ANALYSE LES SÉROSITÉS

Ils sont en général laihlenient alcalins et pins ou moins fluides; leur consistance varie considérablement avec la proportion de fibrine, de mucine ou de ))aralbumine, et peut tantôt afl'ecter la lôrme d’une gélée, tantôt celle d’un liquide filant.

Les li(piides dont nous avons à nous occuper ici sont principalement clairs, transparents et présentent presque toujours une fluorescence blanche. Ils peuvent être troublés néanmoins par des globules sanguins ou par leurs produits de décomposition, ainsi que |)ar des corpuscules du pus, des cellules épitliéliales, des dépôts fibrineux, des cristaux de cbolestérine, des globules graisseux (dans le sérum du sang pendant la digestion, dans les cas de diabète, chez les sujets adonnés à la boisson, rarement dans les exsudats).

En jetant les licpiides troubles sur filtre, on parvient à les clarifier et à se débarrasser de la plupart de ces corps étrangers, à l’exception des globules sanguins et graisseux, ainsi que d’une madère albuminoïde de nature particulière. Les globules sanguins se déposent lacilement au bout de‘2 i heures ; de sorte que, s’il s’agit d’en piiver un liquide, il l'aut l’abandonner au repos pendant un jour. Ce procédé toutelbis ne réussit pas avec le sang défibriné. La matière grasse en suspension s’enlève parfaitement en agitant le liquide avec de l’étber. Enfin la clarification des liquides troubles peut s’effectuer dans tous les cas en employant de la soude caustique et de l’étber ; mais il ne faut pas perdre de vue l’altération que les matières albuminoïdes peuvent éprouver sous l’influence de la liqueur alcaline.

La couleur du sérum du sang, ainsi que celle des exsudais et des sérosités de kystes présentent diverses variétés de nuances depuis le jaune plus ou moins foncé jusqu’au jaune verdâtre. Exposés à l’air, ces liquides se troublent et prennent une teinte bleuâtre. Les li([uides provenant des hydrocèles ont généralement une teinte verdâtre immédiatement après la ponction.

La densité de ces liquides varie entre i,050 et 1,005; on la détermine au moyen de l’aréomètre. Voir § 15 les prescriptions relatives â ces analyses.

MATIÈRES albuminoïdes DES SEROSITES.

Analyse des matières albuminoïdes contenues dans les sérosités.

'224. Les liquides séreux ue reuferment j)as seuleuieut de l’albumiue du sérum, que l’on trouve dans tout sérum du sang, ainsi que dans tous les exsudais (à rexcc[)liou de ceux du cerveau), mais encore d’autres matières alhumiiioïdes, suscejitihles de déjioser de la (ibrine, et (|ui ont été le plus souvent coulbiidues avec la caséine ou les albuminates alcalins. Les kystes de l’ovaire, ainsi que les tumeurs de la glande thyroïde, reulérment souvent de la jiaralbumiuc, de la caséine ou de la myosine.

1“ Si un liquide renferme les deux substances fibrinogènes, il se transforme en une gelée plus ou moins épaisse, plus ou moins consistante, au bout d’un temps plus ou moins long, selon la température, sa réaction au papier, la quantité de sels et sa richesse en principes tilirinogènes. La fibrine déposée présente alors les caractères décrits § 152.

2° One ce dépôt se produise (plasma du sang) ou non (sérosités de la plupart des kystes), il s’agit d’examiner si le liquide renferme une substance analogue aux globulines.

A cet effet, ou traite une partie de la liqueur par 10 ou 20 fois sou volume d’eau; on y ajoute goutte à goutte de l’acide acétique étendu tant que le précipité augmente, ou bien on y fait passer un courant d’acide carbonique après y avoir ajouté de l’eau et quelques gouttes d’acide acétiiiue. Si la solution ainsi préférée fournit un trouble après l’addition d’une nouvelle quantité d’eau, et si ce trouble augmente peu à peu de manière à se transformer eu un précipité lloconueux, ou en conclut que le liquide renfermait une substance de la nature des globulines ou des albuminates.

5° La li([ueur, filtrée après séparation du précipité 2“, est chauffée à 100“. Se forme-t-il un précipité, on a la preuve de la présence de y albumine du sérum.

4“ Le précipité 2“, débarrassé de la majeure partie de la liqueur, mais tenu encore eu suspension, doit être divisé en deux parties A et B.

5“ On ajoute cà la première A queb|ues gouttes de solution concentrée de chlorure sodique ; le précipité se dissout-il, la réaction indique la présence d’une substance librinogène ou do la myosine;

MATIÈRES albuminoïdes DES SÉROSITÉS.

dans le cas contraire, le ])récipité est constitué ]>ar de la caséine, (on n’a pas encore trouvé la sijnlomne dans des liquides de cette nature).

0° l ue autre partie II est traitée j)ar de l’acide chlorhydrique à 1 p. 100; si le précipité se dissout, il était tonné de myosine, de caséine ou de substances fibrinoyènes.

7° On ajoute ensuite à une nouvelle j)orlion du licjuide à analyser une goutte de sang Irais débarrassé du caillot par e.xpression ; ou agite le mélange et on laisse reposer à une température modérée pendant nu jour, en ayant soin d’incliner le vase avec précaution, sans l’agiter; ou e.xamine alors si la masse prend ou non une consistance gélatinit'orme. La lormation d’un caillot au bout d’un temps plus ou moins long indique la présence d’une substance fibrinoyéne .

8° A[)rès cet essai, on traite une autre portion du liijuide séi'cux par une certaine quantité de sérosité d’hydrocèle ou de sérosité péricardique du bœuf; on agite le mélange, on le laisse rejioser pendant un jour, et l’on observe s’il se forme ou non un coagulum. Dans le cas où le liijuide prend une consistance de gelée, on est assuré de la présence d’une substance fibrino-plastique dans le liquide analysé. On peut encore se servir, pour faire cet essai, du liquide liltré de traité préalablement par une goutte de soude caustiijue.

9° Les liijuides de consistance épaisse, tels que ceux des kystes, la synovie, etc., etc., doivent en jiartie leur grande densité à la présence de la mucine on de la paralbumine. On reconnaît la mucine (\i\imd l’acide acétique donne naissance à un précipité insoluble dans un excès de réactif et dans le chlorure sodiijue. La paratbumine, au contraire, est précipitable par l'acide acétique, mais entièrement soluble dans un excès. On peut s’assurer d’une autre manière de la présence de ce corps en préci|)itant le liquide à analyser par trois fois son volume d’alcool, en recueillant le précipité et en le dissolvant de nouveau dans l’eau ; la solution prend alors, au bout d'un certain temps, une consistance épaisse ; elle filtre diiïicilenient et présente les caractères indiqués § 159. [.\LM. Gautier, Cazeneuve ci Darembery (*)ont reconnu dans les kystes de l’ovaire la présence d’une matière translucide, analogue .à la gelée tremblo-

(*) Soc. de biologie. 20 juin 1874.

MATIÈRES COLORAiNTES DES LIQUIDES SÉREUX.

laiite, j)i'écipitnl)le |>ar l’alcool conccntuc, non coagulable par la chaleur ni dialysahle. Celte nouvelle substance, appelée colloïdtne, représentée par la l'orinule CMP^NO”, ])araît être un ternie intermédiaire entre les matières albuminoïdes et la tyrosine C/1P‘N0\]

Matières eoloraiites des li(|iiides séreux.

La couleur jaune du sérum du sang et des principaux liquides séreux paraît provenir d’un corps, jirobablement identique à la lutéine, g 159, soluble dans les corps gras cl lacilcmcnt décomposable par les alcalis. Les matières colorantes de la bile, l’iiémoglobuline et l’hénialine, peuvent se trouver dans les liquides séreux pathologiques. Pour y rechercher les matières colorantes de la bile on se sert de l’acide azotique, sans se préoccuper de la présence probable de l’albumine, § 155; et l’on emploie les méthodes des § 159 et 161 pour déceler l’hémoglobuline et l’iiématine.

On ne connaît pas encore l’origine de la coloration verte des exsudais et du sérum du sang exposés à l’air pendant un certain temps.

8els inorganiques, matières grasses et principes extractifs des

liquides séreux.

La présence constante de matières albuminoïdes dans les liquides séreux nécessite la recherche des sels fixes qui y sont contenus. Ces opérations doivent se faire après l’incinération complète de la substance et en suivant les prescriptions données plus haut depuis ^171 à 186.

Les règles générales qui se rapportent à la préparation des cendres doivent néanmoins être modifiées ici à cause de la quantité plus ou moins grande de soufre et de phosphore contenus dans les combinaisons organiques : les substances albuminoïdes, l’acide taurocholitjue, la lécithine, la nucléine, etc., etc. La lécithine se trouve généralement associée dans les liquides séreux à des quantités plus ou moins fortes de matières albuminoïdes ; il suit de là qu’en incinérant directement ces matières, sans élimination préalable de l’albumine et de la lécithine, on obtiendrait des cendres reidermant des sulfates et des phosphates provenant naturellement

UECUERCllE DU SUCRE DANS LES SÉROSITÉS.

(Je ces corps. Ces mêmes acides siilliirifjue et phospliori(|ue déplaceraient nécessairement d’autres acides de leurs comijinaisons, entre autres l’acide carbonicpie. 11 n’est donc pas sans intérêt, (piand on veut e.vamincr avec soin la nature des comljinaisons inorfiani(jues (jue rcnlerment les liquides séreux, de précipiter tout d’abord ces liquides par de l’alcool en excès, de les verser sur des filtres exenqîts de sels inorganiques, de laver le précipité à l’alcool, puis à l’eau chaude, et d’évaporer ensuite les licpieurs alcooliques à une douce température. On reprend ensuite le résidu par de l’alcool absolu, et, apres évaporation du liquide alcoolique, on dissout la lécithine dans l’éther anhydre, qui ne dissout pas trace de sels inorganiques. On réunit alors les liquides alcooliques, ainsi que les eaux de lavage du premier préci[)ité; on les évapore, on carbonise le résidu; puis, après avoir enlevé le charbon par l’eau chaude, on termine l’incinération. L’albumine, restée sur filtre, est soumise à une calcination spéciale et fournit des cendres renfermant des phosphates de chaux, de magnésie et peut-être des phosphates de fer qui demandent à être examinés séparément.

M. Pribmini*) avait proposé de traiter les liquides séreux par l’ammoniaque et l’oxalale ammonique, afin de précipiter le phosphate de chaux, la chaux, etc. ; cette méthode toutefois n’est pas recommandable puisque les précipités sont loin d’être purs : ils entraînent le plus souvent de la lécithine. 11 faut surtout éviter d’incinérer le sang directement, puisque les cendres préparées de la sorte sont complètement exemptes de carbonates, ])ar suite du déplacement de l’acide carbonique sous l’influence de l’acide phosphori(]ue provenant de la lécithine.

La recherche des corps gras dissous ou en suspension doit se faire d’après les détails circonstanciés des 86 et 87.

Recherche tlii siicr«*.

Pour rechercher la glucose dans les li(piides séreux, on commence par les faire bouillir avec (fuclques gouttes d’acide acétique faible après les avoir dilués préalablement au besoin. On filtre et on traite la liqueur d’aj>rès les j)rocédés de MM. Trommer et Bœllcher. Les

(*) Pril)rain. Dcr. d. Sfcchs Grs.d. Juillet 1881. — Gcriacli.. kl. Déc. 1872. — Fokkcr. Arcli. f. <jcs. Plujsiol., VII, p. 274

REGIIERCIIE DE L’URÉE.

sérosités renferment rarement une quantité de sucre suffisante pour dévier à droite la lumière polarisée, après la séparation des substances albuminoïdes.

Oiiand on veut faire usage du saccharimètre pour la recbercbe du sucre, il faut employer une assez grande (juantité de liquide : faire bouillir avec (juelques gouttes d’acide acéti(pie, filtrer, décolorer au besoin par le noir animal, concentrer à un jietit volume, [)uis soumettre la liqueur à ra[)pareil (voir les détails § Connaissant le volume primitif du liquide employé, on })récij)ite la glucose au moyen d’un mélange d’acétate triplombique et d’animoniaqne et l’on élimine l’excès de plomb par l’bydrogène sulfuré, ou bien on prend la déviation de l’extrait alcoolique préparé directement. l^a formule du § 1214 sert à calculer la quantité p. lüO de glucose contenue dans la sérosité.

Enfin la liqueur de Fehling peut servir à titrer le sucre d’après le §215. 11 suffit d’opérer dans ce cas avec l’extrait alcoolique du liquide séreux et de le redissondre de nouveau dans quantité suffisante d’eau. La proportion de sucre est généralement faible ; dans les cas- de diabète, les sérosités peuvent en renfermer au delà de 1 p. 100.

[M. CL Bernard{*) se sert également de la liqueur cuivri(pic préparée par la méthode de PcYïj/ofpour déterminer la quantité de sucre contenu dans l’œuf des oiseaux; mais au lieu de précipiter l’albumine par l’acide acétique seulement, il emploie du sulfate de soude cristallisé additionné d’un peu d’acide acéti(|ue.]

Recherclic tie l’urée.

.Malgré les nombreuses expériences faites en vue de déterminer l’urée dans le sang et dans les liquides séreux, on n’a pas encore trouvé de méthode rigoureuse de dosage applicable dans ce cas particulier. Peut-être arriverait-on le plus facilement à combler cette lacune en réunissant les deux rnétbodes de Liehig et de Bunsen.

On précipite le liquide à analyser par trois fois son volume d’alcool concentré, on jette sur filtre et on lave le coagulum avec de l’alcool. On évapore toutes les bbpieurs au bain-marie et on reprend le résidu j>ar l’alcool absolu à froid. Ce nouvel extrait alcoolicpie

(*) Rev. des cours scient. 7 nov. 1874.

RECHERCHE DE L'UREE.

osl êva|)orc au haiii-marie à une douce clialeur et le résidu re|)ris j)ar l’eau. Un ajoute à cette solution de l’acétate triploiiihique tant (lu’il se forme un ])réci|)ité ; ou liltre et l’on déteriiiiiie dans la li([ueur filtrée la quantité d’urée au moyen de la liqueur mercurielle de Liebig, de la même manière (|ue dans Turine normale, en ayant soin de saturer a|)|)roxiniatlvement l’excès d’acide lil)ie au moyeu d’un peu de carbonate de soude afin de ne pas obtenir trop tôt le j)i‘écipité jaunede la réaction finale. Un lave ce dépôt d’urée quadrimercuri(|ue, on le met en susj)ension dans l’eau, on le décompose par un courant d’bydrogène sulfuré, on filtre, on lave, 011 évapore les liijnides au bain-marie à une très-douce clialeur et l’oii verse de résidu dans un tube de verre résistant en même temps (|ue du cblorure de baryum ammoniacal. (On peut également mettre dans le tube quelques cristaux de cblorure avant de verser les liquides.') Après avoir rempli le tube à la moitié de sa longueur totale, ou ferme à la lampe et l’on cbauffe au bain d’buile à 20ü“ pendant trois à quatre heures. Quand l’opération est terminée, ou ouvre le tube et l’on verse le carbonate de baryte snr un filtre pesé ; 011 lave, on dessèche et l’on pèse. Si l’on ne parvient pas à jeter le tout sur filtre, on lave le précipité avec soin, on le dissout dans l’acide chlorhydrique et l’on précipite par de l’acide sulfurique. Ou filtre à chaud le sulfate de baryte, on lave à l’eau chaude ; on^ dessèche, on calcine et l’on pèse. 1 giamme de sulfate de baryte correspond à 0®",2574 d’urée.

On peut simplifier cette méthode de la manière suivante : après la précipitation par le sous-acétate de plomb, on verse du sulfure ammoni(jue dans la liqueur filtrée afin d’enlever l’excès de plomb ; on filtre le sulfure de plomb et l’on traite la liqueur filtrée directement par du cblorure de baryum ammoniacal dans un tube fermé à 200®. Cette méthode indiquée par M. Treskin (') est probablement aussi exacte que la précédente, quand les liijuides à examinei- ne renferment pas de glucose. Nous ferons remarquer néanmoins que toutes deux sont sujettes à une cause d’erreur ipii résulte de^la décomposition de la créatine et de la créatinine à 200°. Ces deux composés donnent d’ailleurs avec le nitrate mercurique un précipité dans les mêmes conditions que l’urée; la créatine, il est vrai, n’est pas soluble dans l’alcool absolu.

(*) Arcli. f. path. Anal., t. LV.

RECHERCHE RE L’ÜRÉE.

M. Gréhanl (*) détermine Tiirée dans le sang au moyend’une antre méthode. 11 précipite le sang de la veine, soit par l’alcool, lave le coagulum à l’alcool, et évapore doucement les liqueurs au bain-marie; puis il dissout le résidu dans l’eau, introduit le li({uide dans le vide de la pompe à mercure et y ajoute une (juantité sul'tisantede réactif de Millon (§ 145).

L’oj)ération doit se faire à la température du bain-marie. On amène ensuite les gaz sous une cloche graduée, on absorbe l’acide carbonique et le bioxyde d’azote par les réactifs appropriés et l’on mesure le volume de l’azote restant.

Nous avons déjeà indiqué antérieurement, § 198, que le dosage de l’urée au moyen de la liqueur de nitrate de protoxyde de mercure était sujet à une cause d’erreur.

Ces liquides renferment normalement de l’urée, mais dans les cas d’urémie on en trouve en plus grande quantité.

MM. Frerichs et Staedeler ont indiqué les méthodes les plus avantageuses pour rechercher la tyrosine et la leucine dans les liquides séreux. On précipite une certaine quantité de liquide par de l’acétate triplornbique jusqu’à refus, on filtre et l’on fait passer un courant d’hydrogène sulfuré dans la liqueur filtrée jusqu’à ce que tout le plomh soit éliminé. On sépare le sulfure de plomb, on évapore les liquides filtrés jusqu’à consistance sirupeuse et l’on extrait le résidu par l’alcool. La Icucine impure se dissout en grande partie, tandis que la tyrosine reste insoluble ; néanmoins la solution alcoolique peut renfermer des quantités notables de tyrosine. On filtre de nouveau et l’on évapore la solution alcoolique ; le résidu est traité par un peu d’ammoniaque, puis additionné d’acétate de j)lomb tant qu’il se forme un précipité ; on filtre et on lave le ])récipité avec une petite quantité d’eau. Ce précipité renferme la combinaison de leucine et d’oxyde de plomb ; on le met en suspension dans l’eau, on traite par un courant d’hydrogène sulfuré, on élimine le sulfure de plomb et l’on évapore la liqueur jusqu’à cristallisation. On constate les caractères de la leucine au moyen des réactifs indiqués, § 104; quant à la partie insoluble dans l’alcool, on l’examine d’après les jirescriptions du § 105 et l’on s’assure de la présence ou de l’absence de la tvrosine.

(*) Cotnpl. rend., t. LXXV, p. 140.

HOPI’E-SEYLER. ASAL. CIIIII.

UEClltUCIlE DE LIRKE.

Les deux composes tyrosine et leucine se rencontrent généraicinent dans les mêmes liquides; tous deux prennent naissance lors de la putréfaction des composés alLurninoïdcs dissous; la leucine se transforme plus tard en valérianatc d’ammoniaque. On n’a constaté la présence de ces corps que dans des cas de ramollissement du foie.

On peut retirer la créaline et la créatinine contenues dans les sérosités en opérant d’après les 117 et 118. Ou obtient la créaline à l’état cristallin, tandis que la créatinine peut être précipitée dans les eaux mèi’cs d’après la méthode de M. Neubauer à l’état de combinaison avec le chlorure de zinc, d’où il est facile de l’isoler (voir § 118). Les sérosités iionnales ne renlérmeîit probal )lement que de la créatine. Mais les liquides pathologiques, principalement dans les cas de typhus, en contiennent souvent des proportions considérables.

L’acide urique existe en petites quantités dans le sérum du sang et en ]>lus grandes porportiows dans les exsudais des affections rhumatismales et autres.

Pour le rechereher il faut éliminer d’abord les matières albuminoïdes par l’ébullition, faire passer le licpiide à travers un linge, puis sur un filtre ordinaire, et évaporer la solution filti'ée à siccité. On reprend le résidu plusieurs fois par l’eau bouillante et l’on filtre bouillant. Les liqueurs sont concentrées jusqu’à un petit volume, traitées par l’acide acétique concentré et abandonnées au repos. L’acide urique se sépare en cristaux, reconnaissables d’après le 115. La réaction de la murexide peraiet de constater sûrement la nature de ce coiqis.

Le procédé de M. Meissner peut également servir à la recherche de l’acide urique.

Pour rechercher la présence des acides biliaires, il faut suivre les prescriptions indiquées plus haut à l’occasion de l’analyse de l’urine, § 217.

La recherche des acides gras, ainsi que celle des acides lactique et succinique, nécessite l’élimination préalable de l’albumine et s’effectue, quant au reste, d’après la méthode du § 77. Pour retrouver la cholestérine et la lécithine, il faut a|q)liquer les règles des §§ 82, 100 et 231.

KECUERCllE 1»E L’AMMONIAQUE DANS LES LIQUIDES SÉREUX.

RovlitTche dt‘ rAMinMmiï««iiic dans les liquides séreux.

‘2:26. Méthode de MM, C. Schmidt et Petroff{'), 1“ On laisse écouler le liquide séreu.v, inunédiateiiicnt après sa sortie du corps, dans un ballon contenant deux lois autant d’alcool et l’on verse le mélange dans la cornue A (lig. 12) reliée à l’aide d’un caoutchouc à son rtkdpient. On lerine la cornue hermétiquement et l’on dispose à la tubulure du récipient un tube coudé à angle droit communiquant

à un appareil à boules de Will et Varrentrapp C, rempli d’acide dilorhydrique pur. On disjrose la cornue dans un bain-marie et l’on refroidit le récipient B. Peu à peu l’alcool passe dans le récipient et entraîne rammoniaque. Cela fait, on verse le liquide alcoolique de B et l’acide de C dans une capsule de porcelaine avec une quantité suflisante de bichlorure de platine et l’on évapore le tout jusqu’à siccité. On lave ensuite le résidu avec un mélange d’alcool et d’éther .; s’il reste un dépôt cristallin, il est constitué par du chloroplatinate d’ammoniaque et provient par conséquent de l’ammoniaque contenue dans le li(juide à examiner.

(*) Arch. /'. patliol. Anal., t. EVj

•i-20 KECIIEUCIIE DE L’AMMOMAQUE DANS LES LIQUIDES SÉREUX.

Cette méthode aiialyti(|iie peut servir au dosage. 11 suHitpour cela de peser d’avance le ballon avec l’alcool qu’il contient, de le peser une seconde fois après y avoir laissé écouler 50*^*^ environ du li(juide à examiner, de dessécher après l’opération le j)récipité de chloroplatinate à 100*’; son poids permet de calculer d’après le tableau 11 celui de rammoniaque du liquide séreux.

Cette méthode est sujette à une cause d’erreur qui tient à la décomposition de riiémoglohuline. En effet, ce corps pouvant donner naissance, dans les conditions expérimentales, à divers acides volatils, il est préférable d’ajouter au sang, avant de le soumettre à la distillation, une petite quantité de chaux caustique; il faut éviter d’en employer un excès, de crainte d’obtenir d’autres produits de transformation.

Méthode de MM. Tliii'y{*), Kuehne et Strauch (**). M. Thinj retire rammonia(|ue contenue dans le sang en chaulfant ce liquide modérément dans le vide, et caractérise ensuite la présence de la base volatile à l’aide du réactif Nessler (§ 57). Mais comme il est diflicile d’éliminer, par ce moyen, les gaz dissous à la pression normale, MM. Kuehne et Strauch ont imaginé de modilier la méthode de l’auteur que nous venons de citer, en faisant passer dans le liquide un courant de gaz inerte. B représente dans la ligure 15 le

Fig. 15.

ballon rempli du liquide à examiner; A est un tube en U rempli de pierre ponce imbibée d’acide sulfurique, C un grand llacon de Molff dans lequel vient se rendre l’écume qui peut se produire, et le tube D renferme une certaine quantité de réactif Nessler. Avant

(*) Med. Centralbl., 1803, p. 150.

(**) Ibid., 1804,11®* 50 cl 57.