ANALYSE DES ORGANES ET DES TISSUS

calculs inleslinaux d’eslurgeon de la mer Caspienne. Ils y ont trouvé des cristaux accolés rayonnant vers un centre commun renfermant : 84 p. 100 de j)hospliate de chaux hibasique, 15 p. 100 de matières organiques, 1 p. 100 de sels minéraux avec traces de lithine.]

On a remarqué quelquefois lors des autopsies que le contenu intestinal renfermait de petits grains bleuâtres de vivianite.

Les concrétions très-rares, connues sous le nom de Bezoards, orignaires de la Perse, paraissent être des calculs intestinaux d’antilope et de chèvre. Elles consistent pilncipalement en acide litbofellique mêlé à de faibles pro])ortions d’une substance verte, de matière colorante de la bile et d’un peu de mucus. Elles sont olivâtres, formées de couches concentriques, à cassure cireuse, et solubles dans l’alcool bouillant. Pour en faire l’analyse, il suffit de suivre les indications du no.

Yl. ANALYSE DES ORG.tAES ET DES TISSES OS, SUBSTANCES DENTAIRES ET CONCRÉTIONS CALCAIRES

Reclierclie et €losa;;c <le.s matières organiques.

280. Les OS, les concrétions calcaires de provenance pathologique, ainsi que la substance dentaire, à l’exception de l’émail, sont constitués par de l’acide pbospborique, de l’acide carbonique, de la chaux et de la magnésie, et renferment, en outre, des tissus de nature collagène. Cette composition constante rend complètement inutile toute analyse qualitative préliminaire. Néanmoins quand on a besoin d’être renseigné sur la nature d’un dépôt, de savoir, par exemple, s’il s’agit d’une concrétion calcaire ou d’une ossification, il faut tâcher de découvrir les corpuscules osseux au moyen du microscope. Si ce premier point reste douteux, il est important d’y rechercher la présence de la matière collagène.

Pour examiner la nature du tissu collacfène dans les os ou dans les parties d’organes ossifiés, on les prive d’abord des tissus avoi- (*)

(*) Compt. rend., 1, 1874, p. 1859.

os. — SUBSTANCE DENTAIRE.

sinants, on les réduit en poudre grossière, on épuise par l’alcool et l’étlier pour enlever toutes les matières grasses et l’on traite ensuite par de l’acide chlorhydrique étendu. Ou reconnaît facilement au bout d’un certain temps que les sels calcaires ont entièrement disparu. On lave à l’eau la partie restante jusqu’à ce que les eaux de lavages ne présentent plus la moindre acidité, puis on fait bouillir la substance ainsi purifiée dans un ballon avec de l’eau ou bien on la laisse dans un tube fermé avec de l’eau pendant vingt-quatre heures au bain-marie bouillant. On filtre à travers du papier les liquides bouillants, on lave à l’eau, on concentre de nouveau et on abandonne au repos; s’il se forme une gelée soluble dans l’eau bouillante, on peut affirmer que la substance soumise à l’analyse renfermait un tissu collagène ; il suffit alors de vérifier les caractères de la glutine, indiqués § 141. La pr<^ence de la chondrine se reconnaît au moyen des réactions du § 163.

Le dosage du tissu collagène des os, des dépôts calcaires et de la substance dentaire, doit se faire d’après les indications précédentes. On dépouille les os de leur périoste, on les purifie à l’éther, on les dessèche à 100% on les pèse et l’on procède aux diverses opérations dont nous venons de parler. A la fin, on évapore à siccité les solutions gélatineuses, et, après avoir maintenu le résidu au bain-marie à 100“ jusqu’à siccité complète, on le pèse. Le dosage de la matière grasse contenue dans la substance à analyser s’effectue sans difficulté après un traitement étbéré. Les os desséchés et pulvérisés sont épuisés par l’éther à diverses reprises ; on évapore les solutions éthérées, on dessèche le résidu et l’on pèse.

Recherche et dosage «les matières inorganiques.

281. Les tissus osseux et dentaire renferment principalement de l’acide phospliorique, de l’acide carbonique, de la chaux et de la magnésie; on y constate de plus la présence de traces de fer, de fluor et de chlore. Pour rechercher dans ces deux espèces de tissus la présence des principes minéraux, on peut appliquer parfaitement la méthode générale de l’analyse des cendres en modifiant toutefois la détermination des fluorures et des chlorures.

Quand il s’agit d’analyser des fragments osseux ou dentaires, on commence par les purifier, les dépouiller des corps étrangers et

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les rétluire en poudre grossière. Après celle opération préliminaire on lave à l’eau el l’on épuise par l’alcool et l’éther.

1. On traite une partie de la substance par l’acide azotique étendu, jusqu’à disparition de la matière calcaire, on lave à l’eau et l’on précipite les chlorures contenus dans la liqueur filtrée à l’aide du nitrate d’argent ; le précipité n’est pas abondant. Quand on veut doser le chlorure d’argent, il faut réduire la liqueur à un petit volume, de manière à ce que le précipité se dépose bien, et achever l’opération d’après les détails du § 1 78.

2. La recherchedu jluoràoxi s’effectuer suivant les indications du §52. On incinère les os de façon à détruire tous les composés organiques, puis on traite les cendres dans un creuset de platine par de l’aeide sulfurique en excès. Le paragraphe suivant contient une méthode approximative pour*le dosage du fluor.

5. Pour connaître la proportion à' acide carbonique conicnn dans les os, on traite une partie de la poudre desséchée à 100“ d’après la méthode du § 186. Il est bon de ne pas employer moins de 5 grammes de matière. On n’a pas à craindre un dégagement d’acide carbonique provenant de l’action de l’acide chlorhydrique étendu sur la matière organique, puisque le dosage des carbonates au moyen de cette méthode fournit toujours des résultats un peu trop faibles (*).

4. V acide phosphorique, la chaux, la magnésie el V oxyde de fer contenus dans les os peuvent se doser de la manière suivante : on incinère environ 5 grammes à 6 grammes d’os en poudre, préalablement desséchés. On restitue l’acide carbonique perdu pendant l’incinération en ajoutant dans le creuset une solution de carbonate d’ammoniaque, en évaporant de nouveau et en chauffant une seconde fois jusqu’au rouge sombre; on laisse refroidir et l’on pèse le tout. On jette les cendres dans un verre de Bohême, on épuise par l’acide chlorhydrique étendu, on filtre au besoin (dans le cas où il y aurait encore des traces de charbon) à travers un filtre taré, puis on lave à grande eau. On dessèche le filtre avec le charbon et on retranche son poids du poids total. On sursature par l’ammoniaque la solution chlorhydrique et l’on ajoute, après coup, de l’acide acétique tant que le précipité se dissout. On jette sur

(*) ber. d. deutsch, chem. GeselL, 1874, VII, p. 220.

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tiltrn le phospliato de Ibr , on love avec soin , on dessèche , on calcine, on pose et l’on calcule le résidu comme phosphate de for pur.

La chaux se trouve dans la solution acétique ; on la précipite au moyen de l’oxalate ammonique. On laisse digérer pendant un certain temps le précipité ainsi que la liqueur, au bain marie, puis on jette sur fdtre, on lave, on dessèche, on calcine en opérant d’après les prescriptions du §170. Cela fait, on évaporeàun petit volume le liquide tiltré et les eaux de lavages, on sursature par rammoniaque, on laisse reposer pendant vingt-quatre heures, on jette sur fdtre le précipité obtenu, on lave à l’eau ammoniacale, on dessèche, on calcine dans un petit creuset de porcelaine et l’on pèse (voir § 177).

Les eaux de lavages du phosphate ammoniaco-magnésien renfei'ment encore l’acide phosphorique combiné primitivement à la chaux. On les traite par le liquide magnésien, c’est-à-dire par le mélange de sulfate de magnésie, de chlorure ammonique et d’ammoniaque caustique, on laisse reposer pendant vingt-quatre heures, on liltre et l’on traite le précipité comme précédemment.

On obtient de cette manière avec une seule et même quantité de poudre d’os : 1“ la somme des matières inorganiques ; 2° le poids du phosphate de fer ; 3“ le poids de la chaux sous forme de carbonate calcique; 4“ le poids du j)hosphate de magnésie ; 5“ enfin le poids de phosphate de chaux provenant des eaux de lavage du pyrophosphate de magnésie. Le tableau 11 sert à calculer la quantité de magnésie d’après la 4'" pesée ; les pesées (4°) et (5°) donnent le poids de l’acide phosphorique ; la pesée (3°) donne la proportion dç chaux ; on peut donc au moyen de ce tableau calculer le total de l’acide phosphorique, de la chaux, de la magnésie et du phosphate de fer contenus dans les os.

On a l’habitude d’envisager la magnésie contenue dans les os, comme combinée à l’acide phosphorique sous forme de P^O®Mg^; par conséquent, une quantité de magnésie représentée par 1 correspond à 2,1833 de phosphate de magnésie. En calculant d’après cette donnée la proportion d’acide phosphorique nécessaire à cette combinaison et en retranchant ce nombre de la quantité d’acide qui existe dans 100 p. d’os, on calcule le reste comme phosphate de chaux P^O*Ca* de façon à ce (jue 1 gramme d’acide phosphorique aidiydre p^O^ corresponde à 2,1831 de j)hos|)hate de chaux P^O*Ca®. En

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loti anclianl la quantité de chaux dont on a besoin j30ur effectuer ce calcul, de la totalité de cette base qui entre dans la composition du résidu exprimé en centièmes, on obtient un reste que l’on considère comme formé de chlorure, de fluorure et de carbonate calciques.

Connaissant le poids d’acide carbonique au moyen d’une pesée directe, on détermine le poids de carbonate de chaux CaCo^ dans dOO p. d’ ’os et l’on fait de même pour le poids du chlore calculé comme chlorure de calcium. Le tableau 11 indique que :

1 CO^ correspond à 2,2727 Ca CO^ et 1 Ci à 1,5654 Ca Cl*; la quantité de calcium qui reste doit être considérée comme fluorure, et l’on a pour établir ce calcul: 1 CaO correspond à 1,59 286 Ca Fl*.

Le phospliate de for n’existe jamais dans les os frais et bien nettoyés, mais on le trouve dans les dents fossiles en assez forte proportion.

Quand on ne peut disposer d’une quantité suffisante de matière pour déterminer à la fois l’acide carbonique, le chlore et les autres éléments inorganiques d’après la méthode que nous venons d’indiquer, il est préférable de faire abstraction du dosage du fluor et de déterminer l’acide carbonique par différence. On calcine la poudre d’os, on dissout les cendres dans l’acide azotique, on précipite les chlorures au moyen de nitrate d’argent et l’on dose le chloi’ure d’argent comme cidessus. Puis on enlève dans la liqueur filtrée l’excès d’argent au moyen d’acide chlorhydrique et cette solution sert alors au dosage de l’acide phosphorique, de la chaux, etc., etc.

On peut aussi faire le dosage direct de l’acide carbonique (*) en employant l’appareil de Will et Frésénius et l’on se sert de la solution azotique pour faire les déterminations des autres éléments qui entrent dans la composition des cendres.

La proportion des chlorures contenus dans les dents ou dans les os est si faible qu’on peut, sans erreur sensible, ne pas en tenir compte dans une analyse approximative.

Le chlorure de calcium, malgré sa grande solubilité dans l’eau, existe néanmoins dans l’émail des dents en combinaison avec le phosphate de chaux de même que dans l’apatite et dans d’autres espèces minérales.

Les os et les dents abandonnent à l’eau une très-faible proportion de matières solubles; on ne peut pas indiquer de méthode générale pour en déterminer la nature. M. C. Schmidt a trouvé de l’acide lactique dans des os d’une ostéomalacie. Pour reconnaître dans une circonstance analogue la présence de cet acide, il faudrait suivre les prescriptions du § 75.

Quand les os séjournent dans la terre pendant un temps plus ou moins long, ils présentent souvent une coloration bleuâtre due à la présence de la vivianite. On peut rechercher le fer d’après le§ 14.

(*) Frésénius, Anal, quantil., trad. de M. Forthomme.

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Uosag;e approximatif «lu fluor coutenii «lans le» o» et les «lents.

282. On ne connaît pas jusqu’à présent de méthode directe de dosage du fluor contenu dans les minerais et dans les produits d’origine animale ; mais on peut employer le procédé de M. Kobell (*) modifié par M. Zaleski. Cette méthode repose sur ce fait expérimental bien connu que le verre à hase de potasse n’est pas attaqué par l’acide sulfurique concentré , mais par un mélange d’acide fluorhydrique et d’acide sulfurique : il se forme dans ce cas du fluorure de silicium gazeux aux dépens de la silice du verre.

Pour appliquer ce principe au dosage du fluor, il faut connaître nécessairement la quantité de silice qui entre dans la composition du verre dont on doit se servir. A cet effet ou commence par triturer une certaine quantité de verre dans un mortier, on lave à l’acide sulfurique, puis à l’eau et l’on fait sécher. On en pulvérise une petite quantité dans un mortier en agate pour l’employer au dosage de la silice. On prend ensuite 0‘%5 à 1 gr. de ce verre réduit en poudre fine, parfaitement séché, on le mélange dans un creuset de platine avec quatre fois environ son poids de carbonate de potasse et de soude, on recouvre le creuset et l’on chauffe au rouge sombre avec précaution, puis à une température plus élevée jusqu’à ce que la masse entre en fusion tranquille et qu’il ne se dégage plus trace d’acide carbonique. Après refroidissement, on dissout la matière fondue dans de l’eau bouillante, on sursature, dans un vase de Bohême couvert, par de l’acide chlorhydrique et l’on évapore la solution acide au bain-marie jusqu’à siccité complète, puis on chauffe au bain de sable de manière à chasser toutes les vapeurs acides. On traite ensuite le résidu par l’acide chlorhydrique, on chauffe, et l’on jette sur filtre la partie insoluble constituée par la silice ; on lave avec soin, on dessèche et l’on pèse.

Connaissant le poids de la silice contenue dans le verre, on parvient à connaître la quantité de fluor de la matière à analyser au moyen du procédé suivant :

On remplit un grand creuset de platine, presque complètement, de verre pilé purifié ; on chauffe de manière à enlever toute trace d’humidité et l’on pèse le creuset avec son contenu. On déverse, après l’efroidissement, ce verre sur un plateau et on introduit dans le creuset 3 à 4 grammes de poudre d’os calcinés, on le recouvre de la quantité de verre déjà pesé et puis on ajoute de l’acide sulfuri({ue concentré en quantité suffisante pour recouvrir complètement les cendres. Au bout d’un certain temps on ajoute encore de l’acide sulfurique de manière à remplir le creuset presque entièrement. On place l’appareil dans un bain de sable, on le recouvre d’une cloche tubulée qui plonge dans le sable et l’on dispose un aspirateur de façon à faire passer de l’air sec à travers la cloche. Cela fait, on chauffe le bain de sable à 100“ et on le laisse exposé à cette (einpérature pendant une semaine environ, puis on chauffe plus fortement de manière à volatiliser la totalité de l’acide sulfurique et on laisse refroidir le creuset dans un courant d’air sec. On verse le contenu du creuset dans unecapsule,on lave soigneusement le verre, on remet les fragments dans le creuset, on chauffe de nouveau au rouge sombre, on laisse refroidir et l’on pèse. L’aspect du verre change, dans le cas où les cendres

(*) Journ. f.prakl. Chem., t. CLXlf, p 585