A. — PROCÉDÉS ANCIENS

I. Procédé de Pasteur. — C'est le plus anciennement employé. Pasteur prend une série de ballons à long col emplis au tiers de bouillon de veau; le col de chacun de ces ballons est étiré à la lampe, puis le ballon est stérilisé et son eflilure fermée d'un trait de chalumeau, le bouillon étant encore en ébullition. Le ballon est

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ainsi privé d'air, il suffit de le transporter au lieu où l'on doit effectuer le prélèvement et d'en briser l'effilure, l'air s'y précipite avec les poussières qu'il renferme ; le col est alors scellé de nouveau et le ballon est abandonné à lui-même. On répète l'opération avec un grand nombre de ballons. Bientôt le contenu d'un certain nombre de ces ballons se trouble ; du nombre des ballons troublés, on déduit le nombre des germes contenus dans l'atmosphère.

Si, par exemple, ou a opéré avec 50 ballons dont chacun contient approximativement 500 centimètres cubes d'air et si 20 de ces ballons ont troublé, on dira : 25 litres d'air ont donné 20 germes, un mètre cube

renferme par conséquent, très approximativement, — X 10000, c'est-a-dire 8 000 germes.

Cette méthode exige un matériel considérable et encombrant,, on ne peut y avoir recours dans la pratique.

11. Procédé de Koch. — Le procédé de Ivoch consiste à exposer à l'air, pendant un temps plus ou moins long, des plaques de gélatine, sur lesquelles on étudie les colonies qui se développent par la suite; il ne peut être utilisé pour l'analyse quantitative.

UT. Procédé de Hesse. — Hesse a indiqué un procédé basé sur le principe de l'aéroscope et qui a le mérite de la simplicité ; malheureusement il ne fournit que des résultats approximatifs.

On prend un tube de verre long de 50 à 70 centimètres et ayant 4 à S centimètres de diamètre (lig. 279). On obstrue une de ses extrémités

Fis. 27'J. — Tube de Hesse.

avec un bouchon de caoutchouc traversé par un tube de verre muni d'un tampon d'ouate ; son autre extrémité est recouverte de deuxcapsules de caoutchouc superposées; la plus interne de ces capsules porte à son centre un trou de un centimètre de diamètre. On stérilise l'appareil, puis on y introduit par la capsule perforée environ 50 centimètres cubes de gélatine stérilisée liquéfiée, on remet immédiatement la deuxième capsule de caoutchouc, on place le tube dans une position horizontale et on laisse faire prise à la gélatine : celle-ci doit constituer dans le tube une couche régulière à surface horizontale, n'atteignant pas le niveau de l'orifice du petit tube de verre ni celui de l'ouverture du capuchon de caoutchouc. L'appareil est alors prêt à servir : au moment du besoin on enlève le premier capuchon

de caoutchouc, on relie le petit tube de verre à un aspirateur et on fait passer lentement 10 à lîî litres d'air. L'air entre par le trou du capuchon de caoutchouc, vient lécher la surface de la gélatine et y abandonne ses poussières. L'aspiration terminée, on replace la deuxième capsule de caoutchouc et on porte l'appareil àl'étuve à 20». Des colonies apparaissent bientôt sur la gélatine; elles sont plus nombreuses dans la première partie du tube; on lescompte et on fait les prélèvements nécessaires pour la détermination des espèces. Si l'on a fait passer 15 litres d'air et que l'on compte dans le tube 6 colonies bactériennes et 10 moisissures, l'air contiendra approximativement:

et

— X 10 000 = 4000 bactéries aérobies par mètre cube,

— X 10 000 = 6 666 moisissures par mètre cube, i a

Mais beaucoup de germes s'accolent aux parois du tube et sont perdus pour la numération ; de plus, si l'opération se poursuit pendant un certain temps, la gélatine sedessèche et devient impropre à la culture ; enfin le courant d'air doit être très lent, sans quoi beaucoup de germes sont entraînés.

B. — PROCÉDÉS ACTUELLEMENT EMPLOYÉS

Aux procédés que nous venonsd'étudier on préfère aujourd'hui ceux qui consistent à dépouiller l'air de ses germes au moyen du barbotement dans un peu de liquide visqueux, ou de la liltration sur un corps pulvérulent. On obtient ainsi sous un petit volume la totalité des germes contenus dans le volume d'air étudié; ces germes sont, ou disséminés dans le liquide, ou mélangés à la poudre qui constitue le filtre ; on n'a plus alors qu'à opérer selon les méthodes générales que nous avons exposées à propos de l'isolement des germes et des analyses d'eau. Il sera toujours bon de pratiquer des isolements sur plaques de gélose, Cn

Fip. 280. — Aspirateur à eau.

PROCÉDÉS ACTUELLEMENT EMPLOYÉS

même temps que Jes isolements sur gélatine, les plaques de gélatine étant d'ordinaire liquéfiées en peu de temps.

La mise en pratique de ces procédés d'analyse de l'air exige remploi d'appareils aspirateurs ; on. utilise de préférence l'aspirateur à eau (fig. 280) en usage dans les laboratoires de chimie, qui permet de mesurer très exactement la quantité d'air aspirée. On peut encore employer la trompe à eau, mais il faut, dans ce cas, interposer, entre l'appareil à barbotement et la trompe, un compteur à gaz qui renseignera sur les quantités d'air aspirées. L'aspiration doit toujours être lente, régulière, les bulles doivent éclater une à une dans le liquide du barboteur. De nombreux appareils permettent d'appliquer le principe du barbotement et de la filtration.