MYCÉLIUM
lorsque le parasite, cerné de tontes parts par les phagocytes, se trouve ainsi arrêté dans son développement et altéré dans sa forme. La production de massues hors de l'organisme n'est pourtant pas impossible comme le prétend Déléarde ; Domec a signalé leur présence dans de vieilles cultures sur milieux solides. Nous-
Fig. 4. — Cultures sur bouillon datant de sept mois et présentant, après un séjour de 24 heui'es à Tétuve : de nombreux filauients à massues (m), des boules hyalines {(/) représentant des massues en voie de désintégration, — et quelques filaments sporifères (s) (Béuard et Niooi.as). (Voy. planche I, fig G) (1/2 schématique).
même, dans une série de recherches pratiquées au laboratoire de médecine expérimentale de la Faculté de Lyon (L. Bérard et Nicolas), nous avons obtenu avec des cultures sur bouillon, datant de sept mois, sans réensemencement dans l'intervalle, les préparations ci-jointes, oii l'on peut reconnaître les massues à toutes les étapes de leur formation (octobre 1897) (fig. 4).
Pour prendre connaissance de l'évolution du parasite, il nous sufiira donc de suivre le développement <les lilaments mycéliens. C'est sur ce point, du reste, qu'ont porté la i)lupart des divergences d'opinion des au leurs.
Mycélium. — Les lilamenls du feulrage central d'un grain jaune apparaissent, au délml, comme des bâtonnets enchevêtrés, larges de 1 à 2 [JL sur '3 à (l de long, donc plus volumineux ([ne les bacilles de la tuberculose, à peu près rectilignes, plus souvent incurvés ou même tordus en spirale (surtout chez le bœuf où les éléments mycéliens sont d'ordinaire plus longs, plus volumineux et plus con-
14 BIOLOGIE DE L'aCTINOMYCES BOVIS.
tournes que chez l'homme j, presque toujours séparés les uns des autres, ou parfois en voie de fragmentation, avec des intervalles clairs dans leur intérieur ; quelques-uns sont moniliformes. Tel est leur aspect le plus constant, lorsqu'on les observe après coloration au violet de gentiane (méthode de Gram) dans un grain écrasé. Mais, si l'on transporte de tels filaments dans un milieu approprié : bouillon peptonisé, gélatine, agar, touraillon, etc., à une température convenable (la plus favorable est de 37 à 40 degrés), et si on les examine au bout de quarante-huit heures, on les trouve, soit simplement beaucoup plus nombreux et mélangés d'une quantité considérable de spores isolées, — soit, au contraire, extrêmement allongés, atteignant parfois 50 à 100 [x de longueur, ramifiés irrégulièrement et souvent partiellement fragmentés en éléments, qui bientôt vont se séparer et reproduire par sporulation de courts filaments nouveaux (fig. o, b).
Sporulation. — On peut suivre la sporulation proprement dite, dès le troisième ou quatrième jour, sur certains filaments dits reproducteurs qui se sont épaissis et différenciés des filaments voisins simplement végétatifs en apparence ; ceux-ci sont cependants susceptibles, à un moment donné, de fournir également des éléments reproducteurs par leurs ramifications. Le filament sporifère s'étrangle bientôt, se segmente de la périphérie au centre en un chapelet de corpuscules arrondis, qui vont enfin se détacher à l'état de &pores. Le filament tout entier contribue à la formation de ces spores qui diffèrent ainsi par là des spores endogènes des bactéries.
Dans sa germination, la spore donne le plus souvent naissance à deux prolongements faisant entre eux un angle obtus. Les bourgeons se ramifient rapidement et reproduisent à leur tour des lilaments de troisième ordre, si bien qu'au bout de trente à quarante heures, il est impossible d'apercevoir ce qui reste de la spore dans ce feutrage inextricable (Domec) (1).
Ce processus de reproduction est de notion récente et bien distinct de celui qui aboulit à la formation des massues. On avait cru d'abord que les massues, elles aussi, étaient analogues à des sporanges et devaient mettre en liberté des spores. Mais Bostrom,
(l) D'après Gasperixi (Congrès de Rome, 1894) les espèces du genre Act'momyces se multiplient normalement par des spores aériennes, et quand pour une cause quelconque la sporulation aérienne est impossible, on a des spores dans le mycélium (?).
SPORULATION.
lo
puis Sauvageau et Radais, Domec, démontrèrent nettement que la massue correspond, au contraire, à un produit de dégénérescence hyaline de l'exoplasme condensé sur les bords du filament mycélien, et semblant lui constituer une gaine qui, en réalité, n'existe pas à l'état distinct. Chaque massue est d'abord appendue à un filament qui l'embroche lotalement, ou lui tient seulement lieu de pédicule; plus tard le filament est détruit à l'intérieur
Fig. 5. — Massues (a) et spores (b) dans leurs rapports avec le mycélium (d'après Bostrôm).
de la massue. Celle-ci, libre désormais, apparaît striée concentriquement, à la façon d'un grain d "aniidoii ou d'un bulbe à écailles vitreuses. Assez régulièrement ovoïde au début, la massue est ensuite le siège dune désintégration progressive, ce qui va lui donner des contours irréguliers avec prolongements mîirilormes ou digitiformes, jusqu'au moment où elle sera totalement désagrégée et disparaîtra elle-même (fig. o «, etc.).
A mesure que le mycélium se transforme en massue, ses réactions colorantes changent : le protoplasma simplement gonfié se colore encore parle Gram, |)uis il prend, de moins en moins, les couleurs basiques d'aniline, et lorsque la massue devient plus distincte, plus épaisse, elle perd son élection pour les réactifs précédents et devient, au contraire, de plus en plus sensible à la safranine, à l'éosine et au picrocarmin. D'où la nécessité de faire des doubles colorations pour suivre celte évolution.
Méthodes d'examen. — Grains jaunes. — Voici les procédés de
coloration les plus simples, qui permettent de déceler la présence de V Actinomijces dans un tissu ou dans les produits d'une lésion.
En général, l'examen porte sur des liquides provenant de collections ou d'ulcérations fistuleuses, plus rarement sur des crachats (actinomycose pleuro-pulmonaire), sur des urines (actinomycose génito-urinaire), ou sur des matières fécales (actinomycose de l'intestin). Quelquefois enfin, on cherche le parasite dans les tissus malades eux-mêmes, et plus particulièrement dans les fongosités et les caillots sanguins extraits à la curette, ou sortis spontanément d'un orifice fistuleux. Presque toujours, VActinomyces se présente alors en agglomérations caractéristiques, qui constituent les grains jaunes. L'absence de grains jaunes dans les produits d'excrétion ou dans les tissus d'une lésion suspecte ne devrait pourtant pas faire conclure à l'absence du parasite, qui dans nombre de cas se trouve encore fixé dans les fongosités des trajets iistuleux, où il peut n'être représenté que par quelques touffes de mycélium ou par des massues éparses, si le foyer est en voie de guérison et s'il se trouve très modifié par des infections secondaires.
11 faut, dès à présent, s'entendre au sujet de ces grains jaunes.
Si, bien des fois, on les voit s'échapper en masses pressées sous le bistouri qui ouvre une collection mycosique, assez volumineux pour frapper l'œil le moins exercé, et assez jaunes pour donner l'impression de grains d'iodoforme finement pulvérisés, trop souvent aussi ils risqueront de passer inaperçus, lorsque l'attention n'est pas spécialement attirée sur leur présence possible par certains caractères purement cliniques des lésions, caractères que nous décrirons plus loin. Exceptionnellement ils dépassent 1/10 à 1/4 de millimètre de section, à moins d'être constitués par l'agglomération de plusieurs grains élémentaires. Dans les foyers récents, leur nuance se rapproche du gris perle, pour devenir, plus tard seulement, jaune ou brun fauve, quelquefois même noirâtre, lorsqu'ils se trouvent au contact de particules organiques en putréfaction. Et dans ce dernier cas, il est très difficile souvent de reconnaître leurs éléments constitutifs, déjà notablement altérés et englobés dans des détritus cellulaires et dans (hi muco-pus, puis inclus enfin au sein de petites masses calcaires provenant des parois du foyer. L'écrasement des grains calcifiés est