Monter dans le baume.
Le fond est leint en gris lilas très faible, les noyaux sont colorés en violet, les bacilles en rouge foncé. Cette méthode est applicable aux pièces durcies dans le liquide de Muller.
Procédé de Lustgarten modifié.
1° Colorer à froid^endant quelques heures dans la fuchsine phéniquée.
2°, 3°, 4°, 5° Opérer comme il a été dit à propos des lamelles (p. 537).
6° Laver à l'eau ; déshydrater rapidement à l'alcool absolu!
7o Éclaircir àl'essencede girofle, au xylol et monter dans le baume.
Cette méthode est utilisable pour la recherche, souvent délicate, des bacilles dans le foie ; elle est applicable aux pièces durcies par le liquide de Muller.
